全 文 ：第32卷第11期
2 0 1 5年 1 1 月
精 细 化 工
FINE CHEMICALS
Vol． 32，No． 11
Nov． 2 0 1 5
中药现代化技术
收稿日期:2015 － 07 － 17;定用日期:2015 － 09 － 28;DOI:10． 13550 / j． jxhg． 2015． 11． 006
基金项目:湖北省自然科学基金(2013C111)
作者简介:乐 薇(1979 －) ，女，副教授，硕士，E － mail:yuewei11@ 126． com。
聚酰胺树脂分离纯化箬叶总黄酮的工艺研究
乐 薇，王 晶
(武汉工商学院 环境与生物工程学院，湖北 武汉 430065)
摘要:采用单因素和正交实验，优化了聚酰胺树脂分离纯化箬叶总黄酮的工艺条件，并进行了梯度洗脱。结果表
明，最佳上样条件为:上样液质量浓度 2. 60 g /L，上样量 20 mL，上样流速 1. 0 mL /min;最佳洗脱条件为:体积分
数为 80%的乙醇，洗脱剂用量 150 mL，洗脱流速 0. 5 mL /min，在该条件下平均解吸率为 94. 54%，其中洗脱剂用
量及其浓度为显著因素。梯度洗脱物的显色反应可鉴定出黄酮类、黄酮醇类及异黄酮类。
关键词:箬竹叶;聚酰胺树脂;总黄酮;纯化;中药现代化技术
中图分类号:TQ91;Ｒ284． 2 文献标识码:A 文章编号:1003 － 5214(2015)11 － 1230 － 06
Study on Purification Technology of Total Favonoids from
Indocalamus Leaves with Polyamide Ｒesin
YUE Wei，WANG Jing
(College of Environmental and Biological Engineering，Wuhan Technology and Business Universtity，Wuhan 430065，
Hubei，China)
Abstract:By using single factor and orthogonal experiments，the optimum conditions in the purification
of total flavonoids from Indocalamus leaves with polyamide resin were studied． The results showed that
the optimal sample condition was 2. 60 g /L in sample concentration，20 mL of sample volume，sample
flow rate of 1. 0 mL /min，and the optimum elution condition was eluent of 80%(V /V)ethanol，elution
liquid amount of 150 mL，the elution rate of 0. 5 mL /min，the average desorption rate could run up to
94. 54%，the amount and concentration of the eluent were significant factors． flavonoids，flavonols and
isoflavones could be identified in color reaction of gradient elution．
Key words:Indocalamus leaves;polyamide resin;total flavonoids;purification;modernization
technology of traditional Chinese medicines
Foundation item:Natural Science Foundation of Hubei Province of China(2013C111)
竹叶总黄酮是一类具有多种生物活性的天然产
物，具有防止动脉硬化、抗氧化、抗菌、抗癌细胞、预
防老年痴呆等作用［1］，在药品、食品、保健品方面有
着广阔的市场。竹叶总黄酮的有效成分主要是以异
荭草苷、荭草苷、异牡荆苷、牡荆苷为代表的碳苷黄
酮类物质，从构效关系上看，竹叶总黄酮的生理活性
超过了银杏叶总黄酮［1］。近年来，竹叶总黄酮得到
学者的重视［1］，已有对苦竹、麻竹、黄甜竹、桂竹、山
白竹、紫竹、铺地竹、毛金竹、撑篙竹等竹叶总黄酮的
研究报道［2 － 7］，箬叶总黄酮也逐渐引起学者的注意。
箬叶是禾本科竹亚科下箬竹属(Indocalamus)的植
物叶，在长江以南各省(区)分布广泛［8］。箬叶具有
清热止血、解毒消肿的效果，可以治疗吐血、下血、小
便不利、痈肿等病症［9 － 10］，已有对箬叶中挥发油、总
黄酮、多糖等的研究报道［11 － 17］。现阶段箬叶主要用
于食品包装，如能充分利用废弃的、可采摘的鲜箬叶
小叶、损叶及加工后的箬叶废渣开发深度加工产品，
将对箬叶资源的开发起到积极作用。研究证明，总
黄酮是箬叶中的重要活性成分，含量丰富，占箬叶总
质量的 2%左右［18］，但目前的研究多限于黄酮的提
取与测定，关于箬叶总黄酮分离纯化的研究很少，所
以有必要开发一种高效低廉的纯化方法。近年来，
黄酮的纯化一般采用树脂法，该法纯化效率高，树脂
可重复使用，成本低，无有毒试剂残留，可适用于工
业化制备。聚酰胺树脂是分离黄酮类化合物较常用
的吸附剂，黄酮分子中富含的酚羟基与聚酰胺分子
中的酰胺基因双方质子共享形成氢键而产生吸附，
从而与不能形成氢键的组分分离，达到提纯的目的。
因此本文采用聚酰胺树脂对箬叶总黄酮分离纯化的
工艺条件进行探索，为箬叶资源的工业化开发提供
有价值的参考。
1 实验部分
1． 1 试剂与仪器
乙醇(体积分数 95%)、无水乙醇，国药集团化
学试剂有限公司;亚硝酸钠，洛阳市化学试剂厂;硝
酸铝，天津市天力化学试剂有限公司;氢氧化钠、镁
粉、甲醇，均产自天津市凯通化学试剂有限公司;盐
酸，开封东大化工有限公司试剂厂;硼氢化钠，上海
山浦化工有限公司;冰乙酸，天津市风船化学试剂科
技有限公司;以上试剂均为 AＲ。
聚酰胺树脂 30 ～ 60 目，郑州勤实科技有限公
司;阔叶箬竹(Indocalamus latifolius)叶，禾本科箬竹
属阔叶箬竹的叶子，采自湖北省恩施武陵山区。
ＲE52CS旋转蒸发器，上海亚荣生化仪器厂;
SHB －Ⅲ循环水式多用真空泵，郑州长城科工贸有
限公司;KQ －100E型超声波清洗器，昆山市超声仪
器有限公司;BSZ － 160 自动部分收集器、HL － 2 恒
流泵，上海泸西分析仪器厂;722E 型可见分光光度
计，上海光谱仪器有限公司;JY02S 型紫外分析仪，
北京君意东方电泳设备有限公司。
1． 2 方法
1． 2． 1 标准曲线的制作
准确称取烘干至恒重的芦丁标准品，配制成
150 mg /L的芦丁标准品母液，吸取芦丁标准品母液
0、0. 50、1. 00、2. 00、3. 00、4. 00 mL，分别将其移入至
10 mL刻度比色管中，各加 0. 3 mL 的 50 g /L 亚硝酸
钠溶液，摇匀后静置5 min，加入0. 3 mL的100 g /L硝
酸铝溶液，摇匀后静置 5 min，加 1 mL的 1. 0 mol /L氢
氧化钠溶液，用体积分数为 30%乙醇定容至刻度，摇匀
后放置 15 min，于 510 nm波长处测定吸光度。以未加
芦丁的溶液为空白，以黄酮质量浓度 c(mg /L)为横坐
标，吸光度 A为纵坐标绘制标准曲线，拟合方程为:
A = 0. 0105c + 0. 0017，Ｒ2 = 0. 9999
1． 2． 2 箬叶总黄酮的提取与浓缩
取洗净烘干后的箬叶剪成小块，粉碎，过 12 目
筛。称取箬叶粉末，提取溶剂为体积分数 85%的乙
醇，箬叶质量与提取溶剂体积比即固液比为 1 ∶ 20
(g /mL)，超声波提取 1 h。
1． 2． 3 聚酰胺树脂的预处理
将聚酰胺树脂用无水乙醇浸泡 24 h 使其充分溶
胀，回流提取 8 h 以除去其中所含杂质，用蒸馏水洗
至无乙醇味。用 50 g /L的 HCl 溶液浸泡 6 h 进行酸
洗，然后用水洗至中性。接着用 20 g /L 的 NaOH 溶
液浸泡 6 h进行碱洗，同样用蒸馏水洗至中性，备用。
1． 2． 4 聚酰胺树脂纯化总黄酮
1． 2． 4． 1 吸附实验
上样方法选择湿法上样，10 mm 内径层析柱装
柱，柱高 12 cm，聚酰胺树脂干重 4. 0 g。用一定量
的总黄酮提取液上样，分段收集流出液，测定黄酮含
量，并计算吸附容量(式 1)及吸附率(式 2)。
吸附容量(mg /g)=
m总 － m1
m2
(1)
吸附率 /% =
m总 － m1
m总
× 100 (2)
式中:m总为上柱液总黄酮质量，mg;m1 为流出液总
黄酮质量(即未被树脂吸附的黄酮质量) ，mg;m2 为
树脂干重，g。
1． 2． 4． 2 解吸实验
吸附饱和的聚酰胺树脂用蒸馏水洗至流出液无色
后，改为乙醇-水溶液洗脱，至洗脱液测不出黄酮，分段
收集洗出液，测定黄酮含量，并计算解吸率(式 3)。
解吸率 /% =
m4
m总 － m1 － m3
× 100 (3)
式中:m3 为水洗液中的总黄酮质量，mg;m4 为乙醇
－水洗脱液中的总黄酮质量，mg。
1． 2． 5 梯度洗脱实验
以最佳条件上柱后，用 100 mL 的体积分数为
30%、50%、70%、80%、85%及 90%乙醇进行梯度
洗脱，分别收集洗脱液并测算其黄酮含量，同时采用
显色反应对其黄酮种类初步定性。显色方法如下:
(1)盐酸-镁粉反应:取样品溶液 1 mL 于试管
中，加少量镁粉，摇匀后加浓盐酸 5 滴，等待反应结
束后观察颜色变化。
(2)硼氢化钠反应:取样品溶液 0. 1 mL 于试管
中，加入浓度为 0. 1 mL 20 g /L 的硼氢化钠甲醇溶
液，1 min后加入 3 滴浓盐酸，等待反应显色。
(3)金属络合反应(镁盐):在滤纸上滴 3 滴样
品液，然后喷上醋酸镁甲醇溶液，将滤纸放入烘箱干
燥，干燥好后即可放入紫外分析仪内观察显色反应。
2 结果与讨论
2． 1 箬叶总黄酮的提取及浓缩
·1321·第 11 期 乐 薇，等:聚酰胺树脂分离纯化箬叶总黄酮的工艺研究
按 1． 2． 2 节中方法，箬叶粗提液中，总黄酮的提
取率可达 2. 2%。由于洗脱溶剂为乙醇，所以对粗
提液进行了浓缩，以提高黄酮浓度、降低乙醇浓度，
提高上样效率。在浓缩过程中，提取液浓缩至原体
积一半之后，有黑绿色物质析出，取黑绿色物质于试
管中，加入少量乙醇溶解，再加入镁粉后滴加浓盐
酸，有显色反应，可判断其中含有黄酮，为了避免沉
淀的析出而没有继续浓缩。
2． 2 上样条件的选择
2． 2． 1 上样质量浓度对吸附容量的影响
考察了不同上样质量浓度对聚酰胺树脂吸附箬
叶总黄酮的影响，结果见图 1。
图 1 不同上样液质量浓度下的泄露曲线
Fig． 1 Leakage curves of different sample concentrations
由图 1 可知，随着上样量的增大，流出液中黄酮
浓度增大，当黄酮质量浓度达到上样质量浓度 1 /10
时即认为达到泄露点，由此计算树脂的吸附容量及
总黄酮的吸附率，如图 2 所示。
图 2 上样液质量浓度对吸附容量及吸附率的影响
Fig． 2 Effect of sample concentration on the absorption capacity
and adsorption rate
树脂的吸附容量随着上样质量浓度的提高而增
加。这是因为上样质量浓度越大，可吸附物质量越
大，从而树脂吸附容量及吸附率越大。但是进一步
浓缩提取液，有黄酮类化合物析出，上样液质量浓度
不宜再增大。由于本实验是对工艺的研究，考虑到
总黄酮的节约使用，采用质量浓度为 2. 60 g /L的浓
缩液来进行后续试验。
2． 2． 2 上样流速对吸附容量的影响
考察了不同上样流速对聚酰胺树脂吸附箬叶总
黄酮的影响，结果见图 3，表明不同流速下泄露点为
20 mL，据此计算出不同流速下的吸附容量，结果如
图 4 所示。
图 3 不同上样流速下的泄露曲线
Fig． 3 Leakage curves of different flow rate
图 4 不同上样流速下的吸附容量及吸附率
Fig． 4 Effect of flow rate on the absorption capacity and
adsorption rate
由图 3 可以看出，上样流速越高，流出液中泄漏
的黄酮浓度越高，即树脂吸附的黄酮量越少。由图
4 可知，上样流速对吸附容量有影响，随着上样流速
的提高，吸附容量及吸附率均呈下降趋势。由于
0. 5 mL /min和 1 mL /min流速下的吸附容量相差较
小，从节约时间上考虑，选择 1 mL /min 的上样流速
较合适。
2． 3 洗脱条件的选择
2． 3． 1 洗脱溶剂的选择
聚酰胺树脂在纯化时常用的洗脱剂有水、甲醇、
乙醇、丙酮、醋酸乙酯、酸、碱以及它们的混合溶液，
其中甲醇具有毒性，丙酮等洗脱能力过强，易洗脱大
量杂质。考虑到工艺条件下，乙醇廉价易得且无毒
·2321· 精 细 化 工 FINE CHEMICALS 第 32 卷
性，洗脱性能也较好，本实验选择乙醇-水为洗脱剂。
2． 3． 2 单因素实验
2． 3． 2． 1 洗脱剂浓度及用量对解吸率的影响
考察了不同浓度乙醇水溶液对箬叶黄酮的洗脱
效果，其洗脱曲线见图 5，并由此绘制洗脱剂用量对
解吸率的影响，如图 6 所示。图 6 表明，洗脱剂浓度
及用量对解吸率的影响很大。当洗脱剂用量相同，
乙醇体积分数在 80%以下时，乙醇浓度越高，解吸
率越大，当乙醇体积分数增大到 80% 时，解吸率最
大，再进一步增大乙醇浓度，解吸率反而下降，这可
能是由于箬叶总黄酮种类较多，有着不同的极性，各
种不同种类黄酮类化合物的最佳洗脱剂浓度不同，
峰值叠加后在 80%乙醇洗脱时，总的解吸率最大。
同时也发现随着解吸剂用量的增多，解吸率逐步提
高，当用量增大到 50 mL 以后，解吸率增加趋势变
缓。结合图 5 可知，当洗脱剂用量增大时，流出液黄
酮浓度先增大后减小，当用量增大到 50 mL以后，流
出液黄酮浓度减少缓慢，当用量为 100 mL 时，流出
液中黄酮的浓度已经很低，因此后续实验中选择
100 mL 80%乙醇进行洗脱。
图 5 不同乙醇体积分数下的洗脱曲线
Fig． 5 Elution curves of different ethanol volume fractions
图 6 洗脱剂用量对解吸率的影响
Fig． 6 Effect of elute volume on desorption rate
2． 3． 2． 2 洗脱流速对解吸率的影响
在上述选择的实验条件下，考察了不同洗脱流
速对解吸率的影响，结果如图 7、8 所示。图 7 表明，
当洗脱剂用量均为 100 mL 时，流速越高，解吸率越
低，但解吸率相差不明显。图 8 表明，流速越低，单
位时间内解吸率越小，且差异明显。如解吸率为
90%时，2. 0 mL /min 与 1. 5 mL /min 的流速洗脱耗
时都在 50 min 以内，而 0. 5 mL /min 的流速则需
120 min以上。可见流速太慢，工作效率低下，不利
于生产。提高流速，尽管黄酮总解吸率略低，但耗时
短，更适合于工业生产。
图 7 洗脱剂流速对解吸率的影响
Fig． 7 Effect of elute rate on desorption rate
图 8 不同洗脱流速下洗脱时间对解吸率的影响
Fig．8 Effect of elution time on desorption rate at different elute rate
2． 3． 3 正交实验
在洗脱单因素的实验基础上，进行正交实验，因
素水平选择见表 1，实验结果见表 2，方差分析见表 3。
表 1 正交实验因素水平表
Table 1 Orthogonal experiment table of three factors and three
levels
水 平
因 素
A洗脱剂用量 /mL B乙醇的体积分数 /% C洗脱流速 /(mL/min)
1 50 70 0． 5
2 100 80 1
3 150 90 1． 5
·3321·第 11 期 乐 薇，等:聚酰胺树脂分离纯化箬叶总黄酮的工艺研究
表 2 L9(
4
3)正交实验结果
Table 2 Ｒesults of L9(
4
3)orthogonal test
实验号 A B C 空白 解吸率 /%
1 1 1 1 1 65． 29
2 1 2 2 2 71． 64
3 1 3 3 3 51． 97
4 2 1 2 3 81． 12
5 2 2 3 1 86． 33
6 2 3 1 2 66． 15
7 3 1 3 2 84． 59
8 3 2 1 3 96． 30
9 3 3 2 1 71． 41
K1 0． 626 0． 770 0． 759 0． 743
K2 0． 779 0． 848 0． 747 0． 741
K3 0． 841 0． 628 0． 740 0． 761
极差 0． 215 0． 220 0． 019 0． 020
由表 2 可知，各因素对解吸率的影响大小顺序
为 B ＞ A ＞ C，即洗脱剂浓度 ＞洗脱剂用量 ＞洗脱流
速，其中最佳水平的组合为 A3B2C1，即洗脱剂用量
为 150 mL，洗脱剂为体积分数为 80%的乙醇，洗脱
流速为 0． 5 mL /min。
表 3 方差分析表
Table 3 Ｒesults of variance analysis
因素 偏差平方和 自由度 F比 F临界值① 显著性
洗脱剂用量 0． 073 2 73． 00 19． 00 *
洗脱剂浓度 0． 074 2 74． 00 19． 00 *
洗脱流速 0． 001 2 1． 00 19． 00
误差 0． 00 2
①F0． 05(2，2)=19． 00。
由表 3 可知，洗脱剂用量和洗脱剂浓度都为显
著因素，洗脱流速影响不显著，因此，在工业生产中，
应注意控制洗脱剂用量和洗脱剂浓度，洗脱流速则
可根据实际情况进行适当调整。
2． 3． 4 验证实验
在正交实验最佳组合条件下进行 3 次洗脱实
验，结果见表 4，其具有良好的重现性，作为工艺条
件应用于工业生产是可行的。
表 4 验证实验结果
Table 4 Ｒesults of verify experiment
次数
1 2 3
平均值 ＲSD /%
解吸率 /% 95． 81 94． 44 93． 37 94． 54 1． 3
2． 4 梯度洗脱实验
为了初步研究聚酰胺树脂对箬叶总黄酮的分离
效果，按 1． 2． 5 节中的方法进行梯度洗脱，并对梯度
洗脱物进行显色反应分析，结果见表 5。说明箬叶
中黄酮种类较多，能在不同浓度洗脱剂中分别洗出。
表 5 梯度洗脱实验结果
Table 5 Ｒesults of gradient elution experiment
解吸率 /%
梯度洗脱物定性实验颜色
洗脱液 盐酸-镁粉 硼氢化钠 镁盐络合实验
30%乙醇 32． 82 黄绿色 橙色偏粉 无变化 黄色
50%乙醇 25． 60 浅黄绿色 橙色 无变化 橙色偏褐色
70%乙醇 19． 87 黄色 无色 无变化 褐色
80%乙醇 13． 23 浅黄色 原色 无变化 褐色偏浅
90%乙醇 5． 51 浅黄色 原色 无变化 浅褐色
由文献［19］可知，(1)盐酸 －镁粉反应中大多
数黄酮、黄酮醇、二氢黄酮和二氢黄酮醇会显橙红-
紫红，少数显紫-蓝色，B 环有—OH 或 OCH3 取代
时，颜色随之加深。查耳酮、橙酮和儿茶素类不显
色，异黄酮类一般也不显色。(2)硼氢化钠反应为
二氢黄酮类专属反应，即二氢黄酮和二氢黄酮醇会
显紫色或紫红色，其他黄酮类均不显色。(3)金属
络合试验(镁盐)中二氢黄酮及二氢黄酮醇类会在
紫外下显天蓝色荧光，黄酮类、黄酮醇类及异黄酮类
则依次显黄色、橙黄色及褐色。根据各个显色反应
的检测特点及显色情况将检出结果总结得表 6。
表 6 定性检测结果
Table 6 The results of qualitative determination
30%
乙醇洗脱物
50%
乙醇洗脱物
70%
乙醇洗脱物
80%
乙醇洗脱物
90%
乙醇洗脱物
二氢黄酮(醇)类 － － － － －
黄酮类 + + － － －
黄酮醇类 + + + + －
异黄酮类 － － + + +
注:“ +”表示该物质被检出，“ －”表示该物质未被检出。
由表 6 可知，各梯度洗脱物中黄酮类化合物种
类是有差别的，黄酮类可在低浓度乙醇中洗脱出，异
黄酮则在高浓度乙醇中被洗脱，其中并未检测出二
氢黄酮类。表明在使用聚酰胺树脂对箬叶总黄酮分
离时，可根据需要使用不同浓度洗脱以获得不同种
类的黄酮类化合物。例如:可采用 30% ～ 50%浓度
的乙醇洗脱可用于分离 4 种主要的竹叶黄酮碳苷
(荭草苷、异荭草苷、牡荆苷、异牡荆苷)，采取 70%
～90%体积分数的乙醇梯度洗脱则可得到黄酮醇及
异黄酮类。
3 结论
聚酰胺树脂纯化箬叶总黄酮的最佳条件为:上
样质量浓度 2. 60 g /L、上样量 20 mL、上样流速
1. 0 mL /min、洗脱剂为体积分数为 80%的乙醇、洗
·4321· 精 细 化 工 FINE CHEMICALS 第 32 卷
脱剂用量 150 mL，洗脱流速 0. 5 mL /min，在此纯化
条件下平均解吸率为 94. 54%。洗脱条件的正交实
验结果表明，洗脱剂浓度与用量为显著影响因素，流
速影响不显著，因此在生产工艺中可根据实际情况
适当提高流速。梯度洗脱物的显色反应表明箬叶黄
酮类化合物的种类有黄酮类、黄酮醇类和异黄酮类，
二氢黄酮类物质未检出。结果表明，黄酮类可在低
浓度乙醇中洗脱出，异黄酮则在高浓度乙醇中被洗
脱，但具体的黄酮单体分离还有待进一步研究。
参考文献:
［1］ 崔 健．箬竹属植物黄酮类物质与挥发性成分的研究［D］．北
京:中国林业科学研究院，2011．
［2］ Guo X F，Yue Y D，Tang F，et al． Flavonoids from the leaves of
pleioblastus argenteastriatus［J］． Journalof Asian Natural Products
Ｒesearch，2008，10(9):903 － 907．
［3］ Sun W X，Li Xian，Li Ning，et al． Cheimicla constituents of the
extraction of bamboo leaves from phyllostachys nigra (Lodd． ex
Lind1．)Munro vat． henonis (Mitf．) Stepf． ex Ｒendle［J］．
Journal of Shenyang Pharmaceutical University，2008，25(1) :39
－ 43．
［4］ Yue J，Tang Y D ，Guo F，et a1． Flavonoids from the leaves of
bambusa pervariabilis mcclure［J］． Journal of the Chilean
Chemical Society，2010，55(3) :363 － 365．
［5］ 程桂广，王煜丹，曹建新．竹叶黄酮类化合物的研究进展［J］．
天然产物研究与开发，2009，21:516 － 520，430．
［6］ 郭雪峰．毛竹与铺地竹叶黄酮类化学成分及其生物活性的研
究［D］．北京:中国林业科学研究院，2007．
［7］ Xie Jie，Lin Yin-Shuang，Shi Xiang-Jun，et al，Mechanochemical-
assisted extraction of flavonoids from bamboo (Phyllostachys
edulis)leaves［J］． Industrial Crops and Products，2013，43:276 －
282．
［8］ 耿伯介，王正平．中国植物志，第九卷第一分册［M］． 北京:科
学技术出版社，1996:676．
［9］ 喻 谨．箬竹属竹叶化学成分的研究［D］． 北京:中国林业科
学研究院，2014 ．
［10］ 金声琅，殷涌光．高压脉冲电场辅助提取箬叶总黄酮的工艺
优化［J］．天然产物研究与开发，2013，25(10):1436 － 1441．
［11］ 周 熠．箬竹叶挥发油的提取、分析及抑菌效果研究［D］．长
沙:湖南农业大学，2009．
［12］ 赖春根，马聿桓，张 斌，等． 箬竹叶水提物化学成分研究
［J］．浙江林学院学报，1995，12(2):161 － 165．
［13］ 邹耀洪．箬竹叶中黄酮类化合物的高效液相色谱分析［J］．分
析化学，1996，24(2):216 － 219．
［14］ 李水芳，文瑞芝，曾 栋，等． 阔叶箬竹叶和箬竹叶中挥发油
的提取及成分分析［J］．色谱，2007，25(1) :53 － 57．
［15］ 李水芳，李姣娟．箬叶化学成分的比较［J］．食品研究与开发，
2008，29(12) :7 － 10．
［16］ 靳 祎，王恩军，宋 洁，等． 箬叶多糖对宫颈癌的抑制及免
疫功能的影响［J］．中国计划生育学杂志，2012，20(3):164 －
167．
［17］ 陈春英，黄雪华，孙定一，等． 硫酸酯化箬叶多糖的合成及抗
艾滋病病毒的作用［J］．药学学报，1998，33(4) :264 － 268．
［18］ 崔 健．箬竹属植物黄酮类物质与挥发性成分的研究［D］．
北京:中国林业科学研究院，2011．
［19］ 吴立军，娄红祥，周 晶．天然药物化学［M］．北京:人民卫生
出版社，2011:169 － 214．
(上接第 1221 页)
参考文献:
［1］ Ｒamachandran S，Fontanille P，Pandey A，et al． Gluconic acid:
properties，applications and microbial production［J］． Food
Technology and Biotechnology，2006，44(2) :185 － 195．
［2］ 田延军，杨丽萍，张家祥，等．黑曲霉 SFGT601产葡萄糖酸钠发酵培
养基及工艺条件的研究［J］．中国酿造，2015，34(1):89 －93．
［3］ 郭凤华，刘昌俊．葡萄糖酸合成方法研究进展［J］．化学工业与
工程，2007，24(2) :173 － 177．
［4］ Znad H，Marko J，Bale V． Production of gluconic acid from
glucose by Aspergillus niger:growth and non-growth conditions［J］．
Process Biochemistry，2004，39(11) :1341 － 1345．
［5］ Sankpal N V，Kulkarni B D． Optimization of fermentation conditions
for gluconic acid production using Aspergillus niger immobilized on
cellulose microfibrils［J］． Process Biochemistry，2002，37(12) :
1343 － 1350．
［6］ Nakao K，Kiefner A，Furumoto K，et al． Production of gluconic acid
with immobilized glucose oxidase in airlift reactors［J］． Chemical
Engineering Science，1997，52(21) :4127 － 4133．
［7］ Yoshimoto M，Takaki N，Yamasaki M． Catalase-conjugated liposomes
encapsulating glucose oxidase for controlled oxidation of glucose
with decomposition of hydrogen peroxide produced［J］． Colloids
and Surfaces B:Biointerfaces，2010，79(2) :403 － 408．
［8］ Ozyilmaz G，Tukel S． Simultaneous co-immobilization of glucose oxidase
and catalase in their substrates［J］． Applied Biochemistry and
Microbiology，2007，43(1) :29 － 35．
［9］ Adler P，Hugen T，Wiewiora M，et al． Modeling of an integrated
fermentation /membrane extraction process for the production of 2-
phenylethanol and 2-phenylethylacetate［J］． Enzyme and Microbial
Technology，2011，48(3) :285 － 292．
［10］ Tomotani E J，Das L C，Vitolo M． Oxidation of glucose to gluconic
acid by glucose oxidase in a membrane bioreactor［J］． Applied
Biochemistry and Biotechnology，2005，48(3) :285 － 292．
［11］ Basséguy Ｒ，Délécouls S K，Bergel A． Glucose oxidase catalysed
oxidation of glucose in a dialysis membrane electrochemical
reactor (D-MEＲ) ［J］． Bioprocess and Biosystems Engineering，
2004，48(3) :285 － 292．
［12］ Godjevargova T，Dayal Ｒ，Turmanova S． Gluconic Acid production
in bioreactor with immobilized glucose oxidase plus catalase on
polymer membrane adjacent to anion-exchange membrane［J］．
Macromolecular Bioscience，2004，4(10) :950 － 956．
［13］ 杨 冰，许 颖，季君晖，等． 琥珀酸发酵过程中的产物抑制
特征及树脂吸附原位分离的研究［J］． 食品与发酵工业，
2011，37(4):12 － 16．
［14］ 汤凤霞，乔长晟，张海红．原位分离技术在 L-乳酸发酵中的应
用［J］．宁夏农学院学报，2001，22(2):70 － 72．
［15］ 魏胜华，王卫军，孟 娜，等． 氧化葡萄糖酸杆菌的固定化及
在鼓泡式反应器中制备乙醇酸［J］．精细化工，2014，31(4):
442 － 446．
［16］ 俞建瑛，蒋 宇，王善利．生物化学实验技术［M］．北京:化学
工业出版社，2005:138 － 141．
［17］ 李丽霞，鲁 格，俞耀庭．过氧化氢酶对固定化葡萄糖氧化酶
稳定性的影响［J］．生物工程学报，1987，3(1) :24 － 25．
·5321·第 11 期 乐 薇，等:聚酰胺树脂分离纯化箬叶总黄酮的工艺研究