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中药材续随子病害的调查与室内药剂毒力测定



全 文 : [收稿日期]  2008-11-12;2008-12-04修回
 [作者简介]  高丽丽(1983-),女 ,在读硕士 ,研究方向:农药生物学。
 *通讯作者:黄荣茂 ,硕士生导师,从事农药毒理学及农药残留分析研究。 E-m ail:huangw ei1007@sina.com
[ 文章编号] 1001-3601(2009)02-0078-0043-02
中药材续随子病害的调查与室内药剂毒力测定
高丽丽1 , 胡德禹1 , 龚德勇3 , 金义兰2 , 黄荣茂1*
(1.贵州大学 精细化工研究开发中心 , 教育部绿色农药与生物工程重点实验室 , 贵州 贵阳 550025;2.贵州大学
农学院 , 贵州 贵阳 550025;3.贵州省亚热带作物研究所 , 贵州 兴义 562400)
  [ 摘 要] 对贵州省中药材续随子病害进行了调查和病原鉴定。结果表明:续随子立枯病病原由镰刀菌引起。对其选用
了 4 种杀菌剂进行室内活性测定 , 其中 , 3%广枯灵 AS 对续随子立枯病菌丝生长的抑制活性最强 , 500μg/ mL 时抑制率为
96%, EC50值为 20.5μg/m L。[ 关键词] 续随子;立枯病;抑制率;中药材[ 中图分类号] S567.9 [ 文献标识码] A
Diseases Investigation of Euphorbia lathyris and Indoor Toxicity Tests
GAO Li-li1 , HU De-yu1 , GONG De-yong3 , JIN Yi-lan2 , HUANG Rong-mao1*
(1.Center For Research and Development o f Fine Chemicals of Guizhou University , Key Laboratory of Green Pesticide and
Agricultural Bioengineering , Ministry of Education , Gui yang , Guizhou 550025;2.Agricultural College of Guizhou
University , Guiyang , Guizhou 550025;3.GuizhouSubtro pical Crop Institute , Xingyi , Guizhou 562400 , China)
  Abstract:Disease s inve stigation and the pathogen identifica tion of Euphorbia lathy ris L.we re carried out in Guizhou.
The results show that the seedling blight caused by Fusarium spp.w as the main fungal disease of E.lathy ris.Four fung icides
were applied to test their pathogenicity indoo r.I t is found that the mycelia g row th of F usarium spp.is str ongly inhibited by
3% Guangkuling AS w ith inhibition ra te o f 96% at 500μg/ mL concentr ation , and the EC50 value is 20.5μg/ mL.
Key words:Euphorbia lathy ris L.;seedling blight;inhibition ra te;Chinese medicinal materials
  续随子(Euphorbia lathyris L.)属大戟科
(Euphorbiaceae)2年生草本植物 ,别名千金子(《开
宝本草》 ,江苏)、小巴豆(四川)、菩萨豆(《日华子本
草》)、拒科子(本草纪言)、千两金(《日华子本草》)、
打鼓子(《全国中草药汇编》)、一把伞 、看园老 、滩板
救(湖南)、拒冬实 、降龙草(陕西)[ 1-2] ,在全国大部分
地区均有分布 ,主产于河北 、河南 、浙江和贵州等地 。
续随子有逐水消肿 、破癥杀虫的功效 ,临床用于治水
肿胀满 、痰饮[ 3] 、宿滞 、症瘕积聚[ 4] 、妇女经闭 、疥癣
疮毒 、蛇咬 、疣赘 、抗肿瘤等作用 ,是一种重要的中药
材。近年来 ,随着续随子在贵州不同生态区人工种
植面积的不断增加 ,病虫害发生及危害有逐年加重
的趋势[ 5] 。调查发现 ,续随子立枯病发病相当普遍 ,
特别在高温高湿季节的环境条件下更容易发病 ,且
发病持续期长 ,每年 4-11月均可发病 ,一般病株率
10%~ 15%,严重的高达 30%~ 40%,个别地块植
株成片枯死 ,病原菌残存在土壤中 ,系土传病害。本
课题组重点对黔西南州的兴义和望谟 ,毕节地区的
赫章县河镇乡海雀 、以则 、舍虎 ,贵阳的清镇市麦格
乡等地的续随子病害发生情况进行了调查 ,并对病
原菌进行了分离鉴定及室内药剂筛选试验。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 续随子病株样 采自黔西南州兴义和望
谟 ,毕节地区赫章县河镇乡和贵阳的清镇市麦格乡
小冲等区域中药材基地 。
1.1.2 其他 PDA培养基 ,显微镜 ,培养箱 ,布氏
漏斗等 。
1.1.3 供试药剂 70%代森锰锌 WP ,河北辛集
市化工三厂生产;70%甲基硫菌灵WP ,日本曹达株
式会社生产;3%广枯灵 AS ,贵州大学科技产业有
限公司生产;50%多菌灵 WP ,湖南省东永农药厂生
产 。
1.2 调查方法
对基地续随子植株采用定点定行逐株调查 ,从
续随子苗期开始 ,每 5 d调查 1 次 ,每块基地分南 、
中 、北 3个点 ,每点调查 20株 ,共 60株 ,分基地记载
始病期 、发病特点 、病株数 ,计算病株率等[ 6] 。
病株率/ %=发病株数/调查总株数×100
1.3 病害症状及鉴定试验
1.3.1 标本采集 分别对上述中药材基地续随子
病株的发生特点及危害症状进行调查 、记录并采集
新鲜病株带回室内进行分离鉴定 。
1.3.2 病原菌分离培养 取新鲜病组织 ,在显微
镜下观察确认病原菌后进行病菌的分离培养。首先
将病组织用清水冲洗净后 ,再用蒸馏水清洗 3次 ,接
着在 70%的酒精中浸泡 2 ~ 3 s ,最后用 0.1%的升
汞灭菌 1 ~ 2min 。取出置于 PDA 培养基上 ,放入
20 ~ 25℃培养箱中培养 ,待长出菌丝产生分生孢子
后镜检病菌形态特征[ 6-7] ,再继续转接培养。
1.3.3 致病性测定 用分离纯化的病菌制作成悬
 贵州农业科学 2009 , 37(2):43 ~ 44 Guizhou Ag ricultural Science s
浮液 ,分别接种在室内盆栽的续随子健康植株上 ,以
不接病菌为对照。接菌后定温保湿 ,定时观察记录
发病情况 ,镜检病菌形态特征 ,与事先分离纯化的病
菌比较 ,确认其致病性[ 6] ,进行再分离培养备用 。
1.4 室内药剂筛选试验
将已培养好的病原菌平板打成直径为 5mm 的
菌饼 ,然后移到含有供试药剂的 PDA 培养基平板
上。4种供试药剂各设 5 个浓度梯度(25μg/mL ,
50μg/mL , 100μg/mL , 200μg/mL , 500μg/mL),以
不加药剂为对照 ,共 21个处理 ,每个处理 3次重复 ,
待对照菌落直径约为平皿直径的 2/3时 ,测量菌落
直径 ,计算抑菌率 ,计算公式[ 6] 为:
抑菌率/ %={[(对照菌落直径-5)-(处理菌
落直径-5)] /(对照菌落直径-5)}×100
2 结果与分析
2.1 续随子立枯病症状及病原菌
2.1.1 症状 调查发现 ,立枯病主要危害续随子
苗期 ,发病初期可见个别幼苗发病(即发病中心),病
株茎秆基部与地接触部位首先出现椭圆形暗褐色病
斑 ,病斑逐渐扩大出现水浸状 ,往上干缩变细 ,中间
相距 5 ~ 10cm ,地上部分因失水而枯死 ,称为续随
子立枯病 。在高温高湿的环境条件下病害迅速扩
展 ,病部常出现白色蛛丝网状霉 ,发病后期在病株基
部和土壤中有时出现浅褐色至深褐色的菌核(图
1),常引起苗床的苗连片枯死 ,以致无苗移栽 。
2.1.2 病原菌 经鉴定 ,续随子立枯病病原菌为
镰刀菌(Fusarium spp.),属半知菌类镰刀菌属[ 8] 。
分生孢子梗无色 ,无隔膜 , 产生 2 种类型孢子(图
2)。大型分生孢子镰刀形 ,顶端细胞较短 , 3 ~ 5隔 ,
基部有突起足胞;小型分生孢子多 ,椭圆形或短圆柱
形 ,较宽 ,无色 ,单胞[ 7] 。
图 1 续随子病株 图 2 续随子病株分生孢子
2.2 不同药剂对续随子立枯病菌丝生长的抑制作用
从表 1看出 ,3%广枯灵 AS 对续随子立枯病菌
丝生长抑制作用最强 , 在 50μg/mL 和 500μg/mL
时抑制率分别为 71%和 96%;其次为 70%甲基硫
菌灵WP ,在 50μg/mL 和 500μg/mL 时抑制率分别
为 65%和 92%;50%多菌灵 WP 在 50μg/mL 和
500μg/mL 时抑制率分别为 52%和 85%;70%代森
锰锌WP 抑制效果较差 ,在 50μg/mL 和500μg/mL
时抑制率分别为 44%和 82%。
2.3 不同药剂对续随子立枯病菌的毒力
从表 2看出 ,3%广枯灵 AS 对续随子立枯病菌
的毒力最高 ,其 EC50值为 20.5μg/mL;其次为 70%
表 1 药剂对续随子立枯病(Fusar ium spp.)菌丝生长的抑制作用
药剂 浓度/(μg/ mL) 菌落直径/ cm 抑制率/ %
70%代森锰锌 WP 25 5.00 25
50 3.86 44
100 3.14 56
200 2.42 68
500 1.58 82
70%甲基硫菌灵 WP 25 3.50 50
50 2.60 65
100 1.82 78
200 1.40 85
500 0.98 92
50%多菌灵 WP 25 4.10 40
50 3.38 52
100 2.90 60
200 2.30 70
500 1.40 85
3%广枯灵 AS 25 3.32 53
50 2.24 71
100 1.70 80
200 1.10 90
500 0.74 96
CK 0 6.50
表 2 药剂对续随子立枯病(Fusar ium spp.)的毒力测定
供试药剂 毒力回归方程式 EC50/(μg/mL)
EC90/
(μg/mL)相关系数
70%代森锰锌 WP y=1.184x+2.750 79.5 961.2 0.994
70%甲基硫菌灵 WP y=1.077x+3.545 22.4 347.5 0.996
50%多菌灵 WP y=0.961x+3.382 48.3 1040.6 0.994
3%广枯灵 AS y=1.273x+3.329 20.5 208.6 0.998
 注:x表示浓度对数 , y表示抑制机率值。
甲基硫菌灵WP ,其 EC50值为 22.4μg/mL;50%多
菌灵WP 的 EC50值为 48.3μg/mL ;70%代森锰锌
WP 对续随子立枯病菌的毒力最低 ,为79.5μg/mL。
3 结论与讨论
通过对续随子病样症状观察 、病原菌的分离培
养和致病性测定等结果表明:立枯病为续随子的主
要真菌病害 ,其病原菌是镰刀菌(Fusarium spp.)。
室内药剂筛选试验结果表明:3%广枯灵 AS 抑制活
性最强 , 500μg/mL 时抑制率为 96%, EC50 值为
20.5μg/mL。
下一步将在病区进行 3%广枯灵 AS 对续随子
立枯病的防治试验[ 9-10] ,为续随子的病害防治提供
科学依据。
[ 参 考 文 献]
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[ 4 ] 江苏新医学院.中国大辞典[ M ] .上海:上海人民出版社 ,
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(责任编辑:杨 林)
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