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野牡丹提取物对血小板聚集的影响



全 文 :Abstract:
Keywords:
Objec ive
Methods
Results
Conclusion
To study the effect of extraction (MCE) on thrombosis, platelet aggregation,
and platelet cAMP, cGMP and nitric oxide (NO) concentration. The thrombosis of the common carotid artery and
average 5-minute blockage rate were determined by thrombotic detector after 5 min of MCE injection via external jugular vein in
rats. After whole blood was incubated with MCE for 5 min, the platelet aggregation and platelet levels of cAMP, cGMP and NO
were detected by aggregometer, ELISA and nitrate reductase assay, respectively. 5 mg/kg MCE increased the
thrombosis of the common carotid artery, and the blockage rate was (86.56 1.54)%. 200, 400 and 800 mg/L MCE induced the
platelet aggregation, and decreased the platelet contents of cAMP, cGMP and NO. MCE can reinforce the throm-
bosis and platelet aggregation, but reduce the platelet production of cAMP, cGMP and NO.
; thrombosis; platelet aggregation; nitric oxide
Melastoma candidum
Mela toma candidum
±
野牡丹提取物对血小板聚集的影响
( 广东省翁源县人民医院功能科,广东翁源 ; 广东医学院1. 512600 2.
第一临床学院,广东湛江 ; 广东医学院生物化学与分子生物学研究所,广东湛江 )524001 3. 524023
Effect of extraction on platelet aggregationMelastoma candidum
LIU Hui , SHEN Yi-hua , LIU Wen1 2 3 (1.Department of Function, Wengyuan People s Hospital, Wengyuan 512600, China)’
摘 要:
关键词:
中图分类号: 文献标识码: 文章编号:
目的 方

结果
结论
DOI:
cAMP cGMP (NO)
5 min 5 min
5 min ELISA cAMP cGMP
NO 5 mg/kg
(86.56 1.54)% 200 400 800 mg/L cAMP cGMP NO
cAMP cGMP NO
R 281 A 1005-4057(2012)05-0482-03
10.3969/j.issn.1005-4057.2012.05.002
观察野牡丹提取物对血栓形成、血小板聚集及血小板 、 和一氧化氮 含量的影响。
在颈外静脉注射给药 后,用血栓生成仪观察野牡丹提取物对大鼠颈总动脉血栓形成的影响,测定 平均堵
塞率;全血与药物孵育 ,用全血血小板聚集仪观察全血血小板聚集情况;用 法检测血小板 和 含
量;用硝酸还原酶法观察血小板释放 情况。 野牡丹提取物 促进大鼠颈总动脉血栓形成,堵塞率为
。 、 、 野牡丹提取物均能诱导全血血小板聚集,并减少血小板 、 和 生
成。 野牡丹提取物可促进大鼠血栓形成和血小板聚集,并能减少血小板 、 和 含量。
野牡丹;血栓形成;血小板聚集;一氧化氮
±
基金项目:
收稿日期: 修订日期:
作者简介:
通讯作者:
广东省重点学科基金 ;
     广东医学院大学生创新实验项目立项课题
     

刘 惠 - ,女,大专,住院医师。
刘 文 - ,男,医学硕士,副教授,
硕士生导师, 。
(No.9306)
(No.ZYZF011)
2012-07-08 2012-09-23
(1973 )
(1970 )
Email: liuw422@yahoo.com.cn
野牡丹
是野牡丹科 野牡丹属
植物,性凉、味酸涩,具有清热解
毒、利湿消肿、活血止血等功效。主治肠炎、痢
疾、肝炎、衄血、便血、乳汁不下、跌打损伤、外
伤出血等疾病 。目前对野牡丹药用成分及其药理
作用的研究较少。本文研究野牡丹提取物
, 对血栓形成和血
小板聚集及血小板 、 和一氧化氮 含
量的影响,现将结果报道如下。
 
 
野牡丹采自广东省翁源县,由广东医学院生物
化学与分子生物学研究所用煎煮法提取 ,并用冷
冻干燥机真空干燥得到固体药品。
 
大白兔,雌雄兼用,体质量 ;
大鼠,雌雄兼用,体质量 。以上动物
均由广东医学院动物中心提供。动物合格证书号:
粤监证字 和 。
 
凝血酶 批号 购自 公司;兔
和 酶联免疫检测试剂盒购自天津索罗门
生物科技有限公司;一氧化氮 试剂盒 硝酸还原
( D. Don [
Lour.]) (Melastomaceae)
( Linn.)
(
P.E M. P.E)
cAMP cGMP (NO)
1.1
1.2
(2.0 0.2) kg SD
(300.0 50.0) g
2008A036 2008A037
1.3
( 85H9320) Sigma
cAMP cGMP
(NO) (
Melasroma, candidum M.septem-
nervium
Melastoma
Melasto-
ma candidum candidum
[1-2] [3]
1 材料和方法
试验药物
动物
试剂
±
±
刘 惠 ,沈毅华 ,刘 文1 2 3
酶法 购自南京建成科技有限公司;水合氯醛 批号
由中国医药集团上海化学试剂公司生
产。其余为国产分析纯或生化纯试剂。
 
小动物血栓生成仪 山东省医学科学院
设备站 ; 全血血小板聚集
仪 美国 公司 ;连续光谱荧光酶标仪
德国 公司 ; 冷冻干燥机 军事医学科
学院实验仪器厂 。
 
 野牡丹提取物对大鼠颈动脉血栓形成的影响
取 大鼠 只,随机分成生理盐水组 和野
牡丹提取物组 。腹腔注射 水合氯醛溶
液 ,充分麻醉后,将大鼠固定于小动物解
剖板上,钝性分离左颈外静脉和右颈总动脉,从左
颈外静脉注射野牡丹提取物或生理盐水, 后用
血栓生成仪通过刺激 电流 ,刺激时间
诱导大鼠右颈总动脉内血栓形成,观察右颈
总动脉血栓阻塞情况。
 野牡丹提取物对全血血小板聚集的影响 兔
血用塑料管收集和用 柠檬酸钠,
葡萄糖, 柠檬酸 体积比抗
凝,全血和生理盐水各取 分别与野牡丹提取
物 、 、 及凝血酶 孵育
,然后用全血血小板聚集仪记录聚集情况。
 野牡丹提取物对血小板 、 和
的影响 取 抗凝血 与野牡丹提取物 、
、 孵育 ,然后 离心
取上清,采用酶联免疫检测法检测 和
的含量,采用硝酸还原酶法检测 的含量。
 
计量资料采用均数 标准差 的形式表
示,以 统计软件进行统计学处理,采用完
全 随 机 设 计 平 衡 资 料 的 方 差 分 析
,多个样本均数方差齐性用
检验,方差齐同时采用 法检验,
方差不齐时采用 检验。以 为差异有
统计学意义。
 
 野牡丹提取物对大鼠颈动脉血栓形成的影响
与生理盐水组比较,野牡丹提取物 有促
进大鼠颈总动脉血栓形成的作用表 。
 
野牡丹提取物具有促进兔全血血小板聚集的作
用,随药物剂量增加而加强 表 。
  、
野牡丹提取物具有降低血小板 、 和
水平的作用,随药物剂量增加而加强 表 。
 
) (
W20011204)
1.4
YLS-14B (
) CHRONO-LOG(590-2D)
( CHRONO-LOG )
( Thermo ) LGJ-10 (
)
1.5
1.5.1
SD 8 (5 mL/kg)
(5 mg/kg) 10%
4.5 mL/kg
5 min
YLS-14B ( 1 mA
5 min)
1.5.2
ACD(86 mmol/L 111
mmol/L 53 mmol/L )0.15?
0.5 mL
200 400 800 mg/L 500 U/mL 5
min
1.5.3 cAMP cGMP NO
ACD 0.5 mL 200
400 800 mg/L 5 min 1000 r/min 15
min, cAMP
cGMP NO
1.6
( )
SPSS12.0
(One-Way
ANOVA) Homogeneity of
Variances Test LSD
Tamhane <0.05
2.1
5mg/kg
( 1)
2.2
( 2)
2.3 cAMP cGMP NO
cAMP cGMP
NO ( 3)
仪器
方法
统计学处理
野牡丹提取物对兔全血血小板聚集的影响
野牡丹提取物对血小板 和 含
量的影响
± ± s
P
2 结果
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β

曾欣 张元春 心脏胶原纤维增生及其影响因素 心血
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陈兆文 李伟华 例 ~ 岁宫内发育迟缓儿的生长方式
分析 上海医学
丘小汕 黄婷婷 早期不同饮食营养干预对宫内生长迟缓
幼鼠生长追赶的影响 中华儿科杂志
3 
民间使用野牡丹治疗肠炎、痢疾、肝炎、衄
血、便血,叶捣碎外敷或用干粉止血等 。血栓形
成和血小板聚集在生理止血过程中起重要作用。直
流电刺激大鼠的颈动脉 血管内皮,造成一系列
活性因子的释放,激活血小板和白细胞,引起血小
板聚集,快速形成混合型血栓。 、 和
在血小板聚集过程中起重要的调节作用,
和 生成减少能够促进血小板聚集,反之则
抑制血小板聚集 。
本实验结果显示,野牡丹提取物 及生理
盐水组的 血栓平均堵塞率分别为
及 ,提示野牡丹提取物有促
进血栓形成的作用。野牡丹提取物 、 、
及凝血酶 、生理盐水组血小板最大聚
集率分别为 、 、
、 、 Ω,野牡丹提取物 、
及凝血酶 与生理盐水组比较差异均有
统计学意义,提示野牡丹提取物具有凝血酶类似的
作用,可诱导血小板聚集。野牡丹提取物 、
、 组血小板 、 和 水平与
生理盐水组比较差异均有统计学意义,尤以
组为著,提示野牡丹提取物可降低血小板
、 和 的水平,其机理值得进一步探
讨。
本实验的结果表明,野牡丹具有促进血栓形成
和血小板聚集的作用,能够降低血小板 、
和 的水平。我们推测,野牡丹止血的机理
可能是野牡丹降低血小板 水平,同时降低血小
板 水平,通过 蛋白激酶途径减少 的
生成,两者同时促进血小板的聚集,形成血栓来栓
塞血管,从而加强止血的作用。
讨论
参考文献:
[1-2]
[4-5]
cAMP cGMP
NO
cAMP NO
5mg/kg
5 min (86.56
1.54)% (63.15 9.74)%
200 400 800
mg/L 500 U/mL
(0.75 0.50) (5.75 1.71) (11.00
2.58) (13.25 2.99) 0 400 800
mg/L 500 U/mL
200
400 800 mg/L cAMP cGMP NO
800
mg/L
cAMP cGMP NO
cAMP
cGMP NO
cAMP
cGMP cGMP- NO
±
±
± ± ±
±
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损伤
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