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壮药假茼蒿生药学研究



全 文 :收稿日期:2015-04-09; 修订日期:2015-08-03
基金项目:广西壮瑶药重点实验室项目(桂科基字【2014】32 号);
壮瑶药协同创新中心项目(桂教科研[2013]20 号);
广西重点学科(壮药学)项目(桂教科研〔2013〕16 号);
《广西壮药质量标准(第三卷)》质量评价与标准研究项目
(MZY 2013016 )
作者简介:曾祥燕(1991-),女(侗族),广西柳州人,硕士研究生,主要从事
中药及民族药品种鉴别与开发利用工作.
* 通讯作者简介:黎 理(1985-),女(汉族),广西玉林人,广西中医药大
学教师,硕士学位,主要从事中药及民族药品种鉴定与开发利用工作.
壮药假茼蒿生药学研究
曾祥燕,颜萍花,蔡 毅,黎 理*
(广西中医药大学,广西 南宁 530001)
摘要:目的 对假茼蒿进行生药学研究,为制订其质量标准提供实验依据。方法 采用四大经典(原植物形态、药材性状
特征、显微特点、理化特征)鉴别法对假茼蒿进行鉴别。结果 假茼蒿四大鉴别特征明显,专属性强。结论 以上特征可作
为鉴别假茼蒿的参考依据。
关键词:假茼蒿; 生药学
DOI标识:doi:10. 3969 / j. issn. 1008-0805. 2016. 01. 042
中图分类号:R282. 5 文献标识码:A 文章编号:1008-0805(2016)01-0115-03
假茼蒿,俗名野茼蒿、冬风菜、满天飞,来源于菊科植物革命
菜 Crassocephalum crepidioides (Benth.)S. Moore 的全草[1]。是
广西地区常用的一味壮药[2],其性辛、平。具有通利水道、消肿、
清热解毒、行气健脾功效,壮医用于治疗水肿、淋症、伤风发热、咽
喉疼痛、消化不良、脾虚浮肿、乳腺炎等,主要分布于广西灵川、博
白、南宁、灵山、罗城、乐业等地[3],具有一定是药用及食用价值。
目前相关研究较少,本文拟进行生药学鉴别研究,为制订其质量
标准提供依据。
1 材料及仪器
1. 1 材料 假茼蒿实验药材分别采于广西区内不同产地,共 10
个批次,经广西中医药大学中药鉴定教研室蔡毅教授鉴定其为菊
科植物野茼蒿 Crassocephalum crepidioides (Benth.)S. Moore的全
草。药材基源详见表 1。绿原酸对照品(供含量测定用,中国药
品生物制品检定所,批号:110753 - 200413)。实验所用试剂均为
分析纯。
表 1 广西区内不同批次假茼蒿药材
编号 采集时间 产地 药用部位 样品状态
JTH -1 2013-11-02 南宁四塘 全株 药材
JTH -2 2013-10-31 武鸣腾翔村 全株 药材
JTH -3 2013-11-04 扶绥县昌平乡中华村周府山 全株 药材
JTH -4 2013-11-12 来宾金秀长垌乡大进村 全株 药材
JTH -5 2013-11-16 来宾兴宾区凤凰镇牛角村 全株 药材
JTH -6 2013-11-08 上思县 全株 药材
JTH -7 2013-11-30 玉林兴业石南镇七团村塘格晒谷岭背 全株 药材
JTH -8 2013-12-20 桂平市江口镇长江村 全株 药材
JTH -9 2013-12-23 南宁高峰 全株 药材
JTH -10 2014-04-13 南宁四塘 全株 药材
JTH -1 为对照药材
1. 2 仪器 Leica Miccrosystems(德国莱卡仪器公司,型号:
DFC500);Leica 光学显微镜 (德国莱卡仪器公司,型号:
DM2500);自动轮转切片机(德国莱卡仪器公司,RM2145);上皿
电子天平(上海精科天平,型号:FA1104);超声波清洗器(昆山市
超声仪器有限公司,型号:KQ5200B);薄层层析硅胶 G(化学纯,
青岛海洋化工公司)。
2 方法
采用原植物鉴别、性状鉴别、显微鉴别和理化鉴别进行实验
研究。
3 结果
3. 1 植物形态 1 年生草本。茎圆柱形,少分枝或不分枝,光滑
无毛,有条纹。叶互生,卵状椭圆形或矩圆状椭圆形,边缘有不规
则的齿缺或浅裂,两面被短而疏的毛,叶面中脉紫红色,叶背中脉
绿色。头状花组成圆锥花序,红褐色,生于枝顶;花全为管状,两
性。瘦果细圆柱形,紫红色。全株有茼蒿菜气味[4]。见图 1。
图 1 假茼蒿植物形态
3. 2 性状鉴别 本品全草多弯曲,灰绿色,全株常附着有白色冠
毛。主根较明显,上部多分枝,黄棕色;须根纤细。茎扁圆柱形,
少分枝,长 20 ~ 120cm;灰绿色或黄绿色;具纵直条纹,光滑无毛;
质脆,易折断,断面黄白色。叶互生,多皱缩,易碎;完整叶片展开
呈卵状椭圆形或矩圆状椭圆形,长 6 ~ 10cm,宽 2. 5 ~ 4. 0cm,先
端尖,基部狭,边缘有不规则的齿缺或浅裂,两面被短疏毛。头状
花序组成圆锥花序,生于枝顶。瘦果细圆柱形,紫黑色,具线条,
白色冠毛易脱落。全株有茼蒿菜气味。见图 2。
图 2 假茼蒿药材图
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 27 NO. 1 时珍国医国药 2015 年第 27 卷第 1 期
3. 3 显微鉴别
3. 3. 1 根横切面 类圆形,多呈现初生构造特征。表皮细胞残
存,微栓化。皮层狭窄,由 2 ~ 4 列较大的薄壁细胞组成,排列疏
松;内皮层隐约可见。维管束为辐射型,韧皮部与木质部相间排
列;韧皮部较窄,可见分沁道;木质部宽广,导管众多,管径较大。
见图 3。
1.表皮 2.皮层 3.分泌道 4.木质部 5.韧皮部
图 3 假茼蒿根横切面显微图
3. 3. 2 茎横切面 类圆形。表皮细胞 1 列,类方形,排列紧密,可
见气孔。表皮下侧常见 7 ~ 8 列厚角细胞;皮层较窄,由 3 ~ 5 列
较大的薄壁细胞组成,排列疏松;可见油细胞散在。外韧型维管
束 10 ~ 35 个,环状排列;韧皮部较窄,可见分沁道;木质部中导管
众多,管径较大。髓部宽广,由大型的薄壁细胞构成,排列疏松,
甚至形成中空。见图 4 ~ 5。
图 4 假茼蒿茎横切示分泌腔
1.表皮 2.厚角组织 3.皮层
4.分泌细胞 5.韧皮部 6.分泌道 7.木质部
图 5 假茼蒿茎横切面显微图
3. 3. 3 叶主脉横切面 异面叶。上表皮细胞 1 列,扁平状、长方
形,排列紧密,可见气孔及多细胞非腺毛;下表皮细胞较小,可见
较多的气孔,亦见多细胞非腺毛。栅栏组织 1 列,细胞近长方形;
海绵细胞数列,类圆形,排列疏松。主脉上、下表皮内侧均有厚角
细胞 2 ~ 3 列。外韧型维管束 3 ~ 5 束;其上下侧常可见微木化的
纤维束。木质部位于向茎面,导管较多,径向排列;韧皮部在下
方,可见分泌道。见图 6。
1.气孔 2.上表皮 3.栅栏组织 4.海绵组织
5.非腺毛 6.韧皮部 7.木质部 8.分泌腔
图 6 假茼蒿叶的横切面显微图
3. 3. 4 叶表面片 见图 7。
A
B
A -上表面 B -下表面 1.非腺毛 2.表皮细胞 3.气孔
图 7 假茼蒿叶表面详图
3. 3. 5 粉末特征 粉末黄绿色。可见分泌道碎片,黄棕色,直径
50 ~ 85μm,内含黄色块状分泌物。油细胞圆形,黄棕色,直径 20
~ 80 μm,内含黄色油滴。花粉粒多见,球形,直径 30 ~ 60μm,黄
色,表面有细刺状雕纹。多细胞非腺毛。纤维多成束,细长,直径
10 ~ 30μm,壁薄,常成尖角状开裂。草酸钙方晶、小簇晶可见。
导管以具缘纹孔为主,亦见网纹导管和螺纹导管,直径 60 ~
90μm。淀粉粒细小。见图 8。
3. 4 薄层鉴定 薄层色谱条件探讨如下:
①选取对照药材(JTH - 1)加入甲醇、70%甲醇、95%乙醇、
乙酸乙酯、水等 5 种不同极性的溶剂进行提取比较试验,最终以
70%甲醇提取液所得薄层色谱图斑点最明显。
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时珍国医国药 2015 年第 27 卷第 1 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 27 NO. 1
1.花粉粒 2.草酸钙方晶 3.油细胞 4.草酸钙簇晶
5.纤维 6.非腺毛 7.分泌道碎片 8.导管
图 8 假茼蒿粉末特征图
②以对照药材(JTH - 1)冷浸 12h、超声提取 30min、水浴回
流 30min等三种不同提取方法进行比较,结果表明三种方法所得
薄层色谱图基本一致,以超声提取 30min最为省时简便。
③取对照药材(JTH - 1)粉末 3 份,每份分别为 0. 5g、1g、2g,
加 70%甲醇各 20ml,超声提取 30min制备供试品溶液进行比较。
结果表明,药材取样量为 0. 5 ~ 2g 时,均可检视到三个斑点。但
取样量为 0. 5g时,主斑点显色不够清晰,取样量为 2g,主斑点略
有拖尾;只有取样量为 1g 时,主斑点较集中且明显,故药材取样
量采用 1g。
④分别以分别乙酸丁酯 -甲酸 -水(6∶ 2∶ 0. 8),乙酸丁酯
-甲酸 -水(7∶ 2. 5∶ 2. 5)等展开系统进行试验,结果显示以乙
酸丁酯 -甲酸 -水(6∶ 2∶ 0. 8)为展开剂时,展开效果较好,斑
点集中且分离较好,Rf值适中。
⑤试验中考察了 1%三氯化铁溶液 - 1%铁氰化钾溶液(1∶
1)混合溶液、10%硫酸乙醇溶液、5%香草醛浓硫酸溶液等显色系
统,以 1%三氯化铁溶液 - 1%铁氰化钾溶液(1∶ 1)混合溶液显
色所得色谱图斑点清晰,稳定。
⑥试验中考察了不同温湿度对薄层色谱的影响,结果表明在
室温(30℃)下,相对湿度在 62%内,均可使主斑点分离较好,斑
点显色集中、清晰,且比移值变化不大。
对不同的提取溶剂、提取方法、药材取样量、展开系统、显色
剂及温湿度等进行反复考察,得出稳定的薄层鉴别方法如下:
取样品粉末 1g,加入 70%甲醇 20ml,超声处理 30min,蒸干
浓缩至 1ml,照薄层色谱法(《中国药典》2010 年版一部附录Ⅵ
B)试验,吸取供试品溶液和对照药材溶液各 2 μl,绿原酸对照品
溶液 2 μl,分别点于同一硅胶 G薄层板上,在 T = 30℃下,RT%
=62%条件下,以乙酸丁酯 -甲酸 -水(6∶ 2 ∶ 0. 8)为展开剂,
展开,取出,晾干,喷以 1%铁氰化钾溶液 - 1%三氯化铁溶液(1
∶ 1)的混合溶液。供试品色谱中,在与对照品薄层色谱相应的
位置上,显相同的普蓝色斑点。结果见图 9。
1.绿原酸对照品 2. JTH - 1(对照药材) 3. JTH - 2 4. JTH - 3 5. JTH - 4
6. JTH - 5 7. JTH - 6 8. JTH - 7 9. JTH - 8 10. JTH - 9 11. JTH - 10
图 9 10 个批次假茼蒿药材 TLC色谱图
4 讨论
假茼蒿植物将征为 1 年生草本,茎圆柱形,光滑无毛,有条
纹。叶互生,边缘有不规则的齿缺或浅裂,叶面中脉紫红色,叶背
中脉绿色。头状花组成圆锥花序,红褐色,生于枝顶。其药材全
草多弯曲;茎扁圆柱形,灰绿色或黄绿色,具纵直条纹;叶互生,多
皱缩,易碎,面被短疏毛;全株常附着白色冠毛,有茼蒿菜气味。
茎横切面韧皮部可见分泌道;粉末中花粉粒、非腺毛、草酸钙簇
晶、方晶易见,可见油细胞及分泌道碎片。将假茼蒿药材粉末,加
70%甲醇溶液、超声提取;以乙酸丁酯 -甲酸 -水(6∶ 2 ∶ 0. 8)
展开,喷以 1%铁氰化钾溶液 - 1%三氯化铁溶液(1∶ 1)的混合
溶液显色;供试品与对照药材、绿原酸对照品在相同位置上有相
同颜色的斑点。以上特征明显,专属性强,可作为鉴别假茼蒿的
参考依据。
假茼蒿为壮族民间草药,相关的化学成分、药理作用和临床
研究较少,本课题组将对其挥发油及有效成分进一步研究,以完
善其质量控制技术,为资源开发、利用奠定基础。
参考文献:
[1] 中国科学院中国植物志编辑委员会.中国植物志[M]. 北京:科学
出版社,1988:304.
[2] 朱 华,蔡 毅.中国壮药原色图谱[M].南宁:广西民族出版社,
2003:158.
[3] 梁启成,钟 鸣. 中国壮药学[M]. 南宁:广西民族出版社,2005:
337.
[4] 国家中医药管理局《中华本草》编写委员会. 中华本草(第五册)
[M].上海:上海科技出版社,1999:792.
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATERIA MEDICA RESEARCH 2015 VOL. 27 NO. 1 时珍国医国药 2015 年第 27 卷第 1 期