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（责任编辑：赵景娣）
黑沙蒿乙醇粗提物对奶山羊体外试验
CLA含量及 C18不饱和脂肪酸生物氢化率的影响
王丽芳 1，卢德勋 2
（1.内蒙古农业大学动物科学与医学学院，内蒙古 呼和浩特 010018；2.内蒙古农牧业科学院动物营养研究所，内蒙古 呼和浩
特 010031）
摘要：采用体外试验研究添加不同浓度的菊科黑沙蒿乙醇粗提物对瘤胃微生物体外发酵脂肪酸生物氢化、CLA 含量及
其前体物 trans-11C18：1含量的影响。 黑沙蒿乙醇粗提物添加的剂量分别是 0（对照组）、3、30、300 及 3 000 mg/L。 培养时
间分别是 2、6 及 24 h。在每个采样时间点、每个添加量均设 3个重复。试验结果表明，添加黑沙蒿乙醇粗提物有降低 C18
不饱和脂肪酸生物氢化率的趋势，有增加 CLA生成前体物 trans-11C18：1脂肪酸含量的趋势，有增加 CLA含量的趋势。
关键词：黑沙蒿粗提物；奶山羊；体外试验；脂肪酸
中图分类号：S816.7 文献标识码：A 文章顺序编号：1672-5190（2011）09-0062-03
The Effects of Compositae Ordos Wormwood Extract on CLA Concentration and C18
Polyunsaturated Fatty Acids Biohydrogenation in vitro
WANG Li-fang1， LU De-xun2
（1.College of Animal Science and Veterinary Medicine， Inner Mongolia Agricultural University， Hohhot 010018，China;2.Institute of
Animal Nutrition， Inner Mongolia Academy of Agricultual and Animal Husbandry Sciences， Hohhot 010031 ， China）
Abstract：A batch culture technique was used to determine the effects of different doses of Compositae Ordos Wormwood extract （COE）
on biohydrogenation of fatty acids，concentration of CLA and trans-11C18：1 in culture medium. The dosage of COE was 0 （control），
3，30，300 and 3 000 mg/L mixed culture fluid ，respectively. The sampling time was 2，6 and 24 h， respectively.All COE treatments
were tested in triplicate at each sampling time.The results showed that COE treatments tended to reduce C18 polyunsaturated fatty acids
biohydrogenation，whereas the concentration of trans-11C18：1 and cis-9,trans-11 CLA in culture medium tended to increase.
Key words：Compositae Ordos Wormwood extract; lactating goats; in vitro;fatty acids
共轭亚油酸 （CLA） 是一组含有共轭双键亚油酸
（linoleic acid）的几何异构体和位置异构体的总称，它主要
是通过反刍动物瘤胃微生物氢化 C18不饱和脂肪酸形成前
体物 trans-11C18：1，其到达乳腺通过△9 去饱和酶 SCD 去饱
和进而形成 CLA。 因此调控瘤胃氢化 C18不饱和脂肪酸的
微生物，改变 C18不饱和脂肪酸的氢化率，增加 trans-11C18：1
的含量，进而增加乳中 CLA含量。
近来有研究报道， 菊科植物及其提取物能增加乳中
CLA含量，但是具体的作用机制报道不一。2006 年，Cabiddu
等研究指出，采食菊科植物茼蒿的奶山羊，其乳中 CLA 的
含量显著增加了， 他们认为是茼蒿中含有较高比例的亚油
酸而导致羊奶中 CLA 含量的增加 ；2007 年 ，Wallace 等报
道， 菊科植物或其提取物可以抑制瘤胃中脂肪酸的生物氢
化， 因此可能会改变乳肉中脂肪酸的组成， 达到增加乳中
CLA含量的目的。
该试验采用体外批次培养法， 研究添加菊科植物黑沙
蒿乙醇粗提物对 trans-11C18：1 含量、CLA 含量及 C18 不饱和
脂肪酸生物氢化率的影响， 旨在探讨黑沙蒿乙醇粗提物对
CLA合成的影响。
1 材料与方法
1.1 试验动物 选择健康的体重为 35 kg 并装有永久性瘤
胃瘘管的泌乳期奶山羊 2 只，为体外试验提供瘤胃液。
1.2 黑沙蒿乙醇粗提物 采用 55%的乙醇作为萃取溶剂，
在固液比为 1∶8，萃取温度为 95 ℃，萃取时间 2 h 的条件下，
从黑沙蒿的茎秆和叶中萃取 3 次的混合液， 混合液再冷冻
干燥而成粉末作为添加物。
黑沙蒿乙醇粗提物的添加方式 ：分别称取 10、100、
本文首次发表在《第四届中国畜牧科技论坛论文集》，2009 年。
作者简介：王丽芳（1975—），女，副研究员 ，博士 ，主要研究方
向为反刍动物营养调控理论与技术。
通讯作者：卢德勋（1937—），男，研究员，博士，博士生导师，主
要研究方向为反刍动物营养调控理论与技术。
△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△△
Animal Husbandry and Feed Science畜牧与饲料科学 2011，32（9-10） :62-64
DOI:10.16003/j.cnki.issn1672-5190.2011.z1.034
1 000 mg黑沙蒿乙醇粗提物溶于 10 mL无水乙醇， 配成 1、
10、100 mg/mL 的溶液，取 0.15 mL 加入相应的培养液，使浓
度依次达到 3、30、300 mg/L， 再称取 150 mg 黑沙蒿乙醇粗
提物直接加入培养液中， 再加入 0.15 mL 无水乙醇使浓度
达到 3 000 mg/L；对照组中加入 0.15 mL 无水乙醇。
1.3 试验设计 按黑沙蒿乙醇粗提物的不同添加剂量分
为 5组，分别是 0（对照组）、3、30、300 及 3 000 mg/L，日粮的
精粗比是 50%∶50%。 2只奶山羊的瘤胃内容物被彻底混合，
并通过 4层纱布过滤， 然后与缓冲液以 1∶4的比例混合，缓
冲液的配制参照 Russell 和 Martin的方法。发酵过程建立在
100 mL 的培养瓶， 其内含有 50 mL 的培养液、0.5 g 通过
1 mm 筛粉碎的培养底物，培养时间分别是 2、6、24 h。 在每
个采样时间点、每个添加量均设 3个重复。
1.4 测定指标
1.4.1 脂肪酸含量
1.4.1.1 脂肪的提取：体外培养液及培养底物混合后（约 50 mL）
真空冻干，脂肪的提取采用 Folch等的方法。
1.4.1.2 脂肪酸的甲酯化： 脂肪酸的甲酯化采用 Krammer
的方法。
1.4.1.3 脂肪酸的测定：脂肪酸的测定采用卜登攀的方法。
1.4.2 多不饱和脂肪酸生物氢化率
1.5 数据统计分析 数据处理采用 Microsoft Excel 2003 软
件初步整理， 并且用 SAS 6.12 软件中的方差统计分析和
DUNCAN′S法多重比较。
2 结果与讨论
2.1 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中脂肪酸氢化
率的影响
2.1.1 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 C18：1脂肪酸
生物氢化率的影响：从图 1 和表 1 可以看出，随着时间的延
长，各试验组 C18：1不饱和脂肪酸的生物氢化率均逐渐上升，
到 24 h均达到最高值。 与对照组相比，除 30mg/L黑沙蒿乙醇
粗提物添加组外， 其他 3 个黑沙蒿乙醇粗提物添加组 C18：1
不饱和脂肪酸生物氢化率均低于对照组， 但各组间平均值
差异不显著（P >0.05）。
2.1.2 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 C18：2生物氢
化率的影响：从图 2 和表 2 可以看出，C18：2不饱和脂肪酸的
生物氢化率与 C18：1不饱和脂肪酸的生物氢化率相似， 随着
黑沙蒿乙醇粗提物浓度
（mg/L）
0
3
30
300
3000
2 h
16.41a±5.81
10.95a±11.29
25.90a±1.18
14.12a±2.05
10.23a±6.98
6 h
21.57ab±9.21
14.16b±2.26
30.71a±1.12
17.27b±5.26
12.66b±0.12
24 h
60.87a±1.05
57.30ab±2.13
59.28a±1.75
51.38b±4.83
18.04c±1.13
平均值
32.95a±24.32
27.47a±25.88
38.63a±18.04
27.59a±20.66
23.71a±14.73
注：同列数据角标字母相同表示差异不显著（P>0.05），字母不同表示差异显著（P<0.05），下表同。
表 1 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 C18：1脂肪酸生物氢化率的影响
C18：1脂肪酸生物氢化率（%）
黑沙蒿乙醇粗提物浓度
（mg/L）
0
3
30
300
3000
2 h
27.76a±5.20
18.95a±13.77
26.83a±6.58
28.85a±6.84
19.16a±7.13
6 h
29.74a±1.00
27.32a±2.72
30.26a±11.85
33.18a±3.25
21.35a±1.56
24 h
79.36a±0.37
78.37a±1.01
78.73a±0.52
75.57a±4.12
33.23b±25.62
平均值
45.62a±29.24
41.55a±32.16
49.69a±25.63
45.87a±25.81
22.90a±9.64
表 2 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 C18：2脂肪酸生物氢化率的影响
C18：2脂肪酸生物氢化率（%）
王丽芳等：黑沙蒿乙醇粗提物对奶山羊体外试验 CLA 含量及 C18不饱和脂肪酸生物氢化率的影响第 9-10 期 63
黑沙蒿乙醇粗提物浓度
（mg/L）
0
3
30
300
3000
2 h
31.43a±11.83
26.63ab±10.51
14.83ab±5.76
22.61ab±4.24
7.16b±1.63
6 h
36.52ab±10.44
44.38a±0.46
20.36b±9.62
32.33ab±1.42
47.06a±4.62
24 h
70.65a±5.40
72.84a±0.37
70.06a±1.94
72.04a±1.20
63.42a±15.00
平均值
46.20a±21.33
47.95a±23.31
35.08a±30.42
42.33a±26.19
39.21a±28.94
表 3 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 C18：3脂肪酸生物氢化率的影响
C18：3脂肪酸生物氢化率（%）
黑沙蒿乙醇粗提物浓度
（mg/L）
0
3
30
300
3000
2 h
0.31b±0.10
0.48b±0.13
0.45b±0.06
0.66ab±0.04
0.99a±0.33
6 h
0.31b±0.25
0.33b±0.11
0.09b±0.01
0.41ab±0.01
0.87a±0.19
24 h
0.15b±0.01
0.11b±0.05
0.08b±0.01
0.19b±0.01
0.42a±0.14
平均值
0.26b±0.09
0.31b±0.19
0.21b±0.21
0.42ab±0.24
0.76a±0.30
表 5 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 CLA含量的影响
CLA含量
时间的延长， 各试验组 C18：2不饱和脂肪酸的生物氢化率均
逐渐上升，到 24 h 均达到最高值，且各黑沙蒿乙醇粗提物
组 C18：2 不饱和脂肪酸生物氢化率在 24 h 均低于对照组，
3 000 mg/L 组显著低于对照组（P<0.05）。
2.1.3 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 C18：3脂肪酸
生物氢化率的影响：从图 3 和表 3 可以看出，C18：3不饱和脂
肪酸的生物氢化率与 C18：1及 C18：2不饱和脂肪酸的生物氢化
率相似，随着时间的延长，各试验组 C18：2不饱和脂肪酸的生
物氢化率均逐渐上升，到 24 h 均达到最高值。 除 3 mg/L 黑
沙蒿乙醇粗提物组，C18：3 不饱和脂肪酸生物氢化率 3 个时
间点的平均值均低于对照组，但差异不显著（P >0.05）。
2.2 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 CLA 及
trans-11C18：1含量的影响
2.2.1 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 trans -
11C18：1含量的影响：从表 4可以看出，trans-11C18：1的含量随
着时间的延长有增加的趋势，其中在 24 h，各黑沙蒿乙醇粗
提物组的 trans-11C18：1的含量均高于对照组，3 mg/L 黑沙蒿
乙醇粗提物组显著高于对照组（P<0.05）。
2.2.2 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 CLA 含量
的影响：从表 5 可以看出，随着时间的延长，CLA 的含量随
着时间的延长逐渐下降，这表明 CLA 随着时间的延长逐渐
被微生物氢化。 与对照组相比，除 30 mg/L 黑沙蒿乙醇粗提
物组，其他各组 3 个时间点 CLA 含量的平均值均高于对照
组，3 000 mg/L 组显著高于对照组（P<0.05）。
3 结论
添加黑沙蒿乙醇粗提物有降低 C18不饱和脂肪酸生物
氢化率的趋势， 有增加 CLA 生成前体物 trans-11C18：1脂肪
酸含量和 CLA含量的趋势。
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（责任编辑：钱英红）
2 h
6.33a±0.39
6.51a±0.11
5.85a±1.37
6.40a±0.04
6.90a±1.63
6 h
5.78b±0.65
6.91b±0.08
5.54b±1.66
7.03ab±0.05
9.11a±0.30
24 h
7.99b±0.72
9.70a±0.37
8.39b±0.54
8.36b±0.20
8.82ab±0.42
平均值
6.70a±1.42
7.71a±1.13
6.59a±1.00
7.26a±1.38
8.28a±1.09
表 4 黑沙蒿乙醇粗提物对体外培养混合物中 trans-11C18：1脂肪酸含量的影响
trans-11C18：1脂肪酸含量黑沙蒿乙醇粗提物浓度
（mg/L）
0
3
30
300
3000
畜牧与饲料科学 第 32 卷64