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苎麻叶抗炎活性部位研究



全 文 :苎麻叶抗炎活性部位研究■
天然产物开发与利用湖北省重点实验室 三峡大学化学与生命科学院(宜昌 443002)
张宏岐 邹 坤* 汪均金植 刘 闯
摘 要:目的:研究苎麻叶提取物及其不同溶剂萃取部分的抗炎作用 ,筛选苎麻叶抗炎活性部位。方法:以重物坠落法造成
小鼠和大鼠足急性软组织损伤模型 ,以苎麻叶提取物涂抹小鼠和大鼠足损伤部位 ,观察药物对足急性软组织损的影响。 结
果:苎麻叶总提取物 、乙酸乙酯部位 、正丁醇部位具有抗炎作用 , 水溶性部位无抗炎作用 , 其中乙酸乙酯部位的活性成分主
要为酚酸组分。结论:苎麻叶提取物吕酚酸组分具有良好的抗炎作用。
关键词:苎麻叶;抗炎;酚酸组分
中图分类号:R29 文献标识码:B 文章编号:1006-6810(2009)04-0037-03
  苎麻(BoehmerianiveaL.)为荨麻科苎麻属多年生宿根
性植物 , 苎麻根 、叶药用 , 在我国 16世纪就有记载。我国民
间用煎剂治疗感冒发烧 ,麻疹高热 , 尿路感染 ,肾炎水肿 , 孕
妇腹痛 , 胎动不安 ,先兆流产 , 以及外科上用于跌打损伤 , 骨
折 , 疮肿痈毒等均有一定疗效 〔1〕。 70年代以来 , 我国医学
上对苎麻根化学成分和药理作用曾进行过研究 〔2〕。苎麻
叶甘寒 , 无毒 ,凉血 、止血 、散瘀 , 治创伤出血 、咯血 、尿血 、肛
门肿痛 、乳痈 、丹毒 、脱肛不吸 、赤白带下 、妇人子宫炎。苎
麻根清热止血 , 解毒散瘀 , 除有与叶相似功效外 , 还治热病
大渴 、跌打损伤 、蛇虫咬伤等 〔3〕。 苎麻叶抗炎物质尚不清
楚 , 为了阐释苎麻叶抗炎药效物质基础 , 为临床应用提供科
学依据 , 本实验采用小鼠和大鼠足急性软组织损伤模型对
不同溶剂萃取物进行了药效学筛选研究。
1 仪器与材料
1.1 药品:苎麻叶采自湖北咸宁 , 取已经阴干的苎麻叶在
烘箱中于 50℃烘干 , 将苎麻叶剪碎。取干粉 100g用 80%
乙醇回流提取 3次减压浓缩为浸膏 , 得苎麻叶总提取物。
用少量水将浸膏分散 ,依次分别用石油醚 ,乙酸乙酯 ,正丁
醇萃取 , 每种溶剂萃取 3次 ,挥干溶剂得浸膏。乙酸乙酯提
取物干燥后用乙酸乙酯溶解 , 10%碳酸钠水溶液萃取 3次。
碱水溶液层用酸酸化 , 乙酸乙酯萃取减压浓缩得酚酸组份;
乙酸乙酯层减压浓缩得非酚酸组份。
1.2 动物:KM小鼠 , 雄性 ,体重 20 ±2g, SD大鼠 , 雄性 , 体
重 180 ±22.0g。由华中科技大学同济医学院实验动物学
部提供 , 许可证号:SCXR(鄂)2004-2007。
 ■基金项目:水利部水土保持植物开发研究中心科技专项
(SDH20088080, SDH20088190);湖北省自然科学基金创新群体计
划(项目编号:2007ABC008)。
 作者简介:张宏岐(1983-),男 ,汉族 ,现为三峡大学药理学专业
2007级在读硕士生 ,主要从事天然药物的活性研究。
 *通信作者:邹坤 , (1962-), 男 ,汉族 , 湖北京山人 ,三峡大学
教授 ,主要从事天然产物研究与利用。 Tel:(0717)6397478, Fax:
(0717)6397478, E-mail:kzou@ctgu.edu.cn
1.3 试剂:扶他林(北京诺华制药有限公司),戊巴比妥钠
(分析纯)进口分装 , 95%乙醇 、石油醚 、乙醚 、醋酸乙酯 、正
丁醇等试剂均为分析纯。
2 方法与结果
2.1 药物对小鼠急性软组织损伤的影响 〔4〕:取 KM小鼠
80只 ,随机分成 8组 , 分别为空白组 、模型组 、扶他林组 、苎
麻叶总提取物组 、苎麻叶石油醚萃取组 、苎麻叶乙酸乙酯萃
取组 、苎麻叶正丁醇萃取组 、苎麻叶水萃取组 , 每组 10只 ,
除空白组外 , 均造模处理。将 KM小鼠后右足置于木质台
面上 ,足掌向上 , 用长 30cm的圆筒置于足掌面。然后用
50g砝码从圆筒顶端自然落下 ,打击小鼠足部 ,连续 3次 ,造
成足部软组织损伤。造模后每天患处涂抹相应药物 4次 ,分别
在上午 8点, 11点 ,下午 2点 、5点 ,其中模型组涂抹基质。
连续给药 3天 , 末次给药后半小时 , 颈椎脱臼处死小
鼠 ,于相同部位剪下左右后肢 ,称重 ,计算肿胀率 [ (右足重
-左足重)/左足重 ×100%] 。
表 1 药物对小鼠急性软组织损伤的影响( x±s, n=10)
组别 剂量(mg/kg) 肿胀率
空白 / 0.61±1.78**
模型 / 22.87±5.52
扶他林 15 8.99±2.03**
苎麻叶总提取物 72 14.08±2.14**
苎麻叶石油醚萃取物 40 19.35±3.23
苎麻叶乙酸乙酯萃取物 30 9.98±3.58**
苎麻叶正丁醇萃取物 40 18.13±5.31*
苎麻叶水萃取物 50 23.88±3.79
  与模型组比*P<0.05, **P<0.01
实验结果表明(见表 1), 苎麻叶提取物具有良好的抗
急性软组织损伤作用 , 其中乙酸乙酯萃取物活性最强。
372009年 4月第 4期           中国民族医药杂志               DOI :10.16041/j.cnki.cn15-1175.2009.04.039
表 2 药物对小鼠急性软组织损伤的影响( x±s, n=8)
组别 剂量(mg/kg) 肿胀率
空白 / 0.52±1.78**
模型 / 24.31±6.17
扶他林 15 7.82±2.14**
苎麻叶酚酸组 10 8.16±2.75**
苎麻叶非酚酸组 30 17.17±4.06*
  与模型组比*P<0.05, **P<0.01
为了进一步对乙酸乙酯萃取物进行研究 , 对乙酸乙酯
提取物经 10%碳酸钠水溶液萃取得到的酚酸组份和非酚
酸组份进行小鼠实验 , 方法同上。结果见表 2。实验结果
表明苎麻叶提取物中酚酸组分活性强 ,是主要有效组分 , 以
下主要对酚酸组分进一步进行研究。
2.2 对大鼠急性软组织损伤的影响 〔4〕:取 SD大鼠随机分
为 6组 , 分别为空白组 、模型组 、扶他林组 、苎麻叶提取物
高 、中 、低剂量组 , 每组 8只 , 除空白组外 , 均造模处理。将
SD大鼠后右足置于木质台面上 , 足掌向上 ,用长 50cm的圆
筒置于足掌面。然后用 200g砝码从圆筒顶端自然落下 , 打
击大鼠足掌 , 连续 3次 ,造成足部软组织损伤。
大鼠造模后每天患处涂抹相应药物 4次 , 分别在上午
8点 、11点 , 下午 2点 、5点 ,其中空白组 、模型组涂抹基质。
每天 4点时记录各组损伤症候指数(皮下瘀血:多量 、块状
计 3分 , 较多计 2分 ,少量 、点状计 1分 , 无瘀血者计 0分。
肌肉肿胀:明显肿胀计 3分 , 肿胀计 2分 ,稍有肿胀计 1分 ,
无肿胀者计 0分。肌肉颜色:紫暗色计 3分 , 较深计 2分 ,
暗红色浅计 1分 ,色泽正常计 0分)。计算总积分。
连续给药 3天 ,末次给药后半小时 , 用 1%戊巴比妥钠
溶液按每 100g体重 4mg的剂量腹腔注射 , 将大鼠麻醉 , 并
固定于手术板上 , 开腹分离腹主动脉 ,动脉下方结扎 , 上方
用动脉夹夹住。将硅化后的 5ml注射器准确吸取肝素钠溶
液 0.1ml, 使溶液充分与注射器接触 , 小心排尽气泡。将针
头插入腹主动脉 , 打开动脉上方的动脉夹 ,慢慢抽出至 2ml
处。将抽出的血液注入碱化过的玻璃管内。送检 , 进行血
液流变学分析。采血后的大鼠颈椎脱臼处死 , 于相同部位
剪下左右后肢 , 称重 , 计算肿胀率 [ (右足重 -左足重)/左
足重 ×100%] 。
表 3 药物对大鼠急性软组织损伤的影响( x±s, n=8)
组别 剂量 肿胀率 损伤症候指数
空白 / 0.33±1.44** /
模型 / 28.57±6.03 22.8±1.4
扶他林 15 10.02±2.66** 1.51±1.0**
苎麻叶酚酸组 40 10.82±3.48** 17.0±2.0**
苎麻叶酚酸组 20 11.88±3.95 17.5±1.4**
苎麻叶酚酸组 10 14.83±4.15** 16.1±3.6**
  与模型组比**P<0.01
表 4 药物对大鼠急性软组织损伤血液流变学的影响( x±s, n=8)
组别 全血低切黏度 全血高切黏度 血浆高切黏度 红细胞压积
空白     17.55±3.14** 8.06±1.03** 1.46±0.10* 0.47±0.07**
模型     42.73±18.87 12.96±3.54 2.09±0.38 0.57±0.05
扶他林    19.71±3.30** 8.72±1.08** 2.06±0.06 0.59±0.03
苎麻叶酚酸组 16.26±2.76** 7.43±0.78** 1.61±0.19 0.52±0.07**
苎麻叶酚酸组 19.02±2.16** 8.01±0.62** 1.80±0.14 0.50±0.04**
苎麻叶酚酸组 21.18±2.28** 8.98±0.60** 1.82±1.07 0.50±0.05**
  与模型组比**P<0.01
表 5 药物对大鼠急性软组织损伤血液流变学的影响( x±s, n=8)续
组别 红细胞积聚指数 红细胞变形指数 红细胞刚性指数 全血还原黏度
空白     2.25±0.05** 0.74±0.09* 9.66±1.32 36.60±4.46**
模型     3.16±0.80 0.63±0.05 8.96±2.28 75.68±26.50
扶他林    2.21±0.11** 0.51±0.02* 5.45±0.74* 31.59±4.61**
苎麻叶酚酸组 2.17±0.16** 0.72±0.07* 8.32±1.01 34.21±4.02**
苎麻叶酚酸组 2.37±0.16** 0.63±0.05 6.97±0.62* 36.14±2.51**
苎麻叶酚酸组 2.35±0.14** 0.69±0.16 9.40±3.03 40.26±3.14**
  与模型组比*P<0.05, **P<0.01
38            中国民族医药杂志             2009年 4月第 4期
  结果表明 , 苎麻叶乙酸乙酯萃取物酚酸组具有良好的
抗炎作用。对大鼠急性软组织损伤的具有显著的治疗作
用 , 对急性软组织损伤所引起的血液流变学变化具有显著
的改善作用。能降低全血低切黏度 、全血高切黏度 、红细胞
积聚指数 、全血还原黏度 ,提高红细胞变形指数。
2.3 镇痛实验 〔6〕:取 KM小鼠 40只 , 随机分成 5组 ,剪除
腹部毛 , 涂药 3天 , 于末次涂药后 30min各鼠腹腔注射 0.
6%醋酸溶液(0.2ml/只),观察并记录注射醋酸后第一次出
现扭体反应的时间及 20min内出现扭体反应的次数。结果见
表 6。
表 6 药物对醋酸所致小鼠扭体的影响( x±s, n=8)
组别 剂量(mg/kg) 潜伏期(min) 扭体次数(次)
模型 / 2.8±1.7 24.3±6.4
扶他林 15 4.5±0.9* 15.8±5.6**
苎麻叶酚酸组 40 5.4±1.4** 8.8±1.8**
苎麻叶酚酸组 20 4.9±1.2** 10.8±3.4**
苎麻叶酚酸组 10 4.4±1.9* 12.0±3.2**
  与模型组比*P<0.05, **P<0.01
结果表明 , 苎麻叶乙酸乙酯萃取物具有良好的镇痛作
用。对腹腔注射醋酸引起的疼痛具有显著的镇痛作用。初
步观察表明药物对皮肤无刺激性。
3 讨 论
急性软组织损伤是临床常见病 、多发病 , 是指人体的皮
肤 、皮下浅深筋膜 、肌肉 、肌腱 、腱鞘 、韧带 、关节囊 、滑膜囊 、
椎间盘 、周围神经及血管等软组织 ,因各种急性外伤造成的
病理损害。急性软组织损伤属中医 “筋伤 ”范畴。 急性软
组织损伤可产生急性疼痛和功能障碍 , 如果得不到及时正
确的治疗 ,可转变成急性损伤后遗症或慢性劳损 ,而引起损
害性疼痛。
苎麻煎剂在民间被用于治疗感冒发烧 , 麻疹高热 ,尿路
感染 ,肾炎水肿 ,风湿性 、类风湿等疾病 ,本实验小鼠和大鼠
足背部急性软组织损伤模型及镇痛实验 , 结果也表明苎麻
叶总提物的乙酸乙酯部位具有明显的抗炎作用 , 因此 ,乙酸
乙酯部位的酚酸组份是苎麻叶发挥抗炎和镇痛作用的主要
活性部位。本研究可为今后研究开发苎麻叶相关制剂提供
理论依据 , 同时也为继续寻找苎麻叶的抗炎镇痛活性成分
奠定了基础。苎麻叶的抗炎机制尚不清楚 , 尚需进一步研
究。
参考文献
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2009年 1月 6日收稿
Preliminarystudyontheanti-inflammatoryeffectof
theextractsofBoehmerianiveaL.leaves
ZhangHong-qi, ZouKun* , WangJun-zhi, LiuChuang
(TheKdyLabotoryofNaturalProductsDevelopmentandResearch, Colegeof
ChemistryandLifeScience, ChinaThreeGorgesUniversity, Yichang, Hubei, 443002
Abstract:Objective:Tostudytheanti-inflammatoryefectofextractsfromBoehmerialeavestoscreenthefrac-
tionwithanti-inflammatoryactivity.Methods:Buildmodelsoffeet-acutesoft-tissueinjurybyweightdropping
withratsandmice, thensmeartheinjuredfeetpartsofratsandmicebytheextracts, observetheefectsofthis
drugonfeet-acutesoft-tissueinjury.Results:TotalextractofBoehmerialeavesanditsethylacetateportionand
n-butanolportionhavetheanti-inflammatoryactivity;thewaterportionhasnoanti-inflammatoryactivity.Andthe
mainlyactivecomponentsofethylacetateportionarephenolicacids.Conclusion:Thephenolicacidsinextracts
fromBoehmerialeaveshavefavourableanti-inflammatoryefect.
Keywords:Boehmerialeaves, anti-inflammatory, phenolicacids
392009年 4月第 4期           中国民族医药杂志