全 文 ：湖 北 农 业 科 学 2014 年
收稿日期：2014－07－28
基金项目：国家科技支撑计划项目（2011BAI13B06）；第四次全国中药资源普查项目（20120716－540000）；西藏自治区科技厅重大专项
（2011－68－20）
作者简介：李连强（1981－），男，云南弥渡人，讲师，硕士，主要从事生物技术、濒危藏药材人工种植与示范研究，（电话）13889047175
（电子信箱）tibetfred＠163．com；通讯作者，兰小中，副教授，主要从事药用植物资源教学与研究工作，（电话）0894－5826471
（电子信箱）lanxiaozhong＠163．com。
喜马拉雅紫茉莉 ［Mirabilis himalaica（Edgew．）
Heim．］为紫茉莉科植物，其根的藏药名为“阿夏尕那
哈”，是传统藏药的五根之一［1］。 藏医名著《蓝琉璃》
中记载“阿夏尕那哈根大，味甘，治下半身寒气病、
浮肿、黄水病，破结石、肿瘤”。Wang等［2］首先从紫茉
莉（M． jalapa L．）根中分离得到了一种鱼藤酮类化
合物——Boeravinone C，其结构如图 1 所示。 范海
霞 ［3］也从喜马拉雅紫茉莉根中分离得到了 Boeravi-
none C，并证实 Boeravinone C 对肺癌细胞株 A549、
肝癌细胞株 Hep G－2、宫颈癌细胞株 Hela 有较强
的抑制作用。 本课题组从 2007 年开始研究喜马拉
雅紫茉莉的人工种植，经过近 6 年探索，已系统掌
握了喜马拉雅紫茉莉的人工种植、水肥管理、病虫
害防治等关键技术， 提高了喜马拉雅紫茉莉的产
量， 改善了野生喜马拉雅紫茉莉资源匮乏的现状。
Boeravinone C 有较强的抗肿瘤作用，是喜马拉雅紫
茉莉的主要活性成分之一。 HPLC 法是测定药用植
物有效成分的常用方法 ［4－7］，本试验建立了喜马拉雅
紫茉莉根中 Boeravinone C 的 HPLC 测定方法，以期
为喜马拉雅紫茉莉的人工种植和药材的质量评价
喜马拉雅紫茉莉根中 Boeravinone C含量
的 HPLC分析
李连强，权 红，兰小中
（西藏大学农牧学院，西藏 林芝 860100）
摘要：建立 HPLC 测定喜马拉雅紫茉莉［Mirabilis himalaica （Edgew．） Heim．］药材中 Boeravinone C 含量的
方法。 色谱柱为 Kromosil 100－5 C18 柱（150 mm×4．6 mm，5 μm），流动相为甲醇－水（70∶30，V/V），流速为
0．8 mL ／ min，检测波长 294 nm。结果表明，Boeravinone C 含量在 0．032 4～0．486 0 μg 范围内，线性关系良好
（R2＝0．999 9）；精确度和准确度良好，平均回收率为 97．2％。该方法快速、简单，可用于喜马拉雅紫茉莉药
材的质量评价。
关键词：喜马拉雅紫茉莉［Mirabilis himalaica（Edgew．） Heim．］；Boeravinone C；高效液相色谱
中图分类号：O657．7＋2 文献标识码：A 文章编号：0439－8114（2014）22－5536-03
DOI：10．14088 ／ j．cnki．issn0439－8114．2014．22．055
Determinating Boeravinone C from Root of Mirabilis himalaica with HPLC
LI Lian－qiang， QUAN Hong， LAN Xiao－zhong
（Agricultural ＆ Animal Husbandry College of Tibet University， Linzhi 860000， Tibet， China）
Abstract： A HPLC method for determining of boeravinone C from root of Mirabilis himalaica （Edgew．） Heim was
established． The sample was separated by Kromosil 100－5 C18 column （150 mm×4．6 mm，5 μm ） with the mobile phase of
methanol－water （70∶30，V/V） at 0．8 mL ／ min． It was detected at 294 nm． The results showed that the calibration curve of
boeravinone C line were in good linearity in the range of 0．032 4～0．486 0 μg （R2＝0．999 9）． The precision and accuracy
were satisfied. The average recovery was 97.2％． This method is simple， rapid and accurate for evaluating the quality of M．
himalaica （Edgew．） Heim．
Key words： Mirabilis himalaica （Edgew．） Heim．； boeravinone C； HPLC
第 53卷第 22期
2014年 11月
湖北农业科学
Hubei Agricultural Sciences
Vol． 53 No.22
Nov.，2014
第 22 期
提供方法［8］，为相关的藏药开发和利用奠定基础。
1 材料与方法
1．1 材料
喜马拉雅紫茉莉药材于 2012年 9月 10日采自
西藏林芝地区八一镇章麦村藏药材人工种植与示
范基地，经西藏大学农牧学院罗建副研究员鉴定为
紫茉莉科植物喜马拉雅紫茉莉［Mirabilis himalaica
（Edgew．） Heim．］。样品保存于西藏大学农牧学院分
子生物学实验室内。
Boeravinone C 对照品由西南大学药学院陈敏
教授实验室自制（纯度＞98％）。甲醇（色谱纯）购于国
药集团化学试剂有限公司，去离子水购于杭州娃哈
哈集团有限公司
1．2 仪器
岛津 LC－20 高效液相色谱仪（LC－20AD、DGU－
20A3R 在线脱气、SIL－20A 自动进样器、 柱温箱、
SPD－20A 紫外检测器） ，Mettler toledo PL203 分析
天平、Mettler toledo B－S 天平、BUCHI B－491 旋转
蒸发器、KQ5200 型超声波清洗仪、高速多功能粉碎
机 BL－200型。
1．3 方法
1．3．1 色谱条件 Kromosil 100－5 C18柱（150 mm× 4．6
mm，5 μm）；流动相为甲醇－水 （70∶30，V ／ V）；流速
0．8 mL ／ min；检测波长 294 nm，柱温 25 ℃。
1．3．2 对照品溶液的配制 称取烘干至恒重的对
照品 4．05 mg，以甲醇定容至 25 mL，配制对照品母
液； 取对照品母液 1 mL， 用色谱纯甲醇定容至 5
mL，得浓度为 0．032 4 mg/mL的对照品工作液。
1．3．3 样品前处理 取样品粉碎， 过 100 目筛，烘
干至恒重，称取 1．000 g 左右样品，共 3 份，加入 20
mL 甲醇浸泡数分钟，超声提取 2 次，每次 30 min，
过滤，合并滤液，滤液用旋转蒸发仪蒸干后用甲醇
定容至 2 mL，经 0．45 μm滤膜过滤，待测。
2 结果与分析
2．1 方法学分析
取上述对照品溶液，分别进样 1～15 μL（n＝3），
以 Boeravinone C 含量为横坐标、 峰面积为纵坐标，
其线性回归方程为 Y＝4．286×105x－3．997×103，R2＝
0．999 9，线性范围为 0．032 4～0．486 0 μg。
取对照品溶液，重复进样 6次，每次 5 μL，以峰
面积计算，其 RSD 为 1．09％，表明精密度良好；取同
一批样品 5 份 ，按“1．3．3”制备样品溶液并测定含
量，其 RSD 为 0．80％，表明重复性良好；取对照品溶
液，分别于 0～48 h 进样 5 μL，计算峰面积的 RSD 为
1．95％，表明样品溶液在 48 h内稳定。
称取已知含量的喜马拉雅紫茉莉根 （同一批
次）5 份，加入对照品母液 2．45 mL，按“1．3．3”处理，
结果见表 1。
2．2 样品测定
喜马拉雅紫茉莉根一般秋末采收，本试验采集
的喜马拉雅紫茉莉为一年生人工种植幼苗，采收时
间为 2012 年 9 月 10 日。 按“1．3．3”制备样品，并进
样分析，对照品溶液及样品溶液的 HPLC 图见图 2。
采用外标峰面积法，根据线性回归方程计算，得样
品中 Boeravinone C 含量为 0．397 mg/g。
图 1 Boeravinone C 的结构
表 1 Boeravinone C 加样回收结果（n＝5）
编
号
1
2
3
4
5
称样量
g
1.001
1.003
1.002
1.005
1.002
本底量
mg
0.397
0.398
0.398
0.399
0.398
加入量
mg
0.397
0.397
0.397
0.397
0.397
测定含量
mg
0.776
0.782
0.758
0.784
0.765
回收率
%
97.7
98.4
95.3
98.5
96.2
均值
%
97.2
RSD
%
1.3
图 2 Boeravinone C 及喜马拉雅紫茉莉根的 HPLC 图
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5
保留时间//min
45
40
35
30
25
20
15
10
5
0
峰
高
//m
V
0.0 2.5 5.0 7.5 10.0 12.5 15.0 17.5
保留时间//min
1 100
1 000
900
800
700
600
500
400
300
200
100
0
峰
高
//m
V
A 对照品
B 样品
李连强等：喜马拉雅紫茉莉根中 Boeravinone C 含量的 HPLC 分析 5537
湖 北 农 业 科 学 2014 年
3 小结与讨论
喜马拉雅紫茉莉产于西藏东部和四川西北部，
基本呈零星分布，严重制约以喜马拉雅紫茉莉为主
要原料的藏药的研究与开发利用。 索朗其美等 ［9］采
用紫外分光光度法测定了野生和人工种植的喜马
拉雅紫茉莉中的黄酮含量，但黄酮类化合物广泛存
在于植物中，以总黄酮含量拟定喜马拉雅紫茉莉质
量标准略显粗糙。 本文建立了喜马拉雅紫茉莉根中
Boeravinone C 的 HPLC 测定方法。 经方法学考察，
Boeravinone C 含量在 0．032 4～0．486 0 μg 范围内，与
峰面积呈良好线性关系，具有较高的精确度和准确
度，平均回收率为 97．2％，样品溶液在 48 h 内稳定。
该方法样品制备方法简单，分析时间较短（约 20
min），可用于喜马拉雅紫茉莉根中 Boeravinone C 含
量的检测。 近期研究表明，Boeravinone C 可能是喜
马拉雅紫茉莉抗肿瘤的主要活性成分。 该方法的建
立，可为喜马拉雅紫茉莉的人工种植和药材的质量
准确评价提供科学依据。
参考文献：
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种成分的 HPLC 含量测定 ［J］． 中国中药杂志 ，2013，38 （9）：
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材与非道地药材的鉴别研究［J］．中国中药杂志，2013，38（12）：
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和人工种植喜马拉雅紫茉莉中总黄酮含量［J］．中国民族医药杂
志，2012（4）：60－62．
（责任编辑 周有祥）
表 1 戊唑醇和苯醚甲环唑在田水中的添加回收试验结果
农药组分
戊唑醇
苯醚甲环唑
1
100.0
110.0
100.0
110.0
3
90.0
110.0
90.0
90.0
添加浓度
mg/L
0.01
0.10
0.01
0.10
2
80.0
110.0
90.0
110.0
4
100.0
100.0
80.0
80.0
5
90.0
100.0
80.0
90.0
平均值
%
92.0
106.0
88.0
96.0
RSD
%
9.51
13.97
9.09
5.17
回收率//%
的检测。 试验结果表明，戊唑醇和苯醚甲环唑的质
量浓度与其峰面积在 0．05～5．00 mg ／ L 内线性关系
良好， 最小检出量分别为 8．26×10－12 g、4．38×10－11 g
（S ／ N＝5），添加回收率为 80．0％～110．0％，相对标准
偏差为 5．17％～13．97％。
参考文献：
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http：//www．agrichem．cn/news/201382914282678885．shtml．2013 －
08－29
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［7］ 包建民，马直爽，孙 莹，等．一种以含硅藻土的复合材料为介质
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［8］ 祝伟霞，袁 萍，杨冀州，等．固相支撑液液萃取－平行蒸发前处
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［9］ 李晓飞，唐 磊，罗永此，等．固相支撑液液萃取－气相色谱串联质
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27－29．
（责任编辑 周有祥）
（上接第 5535页）
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