全 文 : 湖南农业科学(HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES) 2016年 8月
72- -植物保护·园艺园林
DOI:10.16498/j.cnki.hnnykx.2016.08.021
2016,(8):72-74,77
斜纹夜蛾 [Spodoptera litura(Fabricus)]属鳞翅
目(Lepidoptera)夜蛾科(Noctuidae),是一种暴食性、
杂食性、世界性分布的害虫,可为害多种作物 [1],对
十字花科蔬菜、水生蔬菜及甘薯、棉花、大豆、烟草
等作物的危害尤为严重 [2]。
香蕉花蓟马 [Thrips hawaiiensis(Morgan)]属缨
翅目锯尾亚目蓟马科 [3],是香蕉的主要害虫之一 [4],
在中国海南、广东、广西、云南、台湾、福建等省(区)
均有发生,且近年来在海南省香蕉产区暴发严重 [5]。
山蒟(Piper hancei Maxim)为胡椒科胡椒属植
物,有祛风除湿、活血消肿、止咳等功效 [6]。2011
年,董存柱等 [7]研究发现山蒟甲醇提取物对椰心叶
甲 [Brontispa longissima (Gestro)]的卵和幼虫有较
好的毒杀作用。2012年,董存柱等 [8]研究发现山蒟
甲醇提取物对家蝇(Musca domestica Linaeus)、白
蚊伊蚊(Aedes albopictus Skuse)和致倦库蚊(Culex
quinquefasciatus)具有强烈的杀虫活性。鉴于山蒟在
活性筛选中的杀虫活性较好,而且杀虫成分含量高,
整株可作为植物源生物农药开发利用,研究就山蒟提
取物对斜纹夜蛾、蓟马的毒杀作用进行了研究,并以
传统植物源杀虫剂鱼藤酮作为对照药剂,希望发现对
斜纹夜蛾和蓟马有较好防治效果的植物源农药。以期
为斜纹夜蛾及香蕉花蓟马防治提供新的方法。
1 材料与方法
1.1 试验材料
1.1.1 供试昆虫 斜纹夜蛾由海南大学环境与植物保
护学院化保实验室培养提供,试验时选取一日龄健康
完整的虫卵,大小一致,健康活泼的 3龄幼虫,同一
批健康的蛹和羽化不久的健康的成虫。香蕉花蓟马在
海南大学儋州校区农学院基地香蕉种植地采集,试验
时取健康活泼的若虫和成虫。
1.1.2 试验药品 准确称取用甲醇浸泡、抽滤、浓
山蒟提取物对斜纹夜蛾和香蕉花蓟马的毒性研究
马浩伟,董存柱,赵 灏
(海南大学环境与植物保护学院,海南 海口 570228)
摘 要:为了丰富防治斜纹夜蛾和香蕉花蓟马的植物源农药,研究了山蒟提取物对斜纹夜蛾 4种虫态和香蕉花蓟马 2种虫态的杀虫活性。结果
表明:山蒟提取物和鱼藤酮对斜纹夜蛾卵的 LC50值分别为 1.87、1.82 mg/mL,对 3龄幼虫的 LC50值分别为 0.48、0.96 mg/mL,对成虫的 LC50
值分别为 0.44、0.43 mg/mL。山蒟提取物和鱼藤酮对香蕉花蓟马若虫的 LC50值分别为 1.34、0.88 mg/mL,对成虫的 LC50值分别为 0.42、0.41
mg/mL,而对斜纹夜蛾蛹没有明显的作用。由此可知,山蒟提取物对斜纹夜蛾卵、3龄幼虫、成虫及香蕉花蓟马若虫、成虫的毒杀作用比较显著,
具备开发为植物源农药的潜在价值。
关键词:山蒟;斜纹夜蛾;香蕉花蓟马;毒性
中图分类号:S482.3+9 文献标识码:A 文章编号:1006-060X(2016)08-0072-03
Toxicity of Piper hancei Extract on Spodoptera litura and Thrips hawaiiensis
MA Hao-wei,DONG Cun-zhu,ZHAO Hao
(College of Environment and Plant Protection, Hainan University, Haikou 570228, PRC)
Abstract:In order to enrich the plant pesticides of controlling Spodoptera litura and thrips hawaiiensis, the insecticidal activity of piper
hancei extract on four insect states of Spodoptera litura and two insect states of thrips hawaiiensis was studied. The results showed that the
LC50 values of extract from piper hancei and rotenone on eggs of Spodoptera litura were 1.87, 1.82 mg/mL, the LC50 values of third instar
larva were 0.48, 0.96 mg/mL, the adult LC50 values were 0.44, 0.43 mg/mL. The LC50 values of extract from Piper hancei and rotenone on
nymph of Thrips hawaiiensis were 1.34, 0.88 mg/mL, the LC50 values of the adults were 0.42 and 0.41 mg/mL, respectively. There was no
signifi cant effect on pupa of Spodoptera litura. From this we can know, the Piper hancei extract has signifi cant toxic effect on eggs, third
instar larva and adult of Spodoptera litura, nymph and adult of Thrips hawaiiensis, it has the potential value of the development for the
plant pesticides.Key words: Piper hancei; Spodoptera litura; Thrips hawaiiensis; toxicity
收稿日期:2016-05-24
基金项目:国家自然科学基金项目(31360447);2015 年海南大学
研究生实践创新项目
作者简介:马浩伟(1990-),男,河南开封市人,硕士研究生,研
究方向为天然源农药。
通讯作者:董存柱
马浩伟 等:山蒟提取物对斜纹夜蛾和香蕉花蓟马的毒性研究
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缩得到山蒟提取物 200 mg,丙酮定容至 20 mg/mL,
置于 0℃冰箱保存。对照药剂鱼藤酮(纯度> 98%,
Aladdin试剂公司),准确称取 200 mg,用丙酮定容至
20 mg/mL,置于 0℃冰箱保存。这两种药剂均在实验
时梯度稀释到所需浓度。
1.2 试验方法
1.2.1 对斜纹夜蛾卵的毒杀作用 采用浸卵法 [9],取
定容好的山蒟提取物 20 mL,梯度稀释到 10、5、2.5、
1.25、0.625 mg/mL;用细毛笔将 1日龄卵挑出,并用
0.5%聚乙烯醇将卵粘到准备好的木薯叶上,每个叶
片不少于 150粒;待聚乙烯醇干燥后将叶片放入 5个
不同浓度的溶液中浸 5 s,取出置滤纸上,待丙酮挥
发后放入垫有湿滤纸的培养皿中,放入培养箱让其自
然发育;相同方法以 5个同等浓度的鱼藤酮为药物对
照,以丙酮为空白对照,每个处理重复 3次;每天清
除掉已孵化的幼虫,待不再有幼虫出现,检查未出卵
粒数。
1.2.2 对斜纹夜蛾 3龄幼虫的毒杀作用 采用浸渍
法 [10],取定容好的山蒟提取物 20 mL,梯度稀释到
10、5、2.5、1.25、0.625 mg/mL备用;将供试 3龄幼
虫分别浸渍在 5个不同的浓度药液中,10 s后取出,
自然晾干,放入培养皿,将新鲜木薯叶剪成小片放入
培养皿;每皿移入 30头浸过药的斜纹夜蛾幼虫;用
相同方法以 5个同等浓度的鱼藤酮为药效对照,以丙
酮为空白对照,每个处理重复 3次,皿上加盖;将培
养皿置于避光处饲养 12 、24 、36 h后记录死亡个数。
1.2.3 对斜纹夜蛾蛹的毒杀作用 采用浸渍法 [11],取
定容好的山蒟提取物 20 mL,梯度稀释到 10、5、2.5、
1.25、0.625 mg/mL备用,将同一批斜纹夜蛾蛹放入 5
个不同浓度药液中浸泡 10 s后取出,自然晾干;后将
浸过同浓度药的蛹 30个放入塑料盒中,塑料盒底部
有滤纸片保湿;相同方法以 5个同等浓度的鱼藤酮为
药物对照,以丙酮为空白对照,每个处理重复 3次,
每天清除掉已羽化的成虫,待不再有成虫出现后,检
查未羽化个数。
1.2.4 对斜纹夜蛾成虫的毒杀作用 采用点滴法 [12],
取定容好山蒟提取物 20 mL,梯度稀释到 10、5、2.5、
1.25、0.625 mg/mL备用;成虫经适量的乙醚麻醉后,
用 1.0 μL微量进样器在成虫胸部背板上点 1.0 μL不同
浓度药液,然后将 30头点过药的成虫放入养虫塑料
盒内,养虫盒底部有干燥滤纸片,再放入有蜂蜜水的
棉团供成虫吸食,自然培养;用相同方法以 5个同等
浓度的鱼藤酮为药物对照,以丙酮为空白对照,每个
处理重复 3次,分别在 12、24和 36 h后记录成虫死
亡数。
1.2.5 对香蕉花蓟马若虫和成虫的毒杀作用 采用滤
纸药膜法 [13],取定容好山蒟提取物 20 mL;梯度稀释
到 2.5、2.0、1.5、1.0、0.5 mg/mL备用;在直径 6 cm
的玻璃培养皿底部,铺一张同样直径的滤纸,用移
液枪吸取 l mL药液均匀滴于滤纸上,待丙酮挥发后,
用毛笔将香蕉花蓟马若虫、成虫(适量乙醚麻醉)各
30头移入培养皿中,待虫身沾满药液后放入长 3 cm
的香蕉花苞片(香蕉花蓟马饲料)上,然后用封口膜
将培养皿封口,置于实验室内;24 h后检查各处理香
蕉花蓟马若虫、成虫的死亡数和存活数(以毛笔尖触
动虫体,不动者为死亡);每处理重复 5次,以丙酮
为空白对照,以鱼藤酮为药物对照。
1.3 数据处理
死亡率(%)=(死亡虫数 /总虫数)×100 (1)
校正死亡率(%)= [(处理死亡率-对照死亡率) /
(1-对照死亡率)] ×100 (2)
利用 Excel软件进行数据处理,计算死亡率 [14],
求出毒力方程、相关系数、LC50和置信区间。
2 结果与分析
2.1 对斜纹夜蛾卵的毒杀作用
由表 1可知,山蒟提取物对斜纹夜蛾卵的毒杀活
性与鱼藤酮的比较接近,LC50 分别为 1.87、1.82 mg/
mL,鱼藤酮的活性稍好于山蒟。这表明山蒟提取物
对斜纹夜蛾卵有较好的毒杀作用。
表 1 试验药剂对斜纹夜蛾卵的毒杀作用
药 剂 回归方程 相关系数 致死中浓度(LC50,mg/mL) 95%置信区间
山蒟提取物 y=2.283 9 x+4.354 5 0.989 8 1.87 1.69~2.05
鱼藤酮 y=1.900 5 x+4.507 8 0.990 3 1.82 1.61~2.05
2.2 对斜纹夜蛾 3龄幼虫的毒杀作用
由表 2可知,山蒟提取物对斜纹夜蛾 3龄幼虫的
毒杀作用与鱼藤酮接近。作用 12、24 h后,山蒟提取
物的毒杀效果略好于鱼藤酮;但是作用 36 h后,鱼藤
酮的毒杀效果略好于山蒟提取物;山蒟提取物的 LC50
为 0.45~0.66 mg/mL,而鱼藤酮的 LC50 为 0.44~0.69
mg/mL。这说明山蒟提取物对斜纹夜蛾 3龄幼虫有非
常好毒杀活性并且活性接近传统植物源农药鱼藤酮。
2.3 对斜纹夜蛾蛹的毒杀作用
试验结果表明,山蒟提取物对斜纹夜蛾蛹基本没
有毒杀活性。在最高浓度 10 mg/mL时,校正未羽化
率为 1.11%;当供试浓度为 2.5 mg/mL及以下时,校
正未羽化率为 0%。山蒟提取物对斜纹夜蛾蛹的毒杀
效果与空白对照差异不明显。对比鱼藤酮对斜纹夜蛾
蛹的毒杀作用,10、5、2.5、1.25、0.625 mg/mL处理
的校正未羽化率依次为 12.22%、8.89%、8.89 %、5.56%、
湖南农业科学(HUNAN AGRICULTURAL SCIENCES) 2016年 8月
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2.22%,和空白对照的差异也不明显。这说明山蒟提
取物和鱼藤酮对斜纹夜蛾蛹的毒杀活性都很弱,但鱼
藤酮对斜纹夜蛾蛹的毒杀活性要比山蒟提取物略好。
2.4 对斜纹夜蛾成虫的毒杀作用
由表 3可知,山蒟提取物对斜纹夜蛾成虫有非常
好的毒杀活性,并且活性接近传统植物源农药鱼藤酮,
山蒟提取物的 LC50为 0.96~1.19 mg/mL,而鱼藤酮的
LC50为 0.43~0.57 mg/mL。总体来看,鱼藤酮的杀成
虫活性要比山蒟提取物的稍好。
2.5 对蓟马若虫和成虫的毒杀作用
由表 4可知,山蒟提取物对蓟马若虫和成虫均
有一定的毒杀作用,且其活性与鱼藤酮的差别不大;
其中,山蒟提取物对蓟马成虫的 LC50为 0.88 mg/mL,
对蓟马若虫的 LC50为 1.34 mg/mL,表明山蒟提取物
对蓟马成虫的毒杀活性大于对蓟马若虫的活性;这一
点与鱼藤酮的表现也一致。
表 2 试验药剂对斜纹夜蛾 3龄幼虫的毒杀作用
药 剂 时 间(h) 回归方程 相关系数 LC50(mg/mL) 95%置信区间
山蒟提取物
12 y=2.435 5 x+4.372 6 0.978 9 0.66 0.33~1.29
24 y=1.702 0 x+5.281 7 0.991 0 0.45 0.20~1.04
36 y=2.346 2 x+4.917 8 0.986 0 0.48 0.23~1.00
鱼藤酮
12 y=3.592 0 x+3.676 6 0.966 5 0.69 0.39~1.20
24 y=3.167 8 x+4.100 8 0.971 4 0.49 0.23~1.04
36 y=2.918 3 x+4.350 3 0.976 8 0.44 0.20~0.99
表 3 试验药剂对斜纹夜蛾成虫的毒杀作用
药 剂 时 间(h) 回归方程 相关系数 LC50(mg/mL) 95%置信区间
山蒟提取物
12 y=0.689 1 x+4.947 3 0.957 8 1.19 0.50~2.83
24 y=0.737 4 x+5.008 1 0.961 6 0.97 0.39~2.41
36 y=0.815 9 x+5.015 0 0.969 5 0.96 0.42~2.20
鱼藤酮
12 y=0.923 3 x+5.223 3 0.915 0 0.57 0.21~1.58
24 y=0.878 7 x+5.301 4 0.935 3 0.45 0.41~1.50
36 y=0.889 2 x+5.326 8 0.916 6 0.43 0.13~1.46
表 4 试验药剂对蓟马若虫和成虫的毒杀作用
虫 态 药 剂 回归方程 相关系数 LC50(mg/mL) 95%置信区间
若 虫
山蒟提取物 y=2.809 3 x+4.645 1 0.918 6 1.34 1.12~1.60
鱼藤酮 y=5.992 8 x+7.282 4 0.985 4 0.42 0.38~0.46
成 虫 山蒟提取物 y=2.983 8 x+5.167 0 0.971 3 0.88 0.71~1.09鱼藤酮 y=6.310 1 x+7.444 7 0.984 4 0.41 0.37~0.45
3 结论与讨论
山蒟提取物对斜纹夜蛾卵、幼虫、成虫及香蕉花
蓟马的若虫、成虫都有较好的毒杀作用,其 LC50值
均小于 2 mg/mL,而对斜纹夜蛾蛹则没有明显的效果;
其毒杀作用与对照药剂鱼藤酮接近,有的甚至优于鱼
藤酮的效果,如鱼藤酮对斜纹夜蛾幼虫的 LC50值为
0.96 mg/mL,而山蒟提取物对斜纹夜蛾幼虫的 LC50值
则达到了 0.48 mg/mL,效果明显好于鱼藤酮。考虑到
山蒟是粗提取,鱼藤酮是纯净物,说明山蒟中含有的
某种或几种化学物质对斜纹夜蛾和香蕉花蓟马的毒杀
作用优于鱼藤酮,山蒟的生物活性应该高于鱼藤酮,
具有开发为新型高效、低毒植物源农药的潜在价值。
试验中,山蒟提取物对斜纹夜蛾和香蕉花蓟马的
生物活性测定尚属初探,为今后防治斜纹夜蛾和香蕉
花蓟马的植物源杀虫剂的研制提供了一定的指导。而
对于山蒟中活性成分的分离、纯化、结构鉴定及作用
机理等方面的研究还有待进一步深入。
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伍绍龙 等:3种鳞翅目化学药剂对烟田天敌昆虫种群的影响
77- -植物保护 ·园艺园林
虫之一,其幼虫的暴食性严重影响烟叶的产质量 [4-5]。
甲维盐、氯虫苯甲酰胺和高效氯氟氰菊酯是目前烟草
上使用较为广泛的鳞翅目控害药剂,国内有较多的相
关报道 [6-9]。
研究发现,甲维盐、氯虫苯甲酰胺和高效氯氟氰
菊酯对烟青虫均有着较好的控制作用,这与陈庭慧等 [10]
研究发现甲维盐和高效氟氯氰菊酯对烟青虫的防治效
果没有显著性差异。但是,甲维盐和氯虫苯甲酰胺对
斜纹夜蛾的防控效果要显著优于高效氯氟氰菊酯,这
可能与最近几年烟农使用高效氯氟氰菊酯较多,斜
纹夜蛾对其抗性增强有关。另外,3种化学药剂对田
间天敌昆虫均有着一定的影响,但以高效氯氟氰菊酯
的影响最大,施药以后天敌昆虫种群呈现负增长,而
甲维盐和氯虫苯甲酰胺对天敌昆虫虽然也有一定的影
响,但天敌昆虫整体种群数量还在增长,这可能是因
为高效氯氟氰菊酯广谱杀虫性更强。因此,建议烟农
在防治烟青虫和斜纹夜蛾时,更多地选择对天敌昆虫
影响较小的甲维盐和氯虫苯甲酰胺,既可很好的防控
烟青虫和斜纹夜蛾,也能更好地保护农田生态环境,
维护生态平衡。
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