全 文 ：［收稿日期］ 20111108(001)
［基金项目］ 哈尔滨 市 科 技 创 新 人 才 研 究 专 项 资 金 项 目
(2008RFXXS041)
［第一作者］ 辛静，硕 士，从 事 中 药 药 理 研 究， Tel:
13946074464，E-mail:xulei010207@ 126． com
［通讯作者］ * 李廷利，博士生导师，从事中药药理研究，Tel:
0451 － 82193430，E-mail:litingli8888@ sohu． com
刺人参改善睡眠的有效部位筛选
辛静，许雷，李廷利 *
(黑龙江中医药大学，哈尔滨 150040)
［摘要］ 目的:筛选刺人参改善睡眠作用的有效部位。方法:选用 ICR 小鼠随机分为空白对照组、地西泮组及 7 个给药
组:刺人参水提液组、刺人参醇提液组、上清液组、沉淀物组、10%乙醇洗脱组、30%乙醇洗脱组、60%乙醇洗脱组。空白对照组
和地西泮组给予生理盐水，给药组给予相应药液，各给药组剂量(生药)均为 64 g·kg － 1，每天 ig 1 次，ig 体积为 20 mL·kg － 1，连
续 7 d，采用戊巴比妥钠协同小鼠睡眠实验方法，记录各组小鼠的睡眠潜伏期和睡眠时间。结果:①刺人参水提液协同戊巴比
妥钠所致小鼠睡眠潜伏期为(2. 82 ± 0. 47)min，睡眠时间为(44. 5 ± 4. 23)min;醇提液协同戊巴比妥钠所致小鼠睡眠潜伏期
为(2. 87 ± 0. 51)min，睡眠时间为(45. 24 ± 4. 74)min，且与空白对照组睡眠潜伏期(4. 63 ± 0. 62)min，睡眠时间(21. 47 ±
3. 79)min 相比均有显著性差异(P ＜ 0. 05)。②刺人参水提液经过醇沉后，其上清液与空白组比较明显缩短了睡眠潜伏期
(2. 85 ± 0. 43)min 和延长睡眠时间(46. 25 ± 5. 4)min，差异具有显著性意义(P ＜ 0. 05)。沉淀物与空白组比较没有明显的差
异。③60%乙醇洗脱部位对戊巴比妥钠诱导的小鼠明显的缩短睡眠潜伏期(3. 14 ± 0. 46)min 和延长睡眠时间(45. 37 ± 5. 22)
min，与空白对照组比较有显著性差异(P ＜ 0. 05)。结论:刺人参改善睡眠作用的有效部位是刺人参水提液经醇沉后的上清液
60%乙醇洗脱部位。
［关键词］ 刺人参;改善睡眠;有效部位
［中图分类号］ R285. 5 ［文献标识码］ B ［文章编号］ 1005-9903(2012)11-0233-03
东北刺人参为五加科植物东北刺人参干燥根、
根茎和茎，是我国长白山区特有珍贵药材。据报道，
东北刺人参有类似于人参的功效，可治疗神经衰弱、
低血压、阳萎、精神分裂症、心血管病、糖尿病和风湿
病等［1-2］，是一种很有开发前途的药用植物。但近
些年，其野生资源日益减少，已处于濒危状态，被列
为国家二级保护植物［3］。多年来，国内外学者对此
人参做了大量研究工作，为更好的开发利用刺人参
奠定了基础。
1 材料
1. 1 动物 健康 ICR 小鼠，雄性，体重 18 ～ 22 g
(黑龙江中医药大学实验动物中心提供，许可证号
黑动字第 P00101006)。
1. 2 仪器与试剂 3102 型电子天平(辽宁龙腾电
子有限公司) ，FA1004 型分析天平(盐城市迪宝电
子设备有限公司) ，N-1100D 型旋转蒸发仪(北京卓
信伟业科技有限公司) ，D101 大孔树脂(上海丽晨
生物科技有限公司) ，95%乙醇，戊巴比妥钠(Merck
公司，批号 2013010) ，地西泮片(江苏济川制药有限
公司，批号 090720)。
1. 3 样品的制备
1. 3. 1 刺人参水提液的制备 刺人参(刺人参根
茎 Oplopanax elatus Nakai，由黑龙江中医药大学鉴定
教研室鉴定)粉碎，用 10 倍量的蒸馏水浸泡 2 h，加
热回流提取 3 次，第 1 次提取 2 h，第 2，3 次各加 8
倍量的蒸馏水提取 1. 5 h，合并提取液，滤过，滤液浓
缩至折合生药 3. 2 g·mL － 1。
1. 3. 2 刺人参醇提液的制备 刺人参粉碎，用 10
倍量的 70%乙醇浸泡 2 h，加热回流提取 3 次，第 1
次提取 2 h，第 2，3 次各加 8 倍量的 70%乙醇提取
1. 5 h，合并提取液，滤过，回收乙醇，用蒸馏水浓缩
至折合生药 3. 2 g·mL － 1。
1. 3. 3 刺人参水提醇沉后上清液与沉淀物的制备
将水提物加 95%乙醇，使含醇量达 80%，沉淀 48
h，过滤分得上清液与沉淀物 2 部分，沉淀物用蒸馏
水溶 解 后 与 上 清 液 分 别 浓 缩 至 折 合 生 药
3. 2 g·mL － 1。
1. 3. 4 刺人参水提液的分离纯化 取 D-101 型大
孔树脂 1 kg，用 95% 乙醇浸泡 24 h，使之充分溶胀
后赶尽气泡，湿法装柱，用 95%乙醇洗脱，除去有机
和无机杂质，至洗脱液与蒸馏水(1 ∶ 5)混合不显浑
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第 18 卷第 11 期
2012 年 6 月
中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 11
Jun．，2012
DOI:10.13422/j.cnki.syfjx.2012.11.072
浊为止，然后用蒸馏水洗至无醇味，再将大孔树脂用
5%盐酸浸泡 3 h，用蒸馏水洗涤至中性，再用 3%氢
氧化钠浸泡 3 h，用蒸馏水洗至中性［4-5］，将刺人参
水提醇沉后所得上清液稀释至 1 g·mL － 1，上大孔树
脂柱，静态吸附 3 h 后用蒸馏水冲至无糖(用 molish
试剂检测法) ，再分别用 10%，30%，60% 的乙醇洗
脱，每个梯度用大约冲 7 倍柱体积，收集洗脱液，回
收乙醇，用蒸馏水溶解药物，稀释至折合生药量 3. 2
g·mL － 1，备用。
2 方法
2. 1 刺人参水提液、醇提液与戊巴比妥钠协同小鼠
睡眠实验 取 56 只小鼠放置于实验室 1 周，使之适
应环境。将小鼠随机分为 4 组，分别为空白对照组、
刺人参水提液组(64 g·kg － 1)、醇提液组(64 g·
kg － 1)、地西泮组。空白对照组和地西泮组给予生理
盐水，给药组给予相应药液，每天 ig 1 次，ig 体积为
20 mL·kg － 1，连续 7 d，水食不限。末次 ig 30 min
后，各组 ip 戊巴比妥钠 45 mg·kg － 1，注射体积为 10
mL·kg － 1(其中地西泮组于末次 ig 后 15 min ip 地西
泮 2. 5 mg·kg － 1，注射体积为 10 mL·kg － 1，30 min 后
再注射戊巴比妥钠，剂量同上)。室内温度保持在
20 ℃，湿度 40%。用翻正反射测定仪测定，翻正反
射消失达 1 min 以上者即为入睡，观察并记录睡眠
潜伏期(注射戊巴比妥钠至翻正反射消失的时间)
及睡眠时间(翻正反射消失至恢复的时间)。
2. 2 刺人参上清液、沉淀物与戊巴比妥钠协同小鼠
睡眠实验 取 56 只小鼠放置于实验室 1 周，使之适
应环境。将小鼠随机分为 4 组，分别为空白对照组、
上清液组(64 g·kg － 1)、沉淀物组(64 g·kg － 1)、地西
泮组。余处理同 2. 1。
2. 3 刺人参水提液不同浓度乙醇洗脱液与戊巴比
妥钠协同小鼠睡眠实验 取 70 只小鼠放置于实验
室 1 周，使之适应环境。将小鼠随机分为 5 组，分别
为空白对照组、10%乙醇洗脱组(64 g·kg － 1)、30%
乙醇洗脱组(64 g·kg － 1)、60% 乙醇洗脱组(64 g·
kg － 1)及地西泮组。余处理同 2. 1。
2. 4 统计学处理 采用 SPSS 13. 0 统计软件处理
实验数据，结果以 珋x ± s 表示，用组间 t 检验进行统计
比较，P ＜ 0. 05 有统计学意义。
3 结果
3. 1 刺人参水提液、醇提液对戊巴比妥钠所致小鼠
睡眠的影响 与空白对照组比较，刺人参水提液和
醇提液都能明显缩短睡眠潜伏期并延长睡眠时间，
差异具有显著性意义(P ＜ 0. 05)。水提液和醇提液
比较，对改善睡眠无太大差别。见表 1。
表 1 刺人参水提液、醇提液对戊巴比妥钠所致
小鼠睡眠的影响(珋x ± s，n = 14)
组别
剂量
/ g·kg － 1
潜伏期
/min
睡眠时间
/min
空白对照 － 4. 63 ± 0. 62 21. 47 ± 3. 79
刺人参水提液 64 2. 82 ± 0. 471) 44. 5 ± 4. 231)
刺人参醇提液 64 2. 87 ± 0. 511) 45. 24 ± 4. 741)
地西泮 2. 5 × 10 － 3 2. 34 ± 0. 381) 54. 63 ± 5. 521)
注:与空白对照组比较1)P ＜ 0. 05 (表 2 ～ 3 同)。
3. 2 刺人参上清液、沉淀物对戊巴比妥钠所致小鼠
睡眠的影响 刺人参水提液经过醇沉后，其上清液
与空白对照组比较明显缩短了睡眠潜伏期和延长睡
眠时间，差异具有显著性意义(P ＜ 0. 05)。沉淀物
与空白对照组比较没有明显的差异。见表 2。
表 2 刺人参水提醇沉后上清液、沉淀物对戊巴
比妥钠所致小鼠睡眠的影响(珋x ± s，n = 14)
组别
剂量
/ g·kg － 1
潜伏期
/min
睡眠时间
/min
空白对照 － 4. 67 ± 0. 52 23. 17 ± 4. 63
刺人参上清液 64 2. 85 ± 0. 431) 46. 25 ± 5. 41)
刺人参沉淀物 64 4. 48 ± 0. 67 24. 52 ± 4. 57
地西泮 2. 5 × 10 － 3 2. 29 ± 0. 381) 56. 28 ± 6. 341)
3. 3 刺人参水提液不同浓度乙醇洗脱液对戊巴比
妥钠所致小鼠睡眠的影响 与空白对照组比较，
60%乙醇洗脱部分与空白对照组和其他各洗脱组比
较明显缩短了睡眠潜伏期和延长睡眠时间，差异具
有显著性意义(P ＜ 0. 05) ，其他各洗脱组与空白对
照组比较没有明显的差异。见表 3。
表 3 刺人参水提液不同浓度乙醇洗脱液对戊巴
比妥钠所致小鼠睡眠的影响(珋x ± s，n = 14)
组别
剂量
/ g·kg － 1
潜伏期
/min
睡眠时间
/min
空白对照 － 5. 38 ± 0. 51 22. 47 ± 4. 54
10%乙醇洗脱 64 5. 20 ± 0. 62 19. 58 ± 4. 27
30%乙醇洗脱 64 4. 96 ± 0. 71 23. 49 ± 5. 04
60%乙醇洗脱 64 3. 14 ± 0. 461) 45. 37 ± 5. 221)
地西泮 2. 5 × 10 － 3 2. 69 ± 0. 481) 60. 47 ± 7. 121)
4 结论
刺人参改善睡眠作用的有效部位是刺人参水提
液经醇沉后的上清液 60%乙醇洗脱部位。
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中国实验方剂学杂志
Chinese Journal of Experimental Traditional Medical Formulae
Vol． 18，No． 11
Jun．，2012
5 讨论
刺人参为五加科植物，具有降血压、兴奋呼吸、
抗炎、抗菌、解热镇痛、抗衰老等作用［6］，与人参相
似［7］。临床主要用于治疗神经衰弱，神经衰弱性抑
郁症，神经衰弱性多疑症，精神分裂症，长期病后体
力衰弱，体虚咳嗽，脑力疲劳，体力减退，阳萎，轻度
的糖尿病，低血压病等。民间常用来治疗关节痛。
有关刺人参挥发油对中枢神经系统影响的报道
较多，刺人参挥发油对小鼠中枢神经系统有明显抑
制作用，与戊巴比妥钠有协同作用，能增强其催眠能
力［8］。而其水煎液的报道较少，本实验通过戊巴比
妥钠协同小鼠睡眠实验，此实验方法可靠［9-10］，确定
了刺人参水提液和醇提液都具有改善睡眠的作用，
但从经济上考虑，选择水提液继续研究。通过醇沉，
比较上清液与沉淀物，结果上清液具有改善睡眠的
作用，据此推算刺人参水提液改善睡眠作用的物质
可能是水溶性物质。进一步采用大孔树脂富集法，
利用药理指标为标准对改善睡眠的有效部位进行
纯化。
研究发现，刺人参改善睡眠的有效部位里主要
含有刺人参皂苷，刺人参皂苷非常复杂，包括胡萝卜
苷、丁香苷、齐墩果酸、刺五加苷 A，B，B1，C，D，E，
F，G 等［11］，与同属药用植物刺五加所含的皂苷相
似，本实验室曾做过刺五加水煎液改善睡眠的研究，
并确定刺五加水煎液具有改善睡眠的作用［12］，对此
初步推算，刺人参与刺五加改善睡眠的物质基础比
较接近，都是水提部分;进一步推测机制也可能相
同，有待进一步验证。
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作用研究［J］．中华中医药学刊，2007，25(10) :2084．
［责任编辑 聂淑琴
檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶檶
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