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杨桃根多糖对糖尿病小鼠降血糖作用的实验研究



全 文 :腺增生病理模型。经过乳康胶囊治疗后其乳头的高度 、直径
明显缩小 , 血清雌二醇含量降低 , 而孕酮水平明显提高。治
疗组大鼠的凝血时间长于模型对照组 , 各项血流变学指标接
近假手术组。另外 ,乳腺增生的发生 、发展有明显的性激素
依赖性。雌激素的主要作用是刺激乳腺导管的生长 , 而孕酮
则能够对抗高雌激素状态 , 抑制垂体与卵巢功能 , 抑制病情
发展。实验结果显示模型对照组血浆 E2水平显著高于正常
组 , 大剂量治疗组血浆 E
2
水平显著低于模型对照组 , P水平
显著高于模型对照组。 这表明该药物的治疗作用与改善机
体内分泌环境有关。
参考文献:
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杨桃根多糖对糖尿病小鼠降血糖作用的实验研究
黄桂红 1, 2 ,  邓 航 2 ,  黄纯真 1 ,  黄仁彬1*
(1.广西医科大学药学院 ,广西 南宁 530021;2.桂林医学院附属医院 ,广西 桂林 541001)
收稿日期:2008-12-40
基金项目:广西自然科学基金项目(桂科自 0447039,桂科自 0832013Z)
作者简介:黄桂红(1972-),女 ,壮族 ,主管药师 ,硕士 ,研究方向:抗糖尿病药。 Tel:(0773)2882506E-mail:huangguihong120@126.com
*通讯作者:黄仁彬 ,男 ,教授 ,博士生导师。研究方向:生化药理学。 Tel:(0771)5358272E-mail:huangrenbin518@163.com
关键词:杨桃根多糖;糖尿病;降血糖;胰岛素;胰岛素敏感指数
中图分类号:R285.6     文献标识码:B     文章编号:1001-1528(2009)09-1438-03
  迄今已发现一百多种植物多糖具有降血糖作用 ,从植物
多糖中寻找具有降血糖作用的有效成分是当今的一个研究
热点 [ 1] , 本实验就杨桃根多糖对链脲佐菌素致糖尿病小鼠的
降血糖作用进行研究 ,并初步探讨其降血糖的作用机制。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 动物 昆明种小鼠 , SPF级 , 体重(22±2)g, 由广西
医科大学实验动物中心提供 , 试验动物生产许可证:SCXK
桂 2003-0003。
1.1.2 主要试剂盒与药物 链脲佐菌素(STZ):深圳晶美
公司进口分装 , ProductID:380-010-G001;格列本脲:浙江南
洋药业有限公司 , 规格 2.5mg/片 , 批号:20060302;杨桃根多
糖由本实验组制备;血糖检测试剂盒:四川省迈克科技有限
责任公司 , 生产批号:0507031;胰岛素放射免疫分析试剂盒:
北京北方生物技术研究所 ,批号 0710201。
1.1.3 主要仪器 722S可见分光光度计(上海精密科学仪
器有限责任公司);GC-1200γ放射免疫计数盒:中国科学技
术大学科技实业总公司中佳光电仪器分公司。
1.2 方法
1.2.1 杨桃根多糖的制备 [ 2 , 3]  杨桃根碎片 500 g用 70%
乙醇提取后的残渣 , 晾干 , 加 5 L水 , 沸水回流提取 3次 , 每
次 1h,滤过 ,合并滤液 , 离心 ,取上清液于真空微波干燥器中
浓缩后加 3倍体积的 95%乙醇进行醇沉 , 搅拌混匀 , 4 ℃冰
箱保存 ,静置 24h,重复 2次 , 去上清液 , 沉淀依次用无水乙
醇 、丙酮洗涤 5次 , 真空干燥得杨桃根多糖 43.25 g, 其提取
率为 8.65%。
1.2.2 糖尿病小鼠模型的建立 [ 4 , 5]  实验小鼠禁食 12 h
后 ,一次性腹腔注射链脲佐菌素 150 mg/kg, 72 h后 , 小鼠禁
食 12 h, 眼内眦取血 ,采用葡萄糖氧化酶法测空腹血糖 ,选择
空腹血糖高于 11.1 mmol/L者确定为糖尿病模型。
1.2.3 分组与给药 将造模成功的 40只小鼠随机分为模
型对照组 、格列本脲组 、杨桃根多糖高 、低剂量组;另随机选
择 10只健康小鼠做正常对照组。正常对照组 、模型对照组
每天给予生理盐水灌胃 ,格列本脲组以 25 mg/kg灌胃 , 杨桃
根多糖以高剂量 249 mg/kg、低剂量 124.5 mg/kg灌胃。各
组均按 10 mL/kg给药 , 每天 1次。
1.2.4 指标测定 观察实验小鼠的一般状况;并分别于灌
胃给药第 0日 、第 7日 、第 14日将小鼠禁食 12 h,称重;眼内
眦取血 ,测定小鼠空腹血糖;在第 14日拔眼球取血 , 用竞争
放射免疫法测定小鼠空腹血清胰岛素水平 [ 6, 7] , 并计算出小
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鼠胰岛素敏感指数。
2 统计方法
采用统计软件SPSS15.0对实验数据进行分析 , 结果以 x
±s表示 ,统计学处理用方差分析 , 以 P<0.05有统计学意
义。
3 结果
3.1 一般情况的观察 正常组小鼠精神状态好 , 皮毛光滑 ,
活动自如 , 活动量大 , 垫料干燥。 模型组小鼠精神萎靡 , 懒
动 ,毛发稀疏 , 易脱落 , 形体消瘦 , 所用垫料较湿。杨桃根多
糖高 、低剂量组及格列本脲组小鼠状态较糖尿病模型组有明
显的改善 ,精神状态良好 ,毛发较糖尿病模型组干净有光泽 ,
垫料较模型组干燥。
3.2 杨桃根多糖对糖尿病小鼠体重的影响 由表 1可知 ,
杨桃根多糖高剂量组小鼠的体重与模型组比较有显著性差
异(P<0.01)。
表 1  各组小鼠体重的变化( x±s)
组别 治疗前第 0日体重 /g 治疗第 7日体重 /g 治疗第 14日体重 /g
正常组 24.56±1.41△△ 27.72±1.08△△ 29.17±1.00△△
模型组 21.14±1.30■■ 16.71±1.34■■ 15.58±0.99■■
格列本脲组 21.24±1.34■■ 19.80±1.45■■△△ 17.58±1.30■■△△
杨桃根多糖-H 21.09±1.46■■ 20.31±1.18■■△△ 18.80±1.12■■△△
杨桃根多糖-L 20.8±1.31■■ 17.38±1.31■■ 16.09±1.20■■
  注:与正常组比较 , ■■P<0.01;与模型组比较 , △△P<0.01。
3.3 杨桃根多糖对糖尿病小鼠血糖的影响 由表 2知杨桃
根多糖高 、低剂量组降血糖作用与模型组比较有显著性差异
(P<0.01)。其降糖率分别达到 35.35%和 33.39%。
表 2  各组小鼠空腹血糖值比较( x±s)
组别 第 0日血糖值 /(mmol/L) 第 7日血糖值 /(mmol/L) 第 14日血糖值 /(mmol/L) 降糖率 /%
正常组 4.77±0.46△△ 4.56±0.49△△ 4.45±0.54△△ 6.65
模型组 19.60±3.30■■ 19.46±3.09■■ 17.96±2.78■■ 8.38
格列本脲组 19.96±4.25■■ 16.37±3.74■■△ 13.06±3.05■■△△ 34.57
杨桃根多糖-H 20.06±3.82■■ 16.21±3.06■■△ 12.97±2.60△△■■ 35.35
杨桃根多糖-L 20.08±3.22■■ 17.09±2.34■■ 13.38±2.10△△■■ 33.39
  注:与正常组比较 , ■■P<0.01;与模型组比较 , △P<0.05;△△P<0.01。
3.4 杨桃根多糖对糖尿病小鼠血清胰岛素及胰岛素敏感指
数的影响 由表 3可知杨桃根多糖高 、低剂量组小鼠的空腹
血清胰岛素明显低于糖尿病模型组小鼠(P<0.01), 而杨桃
根多糖高 、低剂量组小鼠的胰岛素敏感指数明显高于糖尿病
模型组小鼠(P<0.01)。
表 3  各组小鼠血清胰岛素水平 、胰岛素
敏感指数的比较( x±s)
组别 空腹胰岛素 /(mIU/L) 胰岛素敏感指数
正常组 6.78±1.73△△ -3.37±0.30△△
格列本脲组 9.47±2.77■△△ -4.75±0.29■■△△
模型组 28.21±9.61■■ -6.17±0.33■■
杨桃根多糖-H 10.59±2.52■△△ -4.87±0.32■■△△
杨桃根多糖-L 8.96±2.32■△△ -4.74±0.33■■△△
  注:与正常组比较 , ■P<0.05;■■P<0.01;模型组比较, △△P<
0.01。
4 讨论
植物多糖是近十年研究较多的一类降血糖药。杨桃根
(AverrhoacarambolaL.root)为酢浆草科属植物的新鲜或干
燥根 , 因其有良好的药用作用 , 民间有用其作为偏方治疗糖
尿病 , 使用方便 ,效果良好。
本研究利用 STZ选择性破坏小鼠胰岛 β细胞 , 使机体内
胰岛素分泌不足 , 使血糖值持续稳定升高而建立糖尿病模
型 [ 8] 。经杨桃根多糖治疗 14 d后 , 实验结果表明 ,杨桃根多
糖高剂量组可明显缓解糖尿病小鼠的体重减轻 ,提高糖尿病
小鼠存活率趋势;同时杨桃根多糖高 、低剂量组对改善糖尿
病小鼠的高血糖状态有良好的作用。
已有大量的研究表明:增加胰岛素敏感性 , 改善胰岛素
抵抗已成为预防和治疗糖尿病的关键措施 [ 9]。 本实验结果
表明:杨桃根多糖在一定程度上降低血清胰岛素水平 , 提高
机体胰岛素敏感指数 , 从而阻止了胰岛素抵抗的发生 , 说明
该药降糖作用机理可能为增强机体对胰岛素的敏感性以及
修复胰岛 β细胞从而改善机体胰岛素抵抗。
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电导法测定水溶性表面活性剂临界胶束浓度研究
吴 敏 1, 2 ,  周朝森 2 ,  龙 然 2 ,  郑恩志1
(1.成都医学院药学院 ,四川 成都 610081;2.成都中医药大学药学院 ,四川 成都 611730)
收稿日期:2008-06-03
基金项目:四川省教育厅科研基金课题(2006C051)
作者简介:吴 敏(1974-),女 ,讲师 ,主要从事药物新剂型新技术研究。 Tel:(028)88051652
关键词:十二烷基硫酸钠;临界胶束浓度;添加物
中图分类号:R284.1     文献标识码:B     文章编号:1001-1528(2009)09-1440-02
  在表面活性剂溶液浓度很稀时 , 当浓度增大到一定值
时 , 表面活性剂离子或分子将发生缔合 , 形成胶束(或称胶
团)。胶束的形成是发生胶束增溶作用的前提条件 , 而临界
胶束浓度(CriticalMiceleConcentration, 简称 CMC)则是表面
活性剂形成胶束的最低浓度 , 是表面活性剂在水中形成胶束
的标志之一 , 也是表面活性剂与溶液性剂的重要分界线 [ 1] 。
由于表面活性剂溶液的一些物理性质 , 如表面张力 、摩尔电
导率 、增溶作用等随着胶束的形成而发生突变 , 利用这些性
质与表面活性剂浓度之间的关系 ,通过测定发生这些突变时
的转变点 , 可推测出表面活性剂的临界胶束浓度。
电导率法是测定离子型表面活性剂临界胶束浓度的一
种经典方法。离子型表面活性剂在稀溶液中能电离 ,分别以
正 、负离子的形式存在 , 其稀溶液的性质与正常的强电解质
溶液相似 , 溶液的电导率随浓度的上升而增加。离子型表面
活性剂的导电性质在 CMC前后有很大不同。 在 CMC之前 ,
离子型表面活性剂分子以单个分子导电 , 浓度增加 , 电导率
成正比的增大;在 CMC之后 , 以单体分子和胶束聚集体的形
式导电 , 增加表面活性剂浓度 , 电导率的增大率大大减少。
在浓度一电导率图上表现为前后直线斜率的变化 ,两条不同
斜率的直线的交点所对应的浓度即 CMC[ 2] 。
十二烷基硫酸钠是一种阴离子型表面活性剂 , 在药剂
中 , 许多难溶性药物在水中的溶解度很小 ,此时经常利用表
面活性剂的增溶作用提高药物的溶解度。因此《中国药典 》
2005年版附录 Ⅹ Ⅸ D“缓释 、控释和迟释制剂指导原则”规
定 , 控释制剂的体外药物释放度试验可采用溶出度仪进行。
脱气的新鲜蒸馏水为最佳的释放溶剂 ,对难溶性药物不宜采
用有机溶剂 , 可加少量表面活性剂(如十二烷基硫酸钠等)。
为此 , 我们探讨了温度为 37 ℃时及相应温度时难溶性药物
添加物对十二烷基硫酸钠 CMC的影响 ,现将研究结果报道
如下。
1 实验方法
1.1 仪器和药品
DDS-11A型数显电导率仪(上海虹益仪器仪表有限公
司);DJS-10C型电导电极(上海虹益仪器仪表有限公司);数
显恒温水浴锅 HH-2型(上海常思工贸有限公司)。
十二烷基硫酸钠(分析纯);岩白菜素(西昌市杰象药物
原料有限公司 ,批号:20070311);HCl(分析纯);高纯水。
1.2 实验步骤
十二烷基硫酸钠经 80 ℃烘干 3 h后 ,用高纯水准确配
制其 0.020 mol/dm3 溶液。分别在量瓶准确配制浓度为
(0.001-十二烷基硫酸钠岩白菜素等量添加物溶液电导率和
浓度的关系)、 0.002、 0.004、 0.006、 0.007、 0.008、 0.009、
0.010、0.012、0.014、0.016、 0.018、 0.020 mol/dm3的十二烷
基硫酸钠溶液 20 mL[ 3] 。按浓度从稀到浓顺序 ,用电导率仪
分别测定水浴恒温(37±0.2)℃下的各溶液电导率值 , 待电
导率仪测量数据稳定后记录数据 [ 4] 。
按上述浓度配制十二烷基硫酸钠的等量岩白菜素溶液 、
岩白菜素饱和溶液 ,同法进行测定。
2 结果与讨论
测定结果如图 1、2、3所示。 37℃温度下的CMC数值采
用最小二乘法分段进行直线拟合确定 , 拟合公式为 y=a+
bx, y为电导率 , x表示浓度 。浓度拟合结果如表 1所示。数
据处理结果表明 ,十二烷基硫酸钠在高纯水 、等量岩白菜素
溶液和岩白菜素饱和溶液中的 CMC分别近似为 0.006 4、
0.006 6和 0.008 4 mol/dm3。
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