全 文 ：湖北中医药大学学报
Journal of Hubei University of Chinese Medicine
2015 年 10 月第 17 卷第 5 期
October 2015，Vol. 17，No. 5
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［4］ 黄敏，陈有根，叶小勇，等．陈皮贮存期及其功效关系的研究(Ⅱ)
不同贮存期陈皮理气作用的药理研究［J］． 中国野生植物资源，
1999，18(1):38 － 40．
［5］ 黄璐琦，郭兰萍，胡娟，等．道地药材形成的分子机制及其遗传基础
［J］．中国中药杂志，2008，33(20):2303 － 2308．
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［7］ 魏裕涛，魏佳娜，庞玉思，等． 浅谈道地广陈皮与普通陈皮之差别
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不同贮存期陈皮祛痰作用的药理研究［J］． 中国野生植物资源，
1999，18(1):36 － 37．
［9］ 黄敏，陈有根，叶小勇，等．陈皮贮存期及其功效关系的研究(Ⅱ)
不同贮存期陈皮理气作用的药理研究［J］． 中国野生植物资源，
1999，18(1):38 － 40．
［10］ 黄璐琦，郭兰萍，胡娟，等．道地药材形成的分子机制及其遗传基
础［J］．中国中药杂志，2008，33(20):2303 － 2308．
(稿件修回日期:2015-09-22 编辑:熊斌)
作者简介:李蒙(1990 －)，男，湖北中医药大学硕士研究生，研究方向:中药炮制。
通讯作者:王光忠(1965 －)，男，湖北中医药大学教授，研究方向:中药学，E － mail:wgzhong4067@ sina． com。
茯苓、茯神、茯神木及松根中茯苓酸及总萜类成分分析
李蒙，聂磊，沈佳瑜，王光忠
(湖北中医药大学药学院，湖北 武汉 430065)
摘要:目的 比较茯苓、茯神、茯神木及松根中茯苓酸及总萜类含量差异。方法 采用高效液相色谱法(HPLC)
法，测定茯苓酸含量;采用比色法测定总萜类成分含量。并对不同产地及来源的样品进行成分分析比较。结果 茯苓
酸含量:茯神木 ＞茯神 ＞茯苓，松根无;总萜含量:松根≈茯神木 ＞茯神 ＞茯苓。结论 为茯苓不同饮片的质量控制与
评价奠定了基础，并为临床选用茯苓不同饮片提供了科学依据。
关键词:茯苓;茯神;茯神木;松根;茯苓酸;总萜;含量分析
中图分类号:Ｒ282． 6 文献标识码:A doi:10. 3969 / j. issn. 1008 － 987x. 2015. 05. 14
Analysis of Pachymic Acid and Total Terpene Constituents of Poria，
Poria cum Pini Ｒadix，Pini Ｒadix in Poria and Pini Ｒadix
LI Meng，NIE Lei，SHEN Jiayu，WANG Guangzhong
(College of Pharmacy，Hubei University of Chinese Medicine，Wuhan 430065)
Abstracts:Objective To compare the contents of pachymic acid and total terpene of Poria，Poria cum Pini Ｒadix，Pini Ｒadix in Poria
and Pini Ｒadix．Methods HPLC was used in the determination of content of pachymic acid，colorimetric method was used in analysis of total
terpenoid components． Comparison and analysis of total terpenoid components were carried out in different medicinal parts of Poria cocos
(Schw． )Wolf from different areas． Ｒesults The content of pachymic acid:Pini Ｒadix in Poria ＞ Poria cum Pini Ｒadix ＞ Poria，and Pini
Ｒadix did not． The content of total terpenoid:Pini Ｒadix≈Pini Ｒadix in Poria ＞ Poria cum Pini Ｒadix ＞ Poria． Conclusion The study
provides foundation for quality control and evaluation of different pieces of Poria cocos，and to provide scientific basis for the clinical selection
of different pieces of Poria cocos．
Key words:Poria;Poria cum Pini Ｒadix;Pini Ｒadix in Poria;Pini Ｒadix;pachymic acid;total terpenoid;content analysis
茯苓来源于多孔菌科真菌茯苓 Poria cocos (Schw．)Wolf的
干燥菌核，采收后削去外皮，切制成的块或厚片。茯苓始载于
《神农本草经》;味甘、淡，性平;归心、肺、脾、肾经;具有渗湿利
水、健脾宁心的功效［1］。茯神为茯苓菌核中间抱有松根的白色
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湖北中医药大学学报
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部分，始载于《名医别录》，甘、淡，平，入心、脾经，具有宁心、安
神、利水功效;茯神木为茯苓菌核中间的松根，性甘平，具有平肝
安神的作用，主治惊悸健忘，中风语蹇，脚气转筋［2］。松根为马
尾松 Pinus massoniana Lamb． 幼根，具有祛风、活络、止血的功
效［3］。茯苓中主要含有茯苓酸等萜类成分及多糖成分。文
献［4］对茯苓和茯神中茯苓酸含量进行了比较研究，发现茯神中
茯苓酸含量略大于茯苓，而茯神和茯苓最显著的区别就是茯神
含有茯神木。因此，本论文对茯神木中茯苓酸、总萜类成分含量
进行了测定，并与茯苓、茯神、松根进行了比较研究，旨在为阐释
茯苓中萜类成分的产生形成奠定一定基础，并为临床选用茯苓
不同饮片提供科学依据。
1 材料
1． 1 仪器
Agilent1100高效液相色谱仪(美国安捷伦公司);SK7200HP
超声波清洗器(上海科导超声仪器有限公司);SHIMADZU UV －
1800紫外—可见分光光度计(日本岛津)，ＲTONUS 型电子天平
(十万分之一)(赛多利斯科学仪器有限公司)，METTLEＲ TOLE-
DO AL204型电子天平(梅特勒 －托利多称重设备系统有限公
司)，TDL －60B型离心机(上海安亭科学仪器厂)。
1． 2 材料
茯苓酸对照品(自制)，经面积归一化法测定后确认其纯度
大于 98%;乙腈为色谱纯，水为重蒸水，其他试剂均为分析纯。
采集的样品分为药材和饮片，见表 1。药材是指将购买的整个
茯苓(含有茯神木)，进行切制加工后分别得到茯苓、茯神和茯
神木饮片;饮片是指在同一产地购买茯苓、茯神和茯神木饮片。
松根采集地及时间与同批次茯苓一致。
表 1 不同样品来源
样品编号 样品品种 产地 样品采集形式 采集时间
A1 茯苓
B1 茯神
C1 茯神木
D1 松根
湖北罗田 药材 2012． 12
A2 茯苓
B2 茯神
C2 茯神木
D2 松根
湖北罗田 饮片 2012． 12
A3 茯苓
B3 茯神
C3 茯神木
D3 松根
湖北罗田 药材 2013． 6
A4 茯苓
B4 茯神
C4 茯神木
D4 松根
安徽岳西 饮片 2012． 11
A5 茯苓
B5 茯神
C5 茯神木
D5 松根
安徽岳西 药材 2012． 11
2 方法与结果
2． 1 茯苓酸的测定
2． 1． 1 色谱条件:Alltima C18(4． 6mm × 250 mm，5μm)色谱柱;
流动相乙腈 － 0． 05%磷酸(78:22);柱温 20℃;流速:1． 0mL /
min;检测波长 210 nm。样品及茯苓酸图谱见图 1。
2． 1． 2 对照品溶液的制备 精密称取茯苓酸对照品 3．
28mg，置 10mL 容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，摇匀，即
得。
2． 1． 3 供试品溶液的制备:分别取茯神木粉末 0． 4g，茯苓、茯
神、松根粉末各 0． 8g，精密称定，精密称定，置 50mL具塞锥形瓶
中，精密加入甲醇 25mL，称定重量，浸泡 30min，超声 60min，放
置冷却，称定重量，用甲醇补足重量，滤过，吸取续滤液 15mL，于
蒸发皿中，水浴蒸至约 1mL，并用甲醇定容至 5mL容量瓶中，摇
匀，微孔滤膜滤过，即得［5］。
2． 1． 4 线性关系的考察:分别精密吸取浓度为 66． 4，132． 7，
199． 1，265． 5，331． 8μg /mL 茯苓酸对照品溶液 10μL，用高效液
相色谱仪测定，按 2． 1． 1 项下色谱条件测定。以茯苓酸对照品
浓度为横坐标，所测得峰面积为纵坐标，绘制标准曲线同时进行
线性回归，得回归方程:Y = 8． 449X + 1． 409(r = 0． 9995)，结果
显示对照品茯苓酸在 66． 4 － 331． 8μg /mL 范围内线性关系良
好。
2． 1． 5 精密度试验:精密吸取茯苓酸对照品溶液 10μL，重复进
样 6 次，计算茯苓酸对照品峰面积 ＲSD%为 0． 38%(n = 6)，结
果表明仪器精密度良好。
2． 1． 6 重复性试验:取同一批茯神木粉末 6 份，每份 0． 4g，精密
称定，按 2． 1． 3 项下方法制备供试液，按 2． 1． 1 项下条件测定，
结果样品中茯苓酸的平均含量为 0． 6093% ，ＲSD 分别为
0． 67%，表明该法重复性良好。
2． 1． 7 加样回收率试验:取同一批已知茯苓酸含量的神木样品
6 份，每份 0． 2g，精密称定。分别精密加入茯苓酸对照品溶液
(0． 3318 mg /mL)3mL，按照 2． 1． 3 项下制备供试液并进行测定，
结果样品中茯苓酸的平均回收率为 99． 0138%，ＲSD% 为
0． 4900%，表明本方法的准确度良好，结果见表 2。
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图 1 HPLC图(1．茯苓酸)
表 2 加样回收率试验结果
供试品号 取样量(g) 含有量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均值(%) ＲSD(%)
1 0． 1968 1． 1991 0． 9954 2． 1770 98． 2419
2 0． 1927 1． 1741 0． 9954 2． 1687 99． 9196
3 0． 2103 1． 2814 0． 9954 2． 2606 98． 3725
4 0． 1908 1． 1625 0． 9954 2． 1515 99． 3570
5 0． 2059 1． 2545 0． 9954 2． 2385 98． 8547
6 0． 1885 1． 1485 0． 9954 2． 1373 99． 3370
99． 0138 0． 4900
2． 1． 8 样品测定:分别取茯神木粉末 0． 4g，茯苓、茯神、松根粉
末各 0． 8g，精密称定，按 2． 1． 3 项下方法制备供试品溶液。精
密吸取供试品溶液与对照品溶液各 10μL，注入高效液相色谱
仪，按 2． 1． 1 项下色谱条件测定，计算样品中茯苓酸的含量，结
果见表 4，折线图见图 2。
2． 2 总萜的测定
2． 2． 1 对照品溶液的制备:取茯苓酸对照品适量，精密称定，用
甲醇溶解制成 0． 4mg /mL的溶液，即得对照品溶液。
2． 2． 2 供试品溶液的制备:取茯苓木、松根粉末各 0． 1g，茯苓、
茯神粉末各 0． 5g，精密称定，置 25mL 容量瓶中，加入甲醇
20mL，超声 60min，冷却，定容，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
2． 2． 3 标准曲线及线性范围:分别精密吸取茯苓酸对照品溶液
0． 25、0． 5、1、2、4mL置具塞试管中，水浴挥干溶剂，冷却，分别精
密加入高氯酸溶液 1． 8mL 和 5%香草醛 －冰醋酸溶液0． 4mL，
混匀，密塞，置恒温水浴中加热 30min，冰浴 5min，取出，迅速加
入精密冰醋酸 5mL，摇匀，于 540nm 测定吸光度［6］。以吸光度
(Y)为纵坐标、质量(X)为横坐标，绘制标准曲线。得出线性回
归方程:A =1． 175C － 0． 0058，r = 0． 9992(n = 5)，线性范围为:
0． 1 － 1． 6mg。
2． 2． 4 精密度试验:精密吸取茯苓酸对照品溶液 1mL ，共 6
份，分别按 2． 2． 3 项下方法测定吸光度，计算其 ＲSD%为 1． 38
(n = 6)，表明仪器精密度良好。
2． 2． 5 重复性试验:取同一批次茯神木粉末 6 份，每份 0． 1g，
精密称定，分别按 2． 2． 2 项下方法制备供试品并按 2． 2． 3 项下
方法测定吸光度，计算含量，结果茯神木总萜含量为 5． 3612%，
ＲSD为 1． 33%，表明重复性良好。
2． 2． 6 加样回收率试验:取 6 份同一批已知总萜含量的茯苓木
样品 0． 05g，精密称定，分别精密加入已知茯苓总萜含量
(1． 386mg /mL)的对照溶液 2mL，按上述方法方法制备供试液并
进行测定。结果平均回收率为 99． 0566%，ＲSD%为 1． 1092%，
见表 3。
表 3 加样回收率试验结果
供试品号 取样量(g) 含有量(mg) 加入量(mg) 测得量(mg) 回收率(%) 平均值(%) ＲSD(%)
1 0． 0513 2． 7503 2． 7720 5． 4705 98． 1313
2 0． 0520 2． 7878 2． 7720 5． 4969 97． 7309
3 0． 0482 2． 5841 2． 7720 5． 3472 99． 6789
4 0． 0495 2． 6538 2． 7720 5． 3792 98． 3189
5 0． 0531 2． 8468 2． 7720 5． 6454 100． 9596
6 0． 0511 2． 7396 2． 7720 5． 4983 99． 5202
99． 0566 1． 1092
2． 2． 7 样品的测定
分别将茯苓、茯神、茯神木及松根按 2． 2． 2 项下方法制备供
试品溶液，并按 2． 2． 3 项下方法分别测定吸光度，计算总萜含
量，结果见表 4。
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表 4 不同样品中茯苓酸及总萜含量测定结果 (n = 3)
样品编号
茯苓酸 总萜成分
含量(%) ＲSD(%) 含量(%) ＲSD(%)
A1 0． 2493 0． 8431 0． 3167 1． 3805
B1 0． 3411 0． 4129 0． 5196 1． 1933
C1 0． 6093 0． 6711 5． 3612 1． 3321
D1 － － 4． 9210 1． 1217
A2 0． 2182 1． 0109 0． 4432 1． 4710
B2 0． 2320 0． 3027 0． 4531 1． 3837
C2 0． 8015 0． 2593 6． 2121 1． 0227
D2 － － 7． 3124 1． 0244
A3 0． 1988 0． 5972 0． 2134 1． 0327
B3 0． 1986 1． 4417 0． 3491 1． 3215
C3 0． 5989 0． 5532 4． 8812 1． 0306
D3 － － 5． 3211 1． 0424
A4 0． 2931 1． 2624 0． 5467 0． 4422
B4 0． 3006 0． 3019 0． 5887 1． 2531
C4 0． 7331 0． 3536 6． 2331 1． 0113
D4 － － 5． 8741 1． 0236
A5 0． 2559 0． 3911 0． 4020 0． 7547
B5 0． 2678 0． 7528 0． 4122 0． 4926
C5 0． 4652 0． 4542 6． 3322 1． 0339
D5 － － 5． 2312 1． 0305
3 讨论
由茯苓酸测定结果及折线图可以得出，茯神木中茯苓酸含
量大于茯苓和茯神，但松根中不含茯苓酸。因此，可以认为茯神
木中的茯苓酸来源于茯苓，且茯苓以松木为寄生生长的时候，
集聚了大量的茯苓酸于松根上，所以长茯苓之后的茯神木所含
茯苓酸含量高。
由总萜测定结果及相应的折线图得出，茯神木和松根中总
萜含量均明显高于茯苓和茯神。茯神木和松根两者总萜含量
并没有明显的差异，但两者的高效液相色谱图差异显著。茯苓
中茯苓酸的生成是否与松根中含有萜类成分有关，值得进一步
深入研究。
研究发现茯苓三萜具有抗惊厥作用［7 － 8］，文献［9］报道许多
镇静安神的中药具有较强的抗惊厥作用。测定结果表明茯神
木中总萜含量显著高于茯苓，为阐释茯神木长于平肝安神提供
了科学依据。
参考文献:
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(稿件修回日期:2015-08-23 编辑:熊斌)
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