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山楂核提取物杀菌效果及影响因素的研究



全 文 :2.4稳定性试验结果
大蒜原液置于 37℃下密闭存放 4 d,对副溶血
性弧菌杀灭率与存放前比较有所下降 ,存放 4 h内
作用 30 min杀灭率为 100%,存放 24 h杀灭率下降
至 15.15%。食醋于 37℃存放 3个月与存放前进行
比较 ,体积分数 50%食醋对副溶血性弧菌作用 10
min,储存前杀灭率为 99.52%,储存后杀灭率为
99.14%,杀菌稳定性基本无变化 。
3讨论
副溶血性弧菌是一种嗜盐菌 ,主要存在于近海
岸的海水 、海底沉积物和鱼类 、贝类等海产品中 ,常
见引起副溶血性弧菌食物中毒的海产品为海虾 、蟹
类 、鱼类 、毛蚶等。副溶血性弧菌对热敏感 ,加热到
90℃ 1min可将其彻底杀死 ,但沿海地区居民有食
用鲜嫩凉拌海产品的习惯 ,在食用前如加热不彻底 ,
会有副溶血性弧菌存活 ,易引起副溶血性弧菌食物
中毒。大蒜液与食醋的抗菌作用已得到证实 〔5〕。
本研究结果表明 ,新鲜大蒜原液对副溶血性弧
菌作用 30min,杀灭率可达 100%,但新鲜大蒜液不
可长期保存 。大蒜液与食醋协同作用二者浓度可明
显降低 ,杀菌效果比较满意 。大蒜液和食醋受温度
影响明显 ,随温度升高逐渐增强;但其随有机物含量
增高而减弱。大蒜液和食醋协同应用明显降低了大
蒜和食醋的杀菌浓度和杀菌时间 ,在不破坏海产品
特有的鲜美味道的同时起到了杀灭副溶血性弧菌的
作用 。食用凉拌海产品时以适量新鲜大蒜和适当浓
度的食醋调制 ,放置 5 ~ 10 min,可有效预防副溶血
性弧菌滋生 ,对预防副溶血性弧菌污染海产品食物
中毒具有实际意义 。如何科学使用 ,达到最佳效果 ,
尚需要作进一步实用研究。
参 考 文 献
〔1〕 金利 ,周曾芬.大蒜抗菌作用的研究进展 [ J] .中华实用医学 ,
2001;14(3):21.
〔2〕 EntaniE, AsaiM, TsujihataS, etal.Antibacterialactionofvine-
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〔3〕 吴玲 ,张景隆 ,倪语里 ,等.我国沿海五省市致病性弧菌的分布
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(2006-06-12收稿)
文章编号:1001-7658(2007)01-0050-03    【研究报告】
山楂核提取物杀菌效果及影响因素的研究
李长青  吴 伟 1  佟 颖
(北京市疾病预防控制中心 ,北京 100013;1北京市东城区疾病预防控制中心)
提要 目的 为了解以山楂核提取物为主要杀菌成分的皮肤消毒剂的杀菌效果及其他相关性能。方法 采用悬
液定量杀菌试验方法进行了实验室观察。结果 含体积分数 50%的该消毒剂作用 1 min,对大肠杆菌 、金黄色葡萄
球菌的杀灭对数值均 >5.00;含体积分数 70%的该消毒剂作用 1 min, 对铜绿假单胞菌的杀灭对数值 >5.00, 对白
色念珠菌的杀灭对数值 >4.00。影响因素试验证明 , 该皮肤消毒剂杀菌作用随着药液浓度的增加和温度的升高而
增强;随 pH值升高而减弱;有机物对其杀菌作用有一定影响。现场消毒试验结果证明 , 用该消毒液原液擦拭作用
1 min,对皮肤表面和手上自然菌的杀灭对数值均 >1.00。结论 该皮肤消毒剂对细菌繁殖体和真菌杀灭效果较
好 , 其杀菌效果受诸多因素影响。
关键词 山楂核;杀菌效果;皮肤消毒;影响因素
中图分类号:R187.2     文献标识码:B
STUDYONGERMICIDALEFFICACYOFEXTRACTOFHAWTHORNFRUITPITANDITS
INFLUENCINGFACTORS
LIChang-qing, WUWei1 , TONGYing
(BeijingMunicipalCenterforDiseasePreventionandControl, Beijing 100013; 1BeijingEastDistrictCenterforDis-
easePreventionandControl, China)
·50· ChineseJournalofDisinfection 2007;24(1)
Abstract Objective Inordertoknowthegermicidaleficacyandotherrelatedpropertiesoftheskindisinfectantwith
extractofhawthornfruitpitasthemaingermicidalingredient.Method Suspensionquantitativegermicidaltestwasused
tocarryoutlaboratoryobservation.Results ThekilinglogarithmvaluesofEscherichiacoliandStaphyloccusaureusex-
posedto50% (v/v)solutionofthisdisinfectantfor1minandPseudomonasaeruginosaexposedto70%(v/v)solutionof
thisdisinfectantfor1 minwere>5.00.ThekillinglogarithmvalueofCandidaalbicansexposedto70%(v/v)solutionof
thisdisinfectantfor1minwas>4.00.Theinfluencingfactortestdemonstratedthatthegermicidalefficacyofthisskindis-
infectantincreasedwithincreasingdrugconcentrationandtemperatureanddecreasedwithmcreasingpHvalue.Organic
substancehadcertaininfluenceonitsgermicidaleficacy.Fieldtrialresultsdemonstratedthatwipingwiththestocksolution
ofthisdisinfectantfor1minkiledthenaturalbacteriaonskinsurfaceandhandsbyalogarithm>1.00.ConclusionThis
skindisinfectanthasrelativelygoodeficacyinkilingvegetativeformsofbacteriaandfungi.Itsgermicidaleficacyisinflu-
encedbymanyfactors.
Keywords hawthornfruitpit;germicidaleficacy;skindisinfection;influencingfactor
  皮肤消毒剂是通过精选 、浓缩 、去杂 、除鞣等一
系列工艺过程从山楂核中提取其纯天然成分精制而
成的植物消毒剂 ,原液呈浅黄色澄清液体 , pH值为
2.64,有特殊的灼檀木香味 。为研究该皮肤消毒剂
杀菌效果及影响因素 ,进行了实验室杀灭微生物效
果和现场试验观察。现将结果报告如下。
1 方法 〔1〕
1.1菌悬液的制备
将白色念珠菌 (ATCC10231)、铜绿假单胞菌
(ATCC15442)、大肠杆菌(8099)和金黄色葡萄球菌
(ATCC6538)24 h新鲜斜面培养物 ,用胰蛋白胨溶
液(TPS)洗下菌苔并制备成菌悬液 ,分别取各菌悬
液与有机干扰物(30 g/L牛血清白蛋白)以 1:1混
合后制备成试验菌悬液备用。试验菌种均由军事医
学科学院消毒检测中心提供。
1.2中和剂鉴定试验
试验菌以白色念珠菌和大肠杆菌为代表 ,试验
设平行 6组 ,按悬液定量杀菌试验程序进行 。试验
结果 ,当第 1组无菌生长或仅有少数菌生长 ,第 2组
菌数较第 1组要多 ,第 3、4、5组菌数为 1×107 ~ 5×
10
7 cfu/ml且组间菌数误差不超过 10%时 ,第 6组
不长菌时 ,表明所用中和剂及其浓度适宜 。试验重
复 3次 。
1.3悬液定量杀菌试验
试验在 19 ~ 21℃水浴条件下 ,按每试管 1ml试
验菌悬液与 4 ml消毒剂比例(阳性对照组为 TPS)
混合 ,作用至预定时间 ,吸取 0.5 ml菌药混合液加
入 4.5 ml中和剂中 ,混匀 。中和作用 10 min,经充
分振荡 ,取该液或其稀释液进行活菌计数 ,计算杀灭
对数值 。所有试验重复 3次 。
1.4影响因素试验
各影响因素试验均采用大肠杆菌作为试验菌 ,
所有试验均重复 3次 。
1.4.1温度的影响试验 取含体积分数 40%的该消
毒剂分别置于 20℃、30℃和 40℃水浴中 ,采用悬液
定量杀菌试验程序进行试验 ,计算杀灭对数值。
1.4.2pH的影响试验 取含体积分数 50%的该消
毒剂 ,用 1mol/L盐酸和 1mol/L氢氧化钠溶液调整
pH值为 2.5、4.5和 6.5等 3个试验组 ,进行悬液定
量杀菌试验 ,计算杀灭对数值 。
1.4.3有机物的影响试验 在菌悬液中加入体积分
数 25%和 50%小牛血清作为有机物 ,与不含小牛血
清对照进行比较。用含体积分数 70%的该消毒剂
进行悬液定量杀菌试验 ,计算杀灭对数值。
1.5现场消毒试验
选择 30名志愿者 ,分别对手和前臂进行消毒处
理。在消毒前 ,对受试者左手及左前臂进行对照组
采样 。然后分别用该消毒液原液 2 ml对受试者右
手及右前臂作擦拭消毒作用 1 min,作消毒后采样。
采样用无菌棉拭沾含中和剂的稀释液对采样部位作
涂抹采样 ,将采样棉拭置于中和剂试管内。中和作
用 10 min后 ,经充分振荡 ,取样液接种培养 ,作活菌
计数 ,计算杀灭对数值。
1.6稳定性试验
取该消毒液原包装产品 ,置于 37℃恒温箱内保
存 90d。分别于保存前 、后 ,取样测定对白色念珠菌
的杀灭效果的变化 。
2结果
2.1中和剂鉴定试验结果
试验结果证明 ,含 6 g/L硫代硫酸钠 、2.5 g/L
亚硫酸氢钠 、5 g/L吐温 80、7 g/L卵磷脂的磷酸盐
缓冲液组成的中和剂 ,可有效中和最高试验浓度的
该消毒剂对试验菌的残留作用 ,且中和剂及中和产
物对试验菌生长无明显影响 。
2.2杀菌效果
试验结果证明 ,含体积分数 50%的该消毒剂作
用 1 min,对大肠杆菌 、金黄色葡萄球菌的杀灭对数
值均 >5.00;含体积分数 70%的该消毒剂作用 1
·51·中国消毒学杂志 2007年第 24卷第 1期
min,对铜绿假单胞菌的杀灭对数值均 >5.00,对白
色念珠菌的杀灭对数值均 >4.00(表 1)。
 表 1 山楂核提取物杀菌试验结果
消毒液浓度 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值
1 3 5 7
 大肠杆菌 
50 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
40 4.27 >5.00 >5.00 >5.00
30 3.26 3.91 4.89 >5.00
 金黄色葡萄球菌 
50 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
40 4.31 >5.00 >5.00 >5.00
30 3.32 3.98 4.93 >5.00
 铜绿假单胞菌 
70 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
60 4.89 >5.00 >5.00 >5.00
50 3.43 4.08 4.91 >5.00
 白色念珠菌 
70 >4.00 >4.00 >4.00 >4.00
60 2.99 3.57 >4.00 >4.00
50 1.56 2.27 2.91 3.37
注:阳性对照组平均对数值 , 大肠杆菌为 7.33,金黄色葡萄球菌为
7.41,铜绿假单胞菌为 7.27,白色念珠菌为 7.09。
2.3影响因素试验试验
试验结果证明 ,含体积分数 40%的该消毒剂在
药液温度为 20℃时 ,作用 1 min,对大肠杆菌的平均
杀灭对数值为 4.27;当温度升至 40℃时 , 作用 1
min,对大肠杆菌的平均杀灭对数值为 >5.00(表
2)。含体积分数 50%该消毒剂随 pH值升高杀菌作
用减弱;pH值≥4.5时 ,杀菌作用明显减弱(表 3)。
菌悬液内含 25%和 50%小牛血清 ,第 2 ~ 4个时间
段杀菌效果合格 ,说明有机物对该消毒剂杀菌效果
有轻度影响(表 4)。
 表 2 不同温度对山楂核提取物杀菌效果的影响
药液温度
(℃)
作用不同时间(min)的平均杀灭对数值
1 3 5 7
20 4.23 >5.00 >5.00 >5.00
30 4.76 >5.00 >5.00 >5.00
40 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
 注:阳性对照组大肠杆菌平均对数值为 7.28。
 表 3 不同 pH值对山楂核提取物杀菌效果的影响
pH值 作用不同时间(min)的平均杀灭对数值
1 3 5 7
2.5 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
4.5 4.71 >5.00 >5.00 >5.00
6.5 1.39 2.07 2.93 3.29
 注:阳性对照组大肠杆菌平均对数值为 7.39。
 表 4 有机物对山楂核提取物杀菌效果的影响
小牛血清
浓度(%)
阳性对照组
平均对数值
作用不同时间(min)的平均杀灭对数值
1 3 5 7
0.0 7.35 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
25.0 7.19 >5.00 >5.00 >5.00 >5.00
50.0 7.03 4.85 >5.00 >5.00 >5.00
2.4现场消毒试验结果
用该消毒剂原液对手或前臂内侧皮肤擦拭消毒
作用 1 min,经检测 30人次结果证明 ,消毒前手上自
然菌平均菌数为 2305 cfu/手(845 ~ 3735 cfu/手),
消毒后对自然菌杀灭对数值均 >1.87。消毒前前臂
皮肤上自然菌平均菌数为 1015 cfu/30 cm2(785 ~
2465 cfu/30 cm2),消毒后对自然菌杀灭对数值均 >
1.69。
2.5稳定性试验结果
试验结果证明 ,该消毒液原液经 37℃恒温存放
90 d,含体积分数 70%该消毒剂对白色念珠菌的杀
灭效果与存放前比较无明显下降 。
3讨论
关于用中草药提取物作为皮肤消毒剂研究已经
有文献报道 ,并得出很好的结果 〔2〕。研究结果发
现 ,以山楂核提取物为主要杀菌成分的皮肤消毒剂
具有较好的杀菌效果 , 稳定性较好。含体积分数
50%的该消毒剂作用 1 min,对大肠杆菌 、金黄色葡
萄球菌的杀灭对数值均 >5.00;含体积分数 70%的
该消毒剂作用 1min,对铜绿假单胞菌的杀灭对数值
均 >5.00,对白色念珠菌的杀灭对数值均 >4.00。
影响因素试验发现 ,该消毒剂随着药液浓度增加和
温度的升高而增强;随 pH值升高而减弱;有机物对
其杀菌作用有一定影响 。该消毒剂性质稳定 ,其有
效期在室温下可达两年 。手和皮肤现场消毒试验结
果证明 ,该消毒液原液作用 1 min,对皮肤表面和手
上自然菌的杀灭对数值均 >1.00。但有关中草药用
作消毒剂进入实际使用尚需要进行系统实验室和临
床效果评价以及使用安全性试验 ,进行必要的制剂
学研究。
参 考 文 献
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的试验观察 [ J] .中 国消毒学杂志, 2003;20(2):92.
(2005-12-19收稿)
·52· ChineseJournalofDisinfection 2007;24(1)