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用桑枝扦插的方法生产制茶用桑芽的试验



全 文 :Science of Sericulture 蚕业科学
收稿日期:2015 - 08 - 15 接受日期:2015 - 08 - 27
资助项目:四川省农业高新技术及新产品产业化项目(No. 2015scny-
zx0011) ,南充市科技支撑项目(No. 13A0015) ,南充市科
技型中小企业技术创新基金项目(No. 15C0009) ,四川省
财政创新能力提升工程项目(No. 2015XXXK-016)。
第一作者信息:殷浩(1980 -) ,男,副研究员。
Tel:0817-2235026,E-mail:s20060428@ 163. com
通信作者信息:刘刚,博士,研究员。
Tel:0817-2229001,E-mail:liugang200480@ sina. com
* Corresponding author. E-mail:liugang200480@ sina. com
2015,41(6) :1067 - 1070
ISSN 0257 - 4799;CN 32 - 1115 /S
DOI:10. 13441 / j. cnki. cykx. 2015. 06. 015
用桑枝扦插的方法生产制茶用桑芽的试验
殷 浩1,3 刘 刚1 孙 波2 黄盖群1 危 玲1 吴劲轩1,3
(1四川省农业科学院蚕业研究所,四川南充 637000; 2湖北省农业科学院经济作物研究所,武汉 430064; 3四川省蚕业科技开发总公司,
四川南充 637000)
摘 要 为了低成本获取生产桑芽茶的原料,将冬季重剪的桑枝条(长 2. 7 m)作插条扦插于苗床中生产桑芽,调查桑品种、桑
芽采摘期、插条扦插密度、苗床土壤含水率对桑芽产量和桑芽中 DNJ含量的影响。桑品种对插条的鲜芽产量和桑芽中的 DNJ
含量均有显著影响,其中桑品种湘 7920 插条的桑芽产量最高,为 12. 68 g /根,川 826 插条的桑芽中 DNJ含量最高,质量分数为
0. 145 5%;插条的扦插密度对桑芽产量、鲜芽含水率、DNJ含量均没有显著影响;苗床土壤含水率对桑芽产量、鲜芽含水率和
DNJ含量均有显著影响,其中土壤相对含水率为 19% ± 2%时桑芽的 DNJ产量最高,为 14. 36 mg /根;不同时期采摘桑芽中的
DNJ含量差异较大,随着桑芽的生长发育 DNJ含量随之显著降低。根据试验结果,选用桑品种川 826 的枝条作插条,设置扦
插株、行距均为 10 cm,苗床土壤含水率为 19% ±2%,采摘初展期“一芽两叶”的桑芽,可以获得较高的桑芽产量,且桑芽中的
DNJ含量较高。
关键词 扦插;桑枝;桑芽;1-脱氧野尻霉素;桑品种;采摘期;土壤含水率
中图分类号 TS272. 2;S888. 2 文献标识码 B 文章编号 0257 - 4799(2015)06 - 1067 - 04
A Study on Bud Production with Mulberry Cuttings for Making Mul-
berry Bud Tea
Yin Hao1,3 Liu Gang1* Sun Bo2 Huang Gaiqun1 Wei Ling1 Wu Jinxuan1,3
(1The Sericultural Research Institute,Sichuan Academy of Agricultural Sciences,Nanchong Sichuan 637000,China;
2 Institute of Economic Crops,Hubei Academy of Agricultural Science,Wuhan 430064,China;3Sericulture Technology
Development Corporation of Sichuan Province,Nanchong Sichuan 637000,China)
Abstract Aiming at obtaining raw material for making mulberry bud tea at low cost,mulberry branches (2. 7 m long)cut
in winter by heavy pruning method were planted in seedbed to produce buds. The impact of mulberry varieties,picking
period of mulberry buds,planting density of cuttings,and water content in soil of seedbed on the yield and DNJ content
in mulberry buds were investigated. The results indicated that mulberry variety had significant effect on the yield and DNJ
content in fresh buds. The yield of mulberry buds from the cutting branches of mulberry variety Xiang 7920 was the high-
est,being 12. 68 g per branch. The DNJ content in mulberry buds from the cutting branches of mulberry variety Chuan
826 was the highest,with a mass fraction of 0. 145 5%. The planting density of cuttings had no significant effect on yield
of mulberry buds,water content of fresh mulberry buds,
and DNJ content. While the water content in soil had
significant effect on yield of mulberry buds,water content
of fresh mulberry buds,and DNJ content. When the wa-
ter content in soil was 19% ±2%,the yield of DNJ in mul-
berry buds reached the highest level (14. 36 mg per
branch). There was significant difference in DNJ content in
mulberry buds at different picking periods,and the content
of DNJ was significantly decreased with the development of
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mulberry buds. Based on these results,the branches of mulberry variety Chuan 826 were selected as material to prepare cut-
tings. When these cuttings were planted in seedbed with planting spacing 10 cm and soil water content 19% ±2%,the mul-
berry buds of“one bud two leaves”picked at the first unfolding stage had high yield and DNJ content.
Keywords Cutting;Mulberry branch;Mulberry bud;1-Deoxynojirimycin;Mulberry variety;Picking period;Water con-
tent in soil
现代药理学研究证明,桑叶中富含的 1-脱氧野尻
霉素(1-deoxynojirimycin,DNJ)具有显著的降血
糖功效,在一定范围内其含量与降血糖功效呈现明
显的正相关关系[1],且桑叶中的 DNJ 含量随着叶位
的降低而逐渐减少[2],所以桑芽是桑叶降血糖保健
食品的优质原料。目前用于制作保健品的桑芽主要
采集于投产桑园的桑树枝条或新梢顶端生长点,而
大量采摘桑芽后会严重影响到桑树的正常生长发
育,降低桑叶产量和品质,同时从桑树枝条或新梢采
摘大大增加了桑芽的采摘成本,并且桑园病虫害防
治过程使用的化学药剂也会严重影响桑芽的品质。
本试验基于桑枝易扦插成活的特点,利用桑树
冬季重剪的枝条作为插条,直接扦插在湿润土壤的
苗床中生产用于制作桑叶茶的桑芽,并研究桑品种、
桑芽采摘时期、插条扦插密度、土壤含水率对桑芽产
量和 DNJ含量的影响,为以收获桑芽为目的的桑树
资源多元化开发利用的生产实践提供新技术。
1 材料与方法
1. 1 材料及主要试剂和仪器
供试桑品种为川 826、川 98-1、油桑、湘 7920,均
为 6 年生植株,种植于本所科研基地。选择 4 个桑
品种的较直立的冬季重剪桑枝条作插条,打捆后置
于荫蔽处,并在其剪伐后 3 d内进行扦插试验。
1-Deoxynojirimycin-HCl(DNJ-HCl)和四氧嘧啶均
为 Sigma 公司产品,9-fluorenylmethyl chloroformate
(FMOC-Cl)为 Fluca公司产品,其他试剂皆为分析纯。
高效液相色谱系统为美国 Waters 公司产品,包
括Waters 600控制器和压力泵,Waters 2489检测器和
Waters在线脱气机;分析柱为 Phenomenex Luna C18
(2)柱(250 mm ×4. 6 mm,5 μm) ,保护柱为 C18 柱(4
mm ×3. 0 mm) ,均为美国 Phenomenex公司产品。
1. 2 桑枝扦插及桑芽采集方法
试验地土壤类型为紫色土。0 ~ 20 cm 的土壤
肥力为:有机质质量分数 3. 31%,全氮(N)质量分
数 0. 16%,有效磷(P2O5)质量比 11. 76 mg /kg,速效
钾(K2 O)质量比 164. 16 mg /kg;土壤 pH 7. 72。苗
床宽 1 m,间隔 0. 3 m有排水沟。剪去桑枝条基部,
保留桑枝长度 2. 7 m 作插条,扦插深度为 0. 2 m。
桑枝扦插后按照常规的育苗方法管理。插条发芽
后,每隔 2 d收集“一芽两叶”形状的桑芽,称鲜桑芽
质量后,60 ℃烘干,粉碎过 200 目筛,4 ℃冷藏,待收
获完毕各组样品充分混匀后称量并测定 DNJ含量。
1. 3 桑枝扦插条件及采摘期选择试验
1. 3. 1 桑品种选择试验 以 4 个桑品种(川 826、
川 98-1、油桑、湘 7920)桑树冬季重剪的枝条供试,
扦插株、行距 10 cm,苗床土壤相对含水率为 19% ±
2%,采集初展期的桑芽(一芽两叶)。每个桑品种
选定 2 个扦插区域,每个区域扦插 500 根插条。
1. 3. 2 扦插密度试验 以桑品种川 826 的桑树冬
季重剪枝条供试,扦插株、行距均分别设置为 5 cm、
10 cm、15 cm、20 cm,苗床土壤相对含水率为 19% ±
2%,采集初展期的桑芽。每组试验选定 2 个扦插区
域,每个区域扦插 500 根插条。
1. 3. 3 桑芽采摘时期试验 以桑品种川 826 和川
98-1 的桑树冬季重剪枝条供试,扦插株、行距均为
10 cm,苗床土壤相对含水率为 19% ± 2%,分别采
集冬芽、脱苞芽、鹊口芽,以及初展期、缓慢生长期、
成熟期的桑芽,采摘桑芽样品均为“一芽两叶”,每
个采摘期各随机采摘 100 g桑芽。
1. 3. 4 苗床土壤水分含量试验 以桑品种川 826
的桑树冬季重剪枝条供试,扦插株、行距均为 10
cm,设置苗床土壤相对含水率分别为 12% ± 2%、
19% ±2%、26% ± 2%、100%,其中 100%含水率试
验组是将桑枝轻绑打捆后放入池塘,浸根深度为
0. 2 m。采集初展期的桑芽。每组试验选定 2 个扦
插区域,每个区域扦插 500 根插条。
1. 4 桑芽 DNJ含量的测定
1. 4. 1 检测样品制作 称取桑芽样品 30 mg置于 3
mL离心管中,加入 0. 05 mol /L 的 HCl 溶液 1 mL,涡
流 1 min后经超声波(频率 40 kHz,功率 240 W)处理
第 6 期 殷 浩等:用桑枝扦插的方法生产制茶用桑芽的试验 1069
40 min,然后 12 000 r /min 离心 30 min,收集上清液,
再次抽提后合并上清液,定容至 2 mL,即得供试样品
的 DNJ提取液。取DNJ提取液140 μL,先后加入0. 4
mol /L硼酸钾缓冲液(pH 8. 5)169 μL和 5 mmol /L衍
生化试剂 FMOC-Cl 250 μL,25 ℃条件下反应 20 min,
最后加入 1 mol /L 甘氨酸 25 μL 和 1%乙酸溶液 66
μL终止反应,用蒸馏水定容至 707 μL,用孔径 0. 2
μm的尼龙膜过滤,即得 DNJ络合后的待测液。
1. 4. 2 DNJ含量测定 采用反相高效液相色谱-紫
外分光光度计法[3]测定。流动相中乙腈与 0. 1%乙
酸的体积比为 11∶ 16,流速 1. 0 mL /min,DNJ待测液
进样量为 20 μL。以 Dionex chromeleox 工作站分
析,外标法计算。所有样品均测定 3 次,取平均值。
1. 5 数据分析
试验数据采用 EXCEL2003 和 SAS9. 0 软件进行
统计分析。
2 结果与分析
2. 1 桑品种对桑芽产量和 DNJ含量的影响
不同桑品种对插条的桑芽产量、鲜芽含水率和
DNJ含量均有较大影响(表 1)。用川 826 和湘 7920
插条扦插的桑芽产量无显著差异,但显著高于川
98-1 和油桑,其中用湘 7920 插条扦插的桑芽产量最
高,为 12. 68 g /根,这可能和桑品种的潜伏芽数量、
发芽率、插条的养分含量、桑芽含水率有关;采自川
826 和油桑插条的鲜芽含水率无显著差异,但显著
高于川 98-1,低于湘 7920;采自川 826、川 98-1 和油
桑插条的鲜芽中的 DNJ含量依次显著降低,湘 7920
和后二者之间没有显著差异,这可能与不同桑品种
插条中的 DNJ 积累量有关,另外,桑枝中的内生菌
也可能是导致其差异的原因之一[4];每根插条的桑
芽所产 DNJ 的总质量从大到小依次为川 826、湘
7920、川 98-1、油桑。综合上述试验数据,选择川
826 的插条用于扦插生产桑芽。
2. 2 扦插密度对桑芽产量和 DNJ含量的影响
插条的扦插密度对桑芽产量、鲜芽含水率和
DNJ含量均没有显著影响(表 2) ,由此也说明插条
的桑芽中的 DNJ主要由桑枝提供,外部环境对其影
响较小。为了方便桑芽的采摘,桑枝扦插的株、行距
均设置为 10 cm。
表 1 4 个供试桑品种插条扦插收获新鲜桑芽的产量和 DNJ含量比较
Table 1 Comparison of fresh mulberry bud yield and DNJ content obtained from cuttings of 4 mulberry varieties
桑品种
Mulberry variety
产量 / (g·根 - 1)
Yield per branch
(x ± s,n = 3)
含水率 / %
Water content
(x ± s,n = 3)
DNJ质量分数 / %
Mass fraction of DNJ
(x ± s,n = 3)
DNJ产量 / (mg·根 - 1)
Yield of DNJ per branch
川 826 Chuan 826 12. 13 ± 0. 13 a 81. 42 ± 0. 22 b 0. 145 5 ± 0. 003 9 a 14. 36
川 98-1 Chuan 98-1 10. 62 ± 0. 06 b 79. 95 ± 0. 13 c 0. 126 6 ± 0. 002 8 b 10. 74
油桑 Yousang 10. 06 ± 0. 11 b 81. 19 ± 0. 21 b 0. 108 8 ± 0. 003 4 c 8. 88
湘 7920 Xiang 7920 12. 68 ± 0. 14 a 83. 52 ± 0. 37 a 0. 114 8 ± 0. 005 8 bc 12. 16
每根插条长度 2. 7 m;不同小写字母表示组间的差异显著(P < 0. 05)。表 2 ~ 3、图 1 同。
The length of each cutting was 2. 7 m. Different lowercase letters indicate significant differences(P < 0. 05). The same in Table 2 and 3,and Fig. 1.
表 2 不同扦插密度插条收获新鲜桑芽的产量和 DNJ含量比较
Table 2 Comparison of fresh mulberry bud yield and DNJ content obtained from cuttings with different planting densities
扦插株行距 / cm
Planting spacing
米条长产量 / g
Yield per meter branch
(x ± s,n = 3)
含水率 / %
Water content
(x ± s,n = 3)
DNJ质量分数 / %
Mass fraction of DNJ
(x ± s,n = 3)
5 4. 80 ± 0. 09 a 81. 15 ± 0. 32 a 0. 145 7 ± 0. 002 9 a
10 4. 85 ± 0. 11 a 81. 42 ± 0. 22 a 0. 145 5 ± 0. 003 9 a
15 4. 80 ± 0. 13 a 81. 25 ± 0. 16 a 0. 146 7 ± 0. 001 1 a
20 4. 82 ± 0. 05 a 81. 33 ± 0. 08 a 0. 147 5 ± 0. 003 0 a
供试桑品种为川 826。表 3 同。
The mulberry variety for test was Chuan 826. The same in Table 3.
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2. 3 苗床土壤含水率对桑芽产量和 DNJ 含量的
影响
扦插的苗床土壤含水率对插条的鲜芽的产量、
含水率和 DNJ 含量均有显著影响(表 3)。随着土
壤含水率的增大,鲜芽的产量和含水率也随之显著
增加,而 DNJ 含量则显著降低;DNJ 总产量以土壤
含水率 19% ±2%试验组最高,为 14. 36 mg /根。虽
然土壤含水率 12% ±2%试验组鲜芽中的 DNJ含量
最高,但桑芽产量最低,且芽型较差,所以选择最适
宜的苗床土壤含水率为 19% ±2%。
表 3 插条扦插于不同含水率土壤中收获新鲜桑芽的产量和 DNJ含量比较
Table 3 Comparison of fresh mulberry bud yield and DNJ content obtained from cuttings planted in soil of different water contents
土壤相对含水率 / %
Relative water
content in soil
产量 / (g·根 - 1)
Yield per branch
(x ± s,n = 3)
含水率 / %
Water content
(x ± s,n = 3)
DNJ质量分数 / %
Mass fraction of DNJ
(x ± s,n = 3)
DNJ产量 / (mg·根 - 1)
Yield of DNJ per branch
12 ± 2 5. 70 ± 0. 16 d 77. 65 ± 0. 28 d 0. 158 0 ± 0. 002 3 a 6. 98
19 ± 2 12. 14 ± 0. 13 c 81. 42 ± 0. 22 c 0. 145 5 ± 0. 003 9 b 14. 36
26 ± 2 13. 18 ± 0. 13 b 82. 78 ± 0. 15 b 0. 125 8 ± 0. 003 3 c 13. 72
100 14. 80 ± 0. 06 a 84. 60 ± 0. 11 a 0. 099 6 ± 0. 001 4 d 12. 46
1—冬芽,2—脱苞芽,3—鹊口芽,4—初展期,
5—缓慢生长期,6—成熟期。
1—Winter bud,2—Budding stage,3—Pre-opening stage,
4—First unfolding stage,5—Tardy growth stage,
6—Mature stage.
图 1 采摘插条上不同发育期桑芽中的 DNJ含量
Fig. 1 Contents of DNJ in mulberry buds from cuttings
picked at different developmental stages
2. 4 不同发育期桑芽中的 DNJ含量
从图 1 可见,随着扦插苗床中插条上桑芽的生
长发育,桑芽中的 DNJ 含量也随之显著降低。采摘
2 个桑品种插条上生长至成熟期的桑芽,芽中的
DNJ 质量分数分别比其冬芽降低了 68. 88% 和
72. 89%。叶晶晶等[5]以实生桑苗为材料进行的试
验发现冬芽发育至鹊口期时,桑芽中的 DNJ 含量明
显降低,本试验结果与之一致;而初展期后,DNJ 的
含量又明显增加,到旺盛生长期后又明显降低,本试
验结果与此差异较大。分析出现这种差异可能是由
于本试验的桑芽是来自插条,而前者的桑芽来自桑
树植株,因插条中的养分供应相对不足,桑芽在初展
期后变小,叶片成熟老化较快,从而导致 DNJ 含量
显著降低,但对此推测还有待进一步研究确证。由
于初展期桑芽的外形美观,且产量相对较高,所以选
择插条上桑芽的采摘时期为初展期。
3 结论
本试验结果表明,以冬季重剪的桑枝条为插条
扦插生产制茶用桑芽时,插条的鲜芽产量及芽中的
DNJ含量受桑品种、苗床土壤含水率和桑芽采摘时
期的影响,选用桑品种川 826 的桑枝作为插条,扦插
株行距为 10 cm,苗床土壤含水率为 19% ± 2%,采
集初展期的“一芽两叶”桑芽,可以获得较高的桑芽
产量,且桑芽中的 DNJ含量也较高。
参考文献 (References)
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