全 文 ：　　　来稿日期:2006-05-16
　　　作者简介:王治宝 (1965-), 男 , 河北张北人 , 河北北方学院医学院药学系实验师.
口蘑中磷脂的含量测定
王治宝 , 刘晓河 , 梁惠花
(河北北方学院医学院 , 河北 张家口 075000)
　　摘要:目的:建立口蘑中磷脂的测定方法.方法:氯仿提取总磷脂 , 经消化后采用钼酸铵比色法测定总磷
脂含量.结果:口蘑中总磷脂的含量:黑口蘑为 9.805%;白口磨为 12.637%;杨树口蘑为 10.435%.结论:
该方法操作简单 , 结果准确 , 口蘑中尤其是白口磨中磷脂含量较高 , 值得开发.
关键词:口蘑;磷脂;分光光度法
中图分类号:Q 545:S 646.1+9　　　文献标识码:A 文章编号:1673-1492 (2006)05-0053-02
　　口蘑 (Mushrooms from Zhang jiakou areas)是河北省张家口以北地区多种食用真菌的总称 , 不仅味
道鲜美 , 而且营养十分丰富 , 口蘑中含有大量的蛋白质 、 氨基酸 、 碳水化合物及矿物质等 , 长期食用还具
有强身健体的作用 , 国内外久负盛名 , 是尚好的保健食品[ 1] , 药用能够降血脂 , 降低动脉硬化指数 , 修复
心肌细胞膜 , 防止肝内脂肪的积聚 , 从而具有抗衰老 、防治心血管疾病和脂肪肝的作用.何首乌的抗衰
老 、 降血脂 、防治动脉粥样硬化及保肝作用 , 主要是因为含有丰富的磷脂酰胆碱 、 磷脂酰乙醇胺 、磷脂酰
肌醇等磷脂成分的作用[ 2] , 为此 , 我们参照有关文献[ 3 ～ 4]测定了口蘑中总磷脂的含量.本文采用的方法是
首先用氯仿提取总磷脂 , 经消化后加入钼酸铵 , 在还原剂 FeSO 4 存在的条件下 , 还原钼酸铵产生蓝色 ,
用分光光度法在 700 nm处测定含量.
1　仪器与试剂
1.1　仪器
UV-752型分光光度计 (上海第三分析仪器厂);RE-52A旋转蒸发器 (上海亚荣生化仪器厂).
1.2　试剂
口蘑:由张北县食用菌研究中心提供 , 其余试剂均为分析纯.
2　方法与结果
2.1　总磷脂的提取及样品液的配制
样品分别于硅胶干燥器中干燥 2 d , 粉碎 , 各称量 10 g左右 , 4份 , 加 2倍量的氯仿 , 在索氏提取器
中 60 ℃水浴回流 3 h , 提取液过滤到已称重的烧瓶中 , 回收氯仿 , 得金黄色油状液体 , 即总磷脂.称重 ,
减去烧瓶的重量 , 分别得总磷脂为黑口蘑:1.025 6 g , 白口磨:1.406 4 g , 杨树口蘑:1.198 1 g .
分别精密吸取提取的总磷脂各 0.20 mL , 用氯仿定容 100 mL , 即得样品液.
2.2　显色剂的配制
称取干燥钼酸铵 22.00 g , 加入 45 mL 浓 H 2SO4 , 溶解后再加入 200 mL 蒸馏水 , 即得钼酸铵溶液.
称量 5.00 g FeSO 4 , 加入 90.00 mL 水 , 溶解后再加上述钼酸铵 10.00 mL , 即为显色剂 (临用时现配).
2.3　磷标准液的配制
准确称量 0.439 1 g 干燥的 KH 2PO 4 , 用水溶解 , 加入 1.00 mL 氯仿 , 定容 100 mL , (含磷 1.00 mg
·mL-1)为磷贮备液.吸取此贮备液 2.00 mL , 加氯仿 1.00 mL , 用水定容 100 mL (含磷 0.02 mg ·
mL
-1)为磷标准应用液.
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第 22 卷第 5 期
2006 年 10 月 　　　　　　　
河北北方学院学报 (自然科学版)
Journal of Hebei Nor th Univ ersity (Na tur al Science Edition)　　　　　　
Vol.22 No.5
Oct.2006
2.4　标准曲线的制备
分别取标准应用液 0.00 ml , 0.20 ml , 0.40 ml , 0.60 m l , 0.80 ml , 1.00 mL 于消化管中加入 1.00
mL 消化液 , 与样品同步进行消化.消化至样品由棕黑色迅速变为澄清时 , 停止消化.加入 2.00 mL 显色
剂 , 65 ℃水浴恒温 10 min , 冷却后以空白调零 , 于 700 nm 处测定吸光度 , 吸光度 A 值分别为 0.090 ,
0.130 , 0.165 , 0.210 , 0.251.将磷的浓度与吸光度值进行线性回归 , 得回归方程为
A =0.080 4C +0.048 6 , r =0.999 3.
2.5　精密度试验
取磷标准液 0.50 mL , 5份 , 按标准项下操作 , 结果见表 1.
表 1　精密度试验
1 2 3 4 5 平均 RSD (%)
A 0.148 0.150 0.150 0.148 0.146
C (ug·m L-1) 1.236 1.261 1.261 1.236 1.211 1.241 1.69
2.6　样品含量测定
参照文献 [ 3] , 取样品液 0.50 mL 于消化管中 , 水浴蒸干溶剂 , 加入 1.00 mL 消化液 , 以下按标准
项下操作 , 测定吸光度值 , 根据回归方程计算样品液中磷的含量 , 再乘以 6折算出提取液中磷的含量 , 然
后按公式 C =αk/ρ计算样品中磷的含量 (式中 C 为口蘑中磷的含量;α为提取液中磷的含量;ρ为提取
液的密度;k为提取液即总磷脂的得率).C×25即为口蘑中磷脂的含量 , 结果见表 2.
表 2　样品中磷脂的含量 (mg.g-1)
1 2 3 4 5 平均 RSD (%)
黑口蘑 　　98.93 　　96.52 　　97.27 　　97.89 　　99.64 　　98.05 1.28
白口磨 124.26 127.89 126.94 127.31 125.46 126.37 1.17
杨树口蘑 104.57 103.32 102.69 105.38 105.62 104.35 1.24
2.7　加样回收率试验
取样品液 0.50 mL , 5份 , 水浴蒸干溶剂 , 分别加入不同量的磷标准液 , 并加水使其总体积为 1.00
mL , 各加入 1.00 mL消化液 , 以下按标准项下操作.结果见表 3
表 3　回收率试验
　　1 　　2 　　3 　　4 　　5 平均 RSD (%)
加入量 (ug) 　　2 　　4 　　6 　　8 　　10
回收量 (ug) 1.938 4.010 5.617 7.840 9.720
回收率(%) 96.90 100.25 93.62 98.00 97.20 97.190 2.46
3　讨　论
关于磷脂的测定方法 , 文献报道较多 , 如薄层扫描法 , 红外光谱法 , P 核磁共振光谱法等 , 但所需仪
器都很昂贵 , 目前尚难推广普及 , 本文采用钼酸铵比色法 , 方法简单 、准确.由实验可知口蘑中磷脂含量
较高 , 所以本文的报道为口蘑的进一步研究和开发提供了有用资料.
参考文献:
[ 1] 　王志宝 , 梁惠花.口蘑中多糖和营养成分分析 [ J] .食用菌 , 2004 , 24 (3):42-43
[ 2] 　白研 , 葛发欢.超临界 CO2 流体萃取制首乌中卵磷脂成分的正交试验研究 [ J] .中药材 , 2003 , 26 (10):749-750
[ 3] 　周玲.蜂蜜的磷脂含量测定方法的研究 [ J] .西北药学杂志 , 1999 , 14 (6):248-249
[ 4] 　梁惠花 , 刘晓河 , 张利民 , 等.坝上油菜蜂花粉中磷脂的含量测定 [ J] .中成药 , 2003 , 25 (6):504-505
[ 责任编辑:刘守义]
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2006 年 10月　　　　　　　　　　　　　　 河北北方学院学报 (自然科学版) 　　　　　　　　　　　　　　第 5 期