全 文 ：第 30 卷 第 8 期
2 0 1 2 年 8 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 30 No． 8
Aug． 2 0 1 2
中
华
中
医
药
1872
学
刊
豨莶草颗粒对小鼠免疫功能影响的实验研究
邵南齐1，赵敏1，王慧琴1，朱萱萱2
(1．郑州澍青医学高等专科学校基础医学部，河南 郑州 450064;2．江苏省中医院临床研究所药理室，江苏 南京 210029)
摘 要:目的:研究豨莶草对正常小鼠免疫功能的影响。方法:用碳粒廓清法、溶血素抗体测定法、耳廓肿胀
法检测豨莶草对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能、溶血素抗体生成(HC50)、迟发型超敏反应以及胸腺指数和脾指数
的影响。结果:豨莶草使小鼠吞噬指数和吞噬系数、HC50、胸腺指数和脾指数、耳肿胀度均降低，与空白组有显著
性差异。结论:豨莶草对正常小鼠的免疫功能具有抑制作用。
关键词:豨莶草;吞噬指数;吞噬系数;溶血素抗体;迟发型超敏反应
中图分类号:R285． 5 文献标识码:A 文章编号:1673 － 7717(2012)08 － 1872 － 03
Experimental Research of Effect of Herba Siegesbeckiae on
Immunological Function of Mice
SHAO Nan-qi1，ZHAO Min1，WANG Hui-qin1，ZHU Xuan-xuan2
(1． Department of Basic Medicine，Zhengzhou Shuqing Medical College，Zhengzhou 450064，Henan，China;
2． Pharmacology Laboratory of Clinical Institute，Jiangsu Provincial Hospital of TCM，Nanjing 210029，Jiangsu，China)
Abstract:Objective :To study the immuno － regulating effect of Herba Siegesbeckiae on normal mice． Methods:Herba
Siegesbeckiae was given，then mononuclear macrophage functions were examined by carbon particle clearance test and anti-
body of hemolysin test and the delayed type hypersensitivity(DTH)model induced by dinitrochlorobenzene(DNCB)was
was measured by auricle swelling and the indexes of thymus and spleen were calculated． Results:The phagocytotic ability
of macrophages for carbon particle and the indexes of thymus and spleen and the amount of hemolytic antibody and the au-
ricle swelling were lower than those of the control group． Conclusion:Herba Siegesbeckiae can inhibit immunologic function
of mice．
Key words:Herba Siegesbeckiae;index of phagocytosis;coefficient of phagocytosis;antibody of hemolysin;delayed
type hypersensitivity(DTH)
收稿日期:2012 － 03 － 29
基金项目:郑州澍青医学高等专科学校资助项目(2010 － Y － 08)
作者简介:邵南齐(1973 －)，男，河南夏邑人，讲师，硕士，研究方
向:中药药理学。
豨莶草为菊科植物豨莶 Siegesbeckia orientalis L．、腺梗
豨莶 Siegesbeckia pubescens Makino或毛梗豨莶 Siegesbeck-
ia glabrescens Makino 的干燥地上部分［1］。其味辛、苦，寒。
归肝、肾经。具有祛风湿，利关节，解毒的功效。现代主要
用于治疗自身免疫病和各种疾病引起的关节炎，如红斑狼
疮、类风湿性关节炎、皮肌炎、骨关节炎、痛风性关节炎及劳
损性关节肌肉酸痛症等［2］。近年来，国内外学者对豨莶草
的研究日趋重视［3 － 5］，本文主要研究豨莶草对正常小鼠免
疫功能的影响，报道如下。
1 材 料
1． 1 药品及试剂
豨莶草颗粒:江阴天江药业有限公司，批号:1102066
(按生药量计算、服用前蒸馏水配制);环磷酰胺:江苏恒瑞
医药有限公司，批号:10052921。碳酸钠:张家港华昌药业
有限公司，批号 100330;印度墨汁:Waldck GmbHCo． GK 生
产，批号:301721;绵羊红细胞:南京绵羊绵羊红细胞血站提
供，批号 20110711;豚鼠血清:豚鼠 3 只取血后分离血清，
4℃保存。临用前生理盐水 1:10 稀释;都氏试剂:碳酸氢钠
1． 0g，氰化钾 0． 05g，高铁氰化钾 0． 2g，蒸馏水 1000mL，现
用现配;2，4 － 二硝基氯苯:武汉威达科技公司，批号
100530;丙酮:苏州强生化工医药物资有限公司，批号:
090112;麻油:泰州市小磨麻油厂，质量标准代号:GB8238;
硫化钠:辽宁光华化工有限公司，批号:090510。
1． 2 仪器与设备
756PC紫外分光光度计，上海光谱分析仪器厂;FA1004
电子分析天平，上海精科天平厂;数显恒温水浴锅，常州国
华有限公司;TDL － 5 台式离心机，上海安亭科学仪器厂。
1． 3 动物
清洁级 ICR 小鼠(18 ～ 22g)，雌雄各半，扬州大学比较
医学中心提供，合格证号:苏 SCXK 2007 － 0001。
2 方 法
2． 1 分组及方法
2． 1． 1 分组 空白组:等量生理盐水(NS)组，环磷酰胺组
40mg /kg，豨莶草颗粒组:小剂量组:3． 75g /kg，中剂量组:
7． 50g /kg，大剂量组:15． 0g /kg。
2． 1． 2 碳粒廓清法实验［6］ 小鼠 50 只，雌雄各半，随机分
2781
DOI：10.13193/j.archtcm.2012.08.178.shaonq.058
第 30 卷 第 8 期
2 0 1 2 年 8 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 30 No． 8
Aug． 2 0 1 2
中
华
中
医
药
1873
学
刊
成 5 组，每组 10 只。除空白组，其余 4 组每天给药 1 次，每
次 0． 2mL /10g，连续 14 天。空白组给予等量 NS 。末次给
药 1h后，各小鼠尾静脉注入稀释印度墨汁 0． 1mL /10g(1 ∶
4)，于注入墨汁后 1、11min，用 20μL 吸管从小鼠眼眶后静
脉丛取血 20μL，即加入 0． 1%碳酸钠溶液 2mL 中，充分洗
出吸管壁上血液。取血完毕，处死小鼠，取肝脾称重。以未
注入印度墨汁小鼠眼眶血 20μL 加入 2mL 0． 1%碳酸钠充
分混匀溶液于分光光度计中校零，在 680nm 处比色，计算
吞噬指数(k)及吞噬系数(a)。
K =(lgC1 － lgC2)/(T2 － T1)
a = W × K1/3 /(WLS)
式中，C:血中碳粒浓度，T:时间，W :体重 WLS:肝脾
合重。
2． 1 ． 3 耳肿胀法［6］ 小鼠 50 只，雌雄各半，随机分成
5 组，每组 10 只。空白组给予等量 NS，其余 4 组每天给
药 1 次，每次 0． 2mL /10g，连续 14 天。给药第 5 天，用 8
% Na2S脱去小鼠腹部皮毛，面积约 1cm2，然后均匀涂
布 1% DNCB 溶液 50μL(致敏)，次日同法加强一次;末
次给药后 30min，各组小鼠右耳两面均匀涂布 1% DNCB
溶液 20μL(发敏)，24h 后处死小鼠。用 8mm 打孔器取
左右两耳同部位耳片称重，以两耳片称重差异表示迟发
型超敏反应(DTH)反应强弱。同时取出脾脏、胸腺，计
算脾指数与胸腺指数。
2． 1． 4 溶血素抗体测定［6］ 小鼠 50 只，雌雄各半，随机分
成 5 组，每组 10 只。空白组给予等量 NS，其余 4 组每天给
药 1 次，每次 0． 2mL /10g，连续 14 天。给药第 4 天，每只鼠
腹腔注射 20%绵羊红细胞悬液 0． 2mL，注射后 1h ，眼眶取
血(小离心管内)，静置 1h ;长针剥离后，2000rpm 离心
10min ;取血清，生理盐水 50 倍稀释;按表 1 进行操作，37℃
水浴 10min。取上清液 1mL，加入都氏试剂 3mL 管内。同
时取绵羊红细胞稀释液 0． 25mL，都氏试剂 4mL 于另一支
试管内充分摇匀，放置 10min 后，于 540nm 处，以对照管做
空白，分别测定各管吸收值。按下列公式计算样品的血清
溶血素半数溶血值:
HC50 =样品吸收度值/羊红血细胞半数溶血时吸收度值
表 1 小鼠溶血素抗体测定实验(mL)
项目 样品管 对照管
50 倍稀释血清 1． 0 －
生理盐水 － 1． 0
绵羊红细胞稀释液 0． 5 0． 5
1 ∶ 10 豚鼠血清稀释液 1． 0 1． 0
2． 2 统计方法
应用 SPSS 13． 0 软件统计包，资料数据用均数 ±标准
差(χ ± s)表示，组间比较用单因素方差分析，P ＜ 0． 05 差异
有显著性，P ＜ 0． 01 差异非常显著。
3 结 果
3． 1 豨莶草对小鼠单核吞噬细胞吞噬功能的影响
见表 2。服用豨莶草颗粒大剂量组的吞噬指数(k)明
显低于空白对照组(P ＜ 0． 05);豨莶草颗粒中、大剂量组吞
噬系数(a)明显低于空白对照组(P ＜ 0． 05)。
表 2 豨莶草对小鼠单核吞噬细胞吞噬
功能的影响(n = 10，珋x ± s)
组别 剂量 吞噬指数 吞噬系数
空白组 NS 0． 01429 ± 0． 010714 3． 510195 ± 1． 10243
环磷酰胺组 40mg /kg 0． 001306 ± 0． 000519＊＊ 1． 243698 ± 0． 217405＊＊
豨莶草小剂量组 3． 75g /kg 0． 008713 ± 0． 00792 2． 635081 ± 0． 966627
豨莶草中剂量组 7． 50g /kg 0． 008041 ± 0． 003851 2． 624055 ± 0． 47065*
豨莶草大剂量组 15． 0g /kg 0． 006314 ± 0． 003885* 2． 393306 ± 0． 55849*
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
3． 2 豨莶草对小鼠迟发型超敏反应的影响
见表 3。服用豨莶草颗粒小剂量、中剂量、大剂量组的
耳片差值明显低于空白对照组(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01);中
剂量组和大剂量组的胸腺指数和脾指数明显低于空白组
(P ＜ 0． 05 或 P ＜ 0． 01)。
表 3 豨签草对二硝基氯苯诱导小鼠迟发超敏反应的影响(n = 10，珋x ± s)
组别 剂量 肿胀度(g) 胸腺指数 脾指数
空白组 NS 0． 00186 ± 0． 00098 0． 027437 ± 0． 007084 0． 042831 ± 0． 007437
环磷酰胺组 40 mg /kg 0． 00085 ± 0． 00051＊＊ 0． 013591 ± 0． 006123＊＊ 0． 010032 ± 0． 002601＊＊
豨莶草小剂量组 3． 75 g /kg 0． 00096 ± 0． 00053* 0． 022368 ± 0． 008422 0． 043142 ± 0． 005877
豨莶草中剂量组 7． 50 g /kg 0． 00053 ± 0． 00041＊＊ 0． 022352 ± 0． 002303* 0． 034658 ± 0． 005433*
豨莶草大剂量组 15． 0 g /kg 0． 00094 ± 0． 00035* 0． 022162 ± 0． 00326* 0． 034256 ± 0． 003857＊＊
注:与空白组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01。
3． 3 豨莶草对小鼠溶血素抗体生成的影响
见表 4。豨莶草颗粒中剂量和大剂量组小鼠溶血素抗
体的生成明显低于空白对照组(P ＜ 0． 01)。
表 4 豨签草对小鼠溶血素抗体生成的影响(n =10，珋x ± s)
组别 剂量 HC50
空白组 NS 0． 876383 ± 0． 038916
环磷酰胺组 40mg /kg 0． 560000 ± 0． 07553＊＊
豨莶草小剂量组 3． 75g /kg 0． 833191 ± 0． 066419
豨莶草中剂量组 7． 50g /kg 0． 795106 ± 0． 067967＊＊
豨莶草大剂量组 15． 0g /kg 0． 784255 ± 0． 065734＊＊
注:与空白组比较，＊＊P ＜ 0． 01。
4 讨 论
机体的免疫系统由非特异性免疫和特异性免疫(体液
免疫和细胞免疫)共同构成。免疫器官的脏器指数是衡量
机体免疫功能的初步指标。单核巨噬细胞的吞噬能力是反
映机体非特异性免疫功能的重要指标之一［7］，巨噬细胞碳
廓清指数 K和吞噬指数 α 的大小可以反映单核巨噬细胞
吞噬功能的强弱。SRBC定量溶血测定法的吸光度值代表
抗体形成细胞的数目［8］，因此 HC50 的水平可以反映体液
免疫功能。DNCB诱发的 DTH主要反映细胞免疫功能［9］。
本实验结果显示:(1)口服豨莶草颗粒能显著降低正
常小鼠的吞噬指数和吞噬系数，对正常小鼠的非特异免疫
3781
收稿日期:2012 － 03 － 26
作者简介:赵利民(1971 －)，男，山东人，主管技师，学士，研究方
向:抗肿瘤中药药理。
功能有抑制作用;(2)口服豨莶草颗粒能降低正常小鼠抗
体形成细胞数目，间接减少抗体形成，具有抑制体液免疫的
作用。(3)口服豨莶草颗粒能明显降低 DNCB 所致的耳肿
胀，抑制了致敏 T细胞介导的迟发性超敏反应，表明对小鼠
细胞免疫功能具有抑制作用。(4)口服豨莶草颗粒明显降
低正常小鼠的胸腺指数和脾指数，表明其对正常小鼠免疫
器官的发育亦具有抑制作用。
本实验结果表明豨莶草颗粒能全方位抑制正常小鼠的
免疫功能，包括非特异性免疫功能和特异性体液免疫、细胞
免疫功能，以及免疫器官的发育。为豨莶草临床用于自身
免疫病的治疗提供了有力的理论支持。
参考文献
［1］ 国家药典委员会．中华人民共和国药典:1 部［S］．北京:化学
工业出版社，2010:345．
［2］ 国家中医药管理局．中华本草［M］．上海:上海科学技术出版
社，2004:956 － 959．
［3］ 罗琼，汪建平，阮金兰，等．豨莶草局部外用的抗炎镇痛作用
研究［J］．湖北中医学院学报，2008，10(3):9 － 11．
［4］ 汪建平，罗琼，阮金兰，等．豨莶草对人宫颈癌 HeLa细胞的体
外抑制效应［J］．医药导报，2009，28(1):45 － 46．
［5］ 钱瑞琴，张春英．豨莶草活性部位抗风湿作用机理研究［J］．
中国中西医结合杂志，2000，20(3):192 － 195．
［6］ 李仪魁．中药药理实验方法学［M］． 2 版．上海:上海科技出版
社，2006:721 － 728．
［7］ 龚非力． 医学免疫学:2 版［M］． 北京:科学出版社医学出版
分社，2004:171 － 174．
［8］ Bin H B，Haque R，Parvez S，et al． Immunomodulatory effects of
fenugreek (Trigonella foenum graecum L)extract in mice［J］．
Immunopharmacol，2003，3(2):257 － 265．
［9］ 沈玉先，魏伟，张安平，等． 富硒酵母对免疫功能低下小鼠
DTH的影响［J］．中国药理学通报，1996，12(2):182 － 184．
第 30 卷 第 8 期
2 0 1 2 年 8 月
中 华 中 医 药 学 刊
CHINESE ARCHIVES OF TRADITIONAL CHINESE MEDICINE
Vol． 30 No． 8
Aug． 2 0 1 2
药
效
学
研
究
盘
点
中
华
中
医
药
1874
学
刊
马钱子碱及其中药复方制剂神农丸的抗炎镇痛作用研究
赵利民，袁惠中，徐恒卫，崔立新
(山东省肿瘤医院，山东 济南 250117)
摘 要:目的:研究马钱子碱及其中药复方制剂神农丸的抗炎镇痛作用。方法:采用二甲苯致小鼠耳肿胀、醋
酸致小鼠腹膜毛细血管通透性增加的实验研究神农丸抗炎作用，并与 0． 9%氯化钠注射液、消炎痛对照。采用醋
酸扭体法研究神农丸对小鼠的镇痛作用，并与 0． 9%氯化钠注射液、阿司匹林对照。结果:马钱子碱 2 个剂量组
(1mg·kg －1，2mg·kg －1)对二甲苯致小鼠耳肿胀具有显著性抑制作用(P = 0． 024692，P = 0． 03351);对醋酸致小
鼠腹膜毛细血管通透性具有显著性抑制作用(P = 0． 023174，P = 0． 028322);对醋酸所致的痛刺激具有非常显著
的镇痛作用(P = 0． 009103，P = 0． 001572)。神农丸 2 个剂量组(0． 108、0． 216g·kg －1)对二甲苯致小鼠耳肿胀具
有显著的抑制作用(P = 0． 047233，P = 0． 040059);对醋酸致小鼠腹膜毛细血管通透性具有显著的抑制作用(P =
0． 028309，P = 0． 037012);对醋酸所致的痛刺激有非常显著的镇痛作用(P = 0． 002301，P = 0． 002043)。结论:马
钱子碱及其中药复方制剂神农丸具有显著的抗炎作用和非常显著性镇痛作用。
关键词:马钱子碱;神农丸;抗炎作用;镇痛作用
中图分类号:R285． 5 文献标识码:A 文章编号:1673 － 7717(2012)08 － 1874 － 03
Anti － inflammatory and Analgesic Effects of Brucine and Shennong Pills
ZHAO Li-min，YUAN Hui-zhong，XU Heng-wei，CUI Li-xin
(Shandong Tumor Hospital ＆ Institute，Ji＇nan 250117，Shandong，China)
Abstract:Objective:To study the anti － inflammatory and analgesic effects of brucine and Shennong Pills． Method:
The ear edema induced by dimethylbenzene and abdominal capillary permeability by acetic acid in mice were used to
study the anti － inflammatory effects． The acetic acid writhing method were adopted in the experiment to study the analge-
sic effects． Results:Brucine(1mg·kg －1，2mg·kg －1)could suppress dimethylbenzene － induced ear edema in mice(P
= 0． 024692，P = 0． 03351)，reduce the abdominal capillary permeability significantly(P = 0. 023174，P = 0． 028322) ，
4781