全 文 ：’ 从表名表9 中的数据可以看出 , · 对于同一品种枯相同树龄 、 同一海拔高度的大毛叶
漆来说 , 其漆酚异构体的含量随着漆树生长坡向的不同而变化 。 在北坡生长的漆树扩兰
姗漆醉的含量最高 , 但是和其它生漆质量指标综合考虑 , 该品种生长在东南向似乎更合
适一些 。
一时子大吐袍这个品种来说 , 在南坡生长的漆树 , 单烯和三烯漆姗的含量都很高 。 综
合考虑 , 该品种生长在南坡比较适宜 。 · ; 、
该上 , 我们利用气相色潜法对生漆中漆酚异构体的含量与漆树生长条件的关系进行
了初步的探讨 。 从中发现了一些规律 。 一 遗憾的是由于漆样品种采集的不够全面 , 这奥只
是对个别品种的生长条件与漆酚异构体相对含量的关系进行了比较详细的研究。 `尽管如
此 , ’ 本文对于漆农发展漆树资源来说 , 仍有其重要的参考价值 。
’ 参 考 文 献
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漆树与两种野漆树之 一间过氧化物酶同工酶
及其活性的比较研究
、李美荣; r ·
l 户二
(福建林学院
何友钊
· 南 平 )
(
.
_ 、 . 万 一 ` ) ’
· 、
{
飞 ’ 漆树 ( R . ” 附诚 f枷 ) 早在 `多年前就用于生产生漆 , 是我国分布最广的 经济林树
种乏昌 泌 , 。 野漆 ’ (R . o c e故姚。 , ) 和 木蜡 树 ( R . sy 加。 “ 。 )( 在 福 建分别俗称 “ 福清
漆 ”和 “黄毛漆” ) 的树液中虽然都含有漆汁 , 但产漆量低且漆质差 , 都处于野生 状 态 。
漆树与这两种野漆树之间在形态上有相同之处 , 在苗期尤难辨别 。 进年来育苗和引种过
程中曾造成混杂 , 引起严重损失 ( , ’ ` ’ ) 。用伺工酶谱来鉴别漆属植物国内外尚未见报道 。
本文报道上述三个漆属树动之何过氧化物酶同工酶酶谱及其活性的差异 , 并讨论了以该
酶为 “ 生化指标 ” 进行漆树苗期鉴定以及利用酶的 “ 互补” 原理杂交育种 、 培育新的漆
树杂种的可能性 。
一 、 材料与方法
(一 ) 植物材料
漆树 ( “ 浦城小木 ” ) 、 野漆 ( “ 福清漆 ” ) 和木蜡树 ( “ 黄毛漆 ” ) 样品均采自
一苯否涌城县漆树`而韶种园方 。 在 4 一 6 年生健康植株剪取新展全的成熟叶片 , 置冰壶中
以碎冰保存 , 用于酶的抽提 。
(二 ) 方法 ’
一 { ’ 1 ,粗酶抽提 称取去除中脉的叶片用燕馏水洗净 , 滤纸吸干后在预冷的研钵中加入
-
. . . . . . . . . . . . . . . 肋 ,明.l 旧川~ ~
, 倍于鲜重的预冷 0 . IM T r is 洲 Hcl 抽提缓冲液 (P H S , 0) 及少量石英砂 , 在冰浴中 仔
细研膺。 . 匀浆在 80 p型医用离心机中如训 q转/分离心幼分钟 , 轻轻倾出上层清液置碎 冰
中保存 , 然后用 L G功一 .2f 4型离心机 I Q , 0叩 耳。再离心 20 分钟 , 上清液用于电泳和话、性
测定 。
2
` 电泳 参照呆少伯 “` ’ 和莽克强筹 `人` ’ , 介绍的方法进行垂真平板聚丙烯疏胺 凝
胶电泳 。 分离胶 7 . 5% 、 浓缩胶 4 . 5% 、 采用 T r is 一甘氨酸系 统 、 ( P H S ` 3 ) , 进 样 2 0 微
升 。 · 冰箱中 (约 5 ℃ ) 稳流 (王6贝人 ) 电泳约 3 小时 , ).摸酚兰指示前沿 。 抗坏 血破—联苯胺染色 , 谱带现出后在流水中冲洗 , 然后描图和照相记录 。 , 1 .
3
. 酶活性测定 用愈创木酚法 “ ’ `进行 : 取30 微升适当稀释的酶液加入反应混合液
(0
.
05 M磷酸缓冲液 ( P H 7 .0 ) 、 · 玉%愈创木 .酚 和 。 · 3%过氧化氢三者体积比 为 8 , 1
, 1 )
。 比色杯 2 c m , 4 7 0n m处准时读取 1分钟乡诊密度值 。 酶活性以每分钟 0 . D . 4 70n m
下降 0 . 0 01 为一个单位 。 _
4
.蛋白质测定 按李琳和焦新之 e() 介绍的方法用考马斯亮益法进行 。
上述所有步骤作 2 ~ 4 次重复。 一
二 、 结果
二
共巴
遨匆左
舞
三
’ 图 1 浦城小木 ( P ) ’ 、 福清漆 ( F )
和黄毛漆 ( H ) 之闻叶片可溶性过氧化物酶
同工酶谱比较 , 注意酶带的迁移率 (R f值 )
和宽度 (活性大的酶带染色深 , 酶带宽 ) 。
三个种之间叶片可溶性过氧化物酶同工酶
惫带数及其迁移率 . 成划直) ,都表现出显著的差
异 (图 1 ) 。 图 1 显示 “ 黄毛漆 ” ( H ) 条带
一 `数减季甫城如色睐而宽的高活性酶带最多 , 漆
树 ( P ) 的酶谱可明显分快慢两区 : 活性大的
一带在快区 ( R f > 。 . 5 ) , 活性小的 8 条带则
位于慢区 ( R f < 0 . 5 ) 。 相反地 , 两种野漆树的
最高活性酶带都同样地位于慢区 ( R f = 。 . 3。 ) 。
三个种之间叶片可溶性过氧化物酶活性见
表 1 。 表 、 1显示这三个种之间过氧化物酶比活
性差异很显著。一 “ 黄毛漆 ” 和 “ 福清漆” 过氧
化物酶线活分别是 “ 浦城 小本” 的 3 · 2 倍和
功 . 0倍 。 , ’ ;
表 1 漆树与两种野漆树叶片可洛性过叔化物醉活性
植 物 过氧化物酶总活力(单位 ) 总可德性蛋白含量(皿9 13 0卜l )
蒲 城 小 木
{漏 ,燕 , 、
} :.3
}
3 5
·
0
!
10
·
7
漆清毛福黄
三 、 讨论
过氧化物酶 ( E C . 1 . 1 1 . 1 . 7) 是一类基 质 较为广泛的含铁氧化还原酶 。 虽然 有 许
多实验证明这类酶参与多种代谢过程 (特别是生长素 (I 八 ^ 》 的氧化和木质素合成的最
`
.
、君 .
后几步反应 ) , 但其生理功能至今尚不清楚 “ . ’ 2 ` ” . ’ 吕` ) 。 由于过氧化物酶在高 等 植
物中普遍存在 , 而且有着多种分子形式 , 这类酶被广泛地用于植物分类方面 。 《 ’ . ’ 名名 )众
所周知 , 高等植物中同工酶主要是等位基因表达的产物 , 而等位基因的存在及其表达受
进化系谱的制约 。 人们可以通过精细分析同工酶从分子水平上了解植物的亲缘 关 系 (’ ’
“ ) 。 目前 , 过氧化物酶同工酶已作为分类的一个 “生化指标 ” 用于植物科 (1 ` ) 、 属。 (1 3 ’
: 。 ) 和种 佃 ’ ` e ’ “ 》的分类研究 , 还用于鉴定杂种 l( ’ , ’ 》方面 。 本实验结果表明漆树与野
漆树之间遗传基础差异很大 , 没有一个过载化物酶位点是同样活化的 。 相比之下 , 两种
野漆树之间有两个过氧化物酶位点总是活化的 (尽管活化程度不同 ) 。 这说明两种野漆
树之间过氧化物酶表达方面的差异比 一它们与漆树之间的差异要小 。 表 1 中所示的比活性
差异与酶谱差异一致 。 人们有可能通过电泳或比色分析过氧化物酶进行苗期鉴定 。
_“ 浦城小木 ” , 、 r “ 福清漆” 和 “ 黄毛漆” 都是漆树科漆树属植物 。 “ 浦城小木 ” 是
长期人工栽培的漆树品种 , 另外两种都是野生的。 “ 福清漆” 在闽东南沿海各县以及广
东海陆丰一带都有分布 , “ 黄毛漆 ” 在闽西北山地很常见 。 这三种植物都能分泌漆汁 ,
引起皮肤过敏 。 许多杂交试验表明 , 杂种出现 “ 互朴酶谱 ” 或带有新的 “杂种酶” 使得
杂种在遗传本质上成为新的类型 (4 ’ “ ) , 有可能兼有两亲本的性状或出现更优良的性状 。
最近徐纬英和件永昌 (l 98 4 ) “ . 》报道的杨树种间杂种 “ 群众杨” 和 “ 合作杨 , 便是成
功的例证之一 。 目前漆树因立地要求较高 , 栽培区域受到很大限制 (如福建生漆只限于
浦城 、 建贩的少数几个大队 , 而野漆树几乎遍布全省 。 因此 , 将漆树与这两种野漆树分
别杂交 , 育出适应性广 、 品质优良的杂种存在可能性 。
参 考 文 献
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H a l im a n d H
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D
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L o e k s l e y , J
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C
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5
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P e r k i n l
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王振升译自 P o l y m , S e i , T e e h n o l , 1 7 , 2 2 5、 2 4 8 ( 1 9 8 3 )
一 8 .