全 文 ：收稿日期：２０１４－０１－１８
基金项目：海南省重点科技计划项目（０１２０３）
作者简介：刘红芳（１９７８－），女，甘肃民勤人，讲师，硕士，主要从事植物病虫害防治研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｌｈｏｎｇｆａｎｇ＠１６３．ｃｏｍ
假蒟提取物对斜纹夜蛾的触杀活性及其
有效成分的初步分离
刘红芳１，符悦冠２
（１．长江师范学院 生命科学与技术学院，重庆４０８１００；
２．中国热带农业科学院 环境与植物保护研究所，海南 儋州５７１７３７）
摘要：为研究假蒟的杀虫生物活性，对假蒟根、茎、叶用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇和甲醇５种溶
剂依次进行索氏提取，测定各提取物对斜纹夜蛾幼虫的触杀活性，并对其有效成分进行了初步分
离。结果表明，不同部位不同溶剂提取物对斜纹夜蛾幼虫的触杀活性不同，假蒟的主要活性部位为
根，其次为茎，叶活性最低；５种有机溶剂提取物中，以石油醚提取物的活性最突出，其他溶剂提取
物对试虫基本无生物活性。虫龄越低提取物的杀虫活性越佳，假蒟根石油醚提取物对斜纹夜蛾三
至六龄幼虫的致死中浓度（ＬＣ５０）分别为０．２０４ ９％、０．３７０ ８％、０．８５３ ６％、１．２３３ １％；假蒟茎石油
醚提取物对斜纹夜蛾三至六龄幼虫的ＬＣ５０分别为０．２３９ ２％、０．３９７ ８％、０．９４８ ５％、１．４８６ ７％。通
过对假蒟根石油醚洗提物进行柱层析和ＴＬＣ分离，得到１６个组分，主要活性组分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ，在
１ｍｇ／ｍＬ质量浓度下，其对斜纹夜蛾四龄幼虫２４ｈ校正死亡率均达到１００％；其次是组分Ｅ和组
分Ｆ，２４ｈ校正死亡率分别为５３．３３％和３６．６７％；其他组分基本无生物活性。总之，假蒟根石油醚
提取物对斜纹夜蛾的触杀活性最高，且虫龄越低杀虫效果越好。
关键词：假蒟；斜纹夜蛾；提取物；触杀活性；有效成分
中图分类号：Ｓ４３３ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００４－３２６８（２０１４）０８－００７７－０５
Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ Ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍＰｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍｏｎ
Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ ａｎｄ Ｐｒｅｌｉｍｉｎａｒｙ Ｐｕｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
ＬＩＵ Ｈｏｎｇ－ｆａｎｇ１，ＦＵ Ｙｕｅ－ｇｕａｎ２
（１．Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｙａｎｇｔｚｅ Ｎｏｒｍａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｃｈｏｎｇｑｉｎｇ ４０８１００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｅｎｖｉｒｏｎｍｅｎｔ ａｎｄ Ｐｌａｎｔ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ｔｒｏｐｉｃａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，
Ｄａｎｚｈｏｕ ５７１７３７，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｓｔｕｄｙ ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ Ｐｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ，ｔｈｅ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ
ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｔｈｅ ｒｏｏｔｓ，ｓｔｅｍｓ ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ ｏｆ Ｐｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍｒｅｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ，
ｃｈｌｏｒｏｆｏｒｍ，ｅｔｈｙｌ ａｃｅｔａｔｅ，ｅｔｈａｎｏｌ，ｍｅｔｈａｎｏｌ ｂｙ Ｓｏｈｘｌｅｔ ｍｅｔｈｏｄ ｗｅｒｅ ｔｅｓｔｅｄ ｕｓｉｎｇ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ
ｌｉｔｕｒａｌａｒｖａｅ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅｍ ｗｅｒｅ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｗｉｔｈ ｄｉｆｆｅｒｅｎｔ ｐａｒｔｓ
ｏｆ ｐｌａｎｔ ｓａｍｐｌｅｓ，ｔｈｅ ｒｏｏｔｓ ｏｆ Ｐｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ ｗａｓ ｔｈｅ ｍａｘｉｍａｌ，ｓｔｅｍｓ ｓｅｃｏｎｄｌｙ，ａｎｄ ｌｅａｖｅｓ
ｌａｓｔｌｙ．Ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｆ ｔｈｅ ｅｘｔｒａｃｔ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ ｗａｓ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ，ａｎｄ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ ｗｅｒｅ
ｕｓｅｌｅｓｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｏｆ ｂｉｏａｓｓａｙ ｔｅｓｔ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ，ｔｈｅ ｃｏｎｔａｃｔ ｔｏｘｉｃｉｔｉｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｃｒｕｄｅ ｅｘｔｒａｃｔｓ
ａｇａｉｎｓｔ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｗｉｔｈ ｔｈｅ ｄｅｃｒｅａｓｅ ｏｆ ａｇｅｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｓｅｃｔｓ．Ｔｈｅ ＬＣ５０ｏｆ ｔｈｅ
河南农业科学，２０１４，４３（８）：７７－８１
Ｊｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｈｅｎａｎ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ
DOI:10.15933/j.cnki.1004-3268.2014.08.013
ｅｘｔｒａｃｔｓ ｗｉｔｈ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ ｆｒｏｍ ｒｏｏｔｓ ａｎｄ ｓｔｅｍｓ ｏｆ Ｐｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍａｇａｉｎｓｔ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ
ｌｉｔｕｒａ ３ｔｈ，４ｔｈ，５ｔｈ，６ｔｈ ｌａｒｖａｅ ｗｅｒｅ ０．２０４ ９％，０．３７０ ８％，０．８５３ ６％，１．２３３ １％ａｎｄ ０．２３９ ２％，
０．３９７ ８％，０．９４８ ５％，１．４８６ ７％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ２４ｈａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｓｅｐａｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ
ｅｘｔｒａｃｔｅｄ ｉｎ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ ｆｒａｃｔｉｏｎ ｗａｓ ｐｅｒｆｏｒｍｅｄ ｔｈｒｏｕｇｈ ｓｉｌｉｃａ ｇｅｌ ｃｏｌｕｍｎ ｆｏｌｏｗｅｄ ｂｙ ＴＬＣ
ａｎａｌｙｓｉｓ，ａｎｄ １６ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｗｅｒｅ ｏｂｔａｉｎｅｄ．Ｔｈｅ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ ｔｅｓｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｆｉｒｓｔ（Ａ），
ｔｈｅ ｓｅｃｏｎｄ（Ｂ），ｔｈｅ ｔｈｉｒｄ（Ｃ）ａｎｄ ｔｈｅ ｆｏｕｒｔｈ（Ｄ）ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ｈａｄ ｔｈｅ ｓｔｒｏｎｇｅｓｔ ｃｏｎｔａｃｔ
ｔｏｘｉｃｉｔｉｅｓ ｏｎ ｔｈｅ ４ｔｈ ｌａｒｖａｅ ｏｆ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ，ｗｉｔｈ ａ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｏｆ １００％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ ａｔ ｔｈｅ
ｄｏｓｅ ｏｆ １ｍｇ／ｍＬ ２４ｈａｆｔｅｒ ｔｒｅａｔｍｅｎｔ．Ｔｈｅ ｆｉｆｔｈ（Ｅ）ａｎｄ ｔｈｅ ｓｉｘｔｈ（Ｆ）ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔ ｇｒｏｕｐｓ ａｌｓｏ ｈａｄ
ｈｉｇｈｅｒ ｃｏｎｔａｃｔ ｔｏｘｉｃｉｔｉｅｓ，ｗｉｔｈ ａ ｍｏｒｔａｌｉｔｙ ｏｆ ５３．３３％ ａｎｄ ３６．６７％ｒｅｓｐｅｃｔｉｖｅｌｙ，ａｎｄ ｔｈｅ ｏｔｈｅｒｓ
ｗｅｒｅ ｕｓｅｌｅｓｓ．Ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｓ ｆｒｏｍ ｒｏｏｔｓ ｏｆ Ｐｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｓｔ
ａｃｔｉｖｉｔｙ ｏｎ Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａｌａｒｖａｅ，ａｎｄ ｔｈｅ ｅａｒｌｉｅｒ ｔｈｅ ｐｅｓｔ ｓｔａｇｅ，ｔｈｅ ｈｉｇｈｅｒ ｔｈｅ ｂｉｏａｃｔｉｖｉｔｙ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ｐｉｐｅｒ ｓａｒｍｅｎｔｏｓｕｍ；Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ；ｅｘｔｒａｃｔｓ；ｉｎｓｅｃｔｉｃｉｄａｌ ａｃｔｉｖｉｔｙ；ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ ｃｏｍ－
ｐｏｎｅｎｔ
斜纹夜蛾（Ｓｐｏｄｏｐｔｅｒａ ｌｉｔｕｒａ Ｆａｂｒｉｃｉｕｓ）属鳞翅
目（Ｌｅｐｉｄｏｐｔｅｒａ）夜蛾科（Ｎｏｃｔｕｉｄａｅ），其食性广泛，
已知寄主多达２９０种以上，是一种世界性农业害
虫［１］。长期以来，对斜纹夜蛾的防治主要依赖于
化学杀虫剂，然而化学农药的大量使用不仅使该
害虫对许多化学农药产生不同程度的抗药性，而
且对生态环境造成了破坏［２－３］。随着现代农业的
快速发展和人们对产品质量要求的提高，人们更
寄希望于植物源等天然药物的研究开发，更加重
视其对害虫具有毒杀、拒食和驱避等作用的活性
成分作用机制、结构和生物活性物质构效关系的
研究，重视与环境相融的高效低毒商品制剂的开
发研制。假蒟是一种常见的祛风湿类药用植物，
更是中华跌打丸的重要原料之一，被２０１０版《中
华人民共和国药典》附录收载［４－５］。近年来，人们
对其生药学及其挥发油进行了研究报道［６－７］，其在
杀虫抑菌方面亦表现出较高的生物活性［８－１１］。为
了进一步明确假蒟的杀虫生物活性，研究了假蒟
不同溶剂提取物对斜纹夜蛾的触杀活性，并对假
蒟有效成分进行了初步分离，为其在有害生物综
合治理中的深入开发和利用提供科学依据。
１ 材料和方法
１．１ 材料
１．１．１ 供试植物 自中国热带农业科学院环境与
植物保护研究所试验场的橡胶园内采集新鲜假蒟。
１．１．２ 供试昆虫 从中国热带农业科学院环境与
植物保护研究所附近的甘蓝菜地采回斜纹夜蛾幼
虫，在室内饲养至成虫，用１０％的蜜糖水为成虫补
充营养让其产卵，收集卵块，孵化后用新鲜蓖麻叶于
室温下饲养，选取发育整齐一致的Ｆ１ 代幼虫供试。
１．２ 方法
１．２．１ 假蒟提取物的制备 采用索氏（Ｓｏｘｈｌｅｔ）抽
提法［１２］。将采集的假蒟清洗干净，根、茎、叶分开，
于室内自然阴干，用植物粉碎研磨机粉碎制成干粉
（５５０μｍ）；称取适量干粉，装入高１０ｃｍ、直径５ｃｍ
的滤纸圆筒内，上下均封口后用石油醚（沸程６０～
９０℃）、氯仿、乙酸乙酯、乙醇、甲醇（在５００ｍＬ的平
底烧瓶中加入提取溶剂２５０ｍＬ）等系列溶剂进行分
步提取，即样品先用极性低的溶剂提取，其残渣再用
极性相对较高的溶剂继续提取。提取液用４层纱布
过滤后于旋转蒸发器（５５℃）中浓缩成膏状物，贴上
标签保存在冰箱中备用。
１．２．２ 假蒟提取物溶液配制 将假蒟提取物先用
少量丙酮和１滴吐温８０溶解，然后用水稀释定容至
所需浓度（以提取物质量分数表示），各分成若干等
份，分装于指型管（直径２．５ｃｍ、高１０ｃｍ）中，每等
份约２０ｍＬ左右。
１．２．３ 假蒟提取物对斜纹夜蛾幼虫毒杀作用测定
选择发育整齐一致的斜纹夜蛾四龄幼虫，用供试
样品５％的溶液浸泡３～５ｓ，将试虫拿出用滤纸吸
干多余药液后放入养虫盒内饲养，用清水加少量丙
酮和１滴吐温８０作对照（ＣＫ）。每处理３个重复，
每重复１０头试虫。置于温度为（２４±１）℃、相对湿
度为８０％±１０％、光周期为（Ｌ∶Ｄ）＝１２∶１２的人
工气候箱中，２４ｈ后检查试虫的存活和死亡头数，
根据下面公式计算２４ｈ死亡率和校正死亡率。
死亡率＝
死亡虫数
供试总虫数×１００％
校正死亡率＝
对照生存率－处理生存率
对照生存率 ×１００％。
８７ 河南农业科学 第４３卷
１．２．４ 假蒟提取物对斜纹夜蛾幼虫致死中浓度的
测定 选择触杀活性较高的溶剂提取物进行致死中
浓度（ＬＣ５０）测定。方法：采用等差或等比稀释法将
提取物稀释成５个浓度，分别求出提取物不同浓度
的校正死亡率，再将死亡率转化成概率值，浓度转化
成对数值，利用ＳＡＳ统计软件计算回归方程、相关
系数（ｒ）、ＬＣ５０及其９５％置信区间。
１．２．５ 假蒟根提取物有效成分的初步分离
１．２．５．１ 提取物的初步洗提分离 称取假蒟根乙
醇提取浸膏１２２ｇ，加入等量７５～４８μｍ柱层析硅
胶拌成粉状物，依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯和无
水乙醇（各５００ｍＬ）洗脱，洗脱液分别浓缩后得到石
油醚、氯仿、乙酸乙酯和乙醇洗提物，称质量计算洗
提物的洗提率。并将洗提物配制成１％溶液对斜纹
夜蛾进行触杀活性测定。
洗提率＝
Ｍ１－Ｍ２
Ｍ１ ×１００％
其中：Ｍ１ 表示样品洗提前质量，Ｍ２ 表示样品
洗提后质量。
１．２．５．２ 洗提物柱层析分离 根据１．２．５．１生物
活性测定结果，选取活性较高的石油醚洗提物进行
硅胶柱层析。
制样：称取适量假蒟根石油醚洗提物，用少量石
油醚稀释；
装柱：采用湿法上柱；
上样：将假蒟根石油醚洗提物用少量洗脱液溶
解，用移液管将样品稀释液沿着柱内壁小心加入柱
内，每个层析柱加样品５ｇ；
洗脱：采用系列极性洗脱剂（Ｖ石油醚：Ｖ氯仿＝５∶
１、３∶１、１∶１、１∶３、１∶５）梯度洗脱；
洗脱液的收集：１０ｍＬ／管分别收集，薄层色谱
（ＴＬＣ）检测（层析液：Ｖ石油醚∶Ｖ氯仿＝４∶１），合并比
移值（Ｒｆ值）相同的洗脱液供下一步试验；
生测：以斜纹夜蛾四龄幼虫为试虫，确定各组分
的生物活性。
２ 结果与分析
２．１ 假蒟提取物对斜纹夜蛾幼虫触杀活性测定
结果
从表１可以看出，假蒟根、茎石油醚提取物对
斜纹夜蛾四龄幼虫具有很高的触杀活性，在使用
质量分数为５％时，其致死活性均达到了１００％；
假蒟叶石油醚提取物对斜纹夜蛾触杀活性较低，
质量分数为５％时，致死活性只有３０％；假蒟不同
部位其他溶剂提取物对斜纹夜蛾四龄幼虫基本无
触杀活性。
表１ 假蒟系列溶剂提取物对斜纹夜蛾幼虫的触杀活性
材料 供试样品
供试虫
数／头
死亡虫
数／头
死亡率／
％
校正死
亡率／％
假蒟根 石油醚提取物 ３０ ３０ １００ １００
氯仿提取物 ３０ ３ １０ １０
乙酸乙酯提取物 ３０ １ ３．３３ ３．３３
乙醇提取物 ３０ ０ ０ ０
甲醇提取物 ３０ ０ ０ ０
假蒟茎 石油醚提取物 ３０ ３０ １００ １００
氯仿提取物 ３０ ２ ６．６６ ６．６６
乙酸乙酯提取物 ３０ ０ ０ ０
乙醇提取物 ３０ ０ ０ ０
甲醇提取物 ３０ ０ ０ ０
假蒟叶 石油醚提取物 ３０ ９ ３０ ３０
氯仿提取物 ３０ ０ ０ ０
乙酸乙酯提取物 ３０ ０ ０ ０
乙醇提取物 ３０ ０ ０ ０
甲醇提取物 ３０ ０ ０ ０
ＣＫ ３０ ０ ０
２．２ 假蒟提取物对斜纹夜蛾各龄期幼虫的致死中
浓度
假蒟根和茎石油醚提取物不同质量分数对斜纹
夜蛾各龄期幼虫的触杀活性测定结果见表２，根据表
２得出假蒟根和茎石油醚提取物对斜纹夜蛾各龄幼
虫的回归方程、ＬＣ５０，结果见表３。从表３可以看出，
表２ 假蒟提取物对斜纹夜蛾不同龄期幼虫的
触杀活性 ％
幼虫龄期
假蒟根石油醚提取物
质量分数
校正
死亡率
假蒟茎石油醚提取物
质量分数
校正
死亡率
三龄 ０．３０ ８０．００ ０．３５ ８６．６７
０．２５ ６０．００ ０．３０ ７３．３３
０．２０ ４０．００ ０．２５ ４６．６７
０．１５ ２３．３３ ０．２０ ３０．００
０．１０ １３．３３ ０．１５ １３．３３
四龄 ０．５０ ８６．６７ ２．００ ９３．３３
０．４５ ８３．３３ １．００ ８３．３３
０．４０ ４６．６７ ０．５０ ４６．６７
０．３５ ４０．００ ０．２５ ３０．００
０．３０ ３０．００ ０．１２５ ２０．００
五龄 ４．００ ９３．３３ ４．００ ８６．６７
２．００ ８６．６７ ２．００ ７６．６７
１．００ ４６．６７ １．００ ４６．６７
０．５０ ２６．６７ ０．５０ ３３．３３
０．２５ １３．３３ ０．２５ １３．３３
六龄 ５．００ ８６．６７ ５．００ ８０．００
２．５０ ８０．００ ２．５０ ６６．６７
１．２５ ４６．６７ １．２５ ４６．６７
０．６３ ２３．３３ ０．６３ ２３．３３
０．３０ １３．３３ ０．３０ １３．３３
９７ 第８期 刘红芳等：假蒟提取物对斜纹夜蛾的触杀活性及其有效成分的初步分离
假蒟根和茎石油醚提取物对斜纹夜蛾各龄幼虫均有
触杀活性，尤其对三、四龄幼虫效果较好，对五、六龄
幼虫的触杀效果明显降低。假蒟根石油醚提取物对
斜纹夜蛾三至六龄幼虫的ＬＣ５０分别为０．２０４ ９％、
０．３７０ ８％、０．８５３ ６％、１．２３３ １％；假蒟茎石油醚提
取物对斜纹夜蛾不同龄期幼虫的 ＬＣ５０分别为
０．２３９ ２％、０．３９７ ８％、０．９４８ ５％、１．４８６ ７％。幼虫
龄期越高，其致死中浓度越高，相对来说，假蒟根石
油醚提取物对斜纹夜蛾不同龄期幼虫的致死中浓度
比假蒟茎石油醚提取物的致死中浓度低。
表３ 假蒟提取物对斜纹夜蛾各龄期幼虫的毒力测定结果
供试样品 幼虫龄期 回归方程 ｒ ＬＣ５０／％ ９５％置信区间／％
假蒟根石油醚提取物 三龄 ｙ＝４．０３５ ０ｘ－４．３２６ ７ ０．９８０ ０ ０．２０４ ９ ０．１８０ ０～０．２３３ ０
四龄 ｙ＝７．５４４ ６ｘ－１４．３８４ ０ ０．９５４ ９ ０．３７０ ８ ０．３４５ ９～０．３９７ ５
五龄 ｙ＝２．３１１ ２ｘ＋０．５３６ ５ ０．９８４ ９ ０．８５３ ６ ０．６７０ ７～１．０８６ ３
六龄 ｙ＝１．９７３ ８ｘ＋０．８７２ ７ ０．９８５ ６ １．２３３ １ ０．９４４ ５～１．６１０ ０
假蒟茎石油醚提取物 三龄 ｙ＝６．０２６ ６ｘ－９．３３５ ９ ０．９８８ ９ ０．２３９ ２ ０．２１９ ６～０．２６０ ５
四龄 ｙ＝２．０５２ ０ｘ＋１．７１７ ４ ０．９８０ ２ ０．３９７ ８ ０．３０４ ８～０．５１９ ３
五龄 ｙ＝１．８６０ ９ｘ＋１．３２１ ０ ０．９９３ ２ ０．９４８ ５ ０．７１８ ７～１．２５１ ８
六龄 ｙ＝１．６６３ １ｘ＋１．３８７ ５ ０．９９６ ２ １．４８６ ７ １．０９０ １～２．０２７ ６
２．３ 假蒟根不同溶剂洗提物对斜纹夜蛾触杀活性
测定结果
利用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、乙醇对假蒟根乙
醇提取物依次进行分步洗提，分别得到各溶剂的洗
提物，其对斜纹夜蛾触杀活性测定结果见表４。以
石油醚的洗提率最高，为２４．７５％，其次为乙酸乙
酯、乙醇，洗提率分别为１１．７２％和７．６１％，氯仿的
洗提率最低，只有３．９９％。对洗提物进行生物活性
跟踪测试表明，石油醚洗提物对斜纹夜蛾四龄幼虫
的生物活性最高，其质量分数为１％时的触杀活性
达１００％。其他系列溶剂洗提物对斜纹夜蛾基本无
活性，说明假蒟对斜纹夜蛾的活性成分易溶于石油
醚，用石油醚洗提基本将活性物质洗提完全。所以
石油醚洗提物初步被定为进一步研究的基础材料。
表４ 假蒟根不同溶剂洗提物对斜纹夜蛾的触杀活性 ％
溶剂 洗提率 死亡率 校正死亡率
石油醚 ２４．７５ １００ １００
氯仿 ３．９９ ０ ０
乙酸乙酯 １１．７２ ３．３３ ３．３３
乙醇 ７．６１ ０ ０
为了获得假蒟根中具有杀虫活性的单体化合物，
在对洗提物活性追踪的基础上，以石油醚－氯仿为洗
脱溶剂对假蒟石油醚洗提物进行柱层析分离，同时对
所分离组分进行生物活性追踪。第１～６管为石油
醚－氯仿（５∶１）洗脱物，第７～１２管为石油醚－氯仿
（３∶１）洗脱物，第１３～１８管为石油醚－氯仿（１∶１）洗
脱物，第１９～２４管为石油醚－氯仿（１∶３）洗脱物，第
２５～３０管为石油醚－氯仿（１∶５）洗脱物。经 ＴＬＣ
检测将相同组分进行合并：１－２合并为组分Ａ，３组
分为组分Ｂ，４组分为组分Ｃ，５－６合并为组分Ｄ，
７－１１合并为组分Ｅ，１２－１７合并为组分Ｆ，１８组分
为组分Ｇ，１９组分为组分 Ｈ，２０组分为组分Ｉ，２１组
分为组分Ｊ，２２组分为组分Ｋ，２３组分为组分Ｌ，２４
组分为组分 Ｍ，２５组分为组分 Ｎ，２６组分为组分
Ｏ，２７－３０合并为组分Ｐ。将合并后各组分分别配
制成１ｍｇ／ｍＬ溶液，采用浸渍法，以斜纹夜蛾四龄
幼虫为试虫进行生物活性测定，其结果如表５所示。
从表５可以看到，在１６个组分中，假蒟根石油醚洗
提物的主要活性组分为Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ，其对斜纹夜蛾四
龄幼虫２４ｈ校正死亡率均达到１００％；其次是组分
Ｅ和组分 Ｆ，２４ｈ校正死亡率分别为５３．３３％和
３６．６７％；其他组分基本无生物活性。
表５ 假蒟提取物各组分对斜纹夜蛾的触杀活性 ％
组分 死亡率 校正死亡率
Ａ（１－２） １００ａ １００
Ｂ（３） １００ａ １００
Ｃ（４） １００ａ １００
Ｄ（５－６） １００ａ １００
Ｅ（７－１１） ５３．３３±１１．１１ｂ ５３．３３
Ｆ（１２－１７） ３６．６７±４．４４ｂ ３６．６７
Ｇ（１８） ０ｃ ０
Ｈ（１９） ６．６７±８．８９ｃ ６．６７
Ｉ（２０） ３．３３±４．４４ｃ ３．３３
Ｊ（２１） ０ｃ ０
Ｋ（２２） ３．３３±４．４４ｃ ３．３３
Ｌ（２３） ０ｃ ０
Ｍ（２４） ３．３３±４．４４ｃ ３．３３
Ｎ（２５） ０ｃ ０
Ｏ（２６） ０ｃ ０
Ｐ（２７－３０） ０ｃ ０
ＣＫ ０ｃ
注：同列不同小写英文字母表示差异达０．０５显著水平，数据方差
分析前进行反正弦平方根转换。
０８ 河南农业科学 第４３卷
３ 结论与讨论
假蒟根和茎石油醚提取物对斜纹夜蛾幼虫具有
良好的触杀活性，在质量分数为５％时，四龄幼虫经
处理后开始剧烈抽搐，无法爬行，几秒钟即可死亡，
内肛腮部破裂，并有浓状物溢出，中毒症状非常明
显。但低质量分数处理时，若试虫２ｈ内不死亡，基
本都可以复苏，且在继续饲养过程中一般能正常化
蛹。幼虫龄期越低，假蒟石油醚提取物的毒力越强，
随着幼虫龄期的增长其毒力明显降低。相对来说，
假蒟根石油醚提取物对斜纹夜蛾不同龄期幼虫的致
死中浓度比假蒟茎石油醚提取物的致死中浓度低。
同一种植物杀虫剂通常具有毒杀、拒食、抑制生长发
育等多种生物活性，本研究只测定了假蒟提取物对
斜纹夜蛾的触杀活性，其他作用方式还有待进一步
研究。单就假蒟石油醚提取物对斜纹夜蛾的触杀活
性来看，这是一种值得深入研究的杀虫植物。
目前植物源杀虫剂的研究由以往的直接利用发
展为寻找新式结构，在确定活性成分和作用机制的
基础上，研究高活性化合物的结构与活性之间的关
系，并以构效关系为基础，反复修饰先导化合物的结
构，最终实现经济、高效的仿生合成。本研究分离得
到１６个组分，发现４个高活性组分，但尚未确定其
纯度以及化学结构，且其对斜纹夜蛾的作用机制、生
物活性物质的构效关系等尚不明确，均需要更进一
步研究，为假蒟资源的有效开发利用创造条件。
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１８ 第８期 刘红芳等：假蒟提取物对斜纹夜蛾的触杀活性及其有效成分的初步分离