全 文 ：药学学报 A c t a P h a r m a e e u t i e a S i n i e a 1 9 8 8 ; 2 3 ( 1 0 ) : 78 9 ~ 7 91 78仑
臭 梧 桐 中 海 常 素 的 波 谱 分 析
陈泽乃 徐佩娟 姚天荣
(上海第二医科大学化学教研室 )
臭梧桐又名海州常山 ( C l e : o d e n d : o o t此 e h o t。 m , , T h u n b . )系马鞭草科 ( V e r b e n a e e a e )
植物 , 其叶有降血压作用 , 为一常用中药 。 1 9 6 3 年曾广方等川 从其叶中分 得 一 新 黄 酮 贰
C Z了H 2 6 0 1了
_ 1
, , 。
乙一二一 】1 ,气. J乙
m P Z z 5
O
C (分解 ) , 命名为海常素 ( e l e r o d e n d r i n ) , 经化学鉴定为芹
菜素 一 7一双葡萄糖醛酸贰 ( a iP ge in n 一 7一 id g lu cu r o in d e ) 。 自此以后 ,国内外虽从该属植物中分
得其他黄酮类试 ` 2一 4 ’ , 但未见再有海常素的报道 。 鉴于海常素中的贰键构型 、 糖与糖间的连
结位置以及有否降压活性等 当时均未及解决 。 为此 , 我们在研究臭梧桐降压有效成分中 , 采
取与文献 “ )不同的提取方法 , 再次分得了海常素 。 在未能获得当年海常素标准品进行对照的
情况下 , 利用波谱手段鉴定了全部结构 , 解决过去结构上的遗留问题 , 并进行了初步的药理
试验 , 证明具有降压作用 。
将从钙沉淀法分得的黄酮贰粗品 , 经甲醇重结晶 , 得浅黄色针晶 , m p 19 4~ 19 5 O C (逐
渐分解 ) , 〔a 」护一 9 9 . 02 。 ( e 0 . 3 5 8 , 咄咤 ) 。 F D 一M S 测得 分 子 量 6 2 2 。 I R 存在 1 6 5 6 e m 一 `
( r
一口比喃 酮 ) 、 3 4 0 0 e m 一 ’ (羚 基 ) 、 8 3 8 e m 一 ’ (对位取代苯 ) 等 吸 收 , U V 在 2 6 8 和 3 3 3 n m
(甲醇 ) 的最大吸收和 M S 中 m / 2 2 70 的碎片提示试元为三经基黄酮 。 U V 中带 H 位置和峰
形 , 表明 5 , 7 , 4 , 位可能有氧取代 。 利用 U V 诊断试剂 ( N a O M e , A I C 13 , N a O A e ) 证实存
在 4仁 O H , 5一 O H 以及未游离的 7一 O H 。 ` H N M R 中 占 6 . 9 3 , 7 . 9 4 各 2 个 H ( d , J 一 8 . S H z ,
H 一 3 ` , 5` 和 H 一 2 ` , 6` ) , 6 1 2 . 7 1 个活泼 H ( s , 5 一 O H ) 以及 d 6 . 4 1 、 6 . 7 6 各 1 个 H ( d , J =
2
.
I H z
,
H
一 6 和 H 一 8) 进一步说明上述三个 O H 的位置 。 据此可确定为芹菜素的 7 一 O 一糖贰 。
关于糖的部分 , I R 在 3 0 0 0~ 2 5 0 0 c m 一 ` 的宽峰和 1 7 4 5 及 1 7 3 1 c m 一 ’ 的两个毅基吸收显示有两
个 C O O H 。 M S 中 m / 2 17 6 ( 1 9 4一 18 ) , 1 7 7 ( 19 4一 1 7 ) , 1 5 9 ( 1 9 4一 1 8一 1 7 ) 表明为两分子 葡
萄糖醛酸 ( M 一 19 4 )形成的双糖 。 ` H N M R 中 d 4 . 0 5 及 3 . 9 7 各 1 个 H ( d , J 分别为 9 . 4 和 8 . 5
H z )
, 可归属为两分子葡萄糖醛酸中的 H一 5 , 由于 C 一 6为 C O O H ,因此仅能与 H一 4 a 一 a
偶合而形成较大 J 值的双峰 。 虽该贰熔点与文献川报道的有所差异 , 但综合以上波谱数据 ,
可以推定所得即为海常素 。
为确定单糖之间的连结位置以及端基碳的构型 , 进行了 ’ “ C N M R 测定 。 将谱中贰 元 信
号与芹菜素已知数据 ` 6 ,对照 , C 一 7 向高场位移 1 . 4 p p m , C 一 6 , 8 , 10 则分别向低 场 位 移
。 . 5 , 0 . 8 和 1 . 9 p p m , 完全符合黄酮 7一 o H 的配糖位移规律 ( “ ’ 。 将糖部分的信号与甲基葡
萄糖醛酸贰已知数据 `了’对照 , 除补充了 d 17 0 . 2 和 1 69 . 8 两个拨基碳的数据外 , 可以发现各
碳信号与报道的 刀一 D 一构型接近而与 a 一 D 一构型差别明显 。 其中 d 10 4 . 5 的 C 一尸 信号与 刀-
贰中 d 1 0 4 . 3 的 C 一 1 几乎一致 。 d 8 2 . 5 的 C 一 2’ 信号则比 刀一贰 中 占 7 3 . 8 的 C 一 2 向 低 场
位移 8 . 7 p p m , 而 占 97 . 8 的 C 一 1 “ 信号却比芹菜素一 7一 O 一刀一葡萄糖武已知数据 `与’ 中d 10 0 . 2
的 C 一 1 “ 向高场位移 2 . 4 p p m , 根据黄酮双糖武的武化位移规律 ` 6 ’ , 可确定海常素中两 分
本文于 19 8 7年 9 月 9 日收到。
夕今 O药学学报 A。 r a Ph arm e e au t i c aS i nie a5 1 95 ;23( 10 ): 了 8 9、 7 91
子单糖间应是C 一 1“ ` 与C 一2 “ 相连 。 此连接方式也可从碳谱中 d4 7.2( C 一2 “ `) 的信号 只
有一个而不像C 一3 “ 与C 一3 ’ , / , C 一 5 “ 与 C 一 5, /` 信号均能成对而被进一步证明 。将 占 7 0 . 8
和 7 1 . 7归属为 C一 4 1 和 C一 4 , , ` , 可根据糖的 C 一 6 如由 C H 20 H 变为 C O O H , 则 C 一 4 将
低场位移 1 . 5 p pm 的规律 `了 , , 以芹菜素一 7 一O 一刀一 D 一葡萄糖试中 C 一 4’ 的 占 69 . 8 来推算 , 则
葡萄糖醛酸贰中糖的 C 一 4 当在 6 71 . 3 左右 。 至于 C 一 3 “ 与 C 一 3, /’ 、 C一 5’ 与 C一 5’ 月 两
对信号的归属因 6值彼此很接近 , 尚难以区分 。 确定 C 一 1 “ 和 C 一 l, , 两个端基碳的构型除
因碳谱中 d值分别与对应的 刀一糖贰数据 `“ , 了’接近外 , C 一 2 “ 的贰化位移值达到 8 p p m , 特征
表明 C 一 l, ,/ 为 刀型 ` 6,s , 。 再结合氢谱中 d 5 . 38 和 4 . 53 两个异头质子 , 前 者 为 m 峰 , w 惫
= 10 H z ( H 一 l ” ) ; 后者为 d 峰 , J 二 7 . 8 H z ( H一 1 / , , ) , 进一步证实了上述构型 ` 9 , 。 至于 糖
环大小 , 因各碳的 咨值与相应的毗喃糖符合 , 加上 I R 在 1 1 0 0~ 2 0 2 0 e m 一 `内存在 1 0 5 5 , 1 0 6 5
和 10 5。三个强峰 , 显示了毗喃糖的特征 “ 。 ’ 。 综上所述 , 海常素的全 部 结构 应 是 芹菜 素
一 7一 0 一刀一 D 一毗喃葡萄糖醛酸 ( 1令 2 ) 一 O 一刀一 D 一毗喃葡萄糖醛 酸贰 (a iP g e in n 一 7 一 0 一刀一 D 一 gl u -
c u r o n o P y r a n o s y l ( 1令 2 )一 O 一刀一 D 一 g l u e u r o n o P y r a n o s i d e ) 。 结构式如下 :
C l e r o d e n d r i n
A p ig e n i n
一
7
一
0
一刀一D 一 g l u e u r o n o P y r a n o s y l ( 1* 2 ) 一 0 一刀一 D 一 g lu e u r o n o P y r a n o s id e
查对文献 , 此化合物与 19 8 3年 R . M ue s `川在 E Zod o a 属植物中分得的同一贰在物理和波
谱数据上均相符合 。 鉴于葡萄糖醛酸以双糖形式成贰在 自然界尚不多见 , 因此海常素的波谱数
据对研究此类试有一定的参考意义 。
实 验 部 分
一 、 海常素的提取和分离
1 k g 去茎臭梧桐乾叶粉 , 用蒸馏水润湿浸泡 、 渗池 。 水液用钙离子沉淀 , 方法 A : 加渗
魏液 6倍量的饱和石灰水 ; 方法 B : 每 10 m l 渗池液加 1 m o l / L N a O H 0 . 9 m l 和 4 . s m o l / L
c a cl
: 0
.
3 m l
。
A
, B 两法所得钙盐沉淀量相近 , 但 B 法试剂用量少 , 操作较方便 。 所得沉
淀溶于盐酸 , 调至 p H Z~ 2 . 5 , 离心 , 离心液经阳离子树脂脱钙后放置 , 析出粗 品 , 得 率
0
.
06 %
。 用 甲醇多次重结晶 , 得海常素浅黄色针晶 , m p 19 4~ 1 9 5 “ c (逐渐分解 ) 。 紫 外 光
下呈紫色 , 氨蒸气薰后呈绿色 。 纸层析分别用展开剂 : ( z ) H 20 , R f 0 . 8 4 , ( 2 ) t e r t一 B u O H
一 H O A e一 H 2 0 ( 3 : z : 1 ) , R f 0 . 2 2 ; ( 3 ) 1 5% H O A e , R f 0 . 3 0 。
二 . 海常素的波谱数据
U V 只禁二兮H n m : 2 6 8 , 5 3 3 ; 只票言罗M ` 2 6 8 , 2 9 8 s h , 3 8 6 ; 只众;反, “ 2 7 6 , 2 9 8 , 3 4 6 , 3 8 2 , 久众级,“ 一 ” c ,
2 7 4 , 2 9 8 , 3 4 4 , 3 82 ; 六之雪分A ` 2 65 , 3 9 0 ; 只票二分A “ 一 “ “ B o “ 2 65 , 3 3 6 。
I R ( K B r ) e m
一 1 : 3 4 0 0 , 3 0 0 0~ 2 5 0 0 ( b
r )
, 1 7 4 5
, 1 7 3 1 , 1 6 5 6
, 1 6 0 5 , 1 49 8 , 1 4 4 5 , 13 47 ,
1 2 47 , 1 1 8 0 , 1 0 8 3 , 1 0 6 5 , 1 0 5 0 , 9 3 5 , 9 0 8 , 83 8
。
F D 一入15 , n / z ( % ) : 6 2 3 ( M 十 + i , 4 . 1 6 ) , 2 7 2咬1 0 0 ) , 2 ’了。 ( 2 . 3 ) , 1 7 7 ( 2 . 0 8 ) , 1 7 6 ( 2 . 0 3 ) ,
1 5 9 ( 1
.
5 3 )
, 1 14 ( 5
.
3 1 )
, 8 1 ( 5
.
7 0 )
, 7 9 ( 4
.
3 4 )
。
药学学报 Act ah P ar m ae eut i e aS in i e a9 1s a; 23 (0 1 ): 7 a9 、 79 179 1
` HN MR ( DMS O 一d 6)舀: 3. 9 7, 4 . 0 5 (各 I H , d , J 分别为 8 . 5 、 9 . 4 H z , H一 5 1 、
H 一 5“ ` ) , 4 . 5 3 ( I H , d , J 一 7 . 8 H z , H一 1“ ` ) , 5 . 3 8 ( I H , m , W告一 10 H Z , H 一 1 1 ) ,
6
.
4 1 ( I H
, d , J = 2
.
1 H z
,
H 一 6 ) , 6 . 7 6 ( I H , d , J 一 2 . 1 H z , H 一 8 ) , 6 . 8 6 ( I H , s ,
H 一 3 ) , 6 . 9 3 ( Z H , d , J = 8 . 8 H z , H一 3 ` , 5 , ) , 7 . 9 4 ( Z H , d , J = 8 . 8 H z , H 一 2 , , 6 , ) ,
1 2
.
7 ( I H
, s , 加 D Z O 消失 , 5一 O H ) 。
1 3C N M R (D M S O 一 d 6 , p N D , A p T ) d : 1 8 2 . 1 ( C 一 4 ) , 1 7 0 . 2 , 1 6 9 . 8 ( C 一 6 ” ,
C 一 6 , , ` ) , 1 6 4 . 4 ( C 一 2 ) , 1 6 2 . 3 ( C 一 7 ) , 1 6 2 . 理 , 1 6一 3 ( C 一 5 , C 一 4 , ) , 15 6 . 9 ( C 一 9 ) ,
1 2 8
.
7 ( C 一 2 , , C 一 6 , ) , 1 2 1 . 2 ( C 一 1 , ) , 1 1 6 . 1 ( C 一 3 , , C 一 5 ` ) , 1 0 5 . 6 ( C 一 1 0 ) , 1 0 4 . 5
( C 一 1 , , , ) , 1 0 3 . 2 ( C 一 3 ) , 9 9 . 5 ( C 一 6 ) , 9 7 . 8 ( C 一 2 1 ) , 9 4 . 8 ( C 一 s ) , 8 2 . 5 ( C 一 2 即 ) ,
7 5
.
9
、
7 5
.
7
、
7 5
.
1
、
7 4
.
9 ( C 一 3 “ , C 一 3 ` , / , C 一 5 “ , C 一 5 , , , ) , 7 4 . 2 ( C 一 2 “ , ) , 7 1 . 7 、 7 0 . 8
( C 一 4 ” , C 一 4产, , ) 。
关锐词
致谢
马鞭草科 ; 臭梧桐 (海州常山 ) ; 黄酮试 ; 海常素
生药产自上海市川沙县 , 由上海市高血压研究所提供 , 顾天华 、 童戟峰两位同志负责采集和鉴
定 。
参 考 文 献
曾广方 , 等 . 中药黄酮类的研究 x . 海州常山成分的研究 , 新黄酮贰海常素的分离及其化学结构 . 药学学报 1 9 63 , 1。 :
4 8 0
。
o k i g a w a M
, e t a l
.
A n e w g ly e o s i d e
,
a e a e e t in
一
7
一 g l u c u r o n o 一 ( l一 2 ) 一 g l u e u r o n id e f r o m t h e l e a v e s o fC l e r o d e 几 d r o 几 r r 云e h o 咨。 ” 乙“ 饥 . T e t r a h e d r o n L e l t 19 7 0 , 2 9 3 5 .
王爱琴 , 等 . 臭梧桐降压成分的初步探讨 . 华东地区第五次药用植物化学学术讨论会论文集 . 上海 : 1 98 5 .
森田道贤 , 他 . 法氏海州常山 C l e , o d e o d , 。 。 t八 e h o t o 。 。 , T h u n b . v a r . f a , g 。 : ￡` R e h d . ( v e r b e n a c e a e )
奠山 一新配糖体 , C l e r o d e n d r o s id e . 秦学雄蒜 19 7 7 , 9 7 , 9 7 6 .
M
a r k h a m K R a n d C h a r i V M
,
C a r b o n
一
13 N M R S P
e e t r o s e o P y o f F l a v o n o id s
.
I n : H a r b o r n e J B a n d M
a b r y
T J
, e d s
.
T h e F l a 秒。 玲o i d : A d ” a n c e s 蓄妈 R e s e a 了 e h . L o n d o n , N o w Y o r k : C h a Pm a n a n d H a l l , 1 9 8 2 : 2 9 .
M a r k h a m K R
, e t a l
.
C a r b o n
一
1 3 N M R s t u d ie s o f f l a v o n o id s
一
111
.
N a t u r a l l y o e e u r r i n g f l a v o n o id g l y e o s i d e s
a n d t h e i r a e y l a t e d d e r i v a t i v e s
.
T e ` r a h e d z o n 1 9 78 , 3 4 : 1 3 8 9 .
G o r in P A J
, e t a l
.
F u r t h e r s t u d i e s o n t h e a s s i g n m e n t o f s i g n a l s in 1
3
C 11i a g n e t i e r e s o n a n e e s P e e t r a o f
a l d o s e s a n d d e r i v e d m e t h y l g l y e o s i d e s
.
C a 拐 J C h e仍 19 7 5 ; 5 3 : 1 2 1 2 .
田中治 . 炭素一 13 核磁氛共喘O 配搪体O 化学礴造研究 。 O 佑用 : P a an x (二 少 沙 沙 ) 属植物 O 廿犷 二 沙及莎甘味植物
配糖体研究会中心 巴 L 〔 . 菜学雄豁 19 8 5 ; I。 , 3 23 .
易大年 、 徐光漪 . 核磁共振波谱一在药物分析中的应用 . 上海科学技术出版社 , 19 8 5 : 2 39 .
林启寿 . 中草药成分化学 . 北京 : 科学出版社 , 19 7 7 : 12 6 .
M
u e s R
.
S p e e i e s s p e e i f i e f l a v o n e g lu e u r o n i d e s i n E l o d e a s P e e i e s
.
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二 t o e a e h o t h e r i n t h e f o r m o f l 一- ) 2 .
C l e r o d e n d r i n s h o w e d a h y P o t e n s i v e a e t i v i t y i n t h e r a t b y m e a s u r e m e n t o f t h e
t a i l v o l u m e P r e s s u r e i n P r o l i m i n a r y P h a r m a e o l o g i e a l t e s t s
.
K e y w o r d , V e r b e n a e e a e ; C l e了 o d e n d ,
·
o ,` t r i e h o t o m 祝m T h u n b
.
; F l a v o n e g l y c o s i d e ;
孟 、
C l e r o d e n d r i n