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(2015-01-15 收稿 2015-05-08 修回)
基金项目:湖南省教育厅科研项目(编号:12C1259) ;国家中医药管理局中药炮制学重点学科(编号:国中医药人教发［2012］32 号) ;湖南省“十
二五”重点学科中药学专业(编号:湘教发［2011］76 号)
通讯作者:石继连 Tel:(0731)88458242 E-mail:hnsjl@ 163． com
不同加工方法对茯苓及茯苓皮中茯苓酸含量的影响
李习平1 庞雪2 周逸群2 罗怀浩2 王成诚2 石继连2 (1． 岳阳职业技术学院生物医药系 湖南岳阳 414000;
2． 湖南中医药大学药学院)
摘 要 目的:考察不同加工方法对茯苓及茯苓皮中茯苓酸含量的影响。方法:采用高效液相色谱法测定各种不同茯苓加
工品中茯苓酸的含量，采用 Apollo C18色谱柱(250 mm × 4． 6 mm，5 μm) ，以乙腈-0． 5%磷酸水溶液为流动相，流速:1． 0 ml·
min －1，检测波长:210 nm，柱温:30℃ 。结果:茯苓皮中茯苓酸的含量 ＞茯苓，且经蒸制后两者的含量均明显降低，其中生切品
＞传统法蒸品 ＞高压蒸品。结论:茯苓酸对热压不稳定，茯苓经过蒸制后，其含量降低。本研究可为茯苓饮片的规范化加工
炮制和质量控制提供参考。
关键词 茯苓;茯苓皮;炮制;茯苓酸;含量;影响
中图分类号:Ｒ283 文献标识码:A 文章编号:1008-049X(2015)09-1453-03
Effects of Different Processing Methods on the Content of Pachymic Acid in White Poria and Poria Peel
Li Xiping1，Pang Xue2，Zhou Yiqun2，Luo Huaihao2，Wang Chengcheng2，Shi Jilian2(1． Yueyang Vocational Technology College，
Hunan Yueyang 414000，China;2． School of Pharmacy，Hunan University of Chinese Medicine)
ABSTＲACT Objective:To compare the effects of different processing methods on the contents of pachymic acid in white poria and
poria peel． Methods:An HPLC method was used on an Apollo C18 column(250 mm ×4． 6 mm，5 μm)with acetonitrile-0． 5% phos-
phoric acid as the mobile phase，the flow rate was 1． 0 ml·min －1，the column temperature was at 30℃，and the detection wavelength
was at 210 nm． Ｒesults:The pachymic acid content in poria peel was higher than that in white poria，both of them were reduced obvi-
ously after steaming，and the order was raw product ＞ traditional steamed product ＞ high pressure steamed product． Conclusion:Af-
ter poria is steamed，pachymic acid can＇t keep stable under heat and pressure，and the higher the thermal pressure，the lower pachymic
acid． The paper can be served as a scientific proof to standardize the processing and quality control of poria．
KEY WOＲDS White poria;Poria peel;Processing;Pachymic acid;Content;Influence
茯苓为多孔菌科真菌茯苓［Poria cocos(Schw．)
Wolf］的干燥菌核，具有利水渗湿，健脾，宁心的功
效，用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，
心神不安，惊悸失眠;茯苓皮为其菌核外皮，具有利
水消肿的功效，用于水肿，小便不利［1］，两者主要含
三萜类茯苓酸和茯苓多糖等有效成分［2］。茯苓多
在产地经发汗后及时加工切制，加工的方法主要有
趁鲜切制和蒸后切制成茯苓块(即白茯苓)和茯苓
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中国药师 2015 年第 18 卷第 9 期 China Pharmacist 2015，Vol． 18 No． 9
皮等。本课题组前期研究了蒸制对茯苓及茯苓皮中
多糖含量的影响［3］，为进一步研究不同加工方法对
其茯苓酸含量的影响，本文采用高效液相色谱法测
定茯苓酸含量，以探讨蒸制对茯苓酸含量的影响，为
茯苓饮片的规范化加工炮制和质量控制提供参考。
1 仪器与材料
1． 1 仪器
Agilent高效液相色谱仪(美国 Agilent 公司) ;
TP-214 型电子天平(北京塞多利斯仪器系统有限公
司) ;KQ 3200E 型超声波清洗器(昆山市超声仪器
有限公司，40 kHz，150 W) ;DK-S22 型电热恒温水
浴锅(上海精宏实验设备有限公司) ;202-3AB 型电
热恒温干燥箱(天津市泰斯特仪器有限公司) ;FZ
102 型微型植物粉碎机(天津市泰斯特仪器有限公
司) ;JZ20Y． 1-E-2 型旋流燃气灶(最大热流量 3．
7KW，迅达科技集团股份有限公司) ;压力锅(苏泊
尔 YL269H2 型)以及普通不锈钢蒸锅等。
1． 2 材料
茯苓药材采自湖南靖州，经湖南中医药大学周
日宝教授鉴定为多孔菌科真菌茯苓［Poria cocos
(Schw．)Wolf］的新鲜菌核。茯苓酸对照品(购于上
海晨易生物科技有限公司，纯度≥95． 0%，批号:
13032001)。乙腈为色谱纯，流动相用水为怡宝纯净
水(经0． 45 μm滤膜过滤) ，磷酸及甲醇等试剂为分
析纯。
2 方法与结果
2． 1 炮制品的制备
2． 1． 1 生切品 取发汗后的新鲜茯苓净药材，及时
削去外皮作茯苓皮，白茯苓切成厚片，置干燥箱中于
80℃烘干，即可。
2． 1． 2 传统蒸切品 取发汗后的新鲜茯苓净药材，
置于普通蒸锅内，武火隔水蒸至圆汽后改用中火蒸
1h，稍冷后取出，及时削去外皮作茯苓皮，白茯苓切
制成厚片，置干燥箱中于 80℃烘干，即可。
2． 1． 3 高压蒸切品 取发汗后的新鲜茯苓净药材，
置于高压锅内，武火隔水蒸至圆汽后改用中火蒸 2
h，稍冷后取出，及时削去外皮作茯苓皮，白茯苓切制
成厚片，置干燥箱中于 80℃烘干，即可。
2． 2 色谱条件
色谱柱:Apollo C18 柱(250 mm × 4． 6 mm，5
μm) ;流动相:乙腈(A)-0． 5%磷酸水(B) ，梯度洗脱
(A:0 ～ 5 min，90% ～ 80%;5 ～ 15 min，80% ～ 70%;
15 ～ 20 min，70% ～ 90%) ;流速:1． 0 ml·min －1;柱
温:30℃;检测波长:210 nm，进样量:20 μl。在此色
谱条件下，理论塔板数按茯苓酸峰计不低于 8 000，
供试品中茯苓酸与其他组分分离度大于2． 0，达到很
好分离。色谱图见图 1。
A．对照品 B．茯苓生切品 C．茯苓传统蒸切品 D．茯苓高压蒸切品
E．茯苓皮生切品 F．茯苓皮传统蒸切品 G．茯苓皮高压蒸切品
1．茯苓酸
图 1 HPLC色谱图
2． 3 对照品溶液的制备
精密称取茯苓酸对照品2． 0 mg，置于 10 ml 量
瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀，即得浓度为
0． 20 mg·ml －1对照品溶液。
2． 4 供试品溶液的制备［3，4］
分别取“2． 1”项下的各种炮制品，粉碎，过 20
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www． zgys． org 研究论文
目筛。取粉末约1． 0 g，精密称定，置于具塞锥形瓶
中，精密加甲醇 20 ml，精密称定，超声处理 30 min，
冷却至室温，再精密称定，用甲醇补重，摇匀，用
0． 45μm微孔滤膜过滤，取续滤液作为供试品溶液。
2． 5 线性关系考察
精密移取对照品溶液0． 5，1． 0，1． 5，2． 0，2． 5 ml
于 5 ml量瓶中，加甲醇稀释到刻度，用0． 45 μm微孔
滤膜过滤，按“2． 2”项下色谱条件进样测定。以峰
面积(Y)为纵坐标，茯苓酸浓度(C，mg·ml －1)为横
坐标，绘制标准曲线，得回归方程:Y = 1． 219 4 ×
107C + 7． 381 4 × 104，r = 0． 999 8。结果表明，茯苓
酸在0． 02 ～ 0． 10 mg·ml －1范围内线性关系良好。
2． 6 精密度试验
精密吸取对照品溶液 20 μl，连续进样 6 次，测
得茯苓酸峰面积的 ＲSD为1． 82%(n = 6) ，表明仪器
精密度良好。
2． 7 重复性试验
取同一炮制品(茯苓生切品)6 份各 1 g，精密称
定，按照“2． 4”项下方法制备成供试品溶液，按
“2． 2”项下色谱条件进样，测得茯苓酸的平均含量
为0． 080 2%，其 ＲSD 为1． 02%(n = 6) ，表明该法重
复性良好。
2． 8 稳定性试验
取同一供试品溶液(茯苓生切品) ，室温放置，
分别于 0，2，4，6，8，12 h，按上述色谱条件进样，测得
茯苓酸峰面积的 ＲSD为1． 14%(n = 6) ，表明供试品
溶液在 12 h内稳定。
表 1 茯苓酸含量测定结果(%，n =3)
炮制品 编号 含量 平均值
茯苓生切品 1 0． 0811 0． 0797
2 0． 0798
3 0． 0783
茯苓传统蒸切品 1 0． 0667 0． 0674
2 0． 0672
3 0． 0683
茯苓高压蒸切品 1 0． 0433 0． 0441
2 0． 0450
3 0． 0441
茯苓皮生切品 1 0． 1213 0． 1226
2 0． 1231
3 0． 1235
茯苓皮传统蒸切品 1 0． 1005 0． 1021
2 0． 1018
3 0． 1041
茯苓皮高压蒸切品 1 0． 0758 0． 0755
2 0． 0765
3 0． 0742
2． 9 加样回收率试验
精密称取已知茯苓酸含量的炮制品 9 份各
0． 5 g，分成 3 组，分别加入相当于样品中茯苓酸含
量的0． 8、1． 0和1． 2倍量的对照品，按照“2． 4”项下
方法制备供试品溶液进样测定，茯苓酸平均回收率
为98． 24%，ＲSD为1． 97%(n = 9)。
2． 10 样品的含量测定
分别取“2． 1”项下各茯苓炮制品，按照“2． 4”项
下方法制备供试品溶液，按“2． 2”项下色谱条件进
样分析，结果见表 1。
3 讨论
3． 1 波长的选择
本试验中对照品溶液经用全波长在 200 ～ 600
nm扫描，结果表明，茯苓酸的最大吸收波长为 210
nm，所以本研究选择 210 nm 做为检测波长，与已有
测定茯苓酸含量的文献［2，4］所用 242 或 250 nm的波
长不同。在此波长测定下虽然前 10 min 有许多杂
峰，但茯苓酸峰的分离度较好，不影响其测定结果。
3． 2 洗脱条件的确定
在综合文献的基础上，本研究尝试了多种色谱
条件，比较了乙腈-水，甲醇-水及乙腈-磷酸水等系
统，其中甲醇-水系统导致各个色谱峰之间分离度欠
佳，不能实现基线分离;乙腈-水系统各色谱峰分离
度较好，但峰型较宽，且明显有色谱峰拖尾现象。本
研究在乙腈-水系统的基础上添加少量磷酸，可有效
改善峰型拖尾的现象。而流动相的梯度与已有文
献［2，3 ～ 5］有较大不同。
3． 3 热压炮制对茯苓酸的影响
测定结果表明，同一批茯苓药材制备的茯苓及
茯苓皮的不同加工品中，茯苓皮中的茯苓酸含量比
茯苓中的含量高。其茯苓酸含量，生切品均高于其
传统蒸切品和高压蒸切品。表明茯苓经过蒸制后，
其茯苓酸对热压不稳定，且热压越大，其含量越低。
参 考 文 献
1 中国药典［S］． 2010 年版． 一部． 224
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3 李习平，张琴，周逸群，等．不同加工方法对白茯苓及茯苓皮中多
糖含量的影响［J］．时珍国医国药，2014，25(12) :2902-2903
4 方东军，赵润琴，张晓娟，等． HPLC 法测定茯苓中茯苓酸的含量
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5 邬兰，王金波，邓媛媛，等． HPLC-ELSD 法测定不同产地茯苓中
茯苓酸的含量［J］．中国药师，2011，14(11) :1568-1570
(2015-04-23 收稿 2015-06-01 修回)
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