全 文 ：第 35卷　第 3期 西 南 师 范 大 学 学 报(自然科学版) 2010年 6月
Vo l.35　No.3 　　Journal of Southwest China Normal University (Natural Science Edition) Jun. 2010
文章编号:1000-5471(2010)03-0162-06
蝎子草浸膏的抗炎 、抗痛风及镇静作用研究①
向少能1 , 　刘　媛1 , 　王　洁1 , 　李　丹1 , 　朱　奕1 , 　陈章宝1 , 2
1.西南大学 药学院 , 重庆 400715;2.重庆市兽药工程技术中心 , 重庆 400715
摘要:制备蝎子草浸膏 , 采用二甲苯致小鼠耳肿胀法和角叉菜胶致小鼠足肿胀法 , 并测定小鼠炎足中 PGE2 、
MDA 、 SOD 含量及高尿酸血症模型小鼠血尿酸含量 , 研究蝎子草浸膏的抗炎和抗痛风作用;采用自主活动测定
法 、 转杆法和高架十字迷宫法 , 研究蝎子草浸膏对小鼠中枢神经兴奋性系统的影响.结果表明:蝎子草浸膏能降
低二甲苯致小鼠耳肿胀效果 , 并降低小鼠炎足中M DA 、 PGE2 含量 , 具有抗炎作用;能降低血尿酸 , 具有抗痛风
作用;减少小鼠自主活动次数 , 降低运动协调性 , 具有镇静作用.
关　键　词:蝎子草浸膏;抗炎;抗痛风;镇静
中图分类号:Q949.737.5 文献标识码:A
蝎子草(Girardinia suborbiculata C.J.Chen), 别名红藿毛草 、火麻草 , 为荨麻科蝎子草属一年生或多
年生草本 , 生于海拔 50 ～ 800 m的林下或沟边阴处.在我国广泛分布于陕西 、甘肃 、湖南 、四川 , 资源丰
富.蝎子草作为民间用药在我国由来已久 , 主要用来治疗风湿痹痛 、外伤出血 、溃疡 、肢麻等.陶玲等[ 1] 对
大蝎子草[ Girardinia diversi f ol ia (Link)Friis]的抗炎研究 , 发现大蝎子草提取物水层有较好的抗炎镇痛
作用 , 醋酸乙酯层和氯仿层具有镇痛作用 , 目前对蝎子草(Girardinia suborbiculata C.J.Chen)的研究主要
集中在延长凝血时间 、抑制血小板聚集等方面[ 2] , 但对于蝎子草抗炎 、抗痛风作用以及对神经系统的影响
却未见报道.本研究旨在对蝎子草的抗炎 、抗痛风及镇静作用进行研究 , 为深度开发蝎子草运用奠定基础.
1　材料与方法
1.1　材　　料
1.1.1　动物
昆明种小鼠 , SPF 级 , 体质量 18 ～ 20 g , 雄性 , 2 ～ 3月龄 , 购自第三军医大学实验动物中心.
1.1.2　药物
蝎子草采自重庆北碚 , 经西南大学药学院吴光权老师鉴定 , 确认品种为荨麻科蝎子草属植物蝎子草
(Girardinia suborbiculata C.J.Chen).
1.1.3　药品试剂
二甲苯(批号 20070412)重庆吉元化学公司;冰醋酸(批号 2009524)、无水乙醇(批号 20090702)、甲醇
(批号 20090506)、 KOH(批号 20090223), 角叉菜胶(20090302), 均购自成都科龙化工试剂厂;丙二醛
(MDA)试剂盒(批号 20090721)、 SOD试剂盒(批号 20090721)、NO 化学法试剂盒(批号 20090721)、血尿
①收稿日期:2010-01-11
基金项目:重庆市科委重点攻关资助项目(CSTC;2009AB1181).
作者简介:向少能(1983-), 男 , 四川简阳人 , 硕士研究生 , 主要从事生物化学与分子生物学研究.
DOI :10.13718/j.cnki.xsxb.2010.03.042
酸(UA)试剂盒(批号 20090824)、考马斯亮蓝试剂盒(批号 20090709), 均购自南京建成生物工程研究所.
1.1.4　仪器
高速台式冷冻离心机(S IGMA 3K15);HH-W420数显恒温三用水箱(江苏荣华仪器公司);U-1800
分光光度计(HITACHI);22-6小鼠自主活动测试仪(成都泰盟科技有限公司);YLS-4C 转棒式疲劳仪
(山东省医学科学院);PM-200大小鼠高架十字迷宫(成都泰盟科技有限公司);FA2104A 分析天平(上海
精天电子仪器厂).
1.2　方　　法
1.2.1　蝎子草浸膏制备
取干燥蝎子草全草 500 g , 用 70%乙醇 2.5 L 回流提取 1.5 h , 过滤 , 药渣再加入 2.5 L 70%乙醇回流
提取 1 h , 过滤 , 合并2次滤液 , 80 ℃下浓缩至粗浸膏.粗浸膏加水0.8 L , 无水乙醇 1.5 L , 放置24 h沉淀
浸膏中的叶绿素 , 在 8 500 r/min , 10 ℃下离心 10 min , 取上清液 , 在 80 ℃浓缩至浸膏(1 g 浸膏相当于生
药 10 g), 得到蝎子草浸膏.
1.2.2　试验分组及处理
将 30只雄性小鼠随机分为 3组 , 每组 10只.第 1 , 2组为蝎子草浸膏高 、低剂量组 , 分别按每 1 kg 小
鼠体质量灌胃蝎子草浸膏 2.5 g 和 1.25 g , 浸膏溶于纯化水后进行灌胃;第 3组为生理盐水组 , 小鼠灌胃
等容积的生理盐水.各组小鼠每天灌胃 1次 , 连续灌胃 7 d.
1.2.3　二甲苯致炎试验[ 3-5]
试验动物分组及给药方式见 1.2.2 , 第 7天给药后 1 h , 用移液枪移取 0.15 mL 二甲苯滴加于小鼠左
耳 , 以棉球均匀涂抹小鼠左耳双侧 , 15 min后颈椎脱臼处死动物 , 用直径 8 mm 皮带于左右耳廓相对应部
位各打下一耳片 , 称质量 , 以左右耳片质量之差为肿胀度 , 计算各组肿胀度值及耳肿胀抑制率 , 并与生理
盐水组比较.耳肿胀度=左耳质量-右耳质量;耳肿胀抑制率%=[(生理盐水组耳肿胀度 —给药组耳肿胀
度)/ 生理盐水组耳肿胀度] ×100% .
1.2.4　对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响
试验动物分组及给药方式见 1.2.2 , 第 7天给药后 1 h , 在左后足跖注射 1%角叉菜胶 50 μL 致炎.于
致炎后 4 h于踝关节处剪下左右后肢 , 称质量 , 以左右后肢质量之差作为炎症肿胀程度.足肿胀度=左后
肢质量-右后肢质量;足肿胀抑制率%=[(生理盐水组足肿胀度-给药组足肿胀度)/ 生理盐水组足肿胀
度] ×100%.
将炎足剥皮剪碎 , 放入 2.5 mL 生理盐水中浸泡 40 min , 3 000 r/min 离心 15 min , 上清液即为炎足上
清液 , 于-20 ℃冰箱保存.
1.2.5　对炎症渗出液中前列腺素 E2(PGE2)含量的影响
取 1.2.4制备的炎足上清液 0.5 mL , 加 0.5 mol/L KOH 甲醇液 2 mL , 在 50 ℃下异构化 20 min , 用
甲醇稀释至 4 mL , 于 278 nm 处测定 PGE2的含量(以 A 值表示).
1.2.6　对炎症渗出液中丙二醛(MDA)含量的影响
取 1.2.4制备的炎足上清液 0.5 mL , 按照试剂盒说明操作.
1.2.7　对血清中超氧化物歧化酶(SOD)含量的影响
试验动物分组及给药方式见 1.2.2 , 用对角叉菜胶致炎按照 1.2.4 进行 , 于致炎 4 h后 , 眼眶静脉取
血 , 血样静置 15 min后 , 3 000 r/min离心 10 min , 取上清液 0.2 mL , 按照试剂盒说明操作.
1.2.8　对高尿酸血症小鼠血尿酸影响
36只小鼠正常饲养 3 d后 , 随机分为 4组 , 每组 9只.第 1 ,2组分别按每 1 kg 小鼠体质量灌胃蝎子草
浸膏 2.5 g 和1.25 g , 第 3组为模型对照组 , 第 4组为正常对照组 , 第 3 , 4组灌胃等量生理盐水 , 连续灌胃
6 d.最后一次灌胃给药后 2 h , 第 1 ,2 ,3组每只小鼠腹腔注射10%黄嘌呤 0.01 mL/g , 各组小鼠眼眶取血 ,
163第 3期　　　　　　　　　　向少能 , 等:蝎子草浸膏的抗炎 、抗痛风及镇静作用研究
2 500 r/min离心 10 m in , 取血清按照试剂盒说明操作 , 测定小鼠血清中血尿酸.
1.2.9　自主活动计数[ 6]
将小鼠饲养 2 d后放入自主活动仪内 , 测定 10 min内的活动次数和站立次数 , 剔除个体差异较大的小
鼠 , 选出 30只小鼠.试验动物分组及给药方式见 1.2.2 , 将小鼠放入自主活动测试仪中 , 使其适应 3 m in
后即可开始实验 , 实验过程中保持安静 , 分别于给药前 1天 , 给药后的第 3天 、第 4天 、第 5天 , 每次给药
后测定小鼠 10 min内的活动次数和站立次数.
1.2.10　转杆试验[ 6]
选用一批雄性小白鼠进行筛选 , 将小鼠放置疲劳式转棒仪上 , 设置转速为35 r/min , 转动 5 min , 以不
坠落者为合格小鼠 , 筛选 30只合格小鼠.试验动物分组及给药方式见 1.2.2 , 给药后第 6天 , 再将小鼠放
置转棒上转动 5 min , 观察小鼠 5 min 内坠落数并记录 , 所得数据用精确法检验分析.
1.2.11　高架十字迷宫试验[ 6-7]
试验动物分组及给药方式见 1.2.2 , 第 7天给药后 30 min 进行试验.试验室内光线恒定 , 保持安静.
迷宫测试前将每只小鼠放入一个 30 cm×30 cm×15 cm 塑料盒中 , 任其自由探究 5 min 后迅速置于十字迷
宫的中央平台处 , 使其头部正对其中一个开放臂 , 释放后即开始实验 , 每只小鼠测试 5 min.
1.2.12　统计学处理
除转杆试验外 , 所有实验数据以均数±标准差(±s)表示 , 用 SPSS V13.0统计软件进行数据处理 , 组
间两两比较采用 LSD检验 , p<0.05认为差异有统计学意义.
2　结　　果
2.1　蝎子草浸膏对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响
以二甲苯涂抹小鼠耳廓两面后 , 可引起鼠耳明显肿胀.蝎子草浸膏的高 、低剂量组均可使鼠耳肿胀度
显著降低 , 与对照组比较 , 差异均显著(表 1).
表 1　蝎子草浸膏对二甲苯所致小鼠耳肿胀的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g· kg -1) 耳廓肿胀度/ mg 抑制率/ %
3组 — 6.20±1.52 —
2组 1.25 2.23±1.12 64.03
1组 2.50 1.80±0.85 70.96
　　注:试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比较 , p<0.05 , n=10.
2.2　蝎子草浸膏对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响
蝎子草浸膏高 、低剂量组 , 均能抑制角叉菜胶所致小鼠足爪肿胀 , 但差异不显著(表 2).
表 2　蝎子草浸膏对角叉菜胶所致小鼠足肿胀的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g· kg -1) 足肿胀度/mg 抑制率/ %
3组 — 34.6±12.95 —
2组 1.25 33.1±9.6 4.34
1组 2.50 34.1±12.08 1.45
　　注:试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比较 , p>0.05 , n=10.
2.3　蝎子草浸膏对角叉菜胶所致小鼠炎足中 PGE2 、MDA和血清中 SOD含量的影响
从表3可知 , 蝎子草浸膏高剂量组可明显抑制角叉菜胶所致小鼠炎足中 PGE2 含量(p<0.05), 但低剂
量组差异不显著.蝎子草浸膏高 、低剂量组对小鼠炎足中 MDA 均有显著抑制作用(p<0.05), 且剂量越
大 , 抑制作用越好.蝎子草浸膏高 、低剂量组与对照组比较 , 血清中 SOD含量差异不显著.
2.4　蝎子草浸膏对小鼠高尿酸血症血尿酸含量的影响
模型组与空白组比较 , 血尿酸值极明显升高 , 证明造模成功.蝎子草浸膏高 、低剂量组与模型组比较 ,
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血尿酸值均有下降 , 且差异显著(表 4).
表 3　蝎子草浸膏对角叉菜胶所致小鼠炎足中 PGE2 、 MDA含量的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g· kg -1) PGE2A 值
MDA 含量
/(nmol·mg -1)
SOD含量
/(U·m L-1)
3 组 — 0.661 6±0.176 24 0.713 0±0.203 91 103.614±8.658
2 组 1.25 0.713 0±0.203 91 1.718 6±0.470 2 101.949±8.658
1 组 2.50 0.418 8±0.936 7 1.498 9±0.820 7 114.635±8.214
　　注:①PGE2 试验高剂量组(1 组)与对照组(3 组)比较 , p<0.05 , n=10;② MDA 试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比
较 , p<0.05 , n=10;③血清中 SOD试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比较 , p>0.05 , n=10.
表 4　蝎子草浸膏对角叉菜胶所致小鼠高尿酸血症血尿酸含量的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g· kg -1) 尿酸含量/(μmol· L-1)
4组 — 25.174 2±9.704 2
3组 — 46.000 0±25.649 3
2组 1.25 33.684 7±16.806 6
1组 2.50 32.211 6±11.701 9
　　注:试验组(1 组 、 2 组)与模型组(3 组)比较 , p<0.05 , n=9.
2.5　蝎子草浸膏对小鼠自主活动的影响
蝎子草浸膏对小鼠自主活动的影响随着给药次数的增加而加强.与生理盐水组相比较 , 蝎子草浸膏灌
胃高剂量组在第 3天给药后就出现了明显的活动次数减小(p<0.05), 而低剂量组在第 4天给药后与当日
生理盐水组对比 , 自主活动明显减少(p<0.05);蝎子草浸膏灌胃高剂量组在第 4 天对小鼠站立次数出现
了抑制作用 , 而低剂量组在第 4天对小鼠站立次数也表现出了抑制影响(表 5 ,6).
表 5　蝎子草浸膏对小鼠活动计数的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g · kg -1) 用药前 1天/次 用药后第 3 天/次 用药后第 4天/次 用药后第 5 天/次
3组 — 36.50±7.07 37.20±7.07 51.50±8.03 34.60±9.34
2组 1.25 37.20±7.56 32.20±7.56 39.10±7.29 20.00±5.62
1组 2.50 36.20±5.07 20.30±4.08 23.60±6.98 19.90±8.96
　　注:试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比较 , p<0.05 , n=10.
表 6　蝎子草浸膏对小鼠站立次数的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g · kg -1) 用药前 1天/次 用药后第 3 天/次 用药后第 4天/次 用药后第 5 天/次
3组 — 101.34±12.67 97.90±13.99 152.50±19.29 103.30±11.87
2组 1.25 98.56±11.36 101.80±11.55 129.40±16.08 87.50±14.19
1组 2.50 96.70±11.63 87.20±16.21 99.30±16.65 56.40±10.32
　　注:试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比较 , p<0.05 , n=10.
2.6　蝎子草浸膏对小鼠运动协调能力的影响
与生理盐水组相比较 , 蝎子草浸膏灌胃高剂量组的坠落率显著增多 , 差异显著(表 7).
表 7　蝎子草浸膏对小鼠运动协调能力的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g· kg -1) 坠落率/ % p 值
3 组 — 30.00 —
2 组 1.25 50.00 0.649 7
1 组 2.50 90.00 0.019 7
　　注:试验组(1 组)与对照组(3 组)比较 , p<0.05 , n=10.
2.7　蝎子草浸膏对小鼠OE%、OT%的影响
OE%为进入开放臂次数 , O T %为进入开放臂时间百分比.与生理盐水组比较 , 蝎子草浸膏灌胃高 、低
剂量组 OE%、OT %均降低 , 差异不显著(表 8).
165第 3期　　　　　　　　　　向少能 , 等:蝎子草浸膏的抗炎 、抗痛风及镇静作用研究
表 8　蝎子草浸膏对小鼠 OE%、OT%的影响(x±s)
组别 给药剂量/(g · kg-1) OE/ % OT/ %
3 组 — 36.60±9.60 56.80±7.87
2 组 1.25 34.40±7.83 54.30±7.54
1 组 2.50 26.60±9.81 52.30±6.52
　　注:试验组(1 组 、 2 组)与对照组(3 组)比较 , p>0.05 , n=10.
3　讨　　论
炎症是对各种致炎因子引起损伤所发生的以防御反应为主的病理过程.炎症初期以毛细血管通透性增
高 , 渗出 、水肿为主 , 故采用了炎性(耳或足)肿胀度来研究蝎子草浸膏对炎症早期实验性渗出 、肿胀的影
响[ 8] .从本试验结果可知 , 蝎子草浸膏的高 、低剂量灌胃组可有效缓解二甲苯所致的耳廓肿胀 , 说明蝎子
草浸膏能有效对抗急性炎症 , 且为剂量依赖性.
不同的致炎方法引起炎症的机制不同 , 炎症介质是产生于炎症局部的生物活性很强的化学介质.PGE2
是一种重要的炎症介质 , 蝎子草浸膏灌胃高剂量组能降低角叉菜胶所致小鼠炎足中的 PGE2 含量 , 具有抗
炎作用.但蝎子草浸膏灌胃低剂量组不能降低角叉菜胶所致小鼠炎足中的 PG E2 含量 , 甚至有促进炎足中
PGE2含量增高的趋势 , 说明蝎子草浸膏低剂量没有抑制炎症介质 PG E2 的作用.
MDA 、 SOD等自由基是一类在机体受到病毒 、细菌入侵时 , 机体免疫细胞产生的自由基物质 , 作为防
御手段杀灭细菌病毒 , 通过 MDA 、SOD含量变化反应机体内炎症的变化程度[ 9] .蝎子草浸膏灌胃高 、低剂
量组能降低对角叉菜胶所致小鼠炎足中的 MDA 含量 , 且蝎子草浸膏灌胃剂量越大 , 抑制作用越好;而蝎
子草浸膏灌胃高剂量组对小鼠血清中的 SOD含量影响不大.说明蝎子草浸膏对不同炎症介质的影响不完
全一致 , 影响机理有待进一步研究.
高尿酸血症发生的机制为尿酸生成增多或肾脏尿酸排泄减少 , 故增加体内尿酸 、尿酸前体(次黄嘌呤 、
黄嘌呤 、腺嘌呤)的量或抑制肾小管尿酸的分泌均可使体内血尿酸含量增高 ,导致高尿酸血症.同时 , 体内
尿酸增加 , 容易导致尿酸钠盐在关节及关节周围组织以结晶形式沉积引起急性痛风的炎症反应[ 10] .本试验
采用注射黄嘌呤的方式增加体内尿酸前体含量 , 同时通过给高尿酸血症小鼠灌胃蝎子草浸膏降低体内尿酸
含量 , 说明蝎子草浸膏具有抗高尿酸血症引起的痛风症状 、并降低伴随痛风引起的炎性.
动物的自主活动情况可反映中枢神经系统的功能状态 , 兴奋时活动次数增加 , 抑制时活动次数减少.
蝎子草浸膏能够显著减少小鼠自主活动 , 说明蝎子草具有明显的镇静作用.转杆试验用于评价影响动物运
动协调能力的药物 , 与抑制中枢神经系统有关.同时十字迷宫试验结果表明给药 7 d后虽没有显著的抗焦
虑作用 , 但给药组与生理盐水组相比有降低趋势 , 这与自主活动计数得出的有镇静作用相一致.
神经系统 、内分泌系统和免疫系统共享信息分子和其受体 , 通过细胞因子和神经递质密切联系.研究
结果[ 11]表明抗炎药物在作用于细胞因子 , 起到抗炎作用的同时影响了神经系统 , 神经系统的影响与细胞因
子变化有关.本实验的抗炎效果与中枢系统的镇静作用体现了这一规律 , 印证了两者之间可能存在的某种
联系.
对蝎子草浸膏的初步药理活性研究 , 表明它具有一定的抗炎 、抗痛风和镇静作用 , 而对该药有效成份
及作用机制的探讨 , 则有待于进一步的深入研究.我国蝎子草资源极为丰富 , 喜在温热带生长 , 且民间广
为传用 , 是一类具有良好开发潜力的植物性中药.
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Study on the Anti-inflammatory ,Analgesic and Sedative Effects
of Girardinia suborbiculata C.J.Chen Extract
XIANG Shao-neng 1 , 　LIU 　Yuan1 , 　WANG 　Jie1 ,
LI　Dan1 , 　ZHU 　Yi1 , 　CHEN Zhang-bao1 , 2
1.School of Pharmaceutical Sciences , Southwest University , Chongqing 400715 , China ;
2.Chongqing Engineering Technology Research Center of Zoopharmaceuticals , Chongqing 400715 , China
Abstract:Object ive:To study on the Anti-inf lamma to ry and analgesic effect of Girard inia suborbiculata
C.J .Chen ex t ract by using dime thylbenzene-induced ear sw elling on mice , car rageenan-induced hind paw
edema , and assessing lev el of PGE2 , MDA in the paw of rats and se rum SOD , and hype ruricemia in hype-
ruricemia model m ice.By using autonomic activity test , ro tating rods method , and the elevated plus-maze
test to observe the sedative ef fects of Girardinia suborbiculata C.J .Chen ext ract.The resul t show ed that
the ea r edema induced by dimethy lbenzene and paw edema induced by car rageenan in mice were inhibi ted
signif icantly by Girard inia suborbiculata C.J .Chen ex tract , i t also decreased the level o f MDA , and it in-
hibited the synthesis of PGE2 in the injected paw of rats caused by carrageenan , i t had anti-inflammato ry
effect.The serum uric acid level significant ly increased by injected xanthine in model mices w ere decreased
by Girard inia suborbiculata C.J .Chen ex t ract , so it have analg esic ef fects , furthermore , it could decrease
the spontaneous activi ty and depress the balance abili ty of mice , it also has sedat ive effects.
Key words:Girardinia suborbiculata C.J.Chen ext ract;ant i-inflammation;analgesic;sedation
责任编辑　夏　娟　　　　
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