全 文 ：［收稿日期］ 20120817(005)
［第一作者］ 景涛，主治医师，博士，从事徐福松教授学术思想传承研究，Tel:13815875413，E-mail:thomasjingxx@ 163. com
［通讯作者］ * 刘叶兰，E-mail:thomasjingxx@ 163. com，Tel:13815875413
聚精枸橘颗粒对畸形精子症患者精子形态学、运动能力及
DNA碎片影响的作用机制
景涛1，唐志安2，刘叶兰1* ，徐福松3
( 1. 南京中医药大学，南京 210046; 2. 江苏省宜兴市人民医院，江苏 宜兴 214200;
3. 江苏省中医院“全国名老中医药专家学术传承工作室( 国家中医药管理局) ”，南京 210029)
［摘要］ 目的:基于多元线性回归模型初步分析了聚精枸橘颗粒干预畸形精子症临床疗效及作用机制，为进一步优化该
领域中药组方临床治疗作探索。方法:采用随机分组对照的设计方法，分为标准对照组 65 例，实验组 65 例分别给予聚精丸与
聚精枸橘颗粒，并对 2 组精子形态学、运动能力及 DNA碎片值等先关指标进行检测分析。结果:多元线性回归模型分析的实
验组治疗前后精液各重要相关指标大部分有显著统计学意义的指标重复，这在复杂统计学分析方法上论证了该研究的临床
疗效，实验组总有效率 42 例(64. 61%) ，对照组总有效率 22 例(33. 84%)。结论:聚精枸橘颗粒可以有效干预畸形精子症。
［关键词］ 多元线性回归;聚精枸橘颗粒;畸形精子症;形态学;运动能力;DNA碎片
［中图分类号］ R287． 6 ［文献标识码］ A ［文章编号］ 1005-9903(2013)09-0304-07
［doi］ 10． 11653 /syfj2013090304
Poly Fine Gouju Particles of Patients with Abnormal Sperm Sperm
Morphology，Athletic Ability of Mechanism of DNA Fragmentation Values
JING Tao1，TANG Zhi-an2，LIU Ye-lan1* ，XU Fu-song 3
［1. Nanjing University of Chinese Medicine，Nanjing 210046，China;
2. Yixing of Jiangsu Province Peoples Hospital，Yixing 214200，China;
3. Jiangsu Province Hospital of Traditional Chinese Medicine National Name Old Traditional Chinese Medicine
Experts Academic Tradition Studio (State Administration of Traditional
Chinese Medicine) ，Nanjing 210029，China］
［Abstract］ Objective:Preliminary analysis based on multiple linear regression model the poly fine Gouju
particles intervene in the clinical efficacy and the mechanism of abnormal sperm，to explore further optimize the
clinical treatment of the field Traditional Chinese Medicine． Method:Randomized control design，divided into
standard control group of 65 cases;experimental group，65 cases were treated with poly pill poly fine Juju
particles，first off，and two groups of sperm morphology，athletic ability and DNA fragmentation values indicators
for detection analysis． Result:Multiple linear regression analysis of the experimental group before and after
treatment，semen from each of the important indicators majority of Table 1-4 in each experimental group are
statistically significant indicators of duplication，this complex statistical analysis on this study the clinical efficacy of
the experimental group total efficiency of 42 (64. 61%) ，control group，the total efficiency of 22 (33. 84%)．
Conclusion:Poly fine Juju Gouju particles can effectively intervene in patients with Abnormal sperm．
［Key words］ multivariate linear regression;Juju Gouju particles;abnormal sperm disease;morphology;
movement ability;DNA fragmentation index
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第 19 卷第 9 期
2013 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 9
May，2013
男性不育症是当今世界男性学科研究中的热点
和难点。精子是延续人类生命的基本，也是决定男
性生育的重要因素。笔者复习历年 WHO《人类精
液及精子-宫颈黏液相互作用实验室技术手册》第 1-
5 版的多项精液质量后发现:在总体下降的趋势中，
以正常精子形态率下降最为突出，从 1987，1992，
1999，2010 年来的正常参考值依次为 ＞ 50%，
＞ 30%，＞ 15%，＞ 4%［1］，全球范围内精液质量全
面快速下降的趋势已是不争的事实，引起下降的主
要原因之一是内分泌干扰物和其他的环境污染物影
响的增加。
目前，临床缺乏改善精子形态的药物治疗方法，
对于畸形精子症的治疗主要为:①经 PESA 或 TESA
后实行 IVF-ET 或 ICSI 方案;②供精人工授精
(AID)及收养方案。
聚精枸橘颗粒是徐福松教授根据我国著名中医
学家许履和教授的经验方，结合自己的多年的临床
体会组合枸橘汤《外科全生集》化裁而成的方药。
导师徐福松教授根据睾系病不同特点，多年来治疗
畸形精子症取得了肯定的临床疗效。本课题文基于
多元线性回归模型初步分析了聚精枸橘颗粒对畸形
精子症患者精子形态学、运动能力及 DNA碎片值的
影响及作用机制，将为进一步优化该领域中药组方
临床治疗作探索，是对中医药干预畸形精子症的临
床疗效的首次集中报道。
1 临床资料
病例来源:①江苏省中医院“全国名老中医药
专家学术思想传承徐福松工作室(国家中医药管理
局)”;②江苏省中医院生殖医学科，收集在上述临
床门诊就诊的男性少、弱、畸形精子症患者。
2 畸形精子症诊断标准
精子形态学的评判标准主要有一般标准(WHO
标准)和严格标准(Kruger 等制订，WHO 推荐
Tygerberg严格标准)。WHO标准为［1］:在异常形态
精子中，根据精子的头、颈 /中段、尾部异常，又分为
大头精子、小头精子、锥形头精子、梨形头精子、无定
形头精子、空泡样头精子、双头精子、颈部 /中段缺陷
精子、尾部缺陷精子和其他畸形精子。严格标准
(Tygerberg 严格标准) :正常形态精子 ＞ 15% 为
正常［1］。
本课题患者精液精子形态学染色检测采用
(Tygerberg 严格标准) :正常形态精子 ＞ 15% 为正
常;异常形态精子 ＞ 85%为异常。
3 病例选择
3. 1 纳入标准 (同时符合 1 ～ 4 项) :①患者睾丸
体积检测(≥10 mL) ;(采用 Prader睾丸模型比拟法
或阴囊超声测量) ;符合上述畸形精子症诊断标准
的少、弱、畸形精子症患者，并同时自愿签署知情同
意书，年龄 25 ～ 45 岁的患者;③夫妻同居，性生活正
常，未采取避孕措施，女方经查生殖受孕机能正常。
3. 2 排除标准 ①不符合纳入标准，有遗传性疾
病家族史的患者或活动性感染的患者或尚未治愈
者;②服用抗肿瘤、癫痫药物及正接受放疗、化疗等
有碍生精及精子活力的患者;③合并有心血管、肝、
肾和造血系统等严重原发性疾病患者;精神障碍患
者;④无法判断疗效或资料不全等影响疗效和安全
性判断者;⑤有长期大量嗜烟、饮酒习惯，或接触高
温、放射、有毒化学环境，而不能改变或放弃的患者。
3. 3 剔除病例与放弃病例 ①服用中药后有连续
严重不良反应或对中药过敏的患者;②治疗过程中
发现不符合纳入标准的病例，需予剔除;③受试者依
从性差不能按照医嘱配合治疗的;④患者放弃就诊，
或其他客观原因或不可抗拒力造成研究无法继续的
情况。
4 研究方法
4. 1 研究设计与治疗方案 采用随机分组对照的
设计方法，分为标准对照组、实验组，均征得患者本
人同意。
4. 2 各组病例样本量 130 例患者分为:标准对照
组(A组)65 例;实验组(A 组)65 例。说明:经过两
组资料均数差别的假设检验所需样本含量估计(公
式计算结合查表法) ，本研究中两组病例样本量符
合假设检验要求。
4. 3 治疗方法 标准对照组:患者给予聚精丸(主
要组成:熟地黄、何首乌、紫河车、制黄精、枸杞子、沙
苑子、茯苓、薏苡仁、淫羊藿、生地黄、当归、党参、益
母草、煅牡蛎等) ，由江苏省中医院制剂部提供;口
服 5 g /次，2 次 /d，3 个月 /疗程，共 4 个疗程)。
实验组:患者给予聚精枸橘颗粒(主要组成:生
地黄、熟地黄、沙苑子、枸杞子、桑葚子、五味子、南沙
参、北沙参、天门冬、麦门冬、柴胡、煅牡蛎、煅龙骨、
薏苡仁、川续断、全枸橘、绿豆衣、野菊花、红花、皂角
刺、白花蛇舌草、干地龙、白茅根等) ;口服，2 次 /日，
90 d /疗程，共 4 个疗程) ;由江苏省中医院中药房
统一发放中药配方颗粒。
4. 4 临床观察指标 ①精浆生化及免疫、血清性激
素 5 项系列参数分析;②精子理化及活力指标分析;
·503·
景涛，等:聚精枸橘颗粒对畸形精子症患者精子形态学、运动能力及 DNA碎片影响的作用机制
③精子形态学与精子 DNA碎片指数分析。
4. 5 统计方法 采用 SPSS 20. 0 统计软件，数据采
取珋x ± s，对于 A 组与 B 组治疗前后分别进行配对 t
检验(Paired-Samples T Test) ，组间比较采用 F(One-
Way ANOVA)分析，同时进行方差齐性检验(test of
homogeneity of variances) ，并分析数据的正态或偏态
分布，以 P ＜ 0. 05 为有统计学意义;采用多元线性
回归模型的回归系数(pearson correlation)具体分析
探讨 A组与 B 组精液各重要指标的相关性，非参数
检验采用行 ×列(Crosstabs)表的 χ2 检验。
5 检测方法
5. 1 染色体及性激素检测
5. 1. 1 Y 染色体 AZF 基因微缺失、男性核型染色
体(46，XY)分析检测 患者在门诊初诊后、治疗前，
均在南京医科大学生殖医学国家重点实验室进行
AZF基因微缺失及男性染色体分析检测。1 周后报
告精子发生基因(AZF) ;YRRMI，DAZ，DYS240 结
果，2 周后报告男性染色体分析检测结果(正常男性
为核型:46，XY)。
5. 1. 2 血清性激素促卵泡生成素(FSH)、黄体生成
素(LH)、睾酮(T)、雌二醇(E2)、泌乳素(PRL)水平
检测 患者在治疗前和治疗后各 1 次清晨 7:00 ～
8:00 空腹肘前静脉采血 3 mL，室温下静置 1. 5 h 用
后离心机(北京医用离心机厂，LDZ5-2)分离血清
10 min(离心机转速 3 000 r·min －1) ，分离出的血清
装在 20 mL的离心管内，－ 20 ℃以下贮藏。采用全
自动微粒子化学发光免疫系统(ACCESS，美国
BECKMAN公司)检测治疗前后患者血清样本中的
T，E2，LH，FSH，PRL的变化水平。
5. 2 精液生化、形态及动力学等参数检测
5. 2. 1 仪器 离心机(美国 Eppendorf 公司)、光学
显微镜(德国 Leica公司)、Makler精液计数池(以色
列 Sefi公司)、微量移液器(美国 Eppendorf公司)。
5. 2. 2 主要试剂 ①精浆酸性磷酸酶(ACP)测试
盒、②精浆 α 糖苷酶(α-GLU)测试盒、③精浆果糖
(Fru)测试盒(均购自南京建成生物工程研究所) ;
④磷酸二氢钠、磷酸氢二钾、磷酸氢二钠、碳酸氢钠、
氯化钠、氯化镁、甲醛溶液、柠檬酸、甲醇、乙醇、冰乙
酸、浓盐酸、丙三醇等实验室常用试剂购于北京化学
试剂公司。⑤DNA 碎片指数化检测试剂盒购自德
国 Merck生物技术公司;⑥改良巴氏染色试剂，购自
珠海贝索生物技术公司。
5. 2. 3 精液采集 禁欲 2 ～ 7 d，在实验室附近用手
淫取精法，收集完整精液于清洁、干燥的小瓶内，置
37 ℃培养箱内，观察液化后立即进行检测。
5. 2. 4 精子动力学参数分析 精液完全液化后，充
分混匀，用移液器吸取 6 μL 精液于精子计数板
(makler counting cham-ber，以 色 列，Sefi-medical
Instruments)上，盖上专用盖片，置 37 ℃恒温条件下
采用计算机辅助的精子动态图像检测系统(清华同
方，CASAS-QH-Ⅲ)检测标本，每份标本随机采样至
少 200 个精子以上，获得精子活力及运动能力轨迹
等参数，每份标本均在 3 ～ 5 min 内完成上述项目的
检测。根据世界卫生组织(2010 年)标准［4］，对精液
进行常规分析，记录精子浓度、前向运动率、精子运
动能力参数。
5. 2. 5 精子形态学分析 精子形态学分析采用改
良巴氏(Papanicolaou)染色法［1］。液化后的精液用
磷酸盐缓冲液 (phosphate buffered saline，PBS，
0. 01 mol·L －1，pH 7. 4)洗涤 2 次(1 000 r·min －1 ×
10 min) ，并将精子密度调整为 50 × 106 /mL 左右。
载玻片事先用稀盐酸浸泡过夜，自来水冲洗并用
95%乙醇洗涤后，空气干燥备用。吸取稀释好的精
子悬液 10 pl，滴在载玻片上，均匀涂片，空气干燥
后，以 95%乙醇固定 5 ～ 15 min 后染色。载玻片封
片后，采用 × 100 倍光学显微镜观察，按照《WHO 人
类精液及精子、宫颈黏液相互作用实验室检验手
册》(第 5 版)［1］的严格标准，每张载玻片至少连续
计数 200 个精子，用 Krugers标准法分别观察正常形
态精子、头部缺陷精子、胞浆小体缺陷精子、尾部缺陷
精子及混合型的数目及百分率，并计算的畸形精子指
数(teratozoospermia index，TZI)。
6 临床疗效标准
①患者配偶自然怀孕(临床治愈) ;②患者精液
质量与功能检测发现前向异常形态精子百分数 ＜
85%(临床显效)［1］;③患者精液质量与功能检测发
现前向异常形态精子百分数较前比较降低1% ～ 3%
(临床有效) ;④患者精液质量与功能检测发现前向
异常形态精子百分数较前比较降低 ＜ 1% 或增加
(临床无效)。
7 结果
7. 1 一般情况及相关鉴别诊断，病史及相关情况分
析 附睾及睾丸炎症病史 7 例(5. 3%)、附睾及睾
丸结核病史 9 例(6. 9%)、附睾及睾丸外伤及手术
史 4 例 (3. 1%)、病 毒 性 腮 腺 炎 病 史 15 例
(11. 53%)、支原体 UU /衣原体 CT 阴性(+)5 例
(3. 8%)、血清 /精浆抗精子抗体阳性(+ )2 例
(1. 5%) ，精子发生基因 AZF(+)存在检测 130 例
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 9
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(100%) ，男性核型染色体(46，XY)分析检测 130
例(100%)。
经过 统 计 学 处 理:在 年 龄 方 面;实 验 组
(32. 29 ± 5. 44)岁，对照组(33. 35 ± 5. 72)岁;方差
齐性分析 P = 0. 386 ＞ 0. 05;两组方差检验:F =
0. 468，P = 0. 497 ＞ 0. 05。禁 欲 时 间;实 验 组
(3. 78 ± 1. 28)d，对照组(3. 96 ± 1. 64)d;方差齐性
分析P = 0. 209 ＞ 0. 05;F = 0. 689，P = 0. 401 ＞ 0. 05。
据此说明两组年龄及禁欲时间资料分布符合正态分
布特点，同时两组在年龄及禁欲时间上差异不显著
性(P ＜ 0. 05) ，具有可比性。
治疗前后两组精浆生化、物理检测参数与血清
激素水平对比分析。见表 1 ～ 4。
7. 2 多元线性回归模型分析实验组治疗前后精液
各重要指标的相关性 检验过程:①随机误差项
(正态性检验) ;②随机误差项(均值是否为 0 检
验) ;③随机误差项(分布的方差齐性检验) ;④随机
变量(残差 Residual)的独立性通过 Durbin-Watson
检验，以治疗前后最后保留在模型中的有效变量分
别列出表示，自变量选着 Backward 向后剔除法(正
态分布直方图及散点图略)。
7. 2. 1 以异常形态精子为因变量的多元线性回归
模型分析 治疗前(有效变量) :鞭打频率(BCF) ，
P = 0. 039 ＜ 0. 05;治疗后(有效变量) :平均移动角
表 1 治疗前后精浆生化及精子质量及功能参数检测比较(珋x ± s)
项目
精浆生化及精子质量参数
治疗前 治疗后
实验组 对照组 实验组 对照组
精浆果糖 1 751． 17 ± 912． 34 1 637． 20 ± 871． 01 2 001． 04 ± 914． 351，2) 2 387． 20 ± 733． 06
a糖苷酶 37． 77 ± 18． 47 44． 23 ± 19． 49 42． 42 ± 13． 10 38． 80 ± 13． 30
碱性磷酸酶 102． 15 ± 38． 76 104． 92 ± 39． 03 104． 92 ± 53． 90 115． 68 ± 47． 75
pH 7． 27 ± 0． 12 7． 25 ± 0． 07 7． 26 ± 0． 10 7． 33 ± 0． 14
液化时间 /h 32． 16 ± 13． 39 31． 03 ± 8． 82 31． 55 ± 11． 06 34． 63 ± 12． 73
精液体积 4． 02 ± 1． 51 3． 75 ± 1． 20 3． 30 ± 1． 29 3． 23 ± 1． 24
精浆 Zn含量 1． 71 ± 0． 51 1． 59 ± 0． 58 1． 88 ± 0． 62 2． 08 ± 0． 501)
密度 17． 76 ± 3． 46 12． 08 ± 6． 72 41． 75 ± 9． 13 30． 62 ± 8． 60
前向运动精子 /% 19． 74 ± 4． 03 19． 10 ± 3． 57 32． 97 ± 7． 221，2) 24． 64 ± 7． 101)
非前向运动精子 /% 22． 95 ± 15． 09 23． 12 ± 16． 43 15． 09 ± 8． 88 16． 46 ± 7． 20
不动精子 /% 48． 24 ± 25． 15 47． 41 ± 21． 49 37． 62 ± 18． 30 39． 08 ± 24． 20
总数 /每次 101． 40 ± 80． 79 108． 51 ± 86． 73 177． 63 ± 89． 131，2) 143． 07 ± 85． 901)
说明:与本组治疗前比较，1)P ＜ 0. 05，与对照组比较，2)P ＜ 0. 05。
表 2 治疗前后精子运动能力参数比较(珋x ± s)
精子运动能力参数
治疗前 治疗后
实验组 对照组 实验组 对照组
曲线速度 /μm·s － 1 51． 95 ± 24． 84 55． 23 ± 19． 32 42． 79 ± 19． 10 47． 73 ± 23． 87
平均直线速度 /μm·s － 1 24． 53 ± 7． 79 31． 43 ± 12． 13 41． 21 ± 17． 22 36． 78 ± 17． 69
PR中直线速度 ＞ 35 μm·s － 1(%) 11． 01 ± 2． 08 12． 50 ± 1． 48 22． 88 ± 3． 011) 14． 34 ± 2． 40
平均路径速度 /μm·s － 1 35． 40 ± 24． 82 43． 35 ± 22． 70 56． 36 ± 25． 631) 62． 61 ± 36． 771)
精子头侧摆幅度 /μm 2． 86 ± 0． 63 2． 64 ± 0． 46 2． 32 ± 0． 39 2． 73 ± 0． 30
平均移动角度 / ° 47． 53 ± 7． 78 43． 53 ± 6． 61 41． 10 ± 10． 36 44． 31 ± 8． 16
鞭打频率 /Hz 2． 36 ± 1． 82 2． 63 ± 1． 63 3． 73 ± 1． 731，2) 3． 12 ± 1． 33
直线性 0． 22 ± 0． 14 0． 20 ± 0． 17 0． 65 ± 0． 091) 0． 70 ± 0． 30
前向性 0． 65 ± 0． 17 0． 76 ± 0． 11 0． 72 ± 0． 40 0． 66 ± 0． 17
摆动性 0． 95 ± 0． 09 1． 06 ± 0． 07 0． 98 ± 0． 04 0． 92 ± 0． 06
圆细胞密度 / × 106 /mL 1． 33 ± 0． 57 1． 38 ± 0． 51 1． 49 ± 0． 391，2) 2． 15 ± 0． 671)
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景涛，等:聚精枸橘颗粒对畸形精子症患者精子形态学、运动能力及 DNA碎片影响的作用机制
表 3 精子形态学分析-基本与混合分类参数检测比较(珋x ± s) %
精子形态学参数
治疗前 治疗后
实验组 对照组 实验组 对照组
正常率 6． 01 ±1． 95 8． 02 ±4． 09 19． 61 ±6． 621，2) 11． 37 ±4． 01
异常率 92． 84 ±11． 71 93． 33 ±7． 18 69． 81 ±8． 401，2) 85． 19 ±9． 62
头部异常率 92． 39 ±38． 10 89． 15 ±51． 19 76． 41 ±38． 261，2) 90． 77 ±45． 30
颈部异常率 25． 12 ±5． 20 18． 07 ±7． 32 21． 82 ±8． 29 15． 13 ±6． 08
尾部异常率 6． 58 ±4． 48 6． 22 ±5． 83 4． 28 ±2． 21 4． 13 ±2． 70
头部 +颈部异常率 17． 87 ±7． 01 13． 25 ±5． 83 12． 92 ±3． 681，2) 12． 54 ±4． 82
头部 +尾部异常率 12． 35 ±5． 83 16． 28 ±8． 72 12． 40 ±7． 70 17． 35 ±8． 38
颈部 +尾部异常率 16． 28 ±8． 72 14． 01 ±5． 49 11． 05 ±4． 621，2) 12． 98 ±6． 061)
头部 +颈部 +尾部异常率 10． 80 ±3． 40 8． 76 ±4． 25 9． 84 ±4． 57 9． 25 ±5． 08
胞浆小滴 0． 53 ±0． 24 0． 47 ±0． 39 0． 52 ±0． 40 0． 68 ±0． 57
正常顶体率 14． 74 ±5． 75 18． 50 ±4． 23 39． 89 ±13． 621，2) 25． 94 ±10． 501)
畸形精子指数 1． 56 ±0． 31 1． 54 ±0． 48 1． 41 ±0． 68 1． 63 ±0． 41
精子畸形指数 1． 62 ±0． 21 1． 48 ±0． 33 1． 28 ±0． 521，2) 1． 37 ±0． 79
精子 DNA碎片值 DFI 18． 36 ±4． 50 15． 58 ±5． 25 11． 75 ±5． 251，2) 18． 26 ±7． 091)
表 4 血清性激素 5 项治疗前后比较(珋x ± s)
血清性激素
治疗前 治疗后
实验组 对照组 实验组 对照组
雌二醇 /ng·L －1 32． 07 ± 24． 25 36． 81 ± 23． 55 39． 57 ± 17． 63 42． 31 ± 19． 81
睾酮 /ng·dL －1 227． 58 ± 45． 74 282． 95 ± 95． 17 389． 39 ± 132． 521) 368． 07 ± 127． 143)
卵泡刺激素 /U·L －1 14． 39 ± 8． 94 12． 84 ± 10． 57 15． 89 ± 10． 98 14． 73 ± 12． 93
黄体生成素 /U·L －1 5． 09 ± 1． 36 5． 01 ± 1． 49 5． 91 ± 1． 98 4． 79 ± 1． 45
催乳素 /μg·L －1 7． 86 ± 2． 60 6． 80 ± 2． 53 6． 12 ± 3． 822) 5． 93 ± 2． 514)
注:与治疗前比较1)P ＜ 0. 05，2)P ＜ 0. 05，3)P ＜ 0. 05，4)P ＜ 0. 05。
表 5 患者治疗前后临床疗效比较 例(%)
临床疗效分析 实验组 对照组
治愈 3(4. 61) 0(0)
有效 31(47. 69) 17(26. 15)
显效 8(12. 31) 5(7. 69)
无效 23(35. 38) 43(66. 15)
总有效 42(64. 61) 22(33. 84)
注:治疗后，经行 ×列(Crosstabs)表的 χ2 检验，实验组与对照组
比较 P均 ＜ 0. 05。
度(MAD) ，P = 0. 019 ＜ 0. 05。
7. 2. 2 以精子 DNA碎片值 DFI为因变量的多元线
性回归模型分析 治疗前(有效变量) :头部异常
率，P ＜ 0. 05;治疗后(有效变量) :颈部异常率，P ＜
0. 05;头部 +颈部 +尾部异常率;P ＜ 0. 05。
7. 2. 3 以前向运动精子 PR(%)为因变量的多元
线性回归模型分析 治疗前(有效变量) :E2，P ＜
0. 05;治疗后(有效变量) :精浆果糖 Fru，P ＜ 0. 05。
7. 2. 4 以密度(Concentration)为因变量的多元线
性回归模型分析 治疗前(有效变量) :精液量
(Volume) ，P ＜ 0. 05;精子总数 /每次排出，P ＜ 0. 05;
头部 +颈部异常率，P ＜ 0. 05;治疗后(有效变量) :
胞浆小滴 P ＜ 0. 05;碱性磷酸酶 ACP，P ＜ 0. 05;a 糖
苷酶 aGlu，P ＜ 0. 05。
7. 2. 5 以 PR中直线速度 ＞ 35 μm·s － 1(%)为因变
量的多元线性回归模型分析 治疗前(有效变量) :
鞭打频率 BCF，P ＜ 0. 05;治疗后(有效变量) :前向
运动精子，PR(%) ，P ＜ 0. 05。
7. 2. 6 以鞭打频率 BCF(Hz)为因变量的多元线性
回归模型分析 治疗前(有效变量) :异常率(%) ，
P ＜ 0. 05;精子 DNA 碎片指数 DFI(%) ，P ＜ 0. 05;
治疗后(有效变量) :直线性 LIN，P ＜ 0. 05;平均移
动角度 MAD/°，P ＜ 0. 05，正常率 /%，P ＜ 0. 05;PR
中直线速度 ＞ 35 μm·s － 1(%) ，P ＜ 0. 05;前向性
STR，P ＜ 0. 05;头部异常率 /%，P ＜ 0. 05;液化时间
Liquefaction Time，P ＜ 0. 05;摆动性 WOB，P ＜ 0. 05;
圆细胞浓度(× 106 /mL) ，P ＜ 0. 05。
7. 2. 7 以精浆果糖为因变量的多元线性回归模型
分析 治疗前(有效变量) :a-Glu，P ＜ 0. 05;不动精
子(%)IM，P ＜ 0. 05;精液量，P ＜ 0. 05;治疗后(有
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第 19 卷第 9 期
2013 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 9
May，2013
效变量) :睾酮 T，P ＜ 0. 05;E2，P ＜ 0. 05，前向运动
精子% PR，P ＜ 0. 05，圆细胞密度 × 106 /mL) ，
P ＜ 0. 05。
7. 2. 8 以液化时间为因变量的多元线性回归模型
分析 治疗前(有效变量) :碱性磷酸酶 ACP，P ＜
0. 05;pH，P ＜ 0. 05;治疗后(有效变量) :正常顶体率
(%) ，P ＜ 0. 05;摆动性 WOB，P ＜ 0. 05。
8 讨论
8. 1 本研究中多元线性回归模型对实验组治疗前
后精液各重要指标的相关性分析
在精子形态学方面分析结果 DFI 为正常率
(%) ，异常率(%) ，精子 DNA 碎片(%) ，头部异常
率，颈部异常率，头部 +颈部 +尾部异常率，头部 +
颈部异常率，圆细胞密度(× 106 /mL) ，胞浆小滴。
在精子运动能力方面分析结果为 PR 中直线速
度 ＞ 35 μm·s － 1(%) ，直线性，鞭打频率，摆动性，平
均移动角度，正常顶体率(%) ，摆动性，前向性。
在精子质量与精浆生化方面分析结果为:精子
总数 /每次排出，前向运动精子 PR(%) ，不动精子
(%)IM，精浆果糖，碱性磷酸酶 ACP，a 糖苷酶
aGlu，精液量 volume，pH，液化时间 liquefaction
time。
在血清激素方面分析结果为睾酮(T) ，P ＜
0. 05，E2，P ＜ 0. 05。
经过比较不难发现;多元线性回归模型分析的
实验组治疗前后精液各重要相关指标大部分与与表
1 ～ 4 中各实验组有显著统计学意义的指标重复，这
在复杂统计学分析方法上论证了本研究的临床
疗效。
笔者结合 12 个月治疗后情况，如表 4 所示，与
治疗前比较，患者血清性激素 5 项中的黄体生成素
有显著差异(P ＜ 0. 05)、睾酮 T 水平有显著差异
(P ＜ 0. 05) ;精子质量及功能参数中的精浆果糖，前
向运动精子%，总数 PR 中直线速度 ＞ 35 μm·s － 1
(%) ，平均路径速度(μm·s － 1) ，鞭打频率(Hz) ，直
线性，圆细胞密度(× 106 /mL)方面比较，上述各项
目均值差异 P均 ＜ 0. 05，均有显著统计学意义。据
此笔者初步分析聚精枸橘颗粒参与了精子发生的内
分泌及旁分泌的调节。
8. 2 聚精枸橘颗粒干预畸形精子症的临床疗效与
作用机制分析 畸形精子症:中医古籍中无“畸形
精子症”的名称，因其结果引起不育，故属于“无子”
的范畴。
睾丸内生精细胞对温度非常敏感，正常情况下
阴囊随外界温度变化而收缩或松弛，以维持阴囊内
温度在 32 ～ 33 ℃，近年来的一些研究清楚地表
明［2］，任何一种持续的热暴露都将对精液质量的多
个方面造成负面影响，高温会引起睾丸内微循环、代
谢和生化的改变，如氧耗增加、酶活性的改变等，最
终导致生精上皮受损。
值得注意的是，适当减少久坐时间，进行科学的
健身锻炼对于降低阴囊-睾丸温度，从而间接改善精
子发育与成熟的内环境。
徐师不唯“肾无实证”之说，多年来应用“补肾
导浊治法”治疗畸形精子症取得较好的临床疗效。
根据导师历年来的临证经验，笔者认为本研究中，聚
精枸橘颗粒的药理作用主要有:①生地黄、熟地黄的
应用是基于改善患者肝经、肾经之阴考虑;枸杞子、
沙苑子、桑葚，证实多用子药确有奇效，无论精子形
态、数量、质量异常皆可参考使用。②南沙参、北沙
参、天门冬、麦门冬，是基于改善患者肺经、胃经之阴
考虑，沙参麦冬汤源于清代吴鞠通的《温病条辨》，
原方由沙参、麦冬、玉竹、天花粉、冬桑叶、生扁豆、生
甘草 7 味药组成，具有清养肺胃、润燥生津之效，主
治温热和燥热之邪伤及肺胃阴分证。徐师从肺论
治，取金水相生之意。③红花、白花蛇舌草、皂角刺、
干地龙，是针对提高精子数量，抗炎，抗过敏，从以往
的中药干预男性少弱精症的临床报道中也证实类似
的药理作用［3］。④川续断、炙水蛭;行气散瘀，活血
(破血)导滞作用较强，改善生殖会阴局部血液循
环;⑤绿豆衣、野菊花有解毒化毒之功，针对畸形精
子的高发生率而言。⑥柴胡、煅龙骨、煅牡蛎有柴胡
桂枝龙骨牡蛎汤之功，软坚散结、养阴潜阳、重镇安
神。有研究表明，哺乳动物 GnRH 的分泌包括脉冲
式释放和大量释放两种。节律性脉冲分泌的原因之
一，是为了避免下丘脑内 GnRH 受体的下调［4］。本
研究中患者治疗期间睡眠及情绪得到一定的改善，
可能改善了 GnRH 的分泌包括脉冲式释放模式，利
于精子的发生与凋亡。
对于重度畸形精子症患者(畸形精子率 ＞
96%)［1］而言，在降低畸形精子百分率的同时，积极
提高患者精子的密度、总数、活力及精液量也是重要
的措施，毕竟在精子畸形率难降低的情况下，前述参
数的提高，对于患者配偶自然怀孕是积极有益的，在
本次临床研究中有 3 例患者的配偶在治疗过程中自
然怀孕，而怀孕前的异常形态精子百分率参数检测
仍然 ＞ 85%，有 1 例配偶怀孕时的异常形态精子百
分率参数为 99. 3%。
·903·
景涛，等:聚精枸橘颗粒对畸形精子症患者精子形态学、运动能力及 DNA碎片影响的作用机制
笔者注意到，人的精子发生一般需要 4 个或 4
个半生精上皮周期，每个生精生精上皮周期历时 16
d，故人的精子发生需要 64 ～ 70 d，生精小管产生的
精子进入附睾大约需要 14 d，因此，应用调控精子发
生的药物方法后进行起效观察，至少需要 80 d［5］，
据此，在考虑到个体差异后，在本研究中按90 d /疗
程来计算。在 12 个月的治疗期间，有 2 例患者的配
偶自然受孕，这对于医患双方均有积极的意义。同
时过频的排精势必影响到精子的数量和密度，过长
的房事时间间隔则会影响精子的活动力。理想的采
精时间应该在房事后 3 ～ 5 d［6］，这说明本研究中的
禁欲时间样本分布是合理的。考虑到样本量及精液
采集时间分布差异的客观限制，本研究未进行禁欲
时间相关的多元线性回归模型分析。
本研究中，标准对照组使用的聚精丸，其药物组
成与聚精枸橘颗粒有一定的相关性，但其改善畸形
精子症的疗效尚不明显，据此本研究未对标准对照
组进行治疗前后的多元线性回归模型分析，笔者将
在未来的研究中进一步探索与明确。
考虑到临床研究的相对局限性，需要说明的是，
所有病例样本只按照精子发生基因 AZF(+)存在
检测、男性核型染色体(46，XY)分析检测结果，随机
纳入实验组和对照组，对于极少数存在附睾及睾丸
炎症病史、结核病史、外伤及手术史、病毒性腮腺炎
病史、支原体 UU /衣原体阳性 (+)、血清 /精浆抗精
子抗体阴性(+) ，未在研究分组中加以区分研究。
9 展望
目前，应用人工生殖治疗严重畸形精子症在我
国已占相当比例，采用丈夫精子(AIH)不存在严重
的伦理法律问题，但是使用供体精子(AID)则有一
系列的问题需要考虑和明确。由于畸形精子症患者
大多数拒绝 IVF-ET，ICSI，AID，或经历 IVF-ET，
ICSI失败后转治于中医，所以造成样本含量在一定
时期内较少，笔者希望在未来的研究中能实现多中
心的相关研究，同时进行相关药对的中药药理基础
实验，以进一步探索相关药对作用于生殖系统的
机制。
笔者认为:对于经历 IVF-ET，ICSI 失败后转治
于中医的畸形精子症患者而言，聚精枸橘颗粒的有
效干预可以最大限度的避免，因为人工辅助生殖而
造成的子代遗传缺陷、身心健康、医学伦理学的长期
问题;同时中医药干预畸形精子症的卫生医疗成本
明显优于同等条件下患者所要承担人工辅助生殖的
经济代价。
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［责任编辑 邹晓翠］
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第 19 卷第 9 期
2013 年 5 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 19，No． 9
May，2013