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空心苋质量标准初步研究



全 文 :2015年 第 18卷 第 2期 广西中医药大学学报
空心苋,又名空心蕹、水花生、过塘蛇、水马齿苋、肥猪菜、
喜旱莲子草、空心莲子草等,来源于苋科植物空心苋 Alter-
nanthera philoxeroides(Mart)Griseb的全草,具有清热、凉血、
解毒功效,内服可用于乙脑、流感初期、流行性出血性结膜炎、
肺结核咯血,外用可治湿疹、带状疱疹、疔疮、毒蛇咬伤等疾
病[1]。现代研究表明空心苋含有甾醇、三萜、皂苷和黄酮类等
化学成分[2-5],并具有抑菌、抗病毒、抗甲型 H3N2流感病毒和
抗呼吸道合胞病毒等药理作用[6-11]。本文通过对其进行生药
学初步研究,旨为其质量标准的建立提供实验依据。
1 试药与仪器
1.1 试药 空心苋采于广西各地,经广西中医药大学蔡毅教
授鉴定为苋科植物空心苋 Alternanthera philoxeroides(Mart)
Griseb.的全草;薄层层析硅胶 G(化学纯,青岛海洋化工公
司);其余试剂均为化学纯;水为纯净水。
1.2 仪器 Leica Miccrosystems(德国莱卡仪器公司,型号:
DFC500);Leica 光学显微镜(德国莱卡仪器公司,型号:
DM2500);自动轮转切片机(德国莱卡仪器公司,RM2145);上
皿电子天平(上海精科天平,型号:FA1104);超声波清洗器
(昆山市超声仪器有限公司,型号:KQ5200B)。
2 生药学鉴别
2.1 药材性状鉴别 全草长短不一,扁茎圆柱形,有纵直条
纹,表面黄棕色;茎节处簇生白色绒毛和棕褐色须状根;断面
中空。叶对生,皱缩卷曲,两面均具疏生短毛。偶见头状花序
单生与叶腋,具总花梗;花白色。气微,味微苦涩。
2.2 显微鉴别
2.2.1 茎横切面 类圆形。表皮细胞 1列,类长方形,排列紧
密,外被角质层,可见气孔及非腺毛;厚角细胞 2~3列,成不
连续的环状。皮层由 4~10列薄壁细胞组成,细胞类圆形或椭
圆形,排列疏松。维管束外韧型,8~15个,大小不等,排列成
环。韧皮部狭窄,由韧皮薄壁细胞和筛管组成,外侧可见纤维
束。形成层明显,束间形成层内方有 1~6列厚壁的木化细胞,
与木质部外侧的木化细胞连接成环状。木质部由木薄壁细胞
和导管等组成,管径较大,近圆形,内侧的木薄壁细胞壁未木
化。髓部宽广,细胞较大,常形成空腔。皮层和髓部散在有异
形细胞,内含草酸钙簇晶。见图 1、图 2。
空心苋质量标准初步研究
曾祥燕,颜萍花,唐玉荣,蔡 毅
(广西中医药大学,广西 南宁 530001)
摘 要:[目的]对空心苋质量标准进行初步研究。[方法]通过生药学鉴别研究,并按照 2010年版《中华人民共和国药典》
附录方法对空心苋的水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量等进行测定。[结果]建立了空心苋的生药学鉴别方法,初步拟
定其水分不得超过 15%,总灰分低于 23%,酸不溶性灰分小于 4%,水溶性浸出物含量大于 30%。[结论]所建立的方法可为空心
苋药材质量标准的制定提供实验依据。
关键词:空心苋;质量标准;生药学
中图分类号:R282.2 文献标识码:A 文章编号:2095-4441(2015)02-0071-04
收稿日期:2015-04-20
基金项目:广西自然科学基金创新研究团队项目(编号:2011GXNSFF018006);《广西壮药质量标准(第三卷)》质量评价与标准
研究项目(编号:MZY2013045)
通信作者:蔡毅,E-mail:Caiyi118@163.com
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(编辑 陈明伟)
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2015,Vol.18 No.2Journal of Guangxi University of Chinese Medicine
1气孔 2草酸钙簇晶 3表皮 4韧皮部 5木质部
6皮层 7中柱鞘纤维 8厚角细胞 9髓部 10空腔
图 1 空心苋茎横切面详图
1气孔 2草酸钙簇晶 3表皮 4厚角细胞
5皮层 6中柱鞘纤维 7形成层 8韧皮部
9导管 10非木化薄壁细胞 11髓部 12空腔
图 2 空心苋茎横切面放大示意图
2.2.2 叶横切面 上表皮细胞 1列,类圆形或长方形,外被角
质层;下表皮细胞较小,可见气孔及非腺毛。栅栏细胞圆柱形,
1~2列,不通过主脉;海绵细胞 3~4列,排列疏松;两组织间散
在有异形细胞,内含草酸钙簇晶。主脉处有 3个外韧型维管
束,木质部在上方,韧皮部在下方。上下表皮内具 1~数列厚角
细胞。见图 3。
1草酸钙簇晶 2上表皮细胞 3栅栏组织 4厚角细胞
5木质部 6非腺毛 7韧皮部 8海绵组织 9气孔
图 3 空心苋叶横切面详图
2.2.3 叶表面片 上表皮细胞垂周壁平直或微波状,可见直
轴式气孔及两种多细胞非腺毛,一种短小,似蚕形;另一种较
长,约由 3~5个细胞构成,具疣状突起。下表皮细胞垂周壁波
状弯曲,气孔较多,亦见两种非腺毛。见图 4。
A上表面 B下表面
1气孔 2表皮细胞 3非腺毛(似蚕形) 4非腺毛(细长形)
图 4 空心苋叶表面图
2.2.4 全草粉末特征 非腺毛易见,一种似蚕形,约由 6~8个
细胞构成,微弯曲,壁薄,粗短,先端钝圆或钝尖,长 62~117μm,
直径 18~38 μm,内含浅棕色物;另一种非腺毛细长,约由 3~5
个细胞构成,长 160~380 μm,先端渐尖,近基部短小,近顶端
细胞长大,壁增厚,具疣状突起。气孔为直轴式。大量草酸钙
簇晶散在,直径为 46~100 μm。亦见草酸钙方晶,直径为 19~
100 μm。导管为螺纹导管和梯纹导管,壁多木化。纤维束碎片
易见。见图 5。
1草酸钙簇晶 2草酸钙方晶 3非腺毛
4纤维 5表皮细胞碎片 6导管
图 5 空心苋粉末显微特征图
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2015年 第 18卷 第 2期 广西中医药大学学报
结果显示:采用热浸法,以水为溶剂提取所得浸出物含量
最高。
3.1.2 样品测定 按《中华人民共和国药典》2010年版一部
附录 XA水溶性浸出物项下热浸法[12]550对 15批空心苋进行
测定,结果见表 2。
3.2 水分、总灰分及酸不溶性灰分的测定 按《中华人民共
和国药典》2010年版一部附录 IXH、IXK方法测定[12]附录 26,结
果见表 2。
2.3 薄层鉴别
2.3.1 薄层色谱条件的筛选
2.3.1.1 提取溶剂的选择 取对照药材(KXX-1)适量,分别
加入乙酸乙酯、甲醇、50%乙醇、水等 4种不同极性的溶剂进
行提取,最终以乙酸乙酯提取液所得薄层色谱图斑点最明显。
2.3.1.2 提取方法的选择 取对照药材(KXX-1)适量,分别
考察冷浸 12 h、超声提取 30 min、水浴回流 30 min等 3种不
同提取方法,结果表明 3种方法所得薄层色谱图基本一致,其
中以超声提取 30 min最为省时简便,故选定为提取方法。
2.3.1.3 药材取样量的选择 取对照药材(KXX-1)粉末 3
份,分别为 0.5 g、1 g、2 g,分别加入乙酸乙酯各 20 ml,超声提
取 30 min制备供试品溶液。结果表明,药材取样量为 0.5~2 g
时,均可检视到 3个斑点。但取样量为 0.5 g时,主斑点显色不
够清晰,取样量为 2 g时,主斑点略有拖尾;只有取样量为 1 g
时,主斑点较集中且明显,故药材取样量采用 1 g。
2.3.1.4 展开剂的选择 分别以对环己烷-乙酸乙酯-甲醇-
甲酸(9∶3.5∶1∶0.5)、环己烷-三氯甲烷-甲醇-甲酸(9∶3.5∶1∶0.5)、
环己烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸(12∶3.5∶2.5∶1∶0.5)等
展开系统进行试验,结果显示以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-甲
酸(9∶3.5∶1∶0.5)作为展开剂时,展开效果较好,斑点集中且分
离较好,Rf值适中。
2.3.1.5 显色剂的选择 考察了 10%磷钼酸硫酸乙醇,10%
硫酸乙醇溶液、5%香草醛浓硫酸溶液等显色系统,其中以
10%磷钼酸硫酸乙醇为显色剂所得色谱图斑点清晰,稳定。
2.3.1.6 温湿度的选择 试验中考察了不同温湿度对薄层色
谱的影响,结果表明在室温(30 ℃)下,相对湿度在 50%~88%
内,均可使主斑点分离较好,斑点显色集中、清晰,且比移值变
化不大。
2.3.2 薄层鉴别方法 取样品粉末 1 g,加入乙酸乙酯 20 ml,
超声处理 30 min,蒸干浓缩至 1 ml,照薄层色谱法(《中华人民
共和国药典》2010年版一部附录Ⅵ B)试验[12]附录 26,吸取供试
品溶液和对照药材溶液各 2 μl,分别点于同一硅胶 G薄层板
上,在 T=30 ℃,RT=62%条件下,以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-
甲酸(9∶3.5∶1∶0.5)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以 10%磷钼
酸硫酸乙醇,置于 105℃下烘烤,斑点显色清晰,结果见图 6。
1~15(KXX-1~KXX-15) KXX-1为对照药材
a墨绿色斑点 b浅绿色斑点 c浅棕色斑点
图 6 空心苋薄层色谱图
3 检查项目
3.1 浸出物测定
3.1.1 浸出方法的选择 分别考察不同方法(冷浸法及热浸
法)及不同溶剂(水、不同浓度乙醇溶液)对空心苋浸出物的浸
出效果,结果见表 1。
表 1 空心苋浸出物方法学考察 (%)
方 法 水
乙醇浓度(%)
30 50 70 95
冷浸法 35.94 27.40 20.71 16.14 6.48
热浸法 44.50 39.07 26.78 17.60 9.90
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2015,Vol.18 No.2Journal of Guangxi University of Chinese Medicine
表 2 空心苋水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物测定结果(%) (n=3,RSD<3%)
编号 产地 采集时间 水分(%) 总灰分(%) 酸不溶性灰分(%) 浸出物含量(%)
KXX-1 崇左扶绥县 2013.10.25 10.04 13.66 3.06 41.18
KXX-2 南宁四塘 2013.11.02 8.25 14.16 0.89 37.83
KXX-3 玉林兴业 2013.11.30 9.05 13.66 0.51 46.16
KXX-4 南宁高峰 2013.12.23 12.72 11.55 1.21 42.20
KXX-5 南宁五合大道 2014.03.29 10.24 17.13 0.76 31.11
KXX-6 贵港市港南区 2014.04.06 8.70 19.62 0.79 39.54
KXX-7 桂林灵川县 2014.04.06 7.58 18.59 1.17 36.98
KXX-8 来宾凤凰镇 2014.04.07 11.34 19.81 1.34 36.72
KXX-9 柳州沙塘 2014.04.13 6.32 19.57 0.74 39.74
KXX-10 南宁四塘 2014.04.14 6.71 18.79 1.28 40.95
KXX-11 南宁上林县 2014.04.24 7.92 20.56 0.79 36.20
KXX-12 南宁武鸣县 2014.04.13 7.05 21.96 1.20 38.30
KXX-13 玉林兴业 2014.06.02 10.32 18.54 0.43 35.84
KXX-14 南宁伊岭岩 2014.06.25 6.35 17.70 0.48 37.44
KKX-15 南宁四塘 2014.06.26 9.71 13.94 1.53 32.12
注:KXX-1为对照药材
表 2结果显示:空心苋水分为 6.32%~12.72%,总灰分为
11.55%~21.96%,酸不溶性灰分为 0.43%~3.06%,浸出物为
31.11%~46.16%。
4 小 结
4.1 空心苋的主要鉴别特征为:全草长短不一,茎节处簇生
白色绒毛或棕褐色须状根;叶对生,皱缩卷曲,两面均有疏生
短毛。茎横切面维管束外韧型,8~15个;束间形成层内方有
1~6列厚壁的木化细胞,与木质部外侧的木化细胞连接成环
状;髓部宽广,常裂成空腔;皮层和髓部散在有异形细胞,内含
草酸钙簇晶。全草粉末中可见草酸钙簇晶、方晶和两种多细
胞非腺毛。药材粉末以乙酸乙酯提取,用环己烷-乙酸乙酯-
甲醇-甲酸(9∶3.5∶1∶0.5)展开,所得斑点清晰,分离度较好。上
述鉴别特征明显、稳定,可作为药材真伪鉴别的依据。
4.2 根据 15批药材的测定结果,初步拟定空心苋药材水分
不得超过 15%,总灰分低于 23%,酸不溶性灰分小于 4%,水溶
性浸出物含量大于 30%。目前对空心苋的的质量标准研究仍
处于真伪鉴定为主,其优劣的控制方法尚需进一步研究、完善。
4.3 文中数据显示总灰分含量很高,考虑到有可能是药材中
泥土、沙石所引起,需进行酸不溶性灰分测定。结果表明空心苋
中含有大量草酸钙簇和方晶,并非含大量泥土、沙石,表明采集
的药材样本均合格。因此,为了准确控制药材质量,确保临床用
药质量,总灰分及酸不溶性灰分的测定亦具有一定意义。
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(编辑 陈明伟)
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