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黄荆子化学成分研究
李妍岚 , 曾光尧 , 周美辰 , 谭健兵 , 周应军＊ (中南大学药学院 , 长沙　410013)
摘要:目的　研究马鞭草科牡荆属植物黄荆果实的化学成分。方法　采用聚酰胺 、 大孔树脂柱层析和 Sephadex
LH-20 柱层析等分离方法对黄荆子强极性成分进行分离纯化 , 根据理化性质和波谱数据进行结构鉴定。结果　分离
得到 4 个单体化合物 , 荭草素 (Ⅰ), 异荭草素 (Ⅱ), 牡荆苷Ⅲ , Vitedoamine A (Ⅳ)。结论　化合物Ⅲ首次从该
植物中分离得到。
关键词:黄荆子;马鞭草科;化学成分
中图分类号:R284　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2009)01-0024-03
Chemical constituents from the seeds of Vitex negundo L.
LI Yan-lan , ZENG Guang-yao , ZH OU Mei-chen , TAN Jian-bing , ZHOU Ying-jun ＊ (School of Pharmaceutical
Sciences , Central South University , Changsha 410013)
Abstract:Objective　 To de te rmine the chemical constituents from the seeds o f Vitex negundo L..Methods　Chemi-
cal constituents wer e iso lated and purified by po lyamide , macropo rous resin and Sephadex LH-20 column chromatog ra-
phy , and their structures w ere e lucida ted by chemica l and spectroscopic me thods.Results　Four com pounds were iden-
tified as o rientin(Ⅰ), isoo rientin (Ⅱ), vitexin Ⅲ , and V itedoamine A(Ⅳ).Conclusion　Compound Ⅲ is isolated
from this plant fo r the first time.
Key words:Vitex negundo L;Verbenaceae;chemical constituents
　　黄荆子 (Fructus Viticis Negundo)为马鞭草科牡荆属
植物黄荆 (Vitex negundo L.)的果实[1] 。黄荆广泛分布于
中国南方各省。黄荆性温 , 味辛 、 苦 , 最早用于退热止痰 ,
消食下气[ 2] 。最近研究证明 , 黄荆子提取物乙酸乙酯部位能
显著抑制乳腺癌 MCF-7 细胞增殖 , 并呈剂量依赖性[ 3] 。为
了研究黄荆子提取物其他部位抗肿瘤活性 , 我们对乙酸乙酯
萃取后水层化学成分进行了研究。从中分离得到了 3 个黄酮
碳苷类化合物及 1 个木脂素类化合物 , 分别为荭草素 (ori-
entin , Ⅰ), 异荭草素 (isoo rientin , Ⅱ), 牡荆苷 (vitex in ,
Ⅲ), Vitedoamine A (Ⅳ)。化合物 (Ⅲ)首次从该植物分
离得到。
1　仪器与试药
Varian-INOVA-400FT 型核磁共振仪 (1H-NM R 400
MHz , 13C-NM R 100 MHz), TMS 为内标 (美国 Varian 公
司)。 F innigan LCQ-Advatange 质谱仪 (美国 The rmo 公
司)。
聚酰胺为浙江省台州市路桥四甲生化塑料厂生产。薄层
色谱用硅胶 (GF254)为青岛海洋化工厂生产 , 大孔树脂
HPD-100为天津乳胶厂生产。 Sephadex LH-20 为瑞典 Am-
er sharm Pharmacia Bio tech 公司生产。所用试剂均为分析纯。
黄荆子由中南大学药学院谭桂山教授鉴定为 Vite x Ne-
gundo L.的果实。
2　提取与分离
取黄荆子 10 kg 用 40%乙醇回流提取 3 次 , 分别为 100
L/ 1.5 h , 80 L· h -1 , 80 L· h -1 , 提取液减压浓缩至 10 L 。
浓缩液用 3 L 聚酰胺 (60 ～ 80 目)拌样 , 拌样后上 7 L 聚酰
胺柱。依次用 0.3%的氨水 (50 L), 水 (20 L)和 10%乙
醇溶液 (20 L)洗脱。氨水洗脱液减压浓缩后至 1 L , 用乙
酸乙酯萃取。萃取后水层浓缩至小体积 , 取水层浓缩物 (50
g)上 80 目的聚酰胺柱 , 依次用不同浓度的乙醇溶液梯度洗
脱。 40%乙醇洗脱液 (5 L)浓缩后上 H PD-100 大孔树脂
柱 , 得到 4个部分。 部分 2 反复用 Sephadex LH-20 柱纯化
得到化合物Ⅰ (60 mg), 化合物Ⅱ (40 mg);部分 3 经将
Sephadex LH-20 柱后再通过制备 T LC 得到化合物Ⅲ (15
mg)。部分 4 反复用 Sephadex LH-20 柱及制备 TLC 纯化后
得到化合物Ⅳ (10 mg)。
3　结构鉴定
化合物 Ⅰ :淡黄色无定型粉末 , 能溶于甲醇 , 微溶于
水。紫外下显红色暗斑 , 碘熏黄色 , 10%H2 SO4-MeOH 试
剂反应显亮黄色 , FeCl3 试剂反应显灰黑色 , 说明化合物中
含有较多酚羟基。盐酸-镁粉反应阳性 , 提示该化合物可能
为黄酮类化合物。
　　1H-NMR中δ6.66 (1H , s)为 3 位质子的特征信号 ,
　　作者简介:李妍岚 , 女 , 硕士研究生 , 主要从事天然药物化学成分研究 , Tel:13755037973 , E-mail:liyanlan 2007@163.com　　
＊通讯作者:周应军 , 男 , 硕士生导师 , 主要从事天然产物活性成分研究。
C ent ral S outh Ph arm acy.J an 2009 , Vol.7 No.1　中南药学 2009年 1月第 7卷第 1期
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结合13C-NMR中δ181.9 及δ60～ 82 的碳信号说明该化合物
为黄酮苷。由1H-NMR得知 , δ13.18 (1H , s)是黄酮类化
合物 5-OH 的特征峰。δ10.85 (1H , s), δ10.09 (1H , s),
δ9.09 (1H , s)为 3 个酚羟基质子信号。δ7.48 (1H , d , J
=2.4 H z), δ6.86 (1H , d , J =8.4 Hz), δ7.54 (1H ,
dd , J=8.4 Hz , 2.4 H z)为一组自旋耦合体系 , 且分别可
能为黄酮 B 环上的 2′, 5′, 6′位质子信号。13 C-NM R 中
δ104.4和δ98.0 是 A 环上 8 位成苷后特征碳信号[ 4] , 故1H-
NM R中δ6.27 (1H , s)应为 A 环上 6 位的质子信号。13C-
NM R中的糖基信号集中在δ60 ～ 82 , 端基碳的化学位移在
70 ～ 80 , 说明成苷类型为碳苷 , 其中δ73.2 为端基碳信号 ,
所连糖基为葡萄糖。1H-NM R 的端基氢信号为δ4.67 (1H ,
d , J =9.6 H z), 为 β 构型的葡萄糖。13 C-NMR (DMSO ,
100 MH z):δ181.9 (C-4), 163.9 (C-2), 162.4 (C-7),
160.2 (C-5), 155.9 (C-9), 149.4 (C-4′), 145.7 (C-3′),
121.9 (C-1′), 119.2 (C-6′), 115.5 (C-5′), 113.9 (C-
2′), 104.4 (C-8), 103.9 (C-10), 102.3 (C-3), 98.0 (C-
6), 81.9 (C-5″), 78.6 (C-3″), 73.2 (C-1″), 70.6 (C-
2″), 70.5 (C-4″), 61.5 (C-6″)。1 H-NMR (DMSO , 400
MHz):δ 13.18 (1H , s , 5-OH), 10.85 (1H , s , 7-
OH), 10.09 (1H , s , 3′-OH), 9.09 (1H , s , 4′-OH),
7.54 (1H , dd , J =8.4 Hz , 2.4 Hz , H-6′), 7.48 (1H ,
d , J=2.4 Hz , H-2′), 6.86 (1H , d , J=8.4 H z , H-5′),
6.66 (1H , s , H-3), 6.27 (1H , s , H-6), 4.67 (1H , d ,
J=9.6 Hz , H-1″), 3.24 ～ 3.84 (m , H-2″～ H-6″)综上所
述并将化合物波谱数据与文献[5 , 6] 对照基本一致 , 鉴定该化
合物为荭草素 (orientin)。
化合物Ⅱ:棕黄色无定型粉末 , 能溶于甲醇 , 微溶于
水。紫外下显红色暗斑 , 碘熏黄色 , 10%H2 SO4-MeOH 试
剂反应显橙黄色 , FeCl3 试剂反应显灰黑色 , 说明化合物中
含有较多酚羟基。 盐酸-镁粉反应阳性 , 提示该化合物可能
为黄酮类化合物。
在1H-NMR 中 , δ13.59 有一尖锐单峰 , 应为黄酮类化
合物 A 环上 5-OH 上的氢信号。与化合物 Ⅰ 比较 , δ7.41
(1H , d , J =8.4 Hz), δ6.88 (1H , d , 8.4 H z), δ7.40
(1H , s)为一组自旋耦合系统 , 分别为 B 环上的 6′, 2′, 5′
位质子信号。δ6.67 (1H , s)为 A 环 3 位质子信号。δ6.47
(1H , s)为 B 环 8 位的氢信号。δ4.58 (1H , d , 9.6 Hz)
为糖端基氢信号 , 综合其他糖基信号 , 所连糖应为 β 构型的
葡萄糖。13C-NM R中δ108.8 和δ93.4 是 A 环上 6 位成苷后
特征碳信号[ 4] , 13C-NM R中的糖基信号集中在δ60 ～ 82 , 端
基碳的化学位移在δ70 ～ 80 , 说明成苷类型为碳苷 , 其中
δ73.2 为端基碳信号。13 C-NMR (DMSO , 100 M Hz):δ
181.6 (C-4), 163.4 (C-2), 163.4 (C-7), 160.6 (C-5),
156.1 (C-9), 149.8 (C-4′), 145.7 (C-3′), 121.1 (C-
1′), 118.8 (C-6′), 115.9 (C-5′), 113.1 (C-2′), 108.8
(C-6), 103.1 (C-10), 102.5 (C-3), 93.4 (C-8), 81.5
(C-5″), 78.9 (C-3″), 72.9 (C-1″), 70.5 (C-2″), 70.0
(C-4″), 61.4 (C-6″)。1H-NM R (DMSO , 400 M Hz):δ
13.59 (1H , s , 5-OH), 7.41 (1H , d , J =8.4 Hz , H-
6′), 7.40 (1H , s , H-2′), 6.88 (1H , d , J =8.4 Hz ,
H-5′), 6.67 (1H , s , H-3), 6.47 (1H , s , H-6), 4.58
(1H , d , J =9.6 H z , H-1″), 4.06 (1H , t , H-2″), 3.11
～ 3.21 (3H , m , H-3″～ H5″), 3.69 (1H , d , J =11.2
Hz , H1-6″)3.40 (1H , dd , J =11.2 Hz , 5.6 Hz , H2-6″)
综上所述并将化合物波谱数据与文献[ 7 ,8]对照基本一致 , 鉴
定该化合物为异荭草素 (isoo rientin)。
化合物Ⅲ :黄色无定型粉末 , 可溶于甲醇。紫外下显红
色暗斑 , 碘熏棕黄色 , 10%H2 SO 4-MeOH 试剂反应显黄色 ,
FeCl3 试剂反应显灰色 , 盐酸-镁粉反应阳性 , 提示该化合物
可能为黄酮类化合物。
在1 H-NMR中 , δ13.17 有一尖锐单峰 , 应为黄酮类化
合物 A 环上 5-OH 上的氢信号。从 H 谱可以看到δ8.02
(2H , d , J =8.8 H z), δ6.89 (2H , d , J =8.8 Hz)为 B
环 H-2′, 6′和 H-3′, H-5′的信号 , 提示 B 环为 4′单氧取代。
氢谱上的其他信号与化合物Ⅰ相似。13C-NM R中 , δ128.8 和
δ115.7 各相当于 2 个碳信号 , δ160.3 与化合物Ⅰ信号相比 ,
4′的碳由于没有邻位羟基氢去屏蔽作用而向低场位移了 11
ppm。而碳谱上其他信号与化合物 Ⅰ 基本一致。13 C-NMR
(DMSO , 100 MH z):δ181.9 (C-4), 163.8 (C-2), 162.8
(C-7), 161.1 (C-5), 160.3 (C-4′), 155.9 (C-9), 128.8
(C-2′, C-6′), 121.4 (C-1′), 115.7 (C-3′, C-5′), 104.5
(C-8), 103.8 (C-10), 102.3 (C-3), 98.1 (C-6), 81.7
(C-5″), 78.6 (C-3″), 73.3 (C-1″), 70.7 (C-2″), 70.4
(C-4″), 61.2 (C-6″)。1 H-NMR (DMSO , 400 MH z):δ
13.17 (1H , s , 5-OH), 8.02 (2H , d , J=8.8 Hz , H-2′,
6′), 6.89 (2H , d , J=8.8 H z , H-3′, H-5′), 6.78 (1H ,
s , H-3), 6.29 (1H , s , H-6), 4.68 (1H , d , J =9.2
Hz , H-1″), 3.24 ～ 3.84 (m , H-2″～ H-6″)。综上所述并将
化合物波谱数据与文献[ 9] 对照基本一致 , 鉴定该化合物为牡
荆苷 (v itexin)。
化合物Ⅳ:白色无定型粉末 , 微溶于甲醇。紫外下显红
色暗斑 , 碘熏无变化 , 10%H2 SO4-MeOH 试剂反应阴性。
EI-MS 给出分子离子峰 m/ z 351 , 结合1H , 13 C-NM R谱
给出分子组成 C20 H 17 NO 5 。在1H-NM R 中低场区δ8.09 ,
δ7.37 , δ7.02 有 3 个单峰质子信号 , 应为苯环或相似共轭
体系上的氢。δ6.75 (1H , dd , J =2 H z , 8 H z), δ6.88
(1H , d , 2 H z)δ6.90 (1H , d , 8 H z)这 3 个氢信号属于
一个苯环上的 ABX系统。δ4.24 (2H , s)应为次甲基连接
在苯环的取代基。13C 谱中δ174.3 是不饱和羰基碳信号 , 在
δ151 ～ 105 有 16 个碳信号 , 与芳基萘类化合物母核的碳位
移值基本一致 , 与文献对照后确定化合物为内酰胺骈芳基萘
类木脂素。13 C-NM R (CD3OD , 100 MHz):δ174.3 (C-
2α), 150.5 (C-6), 150.0 (C-7), 149.3 (C-3′), 147.5
(C-4′), 137.2 (C-3), 134.2 (C-4), 132.5 (C-10), 130.6
(C-2), 129.9 (C-9), 128.3 (C-1′), 123.5 (C-6′), 122.4
(C-1), 116.6 (C-5′), 114.2 (C-2′), 109.1 (C-8), 108.7
(C-5), 56.6 (OCH3-3′), 56.3 (OCH3-7), 46.4 (C-
3α)。1H-NM R (CD3OD , 400 M Hz):δ8.09 (1H , s , H-
1), 7.37 (1H , s , H-8), 7.02 (1H , s , H-5), 6.75
中南药学 2009年 1月第 7卷第 1期　Cent ral Sou th Pharmacy.Jan 2009, Vol.7 No.1
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(1H , dd , J =2 , 8 H z , H-6′), 6.88 (1H , d , 2 H z , H-
2′)6.90 (1H , d , 8 H z , H-5′), 4.24 (2H , s ,) 3.95
(3H , s , OCH3-3′), 3.80 (3H , s , OCH3-7)。综上所述
并将化合物波谱数据与文献[ 10]对照基本一致 , 鉴定该化合
物为 Vitedoamine A 。
参考文献
[ 1] 南京中医药大学.中药大辞典 (第二版)[ M] .上海:上海科
学技术出版社 , 2001:2852-2854.
[ 2] 赵学敏.本草纲目拾遗 [ M ] .北京:中国中医药出版社 ,
1998:99.
[ 3] 彭娟 , 周应军 , 封萍 , 等.黄荆子乙酸乙酯提取物抑制人乳腺
癌 MCF-7裸鼠移植瘤生长 [ J] .湖南师范大学学报· 医学版 ,
2007 , 4 (3):16-19.
[ 4] 吴立军.实用天然有机产物化学 [ M ] .北京:人民卫生出版
社 , 2007:902.
[ 5] 任正博 , 张振学 , 周伟利 , 等.金莲花化学成分研究 [ J] .中国
现代中药 , 2006 , 8 (2):14-15.
[ 6] 宋冬梅 , 孙启时.阿尔泰金莲花化学成分的研究 (Ⅰ)[ J] .中
国药物化学杂志 , 2004 , 114 (14):233-235.
[ 7] 陈封政 , 向清祥 , 李书华.孑遗植物桫椤叶化学成分研究 [ J] .
西北植物学报 , 2008 , 28 (6):1246-1249.
[ 8] 孙武兴 , 李铣 , 李宁 , 等.毛金竹叶提取物化学成分的分离与
鉴定 [ J] .沈阳药科大学学报 , 2008 , 25 (1):39-43.
[ 9] 冯世秀 , 刘梅芳 , 魏孝义 , 等.布渣叶中三萜和黄酮类成分的
研究 [ J] .热带亚热带植物学报 , 2008 , 16 (1):51-56.
[ 10] Masateru Ono , Yoichiro Nishida , Chikako Masu ok a , et al.
Lignan Dericat ives and a Norditerpene f rom th e S eeds of Vi tex
negu ndo L.[ J] .Natu ral Product , 2004 , 67 (12):2073-
2075.
(收稿日期:2008-10-10;修回日期:2008-12-06)
高效液相色谱法测定火麻仁中大麻酰胺 A的含量
沈谦1 , 2 , 蔡光明1＊ , 何桂霞2 , 朱中贵1 (1.中国人民解放军 302医院全军中药研究所 , 北京　100039;2.湖南中医药
大学药学院 , 长沙　410208)
摘要:目的　首次建立火麻仁中大麻酰胺 A 的含量测定方法。方法　采用 Wate rs C18 (250 mm ×4.6 mm , 5 μm)
色谱柱;乙腈-0.1%磷酸溶液 (22∶78)为流动相;流速:1.0 m L·min-1 ;检测波长:257 nm。结果　大麻酰胺
A 的线性范围 0.1～ 0.50 μg (r=0.999 6);加样回收率为 101.16%, RSD=1.63% (n=6)。结论　该法操作简
便 、 准确 、 重复性好 , 可用于火麻仁的质量控制。
关键词:高效液相色谱法;火麻仁;大麻酰胺 A;含量测定
中图分类号:R284.2 , R927.2　　　　文献标识码:A　　　　文章编号:1672-2981 (2009)01-0026-03
Determination of Cannabisin A in fruits of Cannabis Sativa by HPLC
SHEN Qian1 , 2 , CAI Guang-ming 1＊ , HE Gui-xia2 , ZH U Zhong-gui1 (1.P LA Institute o f Chinese Materia Medi-
ca , 302 Hospital of the PLA , Beij ing 100039;2.College o f Pharmacy , Hunan University o f Tradtional Chinese
Med icine , Changsha 410208)
Abstract:Objective　 To establish an HPLC me thod to determine the content o f Cannabisin A in fruits of Cannabis Sa-
tiva.Methods　The HPLC sy stem consisted o f Wa te rs colum n C18 (250 mm×4.6 mm , 5 μm);ace tonitrile -0.1%
pho sphoric acid(22∶78) as the mobile phase;flow rate wa s 1.0 mL·min-1 .I t w as de tected at 257 nm.Results　
The linear range of Cannabisin A w as 0.1 ～ 0.50 μg , r=0.999 6;the mean recovery w as 101.16%, RSD=1.63%
(n=6).Conclusion　This method is simple and accurate w ith good reproducibility.It is suitable fo r the quality con-
trol of f ruits of Cannabis S ativa.
Key words:HPLC;fr uits o f Cannabis S ativa ;Cannabisin A;determination
　　火麻仁为桑科 Moraceae 植物大麻 Cannabis sativa L. 的干燥成熟果实。有润燥滑肠通便的功效[ 1] 。秋季果实成熟
　　作者简介:沈谦 , 男 , 硕士研究生 , 主要从事天然药物化学 , Tel:(010) 66933324 , 13810664364 , E-mai l:shenqian01@163.com
＊通讯作者:蔡光明 , 男 , 研究员 , 主要从事新药研发与质量标准 , Tel:(010) 66933324 , E-mai l:cgm1004@vip.sina.com
C ent ral S outh Ph arm acy.J an 2009 , Vol.7 No.1　中南药学 2009年 1月第 7卷第 1期