全 文 ：4 讨论
核转录因子(nuclear factor － kappa B，NF － κB)于 1986 年由
Sen［6］发现并报道，作者在实验中从 B 细胞核提取一种核蛋白，
该蛋白能与 B细胞免疫球蛋白 κ 轻链基因增强子 κB 序列特异
结合，并命名为 NF － κB。到目前为止，哺乳动物细胞内发现 5 种
NF － κB蛋白，分别为 p65(ＲelA)、c － Ｒel、ＲelB、p50 /p105(NF －
κB1)和 p52 /p100(NF － κB2)。这些蛋白均具有一个共同的由大
约 300 个氨基酸组成的特异性 N端氨基酸序列，称为 Ｒel同源区
(Ｒel homogeneous domain，ＲHD) ，该区包括有与 DNA 结合、二聚
体化、与抑制蛋白 IκB(inhibitoryκB，IκB)相互作用及核定位信号
区域(nuclear location signal，NLS) ，NLS能促进 NF － κB转位到细
胞核［7］。NF － κB /Ｒel 蛋白以一定的方式结合成同源二聚体或
异源二聚体而存在于细胞内，以 p65 /p50 二聚体含量最丰富。未
激活时，NF － κB通常与其抑制物 IκB 结合成三聚体以无活性的
复合物形式存在于细胞质内。激活后 IκB 被磷酸化而降解，NF
－ κB从胞质移位至细胞核，并与靶基因结合，增强有关基因的转
录水平。NF － κB参与多种基因，特别是与炎症及免疫有关反应
相关基因的表达调控，与炎症的发生和维持密切相关。NF － κB
活化后可增强 IL － 1β、TNF － α、IL － 6、IL － 8、粘附分子、粒细胞
－锯齿细胞集落刺激因子(CM － CSF)、诱导型一氧化氮合酶
(iNOS)、环氧酶 2(COX2)等炎症介质基因的转录水平，同时这些
物质又作为激动剂进一步作用于 NF － κB，使其活性更加增强，
形成了 NF － κB活化的正反馈调节，两者构成的反馈机制导致类
风湿关节炎炎症反应和结构破坏得以维持与进展［8］。Han 等［9］
研究显示，对于Ⅱ型胶原诱导的大鼠关节炎，NF － κB 的活化于
免疫后 20 d明显增高，还有研究提示，在鼠的胶原性关节炎及佐
剂性关节炎中 NF － κB的表达均先于临床症状出现。
本实验成功建立了大鼠类风湿关节炎模型，比较各组大鼠给
药后第 21 天关节炎指数，STＲD 各剂量组较模型组明显降低(P
＜0． 01，P ＜ 0． 05)。经免疫组化法和 western blot 法检测模型对
照组中 NF － κB p65 蛋白表达显著高于正常组(P ＜ 0． 01) ，SＲTD
高、中、低剂量组 ＲA大鼠足跖组织 NF － κB p65 蛋白表达水平显
著低于模型对照组(P ＜ 0． 01，P ＜ 0． 05) ，且有明显的剂量依赖关
系。提示 SＲTD治疗类风湿关节炎作用与抑制 NF － κB p65 的表
达有关，可能是 SＲTDA 治疗 ＲA 的机制之一。本实验进一步阐
明了 SＲTD对类风湿关节炎的作用机制，为满药赤雹的进一步研
究开发提供实验依据。
参考文献:
［1］ 王兰英．类风湿关节炎实验室检查的进展［J］． 中国社区医师 －医
学专业，2010，12(34) :169．
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tion in rhenmatoid arthritis and murine collagen － induced arthritis［J］．
Autoimmunty，1998，28(4) :197．
收稿日期:2012-11-14; 修订日期:2013-05-22
基金项目:国家“973”前期重大基础研究专项( No． 2012CB722601) ;贵州省中药现代化项目［黔科合中药字( 2011) 5085］;
贵州省中药现代化项目［黔科合农字( 2006) 5032 号］;贵州省优秀人才省长资金项目［黔省专合字( 2006) 83 号］
作者简介:谢海琴( 1986-) ，女( 仡佬族) ，贵州遵义人，现为贵州大学在读硕士研究生，主要从事天然药物化学研究工作．
* 通讯作者简介:张援虎( 1967-) ，男( 汉族) ，北京人，现任贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室研究员，博士学位，主要从事天然产物化学研究
工作．
* 通讯作者简介:黄筑艳( 1973 － ) ，女( 汉族) ，吉林扶余人，现任贵州大学副教授，硕士学位，主要从事天然产物化学研究工作．
追风伞抗炎药理活性研究
谢海琴1，2，赵 兵2，邓璐璐2，黄筑艳1* ，张援虎2*
(1．贵州大学，贵州 贵阳 550025; 2．贵州省中国科学院天然产物化学重点实验室，贵州 贵阳 550002)
摘要:目的 以抗炎药理活性为药效学指标，对苗药追风伞总提物及其各萃取层进行筛选研究，以确定追风伞抗炎活性
的有效部位。方法 采用二甲苯致小鼠耳廓肿胀法。结果 追风伞总提物组对二甲苯所致的小鼠耳肿胀有显著的抑制作
用，其水层低剂量组有明显的抑制作用。结论 追风伞具有良好的抗炎药理活性，其有效部位为水层。
关键词:追风伞; 抗炎; 药理活性; 有效部位
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 08． 018
中图分类号:Ｒ285 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 08-1847-02
Study on the anti － inflammatory activity of Lysimachia paridiformis Franch． var． sten
ophylla Franch
XIE Hai － qin1，2，ZHAO Bing2，DENG Lu － lu2，HUANG Zhu － yan1* ，ZHANG Yuan － hu2*
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 8 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 8 期
( 1． Guizhou Unirersity，Guiyang 550025，China; 2． The Key Laboratory of Chemistry of Natural Products of
Guizhou Province and Chinese Academy of Sciences，Guiyang 550002，China)
Abstract: Objective To find the active fraction of Lysimachia paridiformis Franch． var． Stenophylla Franch by screening its total
extract and different fractions with anti － inflammatory pharmacodynamics index．Methods Xylene － induced mice auricular swell-
ing model were established． Ｒesults The total extract significantly reduced the xylene － induced mice auricular swelling degree; the
low dose of water fraction obviously reduced xylene － induced mice auricular swelling degree． Conclusion L． paridiformis Franch．
var． Stenophylla Franch has remarkable anti － inflammatory effect and the active part is water fraction．
Key words: Lysimachia paridiformis Franch． var． Stenophylla Franch; Anti － inflammatory; Pharmacological activity; Ac-
tive part．
追风伞 Lysimachia paridiformis Franch． var． Stenophylla Franch
系报春花科珍珠菜属植物狭叶落地梅的全草，主要分布于我国西
南地区，在贵州作为苗药使用，性热，味辛、辣、苦，具有祛风通络、
活血止痛之功效，用于治疗风湿痹痛、四肢拘挛、半身不遂、小儿
惊风、跌仆、骨折等［1］，目前关于其作用机理的研究报道较少［2］。
根据其功效与主治，以抗炎药理活性为药效学指标，采用二甲苯
致小鼠耳廓肿胀法，对追风伞总提物及其各萃取层进行了筛选研
究，以确定其抗炎活性的有效部位，为其药用价值的开发与应用
提供一定的实验依据。研究表明，追风伞总提物组对二甲苯所致
的小鼠耳肿胀有显著的抑制作用，其有效部位为水层。
1 材料
1． 1 药材与试剂 追风伞购于贵阳市万东桥药材市场，经贵阳中
医学院陈德媛教授鉴定为报春花科珍珠菜属植物狭叶落地梅 Ly-
simachia paridiformis Franch． var． Stenophylla Franch．。阿司匹林，
拜耳医药保健有限公司，批准文号:国药准字 J20080078;羧甲基
纤维素钠(CMC － Na) ，上海三浦化工有限公司;乙醇、石油醚、氯
仿、正丁醇、二甲苯等均为分析纯，重庆川江化学试剂厂。
1． 2 动物 昆明种小鼠，清洁级，雌雄各半，体质量(20 ± 2)g，由
贵阳医学院实验动物中心提供，合格证号:SCXK(黔)2002 －
0001。
1． 3 仪器 BS223S 型电子分析天平，北京赛多利斯仪器系统有
限公司。
1． 4 试药 取追风伞粗品干粉 2kg，以 90%乙醇加热回流提取 2
次，合并滤液，减压回收至稠膏，得追风伞总提物;取部分稠膏加
水溶解，依次用石油醚、氯仿、正丁醇萃取至无色，回收溶剂，得石
油醚萃取物、氯仿萃取物、得正丁醇萃取物和水层，将各极性部位
置冰箱中密封冷藏，临用时用 0． 1 ﹪ CMC － Na 溶液稀释成所需
浓度(实验所用剂量均以生药浓度计算)。
2 方法
昆明种小鼠，按体质量随机分组，每组 10 只，雌雄各半，分别
为对照组，阿司匹林组，追风伞总提取物组，石油醚层组，氯仿层
组，正丁醇层组，水层组(总提物组及各极性部位均设高、中、低
剂量组)。除对照组外，各组均以(20 ml 生药 /kg)予灌胃给药 3
d，对照组给予等量容积蒸馏水。末次给药 1 h后，将二甲苯以 20
μl涂于小鼠右耳前后两面，使其耳廓两面致炎，左耳廓为对照，4
h后将小鼠颈椎脱臼处死，用直径为 6 mm 打孔器沿左右耳片同
一部位打下圆耳片，于电子天平分别称取两耳重量，两耳的差值
即为肿胀度，并计算小鼠耳廓肿胀抑制率，肿胀抑制率(%)=
(对照组平均肿胀度 －给药组平均肿胀度 /对照组组平均肿胀
度)× 100%。统计学方法 用 SPSS 软件进行统计学分析，数据以
珋x ± s表示。
3 结果
追风伞总提物对小鼠耳肿胀的影响见表 1。实验数据结果
显示，与空白对照组比较，阿司匹林组、追风伞 90%乙醇总提物
低、中、高剂量组的小鼠耳肿胀度明显下降，具有显著性的差异
(P ＜ 0． 01) ，说明各给药组均能抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿
胀。
表 1 追风伞对总提物二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/mg·kg －1
肿胀度
抑制率
(%)
空白对照组 － 8． 30 ± 1． 16 －
阿司匹林组 200 3． 08 ± 1． 06＊＊ 62． 89
追风伞 90%
乙醇总提物组
1 788 5． 26 ± 1． 36＊＊ 36． 63
894 4． 08 ± 1． 99＊＊ 50． 84
447 5． 13 ± 1． 87＊＊ 38． 19
与对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
表 2 追风伞不同极性部位对二甲苯致小鼠耳廓肿胀度的影响(珋x ± s)
组别
剂量
/mg·kg －1
肿胀度
抑制率
(%)
空白对照组 － 3． 90 ± 1． 79 －
阿司匹林组 200 2． 40 ± 1． 63* 38． 46
追风伞石油醚层组 169 3． 80 ± 2． 15 2． 56
85 2． 90 ± 1． 37 25． 64
43 3． 80 ± 1． 93 2． 56
追风伞氯仿层组 169 3． 30 ± 2． 11 15． 38
85 3． 20 ± 3． 04 17． 94
43 3． 80 ± 2． 57 2． 56
追风伞正丁醇层组 1073 3． 80 ± 2． 97 2． 56
537 2． 60 ± 0． 96 33． 33
269 3． 10 ± 1． 45 20． 51
追风伞水层组 760 2． 30 ± 2． 09 41． 02
380 3． 60 ± 2． 91 7． 69
190 2． 10 ± 1． 68* 46． 15
与对照组比较，* P ＜ 0． 05，＊＊P ＜ 0． 01
不同极性部位对小鼠耳肿胀的影响见表 2，与空白对照组相
比较，石油醚层各剂量组、氯仿层各剂量组、正丁醇层各剂量组均
没有显著性差异，而追风伞水层低剂量组对二甲苯致小鼠耳肿胀
炎症的抑制率 46． 15%，与空白对照组相比较，其耳廓肿胀度明
显低于对照组，具有显著性差异(P ＜ 0． 05)。追风伞水层低剂量
对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有明显的抑制作用。
4 讨论
在贵州，狭叶落地梅作为苗药入药，主要用于治疗风湿性关
节炎，而关节的炎症是风湿科疾病中最常见的表现［3］。追风伞
中的主要化学成分有黄酮及三萜皂苷类等，黄酮类及三萜类成分
的抗炎作用在其他中药中有明显的体现［4 ～ 6］。二甲苯致小鼠耳
肿胀法是筛选抗炎药物简便、有效、重复率强的方法［7］。本实验
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时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 8 期 LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 8
采用经典的炎症模型观察追风伞的抗炎作用，发现其 90%乙醇
总提物组对二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀有显著的抑制作用，基于
此进一步研究其有效部位，实验结果显示，水萃取层具有明显的
抗炎作用，为追风伞治疗风湿痹症提供了一定的实验依据。
参考文献:
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1982:884．
收稿日期:2012-09-14; 修订日期:2013-04-20
基金项目:河北省自然科学基金项目( No． C2010001795) ;
河北省唐山市“十一五”重点工程项目( No． 072631B － 1) ;
河北省唐山市科技攻关项目( No． 111302025b)
作者简介:郭 兰( 1979-) ，女( 汉族) ，河北唐山人，现任河北联合大学讲
师，硕士学位，主要从事肿瘤药理研究工作．
* 通讯作者简介:韩淑英( 1959-) ，女( 蒙古族) ，内蒙古通辽人，现任河北
联合大学教授，硕士研究生导师，硕士学位，主要从事中药药理研究工作．
荞麦花叶提取物体外抗肿瘤
及其作用机制的实验研究
郭 兰1，赵志宇2，韩淑英3*
(1．河北联合大学冀唐学院，河北 唐山 063000;
2．河北联合大学附属医院，河北 唐山 063000; 3．河北联合大学药理学教研室，河北 唐山 063000)
摘要:目的 研究荞麦花叶提取物( EBFL) 的体外抗肿瘤作用。方法 MTT法观察 EBFL对 H22 细胞体外增殖的影响，计
算肿瘤细胞生长抑制率。台盼蓝染色法动态观察 EBFL对 H22 肿瘤细胞的直接杀伤作用，计算细胞平均死亡百分率。台
盼蓝染色法动态观察 EBFL对 H22 肿瘤细胞的促凋亡作用，计算细胞凋亡百分率。结果 EBF对 H22 瘤细胞具有抑制增
殖作用，以中浓度组最为明显，抑制率达到 51． 29%。肿瘤细胞生存率显示，EBFL对肿瘤有直接杀伤作用，但不如 CTX明
显( P ＜ 0． 01 ) 。凋亡率结果显示，48 h 后 EBFL 对 H22 瘤细胞具有明显的促进凋亡作用，以中浓度组最为明显达到
( 40． 33 ± 2． 52) %。结论 EBFL可直接抑制肿瘤细胞增殖，促进其凋亡。
关键词:荞麦花叶提取物; 肿瘤; 凋亡; H22 肿瘤细胞
DOI标识:doi: 10． 3969 / j． issn． 1008-0805． 2013． 08． 019
中图分类号:Ｒ962 文献标识码:A 文章编号:1008-0805( 2013) 08-1849-03
Study on the Anticancer Effect in Vitro of extraction from buckwheat flower and leaf
GUO Lan，ZHAO Zhi-yu，HAN Shu-ying*
( Hebei United University，Tangshan 063000，China)
Abstract: Objective To observe the assistant effect of EBFL on H22 cells and explore its possible mechanism． Methods MTT
method was used to observation on H22 cells in vitro multiplication effect，calculation of the tumor cell growth inhibition rate．
Trypan blue staining method method was used to observation the direct cytotoxic effecton on H22 cells in vitro，calculation of aver-
age cell rate． Trypan blue staining method method was used to observation the promoting apoptosis on H22 cells in vitro，calcula-
tion of cell apoptosis rate． Ｒesults EBFL can increase the mouse lymphocyte transformation function，there is a certain dose － re-
sponse relationship，on H22 cells in vitro cells without the direct cytotoxic effect． It was obvious that EBFL could inhibit tumor cells
the proliferation which were cultured in vitro，and EBFL had inhibiting effect． The most obvious was EBFL － M group． CTX and
CTX + EBFL － M group could inhibit the proliferation of H22 tumor cells remarkably ( P ＜ 0． 01) ． Conclusion EBFL can directly
inibit trmor cell proliferation and promote its apoptosis．
Key words: Extraction of buckwheat flower and leaf; Tumor; Apoptosis; H22 tumor
荞麦花叶提取物(EBFL)是从蓼科植物甜荞麦花叶中提取的 活性成分。研究表明，荞麦中的生物活性物质具有显著的降血
脂、降血糖功能，有降低血管脆性及异常的通透性、抑制血小板聚
集、抗氧化、影响血管活性物质、抗炎、强心、解痉等作用［1 ～ 4］。最
近，有文献报道金荞麦提取物对小鼠黑色素瘤、S180 肉瘤、肝癌
等体外有抗侵袭活性和体内抗转移作用［5］，但有关甜荞麦提取
物抗肿瘤作用的实验研究目前尚未见报道。本实验旨在观察荞
麦花叶提取物体外抗肿瘤活性，为进一步的体内试验及新药开发
和临床应用提供理论基础和实验依据。
1 材料
1． 1 瘤株 小鼠 H22 瘤腹水型细胞由我河北联合大学预防医学
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LISHIZHEN MEDICINE AND MATEＲIA MEDICA ＲESEAＲCH 2013 VOL． 24 NO． 8 时珍国医国药 2013 年第 24 卷第 8 期