全 文 :3.2 各组大鼠血浆及结肠组织 VIP变化比较 结果见表 1。
表 1 各组 VIP含量变化的比较( x±s) pg· ml-1
组别 血浆 VIP 结肠组织VIP
空白 21.64±3.04 60.52±6.62
模型 26.59±3.61* 73.48±6.61**
水提取法提取液 21.76±3.75△ 60.68±6.36△△
半仿生提取醇沉淀法提取液 33.38±5.05 83.12±10.20
水提取醇沉淀法提取液 34.95±5.88 69.96±9.68
生物提取法提取液 24.29±2.52 67.16±8.45
半仿生法提取液 20.81±3.17△△ 60.00±6.64△△
与空白组比较 , *P<0.05, **P<0.01;与模型组比较 , △P<0.05, △△P<
0.01;n=8
4 讨论
半仿生提取法(Semi-bionicExtractionMethod, 简称 SBE法)
是利用 “灰思维方式 ”, 将整体药物研究法与分子药物研究法相
结合 , 从生物药剂学的角度为经消化道给药的中药制剂创立的一
种提取新技术。它模拟口服给药及药物经胃肠道转运的过程 ,适
合工业化生产 , 体现中医治病综合成分作用的特点 , 有利于用单
体成分控制制剂质量 。
从实验结果来看 ,半仿生法提取的效果最好 , 对血浆及肠组
织 VIP均有极显著性差异;水提取法提取对肠组织有极显著性差
异 , 对血浆 VIP有显著性差异;而其它几种提取方法无差异。然
而从这几种提取液中的主要成分分析 , 比如多糖含量 、指标性成
分来看 , 水提取液 、水提醇沉法的含量最高 ,生物提取法提取液含
量次之 ,半仿生提取法及半仿生提取醇沉淀法含量最低 , 可见中
药复方起效是整体作用的结果 , 这符合中药复方的多药物 、多成
分的配伍组合后有协同增效的作用特点 ,为中药复方的研究提供
进一步的研究思路 ,中药复方用半仿生提取值得进一步的探索和
研究。
参考文献:
[ 1 ] 贾 波 ,李晓红.粱 煜 ,等.白术茯苓汤对脾虚大鼠胃肠激素的影
响 [ J] .成都中医药大学学报 , 2001, 24(4):47.
[ 2 ] 魏 华 ,贾 波 ,张丰华 , 等.白术茯苓汤分煎 、合煎及醇提对脾虚
大鼠血管活性肠肽的比较研究 [ J] .中药药理与临床 , 2007, 23
(5):37.
[ 3 ] 张瑞亭 ,张兆旺 , 孙秀梅.思维方式的转换与中药半仿生提取法
[ J] .中国中药杂志 , 1997, 22(9):542.
[ 4 ] 陈惠结 ,王晓芳 ,陈俊方.中药 “半仿生提取 ”的进一步仿生化构想
[ J] .基层中药杂志 , 1998, 12(3):18.
[ 5 ] 王淑玲 ,张兆旺 ,孙秀梅 ,等 ,半仿生 -酶法提取的半夏白术天麻汤
中甘草次酸的含量测定 [ J].承德医学院学报 , 2008, 25(2):119.
收稿日期:2009-06-12; 修订日期:2009-12-31
基金项目:新疆维吾尔自治区科技基础条件平台建设项目(No.PT0708)
作者简介:玛依拉·买买提依明(1959-), 女(维吾尔族),新疆乌鲁木齐
人 ,现任新疆维吾尔自治区药物研究所维吾尔药研究室高级实验师 ,学士
学位 ,主要从事植化及维吾尔药材质量标准研究工作.
*通讯作者简介:杨伟俊(1973-), 男(汉族),甘肃定西人 , 现任新疆维吾
尔自治区药物研究所维吾尔药研究室副研究员 ,博士学位 ,主要从事维吾
尔药物及天然药物化学研究工作.
新疆圆柏叶药材质量标准的探讨
玛依拉·买买提依明 ,满尔哈巴·海如拉 ,于 睿 ,杨伟俊*
(新疆维吾尔自治区药物研究所 ,新疆 乌鲁木齐 830004)
摘要:目的 建立新疆圆柏叶药材质量标准。方法 采用显微鉴别法 、理化鉴别法 、薄层色谱法 、挥发油测定法进行定性鉴
别。结果 建立了简便 、灵敏 、重复性好的鉴别方法。结论 为有效评价新疆圆柏叶质量提供依据。
关键词:新疆圆柏叶; 维吾尔医药; 质量标准
DOI标识:doi:10.3969 /j.issn.1008-0805.2010.07.054
中图分类号:R283 文献标识码:B 文章编号:1008-0805(2010)07-1686-02
本品为柏科(Cupressaceae)植物新疆圆柏 SabinavulgarisAn-
toine的干燥枝叶 ,多年生小灌木 , 喜生于沙石的山坡上。新疆圆
柏枝叶为维吾尔族习用药材 ,维吾尔语名为 “Arqayopurmige” ,汉
语名为 “新疆圆柏叶”。我国主产于新疆 , 亦产于青海 、江西 、内
蒙古等地;国外俄罗斯 、蒙古 、巴基斯坦 、北欧 、伊朗等地亦有分
布。嫩枝叶和果实是新疆圆柏的主要药用部位。新疆圆柏作为
一种天然植物 , 在新疆广大地区均有生长 , 其自然资源十分丰富 ,
含有多种化学成分如黄酮类 、挥发油类 、萜类 、木质素类等 , 具有
多种生理功能和药用价值如抗肿瘤作用 、心血管系统作用等 ,具
有驱风镇静 、活血止痛等功能 , 用于风湿性关节炎 , 小便不利 ,迎
风流泪 , 视物不清等 [ 1] 。维吾尔医临床用于风寒头痛 、风湿性关
节炎等疑难病症的治疗 [ 2] 。国内学者对新疆圆柏叶的研究主要
集中在对其化学成分及生理活性的研究上 ,对其质量标准研究未
见文献报道 ,目前国家标准和地方标准均未见收载。因此 , 为了
给该药材的质量评价提供理论依据 ,我们对新疆圆柏叶药材进行
初步研究并起草了其质量标准。
1 材料与仪器
1.1 材料 新疆圆柏枝叶药材采自新疆石河子清水河 ,由新疆药
物研究所张彦福研究员鉴定为柏科植物新疆圆柏 Sabinavulgaris
Antoine的干燥叶。
1.2 试剂 芦丁对照品(批号 080409, 上海融禾医药科技有限公
司);硅胶 G预制板(青岛海洋化工厂分厂);水为蒸馏水 ,乙醇等
其它试剂均为分析纯。
1.3 仪器 OLYMPUSCX31型照相显微镜(北京泰克仪器有限
公司 , 型号 7K13884);旋转蒸发仪(巩义市子华仪器有限公司 , 型
号 RE-501);电子天平(余姚纪铭称重校验设备有限公司 ,型号
10002);分析天平 (赛多利斯科学仪器北京有限公司 , 型号
D000000246);DHG-9070A型电热恒温鼓风干燥箱(上海齐欣
科技仪器有限公司);挥发油提取器;ZF-20D暗箱式紫外分析
仪(巩义市予华仪器有限责任公司)。
2 方法与结果
2.1 性状鉴别 本品多分枝 , 小枝扁平 ,枝灰棕褐色 , 老枝暗褐
色 , 光滑。叶交互对生;菱形或菱状卵圆形 , 叶细小鳞片状 , 鳞叶
相互紧覆 ,长 1 ~ 2.5 mm, 先端钝或微尖 , 全缘 , 下面中部生有椭
圆形腺体 , 刺形叶生于幼龄植株上 , 有时壮龄植株亦有少量刺形
·1686·
时珍国医国药 2010年第 21卷第 7期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.7
叶 , 排列紧密 , 向上斜伸不开展 , 长 3 ~ 7 mm, 上而凹入 , 中肋明
显 , 被白粉。叶贴伏于枝上 ,深绿色或黄绿色。质脆 ,易折断。气
清香 , 味苦涩 、微辛。
2.2 显微鉴别
2.2.1 切片的制作方法 取材※软化※脱水※透明※浸蜡※包
埋※切片※粘贴※脱蜡※染色制片※封藏※贴标签。
2.2.2 嫩枝横切面 呈椭圆形 , 中央为小枝部分 , 两侧为鳞片状
叶。鳞叶表皮细胞 1列 , 排列整齐 ,外被厚角质层;鳞叶中部有较
大的类圆形或椭圆形的空腔;叶肉栅栏细胞短柱状 , 海绵组织细
胞较大 、排列疏松;小枝部下皮细胞类长方形 , 排列整齐 , 木质部
由管胞组成;中央髓部扁小 ,髓射线明显。见图 1。
1.表皮细胞 2.叶肉组织 3.小枝韧皮部
4.小枝木质部 5.小枝髓部
图 1 圆柏叶横切
2.2.3 粉末装片制作方法 将药材研粉※过 60目筛※置载玻片
上※加水合氯醛 1 ~ 2滴透化※加甘油 1 ~ 2滴※盐酸间苯三酚
染色※装片※显微下观察。
2.2.4 粉末特征 粉末绿色 , 表皮细胞类长方形 , 长 47.5 ~ 125
μm,宽为 12.5 ~ 25μm;气孔甚多 ,凹陷形 , 保卫细胞较大 , 长径约
为 50μm;纤维细长 ,单个或成束 , 直径约 7.5 ~ 20μm;木薄壁细胞
多见 , 长为 30 ~ 72.5μm,宽为 17.5 ~ 42.5μm。见图 2。
1.木薄壁细胞 2.表皮细胞 3.纤维 4.气孔
图 2 圆柏叶粉末
2.3 理化鉴别 取本品粗粉(过 20目筛)0.5g, 加甲醇 5ml,振摇
后浸渍 1h,滤过 , 滤液供下述实验:①取滤液 1ml, 加三氯化铁试
液 1 ~ 2滴 ,溶液变为墨绿色。 ②取滤液 1ml, 加 5%亚硝酸钠和
5%硝酸铝各 5滴 , 混匀 , 加 5%氢氧化钠溶液 5滴 , 溶液变为红
色。
2.4 薄层鉴别
2.4.1 对照品溶液的制备 取芦丁对照品 1.5 mg,加甲醇 10 ml
制成 0.15 mg/ml的对照品溶液。
2.4.2 供试品溶液的制备 取本品粗粉 1 g,加 40 ml50%甲醇 ,
在 80℃水浴加热回流提取 1 h, 乘热过滤 , 水浴蒸干 , 残渣用 20
ml热水溶解 ,置分液漏斗中 , 第 1次用石油醚(60 ~ 90 ℃)20 ml
萃取;第 2次用醋酸乙酯 30ml萃取;第 3次用正丁醇 30ml萃取 ,
水浴蒸干 , 残渣加 2 ml甲醇溶解 ,作为供试品溶液 [ 3] 。照薄层色
谱法试验 [ 4] , 取正丁醇部分样品及芦丁对照品(0.15 mg/ml)各
2μl点于硅胶 G预制板上 , 用醋酸乙酯 -甲酸 -水(8∶ 1.5∶
0.5)展开 , 取出凉干 , 用 1%三氯化铝乙醇溶液显色 , 置紫外灯
(365 nm)观察 , 结果样品与对照品在同一位置上显相同颜色的
荧光斑点。见图 3。
1~ 3.正丁醇供试品溶液 4.芦丁对照品溶液
图 3 圆柏叶薄层鉴别
2.5 挥发油测定 照挥发油测定法(《中国药典》 2005年版Ⅰ部 ,
附录 XD)测定 [ 4] , 取新疆圆柏枝叶粗粉 150 g(过 20目), 置
1 000 ml圆底烧瓶中 , 加 600 ml水 ,加数粒玻璃珠 , 置电热套中 ,
接的挥发油提取器及冷凝管 , 加热回流提取挥发油 ,并保持微沸
约 5 h,得 3.8 ml挥发油 , 2.53%(ml/g)。暂定本品挥发油含量
不得少 2%(ml/g)。
3 讨论
本研究首次对新疆圆柏叶药材进行了质量标准初步研究 , 为
控制药材内在质量 、为进一步开发利用新疆圆柏叶资源奠定基
础。
根据文献 [ 2]报道 , 从新疆圆柏的醋酸乙酯部位中分离得到
了芦丁等 9个黄酮类化合物 , 因此我们选用芦丁为对照品 ,建立
了黄酮薄层色谱检查项 ,进行了薄层鉴别试验 , 结果该鉴别方法
简单 、薄层色谱斑点清晰 、显而易见 、重复性好。在薄层分离过程
中 , 曾用 3种展开剂进行薄层层析分离 , 但醋酸乙酯部位在前 2
种展开剂中与对照品溶液相同位置无相同的斑点 ,正丁醇部位在
前 2种展开剂中与对照品溶液有相同的斑点 ,但展开效果不够理
想 , 因此再次调整展开剂的比例 , 改用第 3种展开剂后 ,展开效果
明显改善 , 正丁醇萃取部位与对照品色谱相应位置上显相同颜色
的斑点 。
根据文献 [ 5]新疆圆柏枝叶含有挥发油成分 , 该植物具有浓郁
芳香气味 ,维吾尔药的功效体现在多种成分的协调作用上。因此
为控制该药材内在质量 ,以测定挥发油含量为考察指标 , 对其进行
挥发油含量测定 , 暂定本品挥发油含量不得少于 2%(ml/g)。
该质量标准研究过程中 ,只收集到一批药材并仅对其性状鉴
别 、显微鉴别 、理化鉴别 、薄层鉴别 、挥发油测定进行初步探讨 , 今
后还需要逐步扩大样本量且进一步补充 、完善其它鉴别 、检查项 ,
才能全面反映各地药材的质量信息。
参考文献:
[ 1 ] 刘勇民.维吾尔药志 ,上册 [ M] .乌鲁木齐:新疆科技卫生出版社 ,
1999:552.
[ 2 ] 赵 军 ,闫 明 , 黄 毅 ,等.新疆圆柏叶黄酮类成分的研究 [ J] .
林业化学与工业 , 2008, 28(4):33.
[ 3 ] 卫星星.苦荞籽壳中黄酮类化合物的定性定量研究 [ J] .数理医药
学杂志 , 2007, 20(4):537.
[ 4 ] 国家药典委员会.中国药典 , Ⅰ 部 [ S] .北京:化学工业出版社 ,
2005.
[ 5 ] 许 伟 ,王武宝 , 巴 杭 , 等.新疆圆柏挥发油化学成分分析 [ J] .
光谱实验室 , 2005, 22(3):622.
·1687·
LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2010VOL.21NO.7 时珍国医国药 2010年第 21卷第 7期