全 文 ：收稿日期:2013-01-11 接受日期:2013-06-09
* 通讯作者 Tel:86-20-39358073;E-mail:gogohe@ gmail． com
天然产物研究与开发 Nat Prod Ｒes Dev 2014，26:193-196
文章编号:1001-6880(2014)2-0193-04
广东桑根心材的化学成分研究
何细新1
*
，巢晓娟2，杨 璐1，张翠仙1，皮荣标2，曾海祥1，李国西1，徐玉娟1，林燕燕1
1广州中医药大学中药学院;2 中山大学药学院，广州 510006
摘 要:采用多种层析方法从广东桑根心材的醇提取物中分离了 8 个已知化合物，经波谱分析手段结合文献分
析方法将其分别鉴定为:桑辛素 C(1) ，桑辛素 M(2) ，二氢桑色素(3) ，氧化白藜芦醇(4) ，2 4-二羟基苯甲醛
(5) ，伞形花内酯(6) ，胡萝卜苷(7)和 3-羟基-2-哌啶酮(8)。化合物 1，3 ～ 6 和 8 首次从广东桑 Morus atpropur-
purea 中分离，化合物 8 亦首次从桑属植物中分离。综合采用 DPPH，MTT 法测试了多酚类化合物 1 ～ 4 的抗氧
化和神经保护作用，结果表明化合物 1 ～ 4 均能清除 DPPH自由基，抑制 L-谷氨酸钠诱导海马神经元细胞 HT22
毒性，具有抗氧化和神经保护作用。在 20 μM浓度下，化合物 2 的活性显著。
关键词:广东桑;心材;化学成分;神经保护;抗氧化
中图分类号:O629． 9 文献标识码:A
The Ｒesearch on Chemical Ingredients of the
Heartwood of Ｒoot of Morus atpropurpurea
HE Xi-xin1* ，CHAO Xiao-juan2，YANG Lu1，ZHANG Cui-xian1，
PI Ｒong-biao2，ZENG Hai-xiang1，LI Guo-xi1，XU Yu-juan1，LIN Yan-yan1
1College of Chinese Materia Medica，Guangzhou University of Chinese Medicine;
2School of Pharmaceutical Sciences，Sun Yat-Sen University，Guangzhou 510006，China
Abstract:Eight known compounds，including Moracin C(1) ，Moracin M(2) ，Dihydromorin(3) ，Oxyresveratrol(4) ，2
4-Dihydroxybenzaldehyde(5) ，7-Hydroxycoumarin(6) ，Daucosterol(7)and 3-Hydroxy-2-piperidinone(8)have been i-
solated from EtOH extract of heartwood of root of Morus atpropurpurea． Compounds 1，3-6 and 8 were isolated from Morus
atpropurpurea for the first time． Compound 8 was also isolated from Morus plant for the first time． Their antioxidant and
neuroprotective activity were test by DPPH，MTT methods． Polyphenolic compounds 1-4 exhibited antioxidative and neu-
roprotective activitives． Compound 2 showed significant neuroprotective activity at 20 μM．
Key words:Morus atpropurpurea;heartwood;chemical ingredients;neuroprotection;antioxidation
桑属植物具有广泛的药用价值。如桑(Morus
abla L．)的枝、叶、果、根皮均可入药，其中桑叶具有
疏散风热，清肺润燥，清肝明目功效;桑椹能滋阴补
血，生津润燥;桑枝祛风湿，利关节;桑白皮则泻肺平
喘，利水消肿［1］。化学成分研究显示，桑属植物富
含黄酮类化合物，苯骈呋喃衍生物，生物碱，香豆素，
甾体，挥发油等多种成分［2］，具有降血压、抑菌、消
炎镇痛，抗癌，抗病毒等多种药理作用［3］。
广东桑 Morus atpropurpurea主要在广东、广西地
区广泛栽培。近年来，广东桑的不同部位，如种
子［4］，桑枝［5］，根皮［6］的化学成分已有报道。本文
对广东桑根心材部分的化学成分进行研究，从中分
离得到 8 个已知化合物，并对其多酚类化合物进行
了抗氧化和神经保护作用研究，为广东桑的资源利
用提供科学依据。
1 实验部分
1． 1 仪器与试剂
Brucker 400 MHz 型核磁共振仪;Thremo LCQ
DECA XP质谱分析仪;层析硅胶(200 ～ 300 目) ，青
岛海洋化工厂产;Sephdax LH-20，Merck 公司产品;
D101 型阳离子交换树脂，购置于南开大学化工厂;
其他所用溶剂均为分析纯;3-(4，5-二甲基噻唑-2)-
2，5-二苯基四氮唑溴盐(MTT)、1，1-二苯基-2-三硝
基苯肼(DPPH) ，美国 Sigma 公司;酶标仪，美国
Bio-Tek公司;分光光度计，美国 Varian公司。
DOI:10.16333/j.1001-6880.2014.02.014
1． 2 生物材料
广东桑根于 2010 年 8 月采自广东湛江，种属由
广州中医药大学药用植物教研室鉴定。样品编号为
MA2010-ZJ。储藏于广州中医药大学中药学院中药
化学实验室，研究所用材料为其心材部分。
1． 3 提取与分离
将广东桑根的心材(干重 1． 3 kg)粉碎后用
95%乙醇回流提取 3 次，减压浓缩提取液，得棕褐色
浓缩物，将浓缩物用 200 毫升水悬浮，然后分别以石
油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取 3 次，乙酸乙酯萃取液
浓缩后得浸膏 14 g。将此浸膏经硅胶(200 ～ 300
目)层析分离，以石油醚 /乙酸乙酯洗脱。石油醚 /
乙酸乙酯(体积比 6 ∶ 4)洗脱部分经 Sephadex LH-
20，甲醇洗脱得化合物 1(15 mg) ，2(10 mg) ，3(15
mg) ，4(100 mg) ;石油醚 /乙酸乙酯(体积比 4∶ 6)洗
脱部分，经 Sephadex LH-20 进一步分离，甲醇洗脱
得化合物 5(5 mg) ，6(5 mg) ;乙酸乙酯洗脱部分，经
甲醇重结晶得化合物 7(10 mg)。正丁醇部分约 8
g，经 D101 型阳离子交换树脂层析，先以水洗 2 个保
留体积，然后 0． 2M氨水洗脱。氨水洗脱部分，依次经
Sephadex LH-20(甲醇洗脱)，硅胶柱层析(200 ～ 300
目)，从甲醇∶氯仿(体积比 4∶ 6)流份中得化合物 8(60
mg)。
2 结果与分析
2． 1 结构解析
化合物 1 白色固体，ESI-MS m /z:311［M +
H］+;1H NMＲ(400 MHz，CD3OD)δ 7. 32(1H，d，J
= 8. 4 Hz，H-4) ，6. 88(1H，d，J = 1. 9 Hz，H-7) ，6. 83
(1H，d，J = 0. 8 Hz，H-3) ，6. 78(2H，s，H-2，6) ，
6. 72(1H，dd，J = 8. 4，2. 1 Hz，H-5) ，5. 37-5. 05(1H，
t，J = 7. 2Hz，H-8) ，3. 33(2H，d，J = 7. 2 Hz，H-7) ，
1. 78(3H，s，-CH3) ，1. 67(3H，s，-CH3) ;
13 C NMＲ
(100 MHz，CD3OD)δ157. 5(C-3，5) ，157. 1(C-6) ，
156. 6(C-8) ，156. 5(C-2) ，131. 3(C-9) ，130. 2(C-
l) ，124. 3(C-8) ，123. 2(C-9) ，121. 8(C-4) ，116. 9
(C-4) ，113. 1(C-5) ，103. 8(C-2，6) ，101. 3(C-3) ，
98. 4(C-7) ，26. 0(-CH3) ，23. 3(C-7) ，17. 9(-CH3)。
以上数据与文献［7］报道的 Moracin C 的数据一致，
将化合物 1 鉴定为 Moracin C。
化合物 2 淡灰色固体，ESI-MS m /z:243［M +
H］+;1H NMＲ(400 MHz，CD3OD)δ 7. 34(1H，d，J
= 8. 4 Hz，H-4) ，6. 91(1H，d，J = 2. 3Hz，H-6) ，6. 90
(1H，s，H-3) ，6. 78(2H，d，J = 2. 2 Hz，H-2，6) ，
6. 74(1H，dd，J = 8. 4，2. 0 Hz，H-5) ，6. 27(1H，t，J =
2. 2 Hz，H -4) ;13C NMＲ(CD3OD，100 MHz)δ160. 5
(C-3，5) ，157. 7(C-7a) ，157. 3(C-6) ，156. 6(C-
2) ，134. 3(C-1) ，123. 5(C-3a) ，122. 5(C-4) ，
113. 7(C-5) ，104. 5(C-2，6) ，104. 1(C- 4) ，
102. 7(C-3) ，98. 9(C-7)。以上数据与文献［8］报道
的 Moracin M的数据一致，鉴定化合物 2 为 Moracin
M。
化合物 3 无色针状结晶，ESI-MS:m/z 305
［M + H］ +;1H NMＲ(400 MHz，CD3OD)δ 7. 24
(1H，d，J = 9. 0 Hz，H-6) ，6. 42-6. 34(2H，m，H-3，
5) ，5. 94(1H，d，J = 2. 1 Hz，H-8) ，5. 90(1H，d，J =
2. 1 Hz，H-6) ，5. 41(1H，d，J = 11. 4 Hz，H-2) ，4. 79
(1H，d，J = 11. 4 Hz，H-3) ;13 C NMＲ(100 MHz，
CD3OD)δ 199. 02(C-4) ，168. 68(C-5) ，165. 42(C-
9) ，165. 10(C-7) ，160. 27(C-4) ，158. 70(C-2) ，
130. 97 (C-6) ，115. 72 (C-1) ，108. 08 (C-5) ，
103. 90(C-3) ，102. 06(C-10) ，97. 30(C-8) ，96. 37
(C-6) ，80. 17(C-2) ，72. 68(C-3)。以上数据与文
献［9］报道的二氢桑色素的数据一致，将化合物 3 定
为二氢桑色素。
化合物 4 淡黄色结晶，ESI-MS:m/z 245［M +
H］+;1H NMＲ(400 MHz，CD3OD)δ 7. 33(1H，d，J
= 9. 2 Hz，H-6) ，7. 27(1H，d，J = 16. 5 Hz，H-α) ，
6. 82(1H，d，J = 16. 4 Hz，H-β) ，6. 46(2H，d，J = 2. 1
Hz，H-2，6) ，6. 34-6. 31(2H，m，H-3，5) ，6. 15(1H，
t，J = 2. 2 Hz，H-4) ;13 C NMＲ(100 MHz，CD3OD)
δ158. 2(C-3，5) ，157. 8(C-2) ，155. 9(C-4) ，140. 77
(C-1) ，127. 0(C-α) ，125. 0(C-β) ，123. 0(C-6) ，116. 0
(C-1) ，106. 9(C-5) ，104. 2(C-2，6) ，102. 0(C-3) ，
100. 8(C-4)。以上数据与文献［10］报道的氧化白藜芦
醇的数据一致，鉴定化合物 4为氧化白藜芦醇。
化合物 5 淡黄色针状结晶，ESI-MS m /z:163
［M + H］+;1H NMＲ(400 MHz，CD3OD)δ 7. 86(1H，
d，J = 9. 4 Hz) ，7. 47(1H，d，J = 8. 5 Hz) ，6. 81(1H，
dd，J = 8. 5，2. 3 Hz) ，6. 73(1H，d，J = 2. 2 Hz) ，6. 20
(1H，d，J = 9. 4 Hz) ;13C NMＲ(100 MHz，CD3OD)δ:
163. 7(C-2) ，163. 1(C-9) ，157. 3(C-7) ，146. 0(C-
4) ，130. 7(C-5) ，114. 5(C-3) ，113. 2(C-10) ，112. 4
(C-6) ，103. 4(C-8)。以上数据与文献［11］报道的伞
形花内酯的数据一致，鉴定化合物 5 为伞形花内酯。
化合物 6 灰白色固体，空气中长期放置变黄
491 天然产物研究与开发 Vol. 26
色粉末结晶。ESI-MS m /z:139［M + H］+;1H NMＲ
(400 MHz，CD3OD)δ 9. 72(1H，s，CHO) ，7. 51(1H，
d，J = 8. 6 Hz，1H，H-6) ，6. 46(1H，dd，J = 8. 6，2. 2
Hz，H-5) ，6. 29(1H，d，J = 2. 2 Hz，H-3)。以上数据
与文献［12］基本一致，鉴定该化合物为 2，4-二羟基苯
甲醛。
化合物 7 白色粉末，TLC 分析与胡萝卜苷标
准品 Ｒf 值一致，与胡萝卜苷混合熔点不下降，鉴定
该化合物为胡萝卜苷［13］。
化合物 8 无色油状物，ESI-MS m /z:116［M +
H］+;1H NMＲ(400 MHz，CD3OD)δ 4. 03(1H，dd，J
= 8. 5，6. 3 Hz，H-3) ，3. 41(1H，dt，J = 11. 5，6. 9
Hz，H-4) ，3. 28(1H，dt，J = 11. 4，7. 3 Hz，H-4)2. 32
(1H，td，J = 15. 7，7. 4 Hz，H-6) ，2. 13(1H，td，J =
13. 3，6. 4 Hz，H-6) ，2. 06-1. 94(2H，m，H-5). 13 C
NMＲ(100 MHz，CD3OD)δ174. 14(C-2) ，62. 47(C-
3) ，46. 85(C-6) ，30. 26(C-4) ，24. 99(C-5)。以上数
据与文献一致［14］，鉴定化合物为 3-羟基-2-哌啶酮
(3-Hydroxy-2-piperidinone)。该化合物首次从桑属
植物中得到。
2. 2 DPPH自由基清除率测试
利用 DPPH溶液的特征紫红色团的吸收峰，以
分光光度法测定加抗氧化剂后，在 517 nm处吸光度
减少值，表示其对有机自由基消除能力［15］。在反应
管中加入 1 mL 0. 2 mM DPPH的甲醇溶液，再加入 1
mL的化合物 1 ～ 4 和白藜芦醇终浓度为(2. 0，4. 0，
8. 0，16. 0 和 32. 0 μM) ，混合均匀，室温避光反应 60
min后在 517 nm处读取吸光度。设 1 mL DPPH + 1
mL 化合物溶液为实验组，同时以 1 mL DPPH + 1mL
甲醇混合后的吸光度为对照组。计算清除率(%)
=［(对照组 A517 － 实验组 A517)/对照组 A517］×
100%。计算使 DPPH溶液吸光度降低 50%的化合
物浓度(IC50)。将 IC50定义为清除 50% DPPH 有机
自由基的化合物浓度。结果见表 1。由结果显示，
化合物 1 ～ 4 都具有自由基清除能力。其中化合物
1和 4对 DPPH自由基清除能力的 IC50低于白藜芦醇
的 IC50，提示它们的清除自由基能力强于白藜芦醇。
表 1 化合物抗氧化活性(IC50，μM)
Table 1 The antioxidant activity of compounds(IC50，μM)
化合物
Compound
消除 DPPH自由基活性
Ｒemoval of DPPH free
redical activity(IC50，μM)
1 20. 32
2 45. 74
3 63. 91
4 18. 30
白藜芦醇(Ｒesveratrol) 40. 12
2. 3 HT22 神经元细胞保护活性测试
在 96 孔板中种入 HT22 细胞(每孔 1* 104 个) ，
然后加入空白和设定浓度的化合物预处理 30 min，
再加入空白和 L-谷氨酸钠(5 mM)孵化 24 h。细胞
存活率采用 MTT法测试，活性结果见图 1。由结果
显示，化合物 1，2，3，4 在 5 μM 和 20 μM 两个浓度
下均有一定的神经保护作用。未加 L-谷氨酸钠情
况下，20 μM化合物 1，2，3，4 降低 HT22 细胞活力。
L-谷氨酸钠能够造成 HT22 细胞死亡，化合物 1 ～ 4
的加入均能减少 L-谷氨酸钠诱导的细胞毒性，增加
存活率。其中化合物 2 在高浓度(20 μM)下活性显
著。
120
100
80
60
40
20
0
Ce
ll%
vi
ab
ili
ty（
%
%of
%C
on
tro
l）
CT
No
.1（
20
μ
m）
No
.2（
20
μ
m）
No
.3（
20
μ
m）
No
.4（
20
μ
m）
Glu
tam
ate
No
.1（
5μ
m）
No
.1（
20
μ
m）
No
.2（
5μ
m）
No
.2（
20
μ
m）
No
.3（
5μ
m）
No
.3（
20
μ
m）
No
.4（
5μ
m）
No
.4（
20
μ
m）
Glutamate(0%mM)
Glutamate(5%mM)
图 1 化合物 1，2，3，4 对 L-谷氨酸钠诱导 HT22 细胞毒
性的影响
Fig. 1 Effects of compound 1、2、3、4 on L-Glutamate in-
duced cytotoxicity. Cells were grown on 96-well
plates(1* 104 cells per well)and pretreated with or
without compounds as indicated concentrations for 30
min，and then incubated with or without L-Glutamate
(5 mM)for 24 h. Cell viability was measured using
the MTT assay.
3 结论与讨论
本研究从广东桑根的心材中分离了 8 个已知化
合物，经分析将其分别鉴定为桑辛素 C(1) ，桑辛素
M (2) ，二氢桑色素(3) ，氧化白藜芦醇(4) ，2 4-二
羟基苯甲醛(5) ，伞形花内酯(6) ，胡萝卜苷(7)和
3-羟基-2-哌啶酮(8)。其中化合物 1，3 ～ 6 和 8 为
首次从广东桑 Morus atpropurpurea 中分离得到。化
合物 8 亦首次从桑属植物中分离到。活性研究显示
591Vol. 26 何细新等:广东桑根心材的化学成分研究
多酚类化合物 1 ～ 4 均具能清除 DPPH自由基，其中
化合物 1 和 4 的清除能力高于白藜芦醇;均能抑制
L-谷氨酸钠诱导海马神经元细胞 HT22 毒性，具有
神经保护，其中化合物 2 在 20 μM 浓度下活性显
著。
桑属植物具有多种药理活性，包括对心血管系
统有降血压作用、提取物在体外有抑菌作用、消炎镇
痛作用，还有抗癌抗病毒等药理活性作用。此外，有
研究报道［16］桑色素可以诱导肿瘤细胞在 S 期中阻
滞，从而抑制细胞增殖。本研究采用的永生系小鼠
海马神经细胞 HT22 是一种可增殖的细胞，化合物 1
～ 4 处理 24 h后，HT22 细胞的活力有所降低，可能
是由于化合物对细胞产生抑制增殖作用，而不是毒
性作用。其抑制细胞增殖的作用机制有待进一步研
究。另外，有报道桑色素具有神经保护作用［17］，手
术前 3 d给予桑色素(4 mg /kg)可以减少脑缺血再
灌注大鼠模型的梗死面积，减少炎性细胞浸润，促进
神经功能恢复。本研究发现从广东桑根的心材中分
离得到的化合物 1、2、3 和 4 均可清除自由基，减少
由氧化应激引起的神经细胞损伤，这对于广东桑提
取物作为抗氧化剂和神经保护剂，应用于神经系统
疾病提供了一定的实验依据。但仅是体外实验研
究，尚有待更进一步的开展动物水平实验。
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