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不同浓度硼酸和氯化钙对紫茉莉花粉离体萌发的影响



全 文 :试 验 研 究
不同浓度硼酸和氯化钙对紫茉莉花粉离体萌发的影响
摘要: 运用水滴法研究不同浓度硼酸和氯化钙
对紫茉莉花粉离体萌发的影响。 结果表明: 紫茉莉
花粉粒在花朵未完全开放时活性最佳, 在一定浓度
的硼酸和氯化钙对花粉的萌发有较大的促进作用,
超过一定浓度时起抑制作用, 对未开放紫茉莉花粉
离体萌发的最适硼酸浓度为 100 mg/L, 最适氯化
钙浓度为 1%, 其得到高花粉萌发率和最长花粉管
生长长度。
关键词: 紫茉莉; 硼酸; 氯化钙; 花粉离体萌
发; 水滴法
全球约有60种紫茉莉科紫茉莉属植物,主要
分布于热带美洲。我国有3种,除紫茉莉外,还有
喜马拉雅紫茉莉和它的变种紫茉莉。紫茉莉又名草
茉莉、胭脂花,花香浓郁,可驱虫。具有甜菜素、
氨基酸、有机酸、萜类、甾体、脂肪酸、糖类和酚
类等化合物,有抗癌、抗病毒、降血糖和抗菌等生
物活性。
1 紫茉莉的成分及药理作用
1.1药用价值及化学成分。紫茉莉是一种重要的
药用植物,其叶、根、种子和花均可入药,味甘
苦,具有清热解毒、利湿消肿、活血散淤、调经利
尿等功能。其复方多用于妇科疾病的治疗,根具
有祛湿利尿、活血解毒的功效,种子主要化学成分
有粗纤维、木质素、粗蛋白、脂肪、淀粉和水分。
根含有多种甜菜素、氨基酸、有机酸、三萜、甾
体、脂肪酸、葫芦巴碱(Trigonelline)和半乳糖等,
它们对真菌有一定的抑制作用。
1.2药理作用
1.2.1抗癌作用。目前对紫茉莉根的研究主要集中
在紫茉莉蛋白(MAP)上。根的乙醇提取物具有
DNA裂解作用。经硅胶柱层析和SephadexLH-20
柱层析等方法,光谱分析鉴定了其中5种化合物的
结构,从紫茉莉中分离得到化合物m-1和m-2。
这些化合物DNA裂解活性均不强,但有不同程度
的体外抑制人白血病细胞株和人肝癌细胞株活性功
能。采用 HPLC法测定紫茉莉根中葫芦巴碱的含
量。现代药理研究表明,葫芦巴碱是一种两性化合
物,具有抗肿瘤活性。
1.2.2抗病毒作用。紫茉莉蛋白(MAP)由250个氨
基酸组成,具有高度特异的糖苷酶活性。当用紫茉
莉蛋白处理ECoh的核糖体时,可通过特异的切断
235-RNA中第2660位腺嘌吟上的糖苷键,使其
失活进而抑制蛋白质合成。RIP有广泛的抗病毒作
用,能抑制HIV-I工病毒在受感染的巨噬细胞和
T淋巴细胞内的复制受到人们的重视。
1.2.3抗菌作用。紫茉莉蛋白(MAP)不但具有抗癌
和抗病毒的作用,同时也具有抗菌的作用。体外试
验表明,紫茉莉根煎剂对金黄色葡萄球菌有抑制作
用,其5%稀释液对痢疾杆菌和大肠杆菌也有抑制
作用。紫茉莉根和茎的甲醇提取物对梨黑斑病菌、
西瓜炭疽病菌菌丝生长具有较好的抑制作用。其中
根甲醇提取物对这两种病原真菌菌丝生长的抑制率
分别为 85.149%和 84.178%,茎甲醇提取物为
98.136%和75.138%;此外,这两种提取物对梨黑
斑病菌、西瓜炭疽病菌与草莓灰霉病菌孢子的萌发
也具有较好的抑制效果。
2 材料与方法
2.1研究材料。研究材料为武汉生物工程学院校
园内自然生长的紫茉莉。
2.2研究方法。紫茉莉未开放时从大小一致的植
株上选取紫茉莉10~20朵,将其花药部分放置载
玻片上,在体视显微镜下用解剖针将花药中花粉粒
剥离,注意不要破坏花粉粒。每1~2朵花的花粉
粒放于一个载玻片,制作8个放有花粉粒的玻片。
每4个载玻片为一组,A组用于测定不同浓度的硼
酸对紫茉莉花粉离体萌发的影响,B组用于测定不
同浓度氯化钙对紫茉莉花粉离体萌发的影响。分别
数出载玻片上花粉粒个数并记录,运用水滴法将不
同浓度硼酸分别滴在A组载玻片的花粉粒上,盖
上玻片做好标记,记下时间。每30~40min放在
光学显微镜下找出萌发的花粉粒(有“小尾巴”产
生)记录个数与萌发长度,以100%计算萌发率。
3 结果与分析
3.1不同浓度硼酸对紫茉莉花粉离体萌发的影响。
将采摘回来的紫茉莉花的花药部分放在载玻片上,
在体视显微镜下逐一用解剖针将花药中的花粉粒剥
图 1 不同浓度硼酸下紫茉莉花粉粒的萌发率
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离,剥离过程中注意不要破坏花粉粒。每1~2朵
花的花粉粒放于一个载玻片上,共制作4个放有花
粉粒的载破片,运用水滴法分别滴加浓度为
50mg/L、100mg/L、200mg/L、400mg/L的硼酸,
将其放在光学显微镜下观察记录。结果表明,在硼
酸浓度为100mg/L时花粉粒的萌发率最高且花粉
管的生长长度最长。
图 2 不同浓度硼酸下紫茉莉花粉管萌发的平均长度
3.2不同浓度氯化钙对紫茉莉花粉离体萌发的影
响。将采摘回来的紫茉莉花的花药部分放在载玻片
上,在体视显微镜下逐一用解剖针将花药中的花粉
粒剥离,剥离过程中注意不要破坏花粉粒。每1~
2朵花的花粉粒放于一个载玻片上,共制作4个放
有花粉粒的载破片,运用水滴法分别滴加浓度为
0.5%、1%、2%、4%的氯化钙溶液,将其放在光学
显微镜下观察记录。结果表明,在氯化钙浓度为
1%时花粉粒的萌发率最高且花粉管的生长长度最
长。
图 3 不同浓度氯化钙下紫茉莉花粉粒的萌发率
图 4 不同浓度氯化钙下紫茉莉花粉管萌发的平均长度
4 讨论
实验结果表明,当硼酸浓度为50mg/L时,紫
茉莉花粉也能萌发但萌发率不高(30%)。随着硼酸
浓度的增大,萌发率逐渐增加,当硼酸浓度为100
mg/L时,紫茉莉花粉离体萌发率最高(47%),花粉
管生长长度最长(1/6Φ)。硼酸浓度进一步增大,当
硼酸浓度为200mg/L时萌发率反而降低(35%),说
明一定浓度的硼酸对花粉萌发起促进作用,超出这
个浓度则会抑制花粉粒的萌发。
当氯化钙浓度为0.5%时,紫茉莉花粉粒的萌
发率较低(20%),花粉管生长长度短(1/8Φ)。当氯
化钙浓度为1%时萌发率最大(40%)且花粉管生长长
度最长(1/6Φ),当钙离子浓度为2%时,花粉的萌
发率会降低(33%),且花粉管的生长长度也会显著
变短(1/7Φ)。说明补充一定的外源钙,可促进花粉
萌芽和花粉管生长,但过高浓度则会抑制花粉的萌
发和花粉管的生长。
参考文献
[1] 王琳, 杨德成, 江金霖, 等.紫茉莉属植物的化
学成分和药理活性的研究进展 [J] . 中国民族民
间医药杂志, 2010 (2): 31 ~ 34.
[2] 李凌智, 吐尔逊娜依, 阿不都拉·阿巴斯. 紫茉
莉花和叶中有效成分分析 [ J] . 食品科学 ,
2009, 30 (4): 233 ~ 235.
[3] 来国防, 罗士德, 曹建新, 等. 黄花紫茉莉化学
成分研究 [J] . 中国中药杂志, 2008, 33 (1):
42 ~ 46.
[4] 彭跃峰, 鲁红学, 李娜.紫茉莉提取物的抑菌活
性 [J] .农药, 2009, 48 (2): 147 ~ 49.
[5] 罗良胜, 屈磊磊, 杨丽英, 等. 紫茉莉对高血糖
模型小鼠降血糖作用研究 [J] . 云南中医中药杂
志, 2009, 30 (4): 51 ~ 53, 85.
[6] 毕顺先, 刘天惠.儿茶酚胺类药物漏出血管外的
处理 [J] . 中国医药导报, 2008 (21): 167 ~
168.
430415 武汉生物工程学院 刘燕玲 丁永辉
试 验 研 究
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