全 文 :第 9卷 第 6期 2009年 3月
1671-1819(2009)6-1393-04
科 学 技 术 与 工 程
ScienceTechnologyandEngineering
Vol.9 No.6 Mar.2009
2009 Sci.Tech.Engng.
医药卫生
金刚藤醇提取物抗痛风作用的实验研究
邓家刚 郑作文 黄丽贞
(广西中医学院 ,南宁 530001)
摘 要 通过测定二甲苯致小鼠耳的肿胀 、醋酸致小鼠毛细血管通透性的增加 、微晶型尿酸钠(MSU)致鼠足的肿胀及足炎症
渗出液中前列腺素 E2(PGE2)含量的降低等方法 ,对金刚藤醇提取物的抗痛风作用进行了研究。 实验结果表明 , 金刚藤醇提
物对二甲苯诱导的耳廓肿胀 、醋酸所致的腹腔毛细血管通透性增高 、MSU所致的足跖肿胀 、MSU所致的肿胀足渗出液中 PGE2
生成均有显著的抑制作用 ,提示金刚藤醇提物有明显的抗急性痛风性关节炎的作用。
关键词 金刚藤 抗痛风 抗炎
中图法分类号 R285; 文献标志码 B
2008年 11月 27日收到 广西科技厅 “自治区重点实验室培育
项目 ”(桂科能 0630006-5A)资助
第一作者简介:邓家刚 ,教授 ,博士研究生导师 ,研究方向:中药药效
筛选。 E-mail:dengjg@tom.com。
金刚藤 , 药材名为菝葜 , 是百合科植物菝葜
SmilaxchinaL.的根茎 ,具祛风利湿 ,解毒散瘀等功
效 [ 1] 。民间多用于治疗风湿性关节痛 、跌打损伤 、
胃肠炎 、痢疾 、消化不良 、糖尿病 、乳糜尿 、白带 、癌
症 ,其叶外用治疗疔疮 、烫伤[ 2] 。金刚藤根茎主要
含皂苷类 、氨基酸酚类 、有机酸类及多元酶类等多
种化学成分 。据报道金刚藤有抗感染 、抗炎镇痛 、
抗肿瘤 、活血及增强免疫等药理作用 [ 3] 。本实验旨
在研究金刚藤的抗痛风作用研究 ,为其资源的开发
和临床应用提供实验依据 ,现将实验结果报道如下 。
1 实验材料
1.1 受试药物
金刚藤购于南宁金不换药业有限公司。地塞
米松(浙江仙琚制药股份有限公司 ,批号 070304)。
金刚藤醇提物的制备:金刚藤 5 kg,加入 8倍量
95%乙醇浸泡 12h,回流提取 2h, 过滤 ,药渣加入 8
倍量 95%乙醇回流提取 2h, 过滤 ,合并滤液 ,浓缩
至每毫升相当于 4.2 g生药量 ,置冰箱内备用 。
1.2 实验动物
SPF级雄性 KM小鼠 ,体重 18 ~ 22 g,广西药品
检验所实验动物中心提供 ,生产许可证号:SCXK桂
2003-0001。
1.3 试剂
尿酸(Sigma产品 ,批号 so5000-033)。 MSU的
制备:将 5g尿酸置 1 000 mL沸水中 ,用 NaHCO3调
pH至 7.4,加热至 95 ℃。室温冷却并轻轻搅拌 ,
4℃冰箱冷
却 ,过滤 ,得微晶型尿酸钠结晶 ,用无菌生理盐
水配成 50 mg/mL,临用前高温灭菌 。
1.4 实验仪器
旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂), EL204电
子天平(梅特勒 -托利多仪器(上海)有限公司),
PV— 200足趾容积测量仪 (成都泰盟科技有限公
司), Lambda35UVPerkinElmer(美国珀金艾尔默公
司)。
2 实验方法
2.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
取 18 ~ 22g雄性小鼠随机分为空白对照组 、地
塞米松阳性对照组 (6.3 mg/kg)、金刚藤醇提物高
(84g/kg)、中(42g/kg)、低(21 g/kg)三个剂量组 。
灌胃给药 , 1次 /d,给药容量为 20 mL/kg,连续 5 d。
末次药后 60 min,右耳滴 0.02 mL二甲苯致炎 , 15
min后 ,脱颈椎处死 ,用 6 mm的打孔器打下耳片 ,称
重 ,以两耳片重量差值作为肿胀度 ,并计算抑制率:
抑制率(%)=(空白对照组平均两耳重差—给药组
平均两耳重差 )/空白对照组平均两耳重差 ×
100%。作 t检验 ,比较药物与对照组之间的差异 。
结果见表 1。
2.2 对小鼠腹腔通透性的影响
取 18 ~ 22 g雄性小鼠随机分为空白对照组 、地
塞米松阳性对照组 (6.3 mg/kg)、金刚藤醇提物高
(84g/kg)、中(42g/kg)、低(21 g/kg)三个剂量组 。
灌胃给药 , 1次 /d,给药容量为 20 mL/kg,连续 5 d。
末次药后 60 min,尾静脉注射 0.25%伊文思兰 0.1
mL/10 g, 腹腔注射 0.6%冰醋酸 0.1 mL/10 g, 15
min后 ,脱颈椎处死 ,注入 6mL生理盐水冲洗腹腔 ,
腹腔洗出液 2 000 r/min离心 10 min,取上清液于
590nm处测定吸收值(A),作 t检验 ,比较药物与对
照组之间的差异 。结果见表 2。
2.3 对 MSU致小鼠足肿胀的影响
取雄性小鼠随机分为空白对照组 、地塞米松阳
性对照组(6.3mg/kg)、金刚藤醇提物高(84g/kg)、
中(42 g/kg)、低(21 g/kg)三个剂量组。灌胃给药 ,
1次 /d,给药容量为 20 mL/kg,连续 5 d。末次药后
1 h,将 0.08 mLMSU(50 mg/mL)注入小鼠右后足
跖皮下 ,用足趾容积测量仪分别测量注射前 、注射
后 1、2、3、4、5 h小鼠足趾至踝关节容积 ,并用公式
计算其肿胀度 (肿胀度 E(%)=(Vt-Vn)/Vn×
100%,其中 Vn和 Vt分别代表用致炎剂前后足跖容
积值)。作 t检验 ,比较药物与对照组之间的差异 。
结果见表 3。
2.4 对 MSU致炎足渗出液中 PGE2的影响
取雄性小鼠随机分为空白对照组 、模型对照
组 、地塞米松阳性对照组(6.3 mg/kg)、金刚藤醇提
物高(84g/kg)、中(42 g/kg)、低(21g/kg)三个剂
量组。灌胃给药 , 1次 /d,给药容量为 20 mL/kg,连
续 5d。末次药后 1h,将 0.08 mLMSU(50 mg/mL)
注入小鼠右后足跖皮下 , 5 h后于踝关节上 0.5 mL
处剪下各组致炎足 ,剥皮剪碎放于 3mL生理盐水中
浸泡 1 h,将浸泡液离心 ,取上清液 0.5mL加入 0.5
mol/LKOH-甲醇溶液 2mL,在 50 ℃水浴中异构化
20min,加 7 mL甲醇稀释 ,空白管亦同上述操作(不
加上清液)用紫外分光光度计于 278 nm处测紫外
光吸收度值(A),作 t检验 ,比较药物与对照组之间
的差异。结果见表 4。
2.5 统计学处理
应用统计软件 SPSS11.0对所得实验数据进行 t
检验 。
3 实验结果
3.1 对二甲苯致小鼠耳肿胀的影响
结果如表 1所示 ,金刚藤醇提物高(84 g/kg)、
中(42g/kg)剂量组耳廓肿胀度明显低于空白组 ,差
异有非常显著性(P<0.01), 抑制率在 50.99% ~
57.73%之间 ,提示金刚藤醇提物可明显降低二甲苯
所致耳廓的肿胀度 。
表 1 金刚藤醇提物对耳廓肿胀度的影响( x±s)
组别 动物数 剂量 /g· kg-1 耳廓肿胀度 /g 抑制率 /%
空白对照组 11 - 0.005 7±0.002 2 -
阳性对照组 12 0.006 3 0.001 5±0.001 0** 73.541 0
金刚藤高剂量组 12 84 0.002 8±0.001 7** 50.985 8
金刚藤中剂量组 11 42 0.002 4±0.001 7** 57.728 7
金刚藤低剂量组 12 21 0.004 6±0.002 6 19.085 2
注:与空白对照组比较﹡ P<0.05, **P<0.01,下同。
3.2 对小鼠腹腔通透性的影响
结果如表 2所示 ,金刚藤醇提物高(84 g/kg)、
中(42g/kg)剂量组腹腔液 A值均明显低于空白
组 ,差异有非常显著性(P<0.01),表明金刚藤醇提
物对醋酸所致小鼠毛细血管通透性的增高有显著
的抑制作用。
1394 科 学 技 术 与 工 程 9卷
表 2 金刚藤醇提物对腹腔毛细血管通透性的影响( x±s)
组别 动物数 剂量 /g· kg-1 腹腔液 A值
空白对照组 12 - 0.40±0.12
地塞米松对照组 11 0.006 3 0.25±0.08**
金刚藤高剂量组 12 84 0.20±0.08**
金刚藤中剂量组 15 42 0.254 1±0.09**
金刚藤低剂量组 14 21 0.31±0.10
3.3 对 MSU致小鼠足肿胀的影响
结果如表 3所示 ,金刚藤醇提物高 、中剂量组足
跖肿胀度明显低于空白组 ,差异有显著性 (P<0.
05),提示金刚藤醇提物对 MSU所致小鼠足跖肿胀
的程度有明显的抑制作用 。
表 3 金刚藤醇提物对 MSU所致小鼠足跖肿胀的影响( x±s)
组 别 动物数 剂量g/kg
致炎后肿胀度(%)
1h 2h 3h 4h 5h
空白
对照组 12 -
16.22±
0.20
20.21±
0.21
36.80±
0.29
47.90±
0.28
59.77±
0.34
地塞米松
对照组 12 0.0063
7.26±
0.10
3.75±
0.10*
16.50±
0.11*
19.11±
0.13**
21.67±
0.13**
金刚藤
高剂量组 12 84
9.68±
0.13
3.40±
0.14*
16.85±
0.14*
24.21±
0.21*
29.21±
0.14*
金刚藤
中剂量组 11 42
4.56±
0.12
2.45±
0.16*
10.40±
0.19*
24.45±
0.22*
34.20±
0.23*
金刚藤
低剂量组 11 21
14.21±
0.16
14.65±
0.20
24.40±
0.22
44.96±
0.16
43.43±
0.33
3.4 对 MSU致炎足炎症渗出液中 PGE2的影响
结果如表 4所示 ,金刚藤醇提物高(84 g/kg)、
中(42 g/kg)剂量组均可显著降低炎足渗出液中
PGE2含量 ,与模型对照组比较有非常显著性差异
(P<0.01),表明金刚藤醇提物对 MSU所致炎足炎
症渗出液中 PGE2释放有显著的抑制作用 。
表 4 金刚藤醇提物对 MSU致炎足炎症
渗出液中 PGE2的影响( x±s)
组别 动物数 剂量 /g· kg-1 A值
空白对照组 12 - 0.18±0.02**
模型对照组 12 - 0.31±0.04
阳性对照组 12 0.063 0.23±0.03**
金刚藤高剂量组 12 84 0.25±0.03**
金刚藤中剂量组 11 42 0.26±0.03**
金刚藤低剂量组 11 21 0.29±0.02
4 讨论
尿酸钠盐(monosodiumurate, MSU)沉积是痛风
的特征性病理改变 , 尿酸钠微晶体可在软骨 、滑膜
及周围组织沉积 ,刺激关节滑膜 ,发生滑膜血管扩
张 、通透性升高和白细胞渗出等病理反应 ,出现关
节红 、肿 、热 、痛等急性炎症症状。细胞受 MSU结晶
刺激时 ,产生花生四烯酸(AA), AA从细胞膜游离
出来经细胞微粒体中的环氧化酶催化为前列腺素
类产物 ,导致发热 、疼痛 、血管扩张 、通透性升高及
白细胞渗出等炎症反应 [ 4— 6] 。实验结果表明 ,金刚
藤醇提物对二甲苯致小鼠耳肿胀 、醋酸致小鼠腹腔
毛细血管通透性增高 、MSU所致小鼠足跖肿胀 、
MSU致炎足炎症渗出液中 PGE2含量有显著的抑制
作用 。以上提示金刚藤醇提物有明显的抗痛风作
用 ,其机理可能与抑制 PGE2生成有关。综上所述 ,
金刚藤醇提物具有抗急性痛风性关节炎作用 ,但其
对脂氧化酶途径 、环氧化酶的表达等机理及抗痛风
作用的活性成分有待进一步深入研究。
参 考 文 献
1 中华人民共和国药典委员会.中国药典(一部), 2005版.北京:化
学工业出版社 , 2005:216— 217
2 《全国中草药汇编 》编写组.全国中草药汇编(上册), 1975年版.
北京:人民卫生出版社 , 1992:752— 753
3 邓家刚 ,陈 壮.金刚藤活性成分与药效学及临床应用研究.河
南中医学院学报 , 2005;20(118):23— 24
4 孟昭亨.痛风 , 1997年版.北京:北京医科大学 ,中国协和医科大
学联合出版社 , 1997:93— 96
5 王文魁 ,沈映君 ,齐 云.辛夷挥发油对佐剂性关节炎大鼠足肿
胀及管界组织中前列腺素 2的影响.中国临床康复 , 2005;9
(23):210— 211
6 HellerA, KochT, SchmeckJ, etal.Lipidmediatorininflammatory
disrodersDrugs.1998;55(4):487— 496
13956期 邓家刚 , 等:金刚藤醇提取物抗痛风作用的实验研究
StudyonAnti-goutEfectsofEthanolExtractofRhizomaSmilasicChinae
DENGJia-gang, ZHENGZuo-wen, HUANGLi-zhen
(GuangxiTCMUniversity, Nanning530001, P.R.China)
[ Abstract] TheAnti-goutefectofethanolextractofRhizomaSmilasicChinaewasstudiedbybxylenecaused
miceearedemamodelandincreaseofpermeabilityofmicecapilarycausedbyethanoicacid, torsionbodymethod
byethanoicacid, observingitsefectonmicefootswelingmodelbyMSU, andcontentsofprostaglandin(PG)E2 in
inflammatoryefusion.ResultsindicatedthattheethanolextractofRhizomaSmilasicChinaehadmarkedinhibiting
efectonthedegreeofswelingofmiceearandthepermeabilityofthecapilary, anditcanalsohadmarkedinhibi-
tingefectonthemicefoodswelingbyMSUandthePGE2 ininflammation.TheethanolextractofRhizomaSmilas-
icChinaehasremarkableinhibitingefectonacutegoutyarthritis.
[ Keywords] RhizomaSmilasicChinae anti-gout anti-inflammatory
(上接第 1392页)
KalmanFilterwithColouredObservationNoisesforDescriptorSystems
TAOGui-li, LIUWen-qiang, SUNCheng-fa
(ComputerandInformationEngineeringColege, HeilongjiangInstituteofScienceandTechnologyHarbin, 150027, P.R.China)
[ Abstract] Forthelineardiscretestochasticdescriptorsystemswithmultisensor, usingthesingularvaluedecom-
position, bymeansofalineartransformationoftheobservationequation, thesystemwithcolouredobservationnoi-
sesisconvertedintotwoequivalentreduced-ordersubsystemswithcorelatednoises.BasedonKalmanfiltering
method, fusionreduced-orderdescriptorKalmanfiltersweightedbymatricesisproposedunderthelinearleastvari-
anceoptimalfusioncriterionbyblock-diagonalmatrices.Thecomputationalburdencanreduce, andcanimprove
thelocalfilteringaccuracy.Inordertocomputetheoptimalweights, theformulasofcomputingthecross-covari-
ancesmatricesamonglocalfilteringerorsarepresented.Theaccuracyrelationsamongfusersandlocalfiltersare
proved.AMonteCarlosimulationexampleshowsitsefectiveness.
[ Keywords] descriptorsystem multisensorinformationfusion optimalweightedfusion singularval-
uedecomposition Kalmanfilteringmethod
1396 科 学 技 术 与 工 程 9卷