全 文 ：第 15 卷　第 3 期 　　　　　　　　　　　　　　云南农业大学学报　　　　　　　 Vol.15　No.3
2000 年　9月 　　　　　　　　　　Journal of Yunnan Ag ricultural University　　　　　 Sep.2000
蚕豆茎疫病菌侵染蚕豆途径的研究
黄　琼　杨永红　汤翠凤　陈兴全　张世光
(云南农业大学 ,云南省植物病理重点实验室 ,昆明 650201 )
摘要:蚕豆细菌性茎疫病是云南蚕豆上的重要病害。通过系统分离和接种试验研究证明 ,蚕豆茎疫病菌可从叶 、茎
尖 、茎 、花侵入 , 以伤口侵入为主 ,雨水多及土壤湿度大是该病传播蔓延的主要途径。
关键词:蚕豆茎疫病;侵入途径
中图分类号:S 435.23　　文献标识码:A　　文章编号:1004-390X(2000)03-0245-02
　 　 蚕 豆 茎 疫 病 菌 (Psoudmonas fabae
T.F.Yu)〔1 , 2〕 ,在蚕豆整个生育期均可致病 ,造成
死苗 、花腐 、叶坏死 、茎枯 。严重时全田黑枯象火烧
一样 ,造成绝产。通常情况下发病率等于损失率 ,
在云南省大理州等多个县造成严重减产 。到目前
为止 ,仅对病原菌的致病性作过研究〔3〕 ,对其病菌
侵入及传播途径均未见报道。为此 ,本试验对与此
相关问题进行了研究 。
1 　材料与方法
1.1 　标本的采集
采集了 15个县(市)不同生育期 ,不同症状病
害标本 ,见表 1。
1.2 　自然病圃观察
自然病圃设于云南农业大学附近蒜村的定点
田块 ,该田连作蚕豆 5年以上 ,在苗期 、初花期 、盛
花期 、结荚期 、鼓粒期各调查 1次 。观察病害发生
部位及严重程度 。
1.3 　病株各部位及病残体的系统分离检测
选取 5株有代表性的病株 ,用全氏 B平板 ,经
不同部位(病叶 、病茎 、病花 、病豆荚 、种子 、根部)
进行组织分离 ,选取颜色 、形态一致的菌落划线纯
化。
所采集病害标本主要为苗期 、花期 ,结荚期的
较少 ,故而对病叶 、病茎 、根部(正常)3个部位的带
菌量进行检测 ,以每个部位取 0.1 g 病组织加　10
mL 灭菌水浸泡 25 min ,取 100μL 倍比稀释 ,涂平
板 ,计算每克干组织含菌量 ,以健康组织为对照。
定期分离检测室内存放病株以及将病株埋入
土壤中的病原存活情况 。
1.4 　致病性测定
取各部位菌株 3个 ,温室进行致病性测定。接
种浓度 105 ～ 108 cfu/mL ,以摩擦 、针刺 、伤口接种;
以喷雾 、浸根 、土壤接种〔4〕 ,查病菌侵入 、传播途
径。
2 　结果
2.1 　自然病圃发病情况
该病可以从茎尖 、花 、叶和茎杆侵入。植株茎
尖受侵染变成黑色发生萎蔫 ,可从植株茎尖开始逐
渐向下传染 ,感病的叶片开始时边缘变成褐色 ,后
迅速变成黑色 ,直至整片叶变成黑色直至枯死 ,初
感染的植株从叶柄 、茎部向下或向上扩展延伸 ,花
受害变黑枯死 ,茎杆呈长条形黑褐色病斑。在温度
较高的晴天 ,典型症状是茎部变黑且发亮。高温高
湿条件下 ,叶片及茎部病斑迅速扩大变黑腐烂。发
病最适生育期是开花至结荚期。
2.2 　病株各部位的带菌情况
从表 1可看出 ,根 、茎 、叶 3个部位带菌量总体
为茎>叶 >根。通过采集 15个县市病害标本统
计 ,发现蚕豆发生茎疫病最适生育期是开花至结荚
期 ,与大田病圃观察的一致。
收稿日期:2000-04-18
　基金项目:云南省教委和云南省科委资助项目(98CO35M)
　作者简介:黄琼(1963-), 女 ,四川合川县人 , 副教授 ,硕士 , 主要从事植物病原细菌的研究。
表 1 　标本来源及各部位带菌情况
Tab.1　Source of specimen and amount of bacteria in various parts of plant
标本来源 生育期 分离部位及带菌量/cfu·g-1叶 茎 根
玉溪 结荚期 2×1014 7.8×1011 5×106
新平 结荚期 3×1014 4×1020 3×1016
保山市 开花期 3×1014 4×1016 2.4×1013
保山汉庄 开花期 10×1019 1.04×1020 1.13×1020
文山 开花期 3×1010 8.1×1010 1.1×107
景东 生长期 10×1017 4×1016 3.5×1010
宣威 生长期 3.2×1019 3×1016 1.68×1018
盈江 开花期 2.1×1021 1.02×108
昭通 结荚期 2.52×1022 1.86×1024 2×1016
剑川 开花期 1.3×109 3×1010 6×108
昆明 结荚期 1.82×1024 1.42×1026 6×1019
呈贡 开花期 7.06×1016 3×1016 3.52×1010
宁蒗 苗期 10×1013 8×1016 10×1012
永胜 结荚期 10×1014 2.3×1022 14.4×1012
双江 开花期 8.9×1011 10×1017 4.8×1012
CK 开花期 6.1×105 4×1010 6.1×1013
2.3 　致病性
从不同部位分离到细菌 ,经回接发现病叶 、病
茎 、病花部位的分离物具有致病性 。
通过 5种接种方法 、4 种接种浓度的比较 ,发
现针刺叶片接种 、摩擦叶片接种 、伤口茎杆接种均
发病 ,常规喷雾和浸根接种没有表现症状(表 2)。
表 2 　不同接种方法 、不同接种浓度的发病率
Tab.2　Disease-rate of different inoculated methods and
bacterial suspension concentration
单位:%
接种方法 菌液浓度/cfu·mL
-1
108 107 106 105
针刺叶 100 100 65 30
伤茎 80 70 40 21
摩擦叶 100 100 75 40
喷雾 0 0 0 0
浸根 0 0 0 0
　　注:针刺 、摩擦接种为病叶率(%),喷雾和浸根接种　
　为病株率(%)。
针刺叶片接种 2 d后开始发病 ,90%的蚕豆苗
发病 5 d后病斑不再继续扩展 , 10%的蚕豆苗发病
12 ～ 18 d后病斑不再继续扩展;伤口茎杆接种多
数菌株 7 d后开始发病 ,潜育期长短不一 ,平均　
12 d开始发病 ,病斑扩展时间较叶片长 ,发病重的
20 d全株枯死;前 3种方法均可用于试验 , 效果较
好 ,菌液浓度为 107 cfu/mL ～ 108 cfu/mL , 发病率
(病叶率)100%,菌液浓度为 105 cfu/mL ～ 106 cfu/
mL , 发病率为 30%～ 60%。
2.4 　侵染来源 、侵染时期和侵入途径
经定期分离检测 ,病株室内存放 1年以上仍有
存活的病原 ,该病原可在土壤中存活 1年以上。通
过 1997 ～ 1999年连续定点调查表明:病斑总是在
温度突然下降 ,湿度较高(雨季/雨后)集中出现 ,老
病区每年都发病。因此 ,土壤及病残体无疑是该病
的初侵染来源。自然条件下 ,田间症状最早在 11
月中旬出现 ,一般 12月至次年 1月大面积爆发流
行 ,植株正处于开花至结荚期 ,阴雨或大雨后田间
发病急剧增多 。因此 ,雨水或淹水及土壤湿度大是
造成该病传播蔓延的主要途径。
3 　结论
人工接种蚕豆茎疫病菌可从叶 、茎尖 、茎 、花侵
入 ,豆夹亦可发病。但浸根及土壤接种没有表现症
状。说明该病原能从蚕豆地上部侵入 ,不能从蚕豆
根部侵入 ,这一结果与文献〔1〕报道的一致。与田
间症状相吻合 。初侵染来源为土壤及病残体 ,该病
以伤口侵入为主 ,亦可从自然孔口侵入 。雨水或淹
水及土壤湿度大是该病传播蔓延的主要途径。
(下接 259)
246 云南农业大学学报 　　　　　　　　　　　　　　第 15卷
Identification of Mei Diseases in Yunnan
Wang Yingxiang　Pu Weiqiong
(Phy topathology Lab of Yunnan Province , Yunnan Ag ricultural University , Kunming 650201)
Abstract　This paper repo rted 11 species diseases of Prunus mume (Sieb.)Sieb.et Zucc.in Yunnan.A-
mong them 10 diseases are reported for the fi rst t ime in Yunnan , Two Host plant new reco rds in China.
Key words　Mei diseases;Identification;New records
(上接 246页)
参　考　文　献
1　Yu T F.Stem Blight of Broad Bean〔〕.Bulletin of the
Chinese.Bo tanical Society , 1936 , 2:32 ～ 42
2　阮兴业.云南省蚕豆茎疫病病原鉴定〔J〕.云南农业科
技 , 1987 , 1:3～ 8
3　黄琼 , 孙跃先.蚕豆茎疫病菌对蚕豆致病性的初步研究
〔J〕.华中农业大学学报 , 1999 , 27:44 ～ 47
4　方中达编.植病研究方法〔M〕.北京:中国农业出版社.
1998
Study on Pathways of Broad Bean by Peudomonas fabae
Huang Qiong　Yang Yonghong　Tang Cuifeng　Chen Xingquan　Zhang Shiguang
(Phy topatho logy Lab of Yunnan Province , Yunnan Agrocultural Univ ersity , Kunming 650201 )
Abstract　Stem blight of broad bean is an important disease in Yunnan Province.Reseach on isolation by dif-
ferent parts of plant and inoculation by various methods show ed that Pseudomonas fabae could infect broad
bean through leaf , tip bud , stem as w ell as f low er , and mianly invade plants through w ounds.The rainy day
and high soil humidity were favo rable for the disease spread.
Key words　Broad bean;Pseudomonas fabae;Invading pathw ay
259第 3期　　　　　　　　　　　王英祥等:云南梅花病害鉴定研究