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茯苓皮与茯苓块中多糖含量测定



全 文 :茯苓皮与茯苓块中多糖含量测定
李俊艳 1 , 魏学军 2 , 石朝珊 2
(1.黔南民族医学高等专科学校附属医院药剂科 , 贵州 都匀 558000;2.黔南民族医学高等专科学
校 , 贵州 都匀 558003)
【摘要】目的:比较两种商品茯苓中多糖含量 , 指导临床用药。方法:以茯苓多糖得率作为指
标 , 采用硫酸 -苯酚法测定 。结果:茯苓块中多糖含量 (12.35%)高于茯苓皮 (10.64%)。结论:
临床用药时 , 首选茯苓块 。
【关键词】茯苓皮;茯苓块;多糖;含量测定
【中图分类号】 R 284.1 【文献标识码】 A 【文章编号】 1008-4983(2009)04-0243-02
  中药茯苓是多孔菌科真菌茯苓的干燥菌核 ,
具有利水渗湿 , 健脾宁心的功能。现代研究证明
茯苓多糖具有增强免疫 、 抗肿瘤作用 [ 1] , 临床
上用复方茯苓多糖注射液治疗肿瘤。茯苓较常用
的商品药材有茯苓块和茯苓皮 , 本文对两种药材
进行多糖含量测定和比较 , 为临床用药提供依
据 。
1 材料与方法
1.1 材料 紫外分光光度计 , 电子天平 , 电热
恒温水浴锅 , 离心机;葡萄糖标准品 , 苯酚 , 硫
酸 , 无水乙醇 , 丙酮 , 乙醚 , (以上试剂均为分
析纯)样品均购自贵州省黔南州医药公司 , 经
黔南医专魏学军老师鉴定为茯苓的干燥菌核。
1.2 方法 采用苯酚 —硫酸法[ 2]测定总多糖含
量 。
2 结果
2.1 粗多糖的提取与精制 称取药材各 20 g,
加水煎煮提取两次 , 合并提取液 , 提取液以纱布
过滤 , 放冷 。离心 5min(2 000r/min), 分取上
清液 , 滤液加醇使含醇量达 80%, 静置过夜。
过滤 , 残渣先后用无水乙醇 、 丙酮 、 乙醚多次洗
涤 , 于 60℃减压干燥即得。
2.2 多糖的含量测定
2.2.1 对照品溶液的制备 精密称取 105℃干
燥恒重的标准葡萄糖 100mg, 精密称定 , 置 100
ml量瓶中 , 用蒸馏水稀释至刻度即得 。
2.2.2 苯酚液的配制  取苯酚 100 g, 加铝片
0.1g与硫酸氢钠 0.05 g, 蒸馏收集 180 ~ 182℃
馏分 , 称取此馏分 5 g, 加水 100 ml, 置棕色瓶
中即得 。
2.2.3 标准曲线的制备 精密吸取对照品溶液
0.1、 0.2、 0.3、 0.4、 0.5、 0.6、 0.7、 0.8、
0.9ml, 分别置 25 ml刻度试管中 , 加入 5%苯
酚溶液 1.00 ml, 摇匀 , 迅速滴加浓硫酸 5.00
ml, 加水至总体积 10ml, 摇匀 , 静置 5min, 置
沸水浴中加热 15min, 再置冷水浴中 10min, 补
充失去的水分至刻度。以 2 ml蒸馏水同法操作
作为空白对照 , 在 490 nm处测定曲线 , 回归方
程为:A=0.0695C+0.0011, r=0.9994 (n=
8)。试验结果表明 , 多糖含量以葡萄糖计 , 在
0.001 6 ~ 0.009 6 mg范围内与吸收度呈良好线
性 。
2.2.4 供试品溶液的制备 精密称取多糖 10.0
mg置 100 ml容量瓶中 , 加水溶解并稀释至刻
度 , 摇匀作贮备液。
2.2.5 换算因素的测定 精密吸取贮备液 2 ml,
按 “2.2.3” 项下方法测定吸收度 , 从回归方程
中求出供试液中含量 , 按下式计算因素:f=W
÷ (C×D), 式中 W为多糖的重量 (mg), C
为多糖液中葡萄糖的浓度 , D为多糖的稀释因
素 , 测得:f=1.34。
2.2.6 加样回收率测定 精密称取样品粉末
20.0mg, 加入一定量的干燥下标准葡萄糖 , 按
供试品溶液制备和含量测定方法操作 , 测得回收
率为 99.12%, 变异系数为 1.08%。
2.2.7 含量测定  精密吸取贮备液 2 ml, 按
“ 2.2.3” 项下方法测定吸收度 , 从回归方程中
求出供试液中葡萄糖含量 , 按 (下转第 247页)
作者简介:(1977-), 女 , 贵州独山县人 , 药师 , 主要从事临床药品调配工作。
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第 22卷第 4期        黔 南 民 族 医 专 学 报        Vol.22 No.4
2009年 12月      JournalofQiannanMedicalColegeforNationalities      Dec.2009
样本有较好的附着力 , 既可省略粘片剂 , 又可简
化实验步骤和节省经费支出。
3.3 湿盒 选择一个平整的试管架将玻片放在
架上 , 再将其放入水浴锅盖上盖子进行保温 , 因
水浴锅内有足够的湿度 , 玻片上的试液不会干
燥 , 确保了实验的顺利完成 , 简单实用。
3.4 荧光抗体的影响及重复使用 荧光抗体因
生产厂家不同价格差异较大 , 本实验采用两种价
格不同的荧光抗体作对比 , 发现实验结果无明显
差别 , 证明可根据实验精度要求和经费情况选择
合适价位的试剂 。本实验还证实荧光抗体至少可
以重复使用一次 , 并不影响实验结果 。
间接免疫荧光法方法大多实验条件要求较
高 , 导致一些实验室难以开展 。本实验结果表
明 , 在实际工作中可以根据现有条件及实验要求
对实验做一些改进 、 简化 , 既省力又省钱 , 同样
可以达到预期效果。
致谢:本实验得到贵阳医学院免疫教研室左丽教
授 、陈阿英 、杨艳 、 崔冬冰 、龙世祺 、 赵青 , 黔
南民族医学高等专科学校卢亚莲等老师的支持和
帮助 , 在此一并表示衷心感谢。
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(2009-10-16收稿)
(上接第 242页)中的香气成分 。烯烃类小分子
化合物构成了芒果的香气成分。可以将萜品油
烯 、 δ-3-蒈烯和 α-萜品烯成分作为香气成分
的作为品质评价的指标性成分 。
参考文献
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(2009-05-05收稿)
(上接第 243页)下式计算样品中多糖含量 。
多糖含量%=C×D×f/W ×100
式中 C为供试品溶液葡萄糖浓度 , D为供试
品中溶液的稀释因素 , f为换算因素 , W为供试
品重量 , 测定结果见表 1
表 1 多糖含量测定 (n=5)
样 品 多糖含量 (%)
茯苓皮 10.64
茯苓块 12.35
3 讨论
茯苓中多糖的含量高低 , 直接影响其临床疗
效。采用苯酚 —硫酸法测定茯苓块和茯苓皮中多
糖含量 , 该方法稳定性好 , 精密度高 , 方法简
便 、 快速 、易行 , 其测定结果可作为临床用药的
依据 。
参考文献
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(2009-12-07收稿)
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第 22卷第 4期        黔 南 民 族 医 专 学 报        Vol.22 No.4
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