全 文 ：147※基础研究 食品科学 2009, Vol. 30, No. 23
榅桲果实中生物碱粗提物的抑菌作用研究
严 雯，汗泥沙·肉孜，帕提古丽·马合木提 *
(新疆大学生命科学与技术学院，新疆 乌鲁木齐 830046)
摘 要：经过定性实验确定榅桲中含生物碱，用分光光度法测定榅桲果实总生物碱含量为 1.2%。又对榅桲果实生
物碱粗提物对几种常见菌株进行体外抑菌实验。结果表明，榅桲果实生物碱粗提物对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、
枯草芽孢杆菌有一定的抑制作用，但对黑曲霉、根霉、青霉和酵母菌的抑制效果不太明显。
关键词：榅桲；生物碱粗提物；抑菌作用
Antimicrobial Activity of Crude Alkaloid Extract from Cydonia oblonga Mill Fruit
YAN Wen，Hannisa·ROZI，Patigul·MAHMUT*
(College of Life Sciences and Technology, Xinjiang University, Urumqi 830046, China)
Abstract ：Alkaloid in fruits of Cydonia oblonga Mill was extracted and determined, and its antimicrobial activity against Bacillus
subtilis, Staphylococcus aureus, Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae, Aspergillus niger, Rhizopus sp, Penicillium sp were
evaluated. Results showed that the crude alkaloid in fruits of Cydonia oblonga Mill was 1.2%. The crude alkaloid extract exhibited
inhibition effect on Bacillus subtilis, Staphylococcus aureus and Escherichia coli, but have no effect on the other 4 fugus.
Key words：Cydonia oblonga Mill；alkaloid extract；antimicrobial activity
中图分类号：Q946.88 文献标识码：A 文章编号：1002-6630(2009)23-0147-03
收稿日期：2009-07-04
作者简介：严雯(1985－)，女，硕士研究生，研究方向为资源植物有效成分分析。E-mail：suerya@163.com
*通讯作者：帕提古丽·马合木提(1959－)，女，教授，本科，研究方向为资源植物有效成分分析。E-mail：p.m1959@163.com
榅桲(Cydonia oblonga Mil1)又名木梨，分布于我
国西北各地，成熟后采收，阴干备用。榅桲的营养成
分极为丰富、成熟果实富含糖、原果胶、有机酸(果肉
含肉豆寇酸和异油酸甘油酯)、生物碱、挥发油和鞣质
(揾桲中鞣质类物质含量较高，此类化合物主要组成高
度聚合的矢车菊苷配质(矢车菊苷 B 1、B 2、B 3)。果皮
含具有果实特殊风味的庚基乙基醚和壬基乙基醚。还有
生物碱、葡萄糖甙、鞣质、酮糖、醛糖、脂质、维
生素和多种元素。榅桲在新疆种植较为广泛，是维吾
尔族人们非常喜爱的一种植物， 维吾尔族人称榅桲为
“比也”，除其可食用外，主要用作抓饭的辅助食材、
熬制果酱等[1]。还常以果实入药，在维吾尔医药学上榅桲
用于止咳、降血压、降脂，治疗胃肠病、防止肝病等。
维药记载：其温中下气，祛湿解署，消食除胀，治伤
暑吐泻，消化不良，关节疼等疾病[ 2 ]。
有关榅桲的药理学研究表明，榅桲还具有治疗腹
泻、痢疾、淋病、真菌性口炎和子宫内膜炎等疾病[ 3 ]。
虽然榅桲具有上述的重要药理作用，但是对其有效成分及
其含量和抑菌作用方面的报道较少。榅桲有效成分的研
究，对其药用成分的大量开发和利用具有重大意义。因
此，合理开发和利用该药材有良好的社会和市场前景。
1 材料与方法
1.1 材料、试剂与仪器
1.1.1 材料与试剂
榅桲(2008年 10月购于新疆喀什)，把榅桲切成小
块，烘干，粉碎，备用。
9 5 % 的乙醇、牛肉膏、蛋白胨、琼脂粉、氯化
钠、葡萄糖等。
1.1.2 仪器与设备
旋转蒸发仪、电子恒温水浴锅、电子天平、压力
蒸汽灭菌锅、冰箱、电热恒温培养箱、分光光度计 上
海棱光技术有限公司。
1.1.3 供试菌种
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)；金黄色葡萄球菌
(Staphylococcus aureus)；大肠杆菌(Escherichia coli)；
酿酒酵母( S a c c h a r o m y c e s c e r e v i s i a e )；黑曲霉
(Aspergillus niger)；根霉(Rhizopus sp.)青霉(Penicillium
s p. )，以上菌中均由本院微生物教研室提供。
1.1.4 培养基
牛肉膏蛋白胨培养基(用于细菌培养)：牛肉膏 3g、
2009, Vol. 30, No. 23 食品科学 ※基础研究148
NaCl5g、蛋白胨 10g、琼脂粉 20g、pH7.2～7.4，水
1 0 0 0 m l；马铃薯培养基(用于真菌的培养)：马铃薯
200g、葡萄糖 10g、琼脂粉 20g、pH值自然水 1000ml。
液体培养基不加琼脂粉。
1.2 方法[4-7]
1.2.1 制备榅桲果实粗提生物碱
准确称取样品 50g，适量加入 75%的乙醇，在 60℃
的恒温水浴中提取 2h，过滤，滤渣重复提取两次，每
次 1h。过滤，合并 3 次滤液，50℃减压回收溶剂，直
到浓缩液无明显乙醇味，加适量 5% HCl于浓缩液中调
pH 值至 2～3，搅拌、溶解，静置过夜，将过夜的溶
液过滤析出不溶于酸的树脂和油脂，酸液用浓氨水碱化
pH值至 9～10左右，再加等量的氯仿，振荡，用分液
漏斗分取氯仿，萃取 3 次，除杂质和色素，合并氯仿
液，加入 10g无水 Na2SO4干燥，密塞容器振摇 1min，
静止 10min脱去氯仿中水分，用滤纸滤除结晶 Na2SO4，
水浴蒸馏回收氯仿至干，得粗生物碱。
1.2.2 对照品溶液的制备[8]
1.2.2.1 标准溶液的配制
精密称取盐酸小檗碱对照品 3.5mg，置 25ml的容量
瓶中，加甲醇(无水)溶解至刻度，摇匀。精密称取该
液 5.0ml，置 25ml容量瓶中，加 95%乙醇稀释至刻度，
摇匀，作为对照品母液。
1.2.2.2 标准曲线的绘制
精密吸取对照品母液 0 .5、1 .0、1 .5、2. 0、2 .5、
3.0ml分别置于 10ml的容量瓶中，加 0.1mol/L的盐酸溶
液稀释至刻度，摇匀。以 95% 的乙醇为空白，在紫外
光最大吸收 345nm波长处测定吸光度，以标准溶液浓度
为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
1.2.3 样品溶液的制备
将所得的总生物碱置 25ml容量瓶中加甲醇溶解，稀
释至刻度，摇匀，备用。取该溶液 5ml置 10ml的容量
瓶，用 95% 乙醇至刻度，摇匀，备用。取该溶液 5ml
置 10ml的容量瓶中加0.1mol/L盐酸至刻度，摇匀，备用。
1.2.4 分光光度法测定总生物碱含量
以乙醇溶液为空白，在可见光 345nm波长处测定已
制备的样品溶液的吸光度，所测样品吸光度经标准曲线
回归方程换算后，得出提取液总生物碱浓度，然后按
下式计算提取率：

C×稀释倍数×V
总生物碱含量(%)=————————× 100

m
式中：C 为根据所测定的溶液的吸光度，代入回
归方程计算出相应的总生物碱含量(mg/ml)；V为样品液
体积；m 为样品液中果实的质量。
1.2.5 含不同浓度提取物培养基的制备
以对照品母液作为 10 0% 原液，先用少量乙醇溶
解，再加蒸馏水稀释，配成浓度为 25%的乙醇提取物
溶液。准确量取该溶液加入到盛有液体培养基的试管
中，配成含不同浓度乙醇提取物的系列培养基。
1.2.6 菌悬液的制备
在相对应的试管斜面培养基上，细菌置 35～37℃活
化 18h，真菌 27～28℃活化 44～48h。分别用接种环挑
取少许菌体置于装有 9ml无菌水的试管内，振荡均匀，
10倍稀释法稀释，制成菌悬液(含菌量为 106～107个 /ml)。
1.2.7 最低抑菌浓度(MIC)的测定
每一稀释系列接种一种菌种(0.1ml)，每个浓度做 3
个重复，另取一稀释系列，不接种任何菌做空白对照，
置适宜条件培养(细菌 35～37℃培养 18～24h，真菌 27～
28℃培养 44～48h)，观察实验结果，统计分析抑菌圈的
直径。以能抑制细菌和真菌生长的最低添加量为该提取
物的最低抑菌浓度(MIC)。因含提取物的培养液肉眼不
宜辩明菌体的生长情况，可从各管取一环转接于固体平
板上，经适宜条件培养后观察有无菌落生长。无菌生
长的最低浓度即为该提取物的最低抑菌浓度。
1.2.8 最低杀菌浓度(MBC)的测定
将提取物的浓度高于MIC(包括MIC)的各管培养物
各吸取 0.1ml涂布于合适的琼脂培养基平板上，置适宜
条件继续培养。平板上菌落数小于 5个的最低样品浓度
即为该样品的最低杀菌浓度。
2 结果与分析
2.1 标准曲线与回归方程
1.4
1.2
1.0
0.8
0.6
0.4
0.2
0
y=0.4259x+0.0208
R2=0.9991
A
34
5n
m
质量浓度(mg/ml)
0 1 2 3 4
图1 标准曲线
Fig.1 Standard curve
标准曲线见图 1，对实验所得的数据进行回归分析得
标准曲线的回归方程为：y = 0.4259x +0.0208，R2 = 0.9991。
在 0.07～0.42mg/ml范围内对照品的质量浓度与吸光度有
良好的线性关系，理论计算的相关系数 r=0.9992，与朗
伯·比尔定律相符。
149※基础研究 食品科学 2009, Vol. 30, No. 23
2.2 总生物碱含量测定结果
将按1.2.3节操作方法所制备的样品溶液按1.2.4节操
作方法进行测定，以乙醇溶液为空白，用可见分光光度
计于 345nm处测吸光度，计算得总生物碱含量为 1.2%。
2.3 提取物对供试菌抑菌圈的分析
菌种 大肠杆菌 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 黑曲霉 根霉 青霉 酵母菌
提取物抑菌
9.6 11.5 8 0 0 0 0
圈直径(mm)
对照 0 0 0 0 0 0 0
表1 提取物最低抑菌浓度下抑菌圈的直径
Table 1 Inhibitory zone size of crude alkaloid extract at minimum
inhibition concentration
由表 1 可知，不同榅桲果实生物碱粗提物对金黄色
葡萄球菌、大肠杆菌和枯草芽孢杆菌表现出较显著的抑
制效果，但对黑曲霉、根霉、青霉和酵母菌均没有抑
菌活性。
2.4 提取物对供试菌的MIC和MBC
25
20
15
10
5
0
MIC
MBC
浓
度
(m
g/
m
l)
菌种
金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 大肠杆菌
图2 提取物对受试菌的最低抑菌浓度和最低杀菌浓度
Fig.2 MIC and MBC of ESTB and ESTL against Bacillus subtilis,
Staphylococcus aureus and Escherichia coli
由图 2可知，一定浓度的榅桲果实生物碱粗提物对
金黄色葡萄球菌具有很强的抑菌效力，而且其最低抑菌
浓度和最低杀菌浓度也较低，对大肠杆菌和枯草芽孢杆
菌的抑制能力为其次，其抑菌活性随着提取物浓度的增
大而增强，也随着浓度的减小而明显的减小。
3 结 论
综上实验结果分析，榅桲果实生物碱粗提取物具有
一定的抑菌作用和杀菌作用，尤其是对葡萄球菌的作用
更为显著，这为榅桲的合理开发和利用提供了可行性的
实验依据。
参考文献：
[1] 王济宪. 新疆的锦希六: 榅桲[J].特种经济植物, 2000(3): 30.
[2] 刘勇民, 沙吾提·伊克木. 维吾尔药志(维文)[M].乌鲁木齐: 新疆
人 民出版社, 1985: 422.
[3] 尼米提拉,买买提江,穆塔力浦.维吾尔医常用材(维文)[M] . 乌鲁木齐:
新疆人民卫生出版社, 2005: 168.
[4] 赵良忠, 王放银, 段林东.大青叶抗菌物质提取及抗菌效果研究[J].食
品科学, 2004, 25(11): 138-140.
[5] 谭敬军. 竹荪抑菌特性研究[J]. 食品科学, 2001, 22(9): 73-75.
[6] 李中南,龙子江,程惠娟. 尿路清的抑菌作用及其免疫功能的影响[J].
中成药, 1999, 21(9): 472-474.
[7] 珧淑敏. 芦荟提取物抑菌作用的研究[J]. 食品科学，2002,23(4): 137-
139.
[8] 陈月圆, 李典鹏, 高江林, 等. 黄柏中总生物碱的提取及测定方法研
究[J]. 广西植物, 2003, 23(6): 565-567.