全 文 ：苎麻叶药材质量标准研究
李小聪 ,周 媛 ,刘 闯 ,张红艳 ,郭志勇 ,邹坤＊　(三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室 ,湖北宜昌 443002)
摘要　描述了苎麻叶的显微特征和薄层色谱特征 ,并测得苎麻叶药材水分分、总灰分、酸不溶性灰分、醇溶性浸出物和绿原酸的平均含
量为分别为 7.47%、16.29%、1.71%、12.66%和 0.05%。
关键词　苎麻叶;质量标准;酚酸类化合物
中图分类号　R284.1　　文献标识码　A　　文章编号　0517-6611(2010)22-12189-03
StudyonQualityStandardofCrudeDrugRamieLeaf
LIXiao-congetal　(HubeiProvincialKeyLaboratoryforNaturalProductResearchandUtilization, ChinaThreeGorgesUniversity,
Yichang, Hubei443002)
Abstract　ThemicroscopiccharactersandTLCcharactersoframieleafweredescribed.Andtheaveragewatercontent, averagetotalashcon-
tent, averageacid-insolubleashcontent, averagealcohol-solubleextractivecontentandaveragechlorogenicacidcontentincrudedrugramie
leafwere7.47%, 16.29%, 1.71%, 12.66% and0.05%resp.
Keywords　Ramieleaf;Qualitystandard;Phenolicacids
基金项目　湖北省食品药品监督管理局专项基金(鄂食药函 [ 2008] 190
号)。
作者简介　李小聪(1984-),男 , 湖北武汉人 ,硕士研究生 , 研究方向:
天然产物化学与药理活性评价。 ＊通讯作者 , E-mail:kzou@
ctygu.edu.cn。
收稿日期　2010-04-19
　　苎麻叶为荨麻科苎麻属植物苎麻 [ Boehmerianivea
(Linn.)Gaudich.]的干燥叶 ,该植物主要分布于陕西 、山东 、
江苏 、浙江 、江西 、福建 、河南 、湖北 、湖南 、广西 、广东 、四川 、
贵州 、云南等省区。多生长于海拔 250 ～ 1 200 m的低山丘
陵 、路旁及沟边 [ 1-2] 。苎麻为多年生草本 ,高 1 ～ 2 m。其根 、
叶均可供药用 ,具有清热解毒 、散瘀消肿 、止血 、利尿 、安胎等
功效 [ 3] 。我国苎麻产量占全世界苎麻产量的 90%以上。苎
麻叶片约占植株重量的 40%[ 4] 。为了更好地开发利用这一
植物资源 ,笔者对 5个不同产地苎麻叶样品(包括栽培种和
野生种)的药材性状 、显微特征进行了鉴别 ,对浸出物 、总灰
分 、酸不溶性灰分和水分含量进行了测定 ,并采用 TLC及
HPLC对各成分进行了定性 、定量研究 ,以期为苎麻叶药材质
量标准的制定奠定基础。
1　材料与方法
1.1　仪器与试药　Waters2690型高效液相色谱仪 , 配 996
型光电二极管阵列检测器 , Milennium32色谱工作站 (美国
Waters公司);ME215S型十万分之一电子天平(德国 Sartori-
us公司);硅胶 GF254预制薄层板(烟台化学工业研究所)。
色谱纯乙腈(美国 Fisher公司);其他试剂均为分析纯;绿原
酸对照品(购买于 Sigma公司 ,纯度≥98%);eugenylβ-ruti-
noside对照品(实验室自制 ,纯度≥98%);苎麻叶采自湖北
等地 ,经三峡大学化学与生命科学学院杨进副教授鉴定为
Boehmerianivea(Linn.)Gaudich.的叶 ,原植物及药材标本现
保存于三峡大学天然产物研究与利用湖北省重点实验室。
1.2　方法
1.2.1　显微及藻层鉴别 。
1.2.1.1　显微鉴别 。取苎麻叶药材 ,粉碎过 60目筛 ,取适
量 ,置显微镜下观察。
1.2.1.2　薄层鉴别。①对照品溶液的制备 。取 eugenylβ -
rutinoside加甲醇溶解 ,配制成每 1ml含对照品 2 mg的溶液 ,
作为对照品溶液 。②供试品溶液的制备。分取 5批干燥的
样品碎片(剪碎 ,直径 <5 mm)5 g,置 150 ml圆底烧瓶中 ,加
70%乙醇溶液 100 ml, 70 ℃回流提取 ,过滤 ,滤液浓缩至无
醇味 ,置 150 ml分液漏斗中 ,加入等体积的乙酸乙酯 ,振摇 ,
静置分层 ,分出上层 ,即得供试品溶液。③薄层色谱条件。
按照薄层色谱法(附录 Ⅵ B)[ 5] ,吸取上述 2种溶液各 10 μl
分别点于同一硅胶 G薄层板上 ,以氯仿 -甲醇 -冰乙酸 -水
(5.00∶1.00∶0.15∶0.20)为展开剂 ,展开后取出 ,晾干 ,喷以
10%硫酸乙醇溶液 ,在 105 ℃条件下加热至斑点显色清晰。
1.2.2　水分 、总灰分 、酸不溶性灰分和浸出物含量测定。
1.2.2.1　水分。取 5个产地的苎麻叶药材适量 ,粉碎 ,取粉
末约 2 g,精密称定 ,平铺于已恒重的称量瓶中 ,按《中国药典
(2005年版)》一部附录 Ⅸ H水分测定第 1法测定 ,计算水
分含量。
1.2.2.2　总灰分和酸不溶性灰分。取 5个产地的苎麻叶药
材粉末适量 ,干燥至恒重 ,约取 2 g,精密称定 ,置已恒重的坩
埚中 ,于电阻箱中缓缓炽热至完全灰化 ,按 《中国药典 2005
年版一部 》附录Ⅸ K灰分测定法测定 ,计算苎麻叶药材总灰
分和酸不溶性灰分的含量。
1.2.2.3　浸出物。取 5个产地的苎麻叶药材粉末适量 ,干
燥至恒重 ,约取 2g,精密称定 ,置 100ml锥形瓶中 ,加 95%乙
醇溶液 50ml,按《中国药典 2005年版一部 》附录 XA浸出物
测定法的热浸法测定浸出物含量 。
1.2.3　绿原酸含量测定。①对照品溶液的配制。取绿原酸
对照品适量 , 精密称量 ,加 70%乙醇溶解 ,定容 ,制成每 1 ml
含对照品 0.25 mg的溶液。②供试品溶液的制备。取干燥
至恒重的苎麻叶药材粉末约 10 g,精密称量 ,用 200 ml70%
乙醇浸泡 24 h, 70℃加热提取 30 min,再依次用 150 ml70%
乙醇溶液提取 2次 ,每次提取 30min。合并 3次提取液 ,减压
浓缩 ,用 70%乙醇溶液定容至 100 ml,即得 。③色谱条件。
色谱柱:YMC-PackODS-AA(250.0mm×4.6mm, 5μm),
流动相为甲醇 -0.1%H3PO4水梯度:0 ～ 30 min, 8% ～ 32%
乙腈 ,进样量 10μl,检测波长 323 nm,流速 1.0ml/min,柱温
30℃。④标准曲线的绘制。精密吸取绿原酸对照品溶液
0.5、1.0、2.0、4.0、6.0、8.0 ml至 10 ml容量瓶中 ,用 70%乙
安徽农业科学 , JournalofAnhuiAgri.Sci.2010, 38(22):12189-12191 责任编辑　常俊香　责任校对　卢瑶
醇溶液稀释至刻度。准确吸取各稀释后的对照品溶液 10
μl,每个体积进样 3次 ,按上述色谱条件测定峰面积。以标
准品峰面积(Y)对质量浓度 (X)进行线性回归 ,得回归方
程:Y=19.921 8X-0.709 7(r=0.999 9)。说明绿原酸在
0.012 5～ 0.200 0 mg/ml范围内线性关系良好。 ⑤精密度试
验。取稀释的对照品溶液 10μl,重复进样 5次 ,按上述色谱
条件测定峰面积 , RSD为 2.62%,表明精密度良好。⑥重复
性试验。按供试品溶液制备方法 ,制备 5份样品溶液 ,分别
按供试品测定法测定 ,绿原酸平均含量为 0.027 5%, RSD为
2.28%。⑦稳定性试验。取供试品溶液于室温下放置 ,分别
在放置 0、2、4、8、12、24、48h时按供试品测定法测定峰面积 ,
RSD为 2.92%,表明供试品溶液在 48 h内稳定。⑧加样回
收率试验 。取 5批 ,每批 5份干燥至恒重(60 ℃, 4 h)的苎麻
叶药材粉末约 10g,精密称量 ,各加入 0.5 mg的绿原酸对照
品 ,按供试品溶液制备方法制备 ,各进样 10 μl,按色谱条件
测定峰面积 ,计算加样回收率 ,得平均加样回收率为
98.14%。⑨样品测定。取 5批干燥至恒重(60℃, 4 h)的苎
麻叶药材粉末约 10 g,精密称量 ,按供试品溶液制备方法制
备 ,各进样 10 μl,按色谱条件测定峰面积 ,计算样品中绿原
酸的含量。
2　结果与分析
2.1　药材性状　叶多皱缩 ,全体绿棕色 ,有毛。叶片展平后
为宽卵形 ,长 15 cm以上 ,宽 5 ～ 10 cm。先端渐尖 ,基部近圆
形或宽锲形 ,边缘有锯齿。基出脉 3条 ,上面微凹 ,下面微隆
起 ,叶柄较长。气微 ,味微辛 ,微苦 [ 6-8] 。
2.2　苎麻叶的显微及薄层色谱特征　显微观察结果显示 ,
药材粉末呈灰绿色。导管多为螺纹或网纹 ,直径 7 ～ 24
μm,少见梯纹导管 。纤维多聚集交织在一起 ,透明 ,直径约
5 μm。栅栏组织 1列 ,草酸钙簇晶众多 ,导管周围 、栅栏组
织 、表皮细胞等均可见 。具棕色或棕黄色团块。纤维众多 ,
细长。
叶表皮撕片(经水合氯醛透化):表皮细胞(图 1 -a)不
规则 ,大量碳酸钙晶体存在于表皮细胞中;纤维成束(图 1-
b),具棕黄色团块 ,可见腺毛(图 1-c),腺头由多细胞组成 ,
非腺毛(图 1-d)众多 ,多为 2 ～ 3个细胞;草酸钙簇晶(图 1
-e)散在或成片存在于导管(图 1-f)、表皮细胞及栅栏组织
(图 1-g)中 ,螺纹导管或网纹导管。
注:a.表皮细胞(10×40);b.纤维(10×40);c.腺毛(10×5);d.非腺毛(10×40);e.晶纤维(10×40);f.导管(10×40);g.栅栏组织(10×40)。
Note:Epidermalcells(10×40);b.Fiberl(10×40);c.Glandularhair(10×5);d.Non-glandularhair(10×40);e.Crystalsiber(10×40);f.Catheter(10×
40);g.Palisadetissue(10×40).
图 1　苎麻叶的显微特征
Fig.1　Themicroscopiccharacteristicsoframieleaves
　　由图 2可知 ,供试品色谱中 ,在与对照品药材色谱相应
位置上出现颜色相同的斑点。
2.3　水分 、总灰分 、酸不溶性灰分和浸出物含量　由表 1可
知 ,苎麻叶药材中水分 、总灰分 、酸不溶性灰分及醇溶性浸出
物的平均含量分别为 7.47%、16.29%、1.71%和 12.66%。
2.4　绿原酸含量　由表 2可知 ,供试样品中绿原酸的平均
含量为 0.05%。
3　讨论
3.1　薄层鉴别　苎麻叶药材中绿原酸含量较高 ,但选用绿
原酸为对照品进行薄层鉴别并不适合 ,因为不仅苎麻叶中含
有绿原酸 ,其他药材如金银花 、杜仲等也含有大量的绿原酸 ,
即专属性不强。
表 1　5个产地苎麻叶药材水分、总灰分、酸不溶性灰分及浸出物含量
Table1　Thecontentsofmoisture, totalash, acidinsolubleashand
extractinramieleavesfromfiveproducingareas %
药材产地Producingareasofmedicinematerials
水分Moisturecontent
总灰分Totalash
酸不溶性灰分Acidinsolubleash
浸出物Extract
咸宁(华苎 4号) 8.13 15.51 1.90 12.44
宜昌 7.18 15.62 1.43 13.11
长阳 6.59 15.79 1.68 12.05
五峰 7.73 15.60 1.79 13.91
恩施 7.74 18.92 1.77 11.79
平均 7.47 16.29 1.71 12.66
　　分别采用乙醇 、70%乙醇 、50%乙醇为溶剂 ,以同样的条
件进行提取 ,并以乙酸乙酯和正丁醇分别萃取 ,结果 70%乙
12190 　　　　　　　　　　安徽农业科学　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　2010年
醇提取 ,乙酸乙酯萃取所得的供试品溶液薄层色谱与对照品
色谱相应位置上出现相同颜色的清晰斑点 。故选取 70%乙
醇为溶剂 ,乙酸乙酯萃取制备供试品溶液。
注:S.对照品;1.苎麻(产地湖北咸宁);2.苎麻(产地湖北宜昌);
3.苎麻(产地湖北长阳);4.苎麻(产地湖北五峰);5.苎麻(产
地湖北恩施)。
Note:S.Controlsubstance;1.Ramie(producedfromXianningofHu-
bei);2, Ramie(producedfromYichangofHubei);3.Ramie
(producedfromChangyangofHubei);4.Ramie(producedfrom
WufengofHubei);5.Ramie(producedfromEnzhiofHubei).
图 2　苎麻叶药材薄层色谱图
Fig.2　Thethin-layerchromatogramoframieleavesmedicine
materials
　　分别采用氯仿 -甲醇 、氯仿 -甲醇 -水 、氯仿 -甲醇 -
乙酸 -水等不同的展层剂 ,发现氯仿 -甲醇 -乙酸 -水
(5.00∶1.00∶0.15∶0.20)为展层剂时 ,对照品与供试品色谱中
斑点数量与分离效果较适宜。因此氯仿 -甲醇 -乙酸 -水
(5.00∶1.00∶0.15∶0.20)为最佳展层剂。
3.2　绿原酸含量测定方法　绿原酸具有显著的清热解毒 、
抗菌消炎和抗衰老等作用 [ 9] 。苎麻叶药材中绿原酸含量较
高 ,可选用绿原酸作为控制苎麻叶药材质量标准的主要成
分 。该研究考察了不同组成和比例的流动相(甲醇 -0.1%
H3 PO4 -水 、甲醇 -0.5%HCOOH-水)的分离效果 ,结果表
明 ,甲醇 -0.1%H3PO4 -水系统分离效果较好 ,因此确定甲
醇 -0.1%H3PO4 -水为流动相。
3.3　药材质量标准制定　水分 、灰分 、浸出物和有效成分含量
是影响药材质量的主要指标。综合以上试验结果 ,建议苎麻叶
药材质量标准中水分含量不得超过 10.0%,总灰分含量不得超
过 16.5%,酸不溶性灰分含量不得超过 2.5%, 95%醇浸出物含
量不得少于 10.0%,绿原酸含量按干燥品计不得少于 0.025%。
表 2　样品绿原酸含量及加样回收率(n=6)
Table2　Thecontentofchlorogenicacidandadditionrecoveryinsam-
ples %
药材产地Producingareasofmedicinematerials
绿原酸
平均含量Averagecontentofchlorogenicacid RSD
加样回收率Additionrecovery RSD
咸宁(华苎 4号) 0.026 3.12 98.32 3.14
宜昌 0.058 1.98 99.18 2.18
长阳 0.036 2.12 98.67 3.09
五峰 0.027 2.45 97.58 2.56
恩施 0.106 3.10 96.93 1.98
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　　本刊提示　参考文献只列主要的 、公开发表的文献 ,序号按文中出现先后编排 。著录格式(含标点)如下:(1)期刊———
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12191　38卷 22期　　　　　　　　　　　　　　　　　　李小聪等　苎麻叶药材质量标准研究