全 文 ：文章编号:1001-7658(2010)01-0045-02　　　 【论 著】
山楂核提取物杀菌效果的试验观察
包卫华 ,慈九正 ,彭国克 ,王　劲 ,李凤玲 ,肖　潇
(北京市疾病预防控制中心 ,北京　100013)
提要　目的　观察山楂核提取物杀菌效果 ,为其在消毒方面应用提供科学依据。 方法　采用悬液定量杀菌试验及
现场试验方法进行了实验室和现场试验。结果　以含总酸 99.3 g/L的山楂核提取液溶液作用 1 min,对悬液内大
肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、白色念珠菌 、铜绿假单胞菌的杀灭对数值均 >5.00。用该山楂核提取物溶液擦拭皮肤作
用 1 min,对皮肤上自然污染菌平均消除对数值均 >1.00, 处理后皮肤上自然污染菌残留菌数均≤1.6cfu/cm2。结
论　该山楂核的提取物溶液对细菌繁殖体和真菌具有良好的杀灭作用 ,对皮肤上自然菌杀灭效果较好。
关键词　山楂核提取物;杀菌效果;细菌繁殖体;真菌
中图分类号:R187　　　　　文献标识码:A
EXPERIMENTALOBSERVATIONONGERMICIDALEFFICACYOFHAWTHORNKERN
EXTRACT
BAOWei-hua, CIJiu-zheng, PENGGuo-ke, WANGJing, LIFeng-ling, XIAOXiao
(BeijingMunicipalCenterforDiseasePreventionandControl, Beijing　100013, China)
Abstract　 Objective　Toobservethegermicidaleficacyofhawthornkernextractinordertoprovidescientificbasisfor
itsapplicationtodisinfection.Methods　Suspensionquantitativegermicidaltestandon-the-spottrialmethodwereused
tocarryoutlaboratoryandon-the-spottests.Results　ThekillinglogarithmvaluesofEscherichiacoli, Staphylococcus
aureus, CandidaalbicansandPseudomonasaeruginosainsuspensionexposedtothesolutionofhawthornkernextractcon-
tainingtotalacid99.3 g/Lfor1 minwere>5.00.Wipingtheskinwiththesolutionofhawthornkernextractandcontact
for1 mineliminatedthenaturalcontaminatingbacteriaonskinbyalogarithmvalue>1.00 inaverage.Theresidualnatu-
ralcontaminatingbacteriaonskinaftertreatmentwas≤1.6 cfu/cm2.Conclusion　Thehawthornkernextractsolutionhas
goodkillingefectonvegetativeformsofbacteriaandfungiandgoodefficacyinkilingnaturalbacteriaonskin.
Keywords　hawthornkernextract;germicidalefficacy;vegetativeformsofbacteria;fungi
〔作者简介〕　包卫华(1969-),女 ,大专 ,主管技师 ,现主要从事疾
病预防控制工作。
　　山楂为蔷薇科植物山里红 ,属于传统的中药材 ,
其果肉 、叶及核均可以入药 。目前 ,国内外对山楂的
化学成分 、药理作用 、临床应用及不良反应等方面进
行了大量的研究〔1, 2〕。本研究山楂核提取物 (绿康
中朗牌皮肤黏膜植物消毒液 ,由北京鑫陆阳洋科技
发展有限公司研制),为淡黄色液体 ,无不良气味 ,
其制剂原液含总酸量为 99.3g/L。为研究该山楂核
提取物的杀菌效果 ,以便研究其在消毒方面的应用 ,
进行了实验室和现场试验 。现将结果报告如下 。
1　方法
1.1　总酸的测定
取本研究山楂核提取物原液 10.0 ml,置于 100
ml容量瓶中 ,加水至刻度 ,混匀后吸取 20.0 ml,置
于 200ml烧瓶中 ,开动磁力搅拌器。在搅拌中用氢
氧化钠标准溶液滴定至酸度计指示 pH8.2,记下消
耗氢氧化钠标准溶液的量(ml数),计算总酸的含
量。重复测定 2次 ,取其平均值。
1.2　稳定性试验
将密封包装的该山楂提取物原液一式 3份 ,置
于 37℃恒温存放 3个月 ,测定其储存前后的样品总
酸的含量 ,计算总酸下降率。重复测定 2次 ,取其平
均值 。
1.3　杀菌试验
1.3.1　菌悬液制备　试验菌为大肠杆菌(8099)、
金黄色葡萄球菌(ATCC6538)、白色念珠菌(ATCC
10231)、铜绿假单胞菌(ATCC15442),由中国普通
微生物菌种保存中心提供。将各试验菌经分离和纯
化 ,选取典型菌落 ,接种各菌特定的培养基斜面 ,培
养 24 h。用含 10 g/L蛋白胨的磷酸盐缓冲液
(PBS)洗下 ,并制备成试验浓度菌悬液。
1.3.2　中和剂鉴定试验　以金黄色葡萄球菌 、白色
念珠菌和铜绿假单胞菌为代表 ,设计 6组试验 ,按悬
液定量杀菌试验中和剂鉴定试验方法进行。试验结
·45·中国消毒学杂志 2010年第 27卷第 1期
果评价 ,以第 1组无试验菌生长或仅有少量试验菌
生长 ,第 2组菌数较第 1组为多 ,第 3、4、5组有相似
量试验菌生长且组间菌落数误差率不超过 15%,第
6组无菌生长时 ,表明所选中和剂及其浓度适宜 。
试验重复 3次。
1.3.3　悬液定量杀菌试验　试验在 20℃水浴条件
下进行 ,将试验浓度的山楂核提取物溶液和菌悬液
经过恒温。在无菌试管内加入 30 g/L牛血清白蛋
白溶液与试验菌悬液各 0.5 ml混匀 ,再加入 4 ml
(阳性对照为 PBS)消毒液混匀。作用至预定时间 ,
取 0.5ml菌药混合液加入到盛有 4.5 ml中和剂的
试管内 。中和作用 10min后 ,吸取 1.0ml用倾注法
接种培养 ,进行活菌计数 ,计算杀灭对数值 。试验重
复 3次 。
1.4　对皮肤表面消毒现场试验
随机选取 30名受试者 ,试验时令受试者将左右
前臂内侧中段相互充分对搓。消毒处理前 ,用无菌
棉拭沾湿采样液在受试者一侧前臂内侧中段 5cm×
5cm的区域内作涂抹采样 ,采样后将棉拭采样端剪
入 10ml采样液管内作为阳性对照。然后用该消毒
液原液涂擦另一侧前臂内侧中段并作用 1min,按上
述相同方法对消毒后区域作涂抹采样 ,将棉拭采样
端剪入 10 ml中和剂的试管内 ,中和 10min后 ,连同
阳性对照一起进行充分洗脱后作活菌计数培养 ,计
算对皮肤自然菌的消除率 。
2　结果
2.1　山楂核提取物总酸含量测定结果
试验结果表明 ,该山楂核提取物制剂原液总酸
的含量平均为 99.3 g/L。
2.2　稳定性试验结果
经测定 ,将密封包装的该山楂核提取物制剂原
液置于 37℃恒温存放 3个月后 ,其原液总酸的平均
含量由储存前的 99.3g/L下降到 92.7 g/L,原液总
酸的含量下降率平均为 6.65%。
2.3　中和剂鉴定试验结果
试验结果表明 ,用含 5 g/L卵磷脂 、20 g/L吐温
80的磷酸液缓冲液作为中和剂 ,可有效中和最高试
验浓度的山楂核提取物溶液对试验菌的残留作用 ,
且中和剂 、中和产物对试验菌生长无明显影响(表
1)。
2.4　杀菌试验结果
结果表明 ,用该山楂核提取物制剂原液作用 1
min,对悬液内大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌 、白色念珠
菌 、铜绿假单胞菌的杀灭对数值均 >5.00(表 2)。
2.5　对皮肤表面消毒现场试验结果
经 30人次结果表明 ,用该山楂核提取物溶液擦
拭皮肤作用 1min,对皮肤上自然污染菌平均消除对
数值均 >1.00,处理后皮肤上自然污染菌残留菌数
均≤1.6 cfu/cm2。
表 1　山楂提取物中和剂选择试验结果
组别 各菌平均回收菌数(cfu/ ml)金黄色葡萄球菌 白色念珠菌 铜绿假单胞菌
1 　　　　　 0 　　　　　0 　　　　　0
2 182 198 326
3 18 000 000 15 400 000 25 200 000
4 17 800 000 15 000 000 24 800 000
5 19 200 000 16 600 000 26 500 000
6 0 0 0
　表 2　皮肤黏膜植物消毒液对不同试验菌的杀灭效果
试验菌株 阳性对照菌数对数值
作用不同时间(min)的平均
杀灭对数值
0.5 1.0 1.5
金黄色葡萄球菌 7.16 5.08 5.32 6.08
大肠杆菌 7.26 5.06 5.35 6.15
白色念珠菌 7.02 4.59 5.11 5.68
铜绿假单胞菌 7.23 4.98 5.26 5.70
3　讨论
目前市场上皮肤表面消毒剂的品种较多 ,其产
品的主要成分 、杀菌效果及毒性各有不同。我国研
究开发中草药在抗菌和消毒方面的应用研究报道较
多〔4 ～ 6〕 ,但将中草药制剂应用于消毒实践还有很长
的路要走 。关于山楂提取液杀菌效果 、影响杀菌作
用的因素以及储存稳定性均有文献报道 〔4〕。我们
对以蔷薇科植物山楂的种子山楂核的提取物为主要
原料制成的皮肤黏膜植物消毒液进行了杀菌效果的
观察与评价 ,并得到良好的试验结果。试验证明 ,山
楂核提取物不仅能有效杀灭细菌繁殖体和真菌 ,对
人体皮肤上自然菌杀灭效果也比较明显 ,为该制剂
进一步进行应用研究提供了有价值的依据。
参 考 文 献
〔1〕　陈佳 ,宋少江.山楂的研究进展 [ J] .中药研究与信息 , 2005, 7
(7);20.
〔2〕　罗玉梅 ,王贺振.山楂的化学成分及药理研究进展 [ J] .时珍国
医国药 , 2004, 15(1);53.
〔3〕　GB/T5009.食醋卫生标准 [ S] .2003:1～ 4.
〔4〕　林玲 ,陈玉杰 ,李俐 ,等.山楂液杀灭微生物作用及其影响因素
的试验观察 [ J] .中国消毒学杂志 , 2000, 17(2):85.
〔5〕　肖创清 ,胡捷 ,陈敏.一种中药复方洗液抑菌效果及毒性试验
观察 [ J] .中国消毒学杂志 , 2005, 22(3):303.
〔6〕　高俊发 ,张秀英.一种植物复方消毒液杀菌效果试验观察 [ J].
中国消毒学杂志 , 2005, 22(3):305.
(收稿日期:2009-06-10)
·46· ChineseJournalofDisinfection　2010;27(1)