全 文 ：·方药研究·
草本水杨梅根 、茎 、叶氨基酸的比较分析
齐志斌1 ,杨晓虹1 ,李　刚2 ,李怀林1
(1.吉林大学药学院 ,吉林长春 130021;2.吉林省产品质量监督检验院 ,吉林 长春 130022)
　　关键词:草本水杨梅;高效液相色谱法;氨基酸
　　中图分类号:R285.5　　　文献标识码:A　　　文章编号:1003-5699(2006)01-0053-02
作者简介:齐志斌(1968～ 　),男 , 硕士在读。研究方向:天然药物化学研究。
　　蔷薇科水杨梅属植物草本水杨梅(Geum alep-
picum Jacq.)为多年生草本植物 ,又名追风七 、老五
叶 、海棠菜等 ,在我国东北 、华北 、西北 、中南及西南均
有分布。民间以全草或根入药[ 1] 。该植物在我国已
有较长的药用历史 ,具有清热解毒 、利尿 、消肿止痛之
功效 ,适用于肠炎 、痢疾 、小儿惊风 、腰腿疼痛 、跌打损
伤 、月经不调 、白带异常 ,外用治疥疮 、痈肿等症 ,具有
很大的开发和应用价值 。该植物的挥发油成分[ 1]和
根茎叶中无机元素的含量[ 2]已有相关报道 ,因此笔者
拟对其氨基酸的含量进行测试分析 。
1　材料与方法
1.1　供试样品　草本水杨梅原植物采摘于吉林省泉
阳林业局 ,采摘季节为 9月 ,经长春中医学院邓明鲁
教授鉴定为 Geum aleppicum Jacq.的全草 。取草本水
杨梅的根 、茎 、叶各少许 ,分别用自来水 、蒸馏水和去
离子水洗净 ,置干燥通风处阴干 ,65℃下干燥 ,用瓷乳
钵研细 ,再干燥至恒重 ,置干燥器皿中备用。
1.2　主要仪器与试剂　高效液相色谱仪:LC-8A 岛
津公司 ,配备LC-8A系列泵及 LC-8A紫外可见系列二
极管阵列检测器 ,日本岛津公司。HP 化学工作站:美
国惠普公司 。18 种氨基酸标准品:分别为天冬氨酸
(ASP)、谷氨酸(GLU)、羟脯氨酸(OH-PRO)、丝氨酸
(SER)、甘氨酸(GLY)、苏氨酸(THR)、精氨酸(ARG)、
丙氨酸(ALA)、脯氨酸(PRO)、缬氨酸(VAL)、蛋氨酸
(MET)、胱氨酸(CYS)、异亮氨酸(ISO-LEU)、亮氨酸
(LEU)、苯丙氨酸(PHE)、组氨酸(HIS)、赖氨酸(LYS)
和酪氨酸(TYR)均为光谱纯 ,英格兰 BDH 化学公司。
乙腈:色谱纯 ,上海脑研究所 。N ,N-二甲基甲酰胺:
色谱纯 ,上海试剂一厂 。2 , 4-二硝基氟苯(DNFB):色
谱纯 ,北京防化研究院化工厂 。实验所用其它试剂均
为分析纯 。实验用水为去离子重蒸馏水 。
氨基酸标准溶液的制备:准确称取氨基酸标准品
6mg 于100ml容量瓶中 ,加入6mol/L盐酸溶液 5ml ,用
水稀释至刻度 ,使用时用水稀释至所需浓度的标准工
作溶液 。
1.3　色谱条件　色谱柱:Hypersil ODS-C18柱(100mm
×4.6mm I.d.,5μm)。流动相A :0.05mol/L乙酸钠缓
冲溶液(pH=6.5 ,含 10mL/L ,N ,N-二甲基甲酰胺);流
动相 B:乙腈-水(体积比为 1∶1),采用梯度洗脱 。流
动相流速:1.0ml/min;检测波长:360nm;柱压:80 ～
120kPa;柱温 22℃;进样量:15μl。
1.4　样品水解 、衍生与测定　精密称取草本水杨梅
根部样品 15mg ,加入 6mol/L 盐酸溶液 20ml ,通入氩
气 ,抽真空 30s ,反复 3次 ,密闭水解24h(110℃),冷却
到室温 ,用 2mol/L 氢氧化钠溶液中和至中性过滤 。
以 0.01mol/L磷酸二氢钾溶液定容至 50ml ,得样品水
解液。取样品水解液 1.0ml ,置于 10ml容量瓶中 ,加
入 0.5mol/L 碳酸氢钠溶液 1.0ml 、含 10ml/L DNFB的
乙腈溶液 1.0ml ,置于 60℃水浴中 ,避光加热 1h ,冷却
至室温 ,用 0.01mol/L 磷酸二氢钾溶液(pH =7.0)稀
释至刻度 ,摇匀 。使用 0.45μm 滤膜过滤 ,以 4000r/
min离心 10min ,得样品衍生物溶液 ,取 15μl进样测
定 。以保留时间定性 ,峰面积外标法定量 ,用化学工
作站进行数据处理 。草本水杨梅茎 、叶样品的水解 、
衍生 、测定方法同上。
2　结果
从草本水杨梅根中检出 16种氨基酸 ,从茎 、叶中
分别检出 15种氨基酸见表 1。
表 1　草本水杨梅中氨基酸的含量(mg/g)
氨基酸 根 茎 叶
天冬氨酸(ASP) 1.71 1.32 3.02
谷氨酸(GLU) 2.87 1.81 2.59
甘氨酸(GLY) 0.19 0.38 0.41
苏氨酸(THR＊) 0.20 0.40 0.42
精氨酸(ARG) 0.65 0.72 1.92
丙氨酸(ALA) 0.56 0.85 1.47
脯氨酸(PRO) 0.99 1.56 2.73
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　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　吉林中医药　2006年 1月　第 26卷第 1期
DOI :10.13463/j.cnki.j lzyy.2006.01.048
缬氨酸(VAL＊) 0.23 2.84 2.36
蛋氨酸(MET＊) 5.14 2.38 4.06
胱氨酸(CYS) 0.71 1.41 1.75
异亮氨酸(ILE＊) 1.10 1.23 1.41
亮氨酸(LEU＊) 0.66 1.11 1.26
苯丙氨酸(PHE＊) 4.18 3.38 5.27
组氨酸(HIS) 1.16 3.73 3.84
赖氨酸(LYS＊) 2.66 - -
酪氨酸(TYR) 19.2 29.96 20.34
必需氨基酸＊ 14.17 11.34 14.78
总氨基酸 42.21 53.08 52.85
3　小结
结果表明 , 用高效液相色谱 (HPLC)方法测得
的草本水杨梅根 、茎 、叶中氨基酸的含量明显不同。
每1g 草本水杨梅根 、 茎 、 叶中含总氨基酸分别为
42.21mg 、 53.08mg、 52.85mg , 其中人体必需氨基酸
分别为 14.17mg 、 11.34mg、 14.78mg , 根 、茎 、叶中
必需氨基酸的含量分别占总氨基酸的 33.57%、
21.36%、 27.96%。所测氨基酸中以酪氨酸 、 组氨
酸 、谷氨酸的含量最高 , 且必需氨基酸中蛋氨酸 、
苯丙氨酸 、 缬氨酸的含量较高 。草本水杨梅根 、茎 、
叶中含有丰富的氨基酸成分 , 是一个良好补充必需
氨基酸的食物来源 , 尤其对于每天进行大运动量的
人来说 , 适当地补充含氨基酸丰富的食品对人体会
有很大益处 。有关草本水杨梅中氨基酸含量的多少
在防病治病中与疗效的关系 , 有待于进一步的探讨 。
参考文献:
[ 1]李怀林 ,杨晓虹,李　刚 ,等.长白山水杨梅挥发油成分GC-MC
分析[ J] .长春中医学院学报, 2005 ,21(2):31～ 32.
[ 2] 管恩杰 , 杨晓虹 , 李怀林 , 等.草本水杨梅根 、茎 、叶无机元
素的比较分析[ J] .长春中医学院学报 , 2005 , 21(2):30～ 31.
(收稿日期:2005-10-28)
长白忍冬干燥花蕾挥发油化学成份的GC-MS分析
樊庆林1 ,王广树1 ,张明欣2
(1.吉林大学药学院 ,吉林 长春 100031;2.四平市药品监督管理局铁东分局 ,吉林 四平 136001)
　　关键词:长白忍冬;花蕾;挥发油;GC-MS 分析
　　中图分类号:R285.5　　　文献标识码:A　　　文章编号:1003-5699(2006)01-0054-02
作者简介:樊庆林(1973～ 　),男 , 吉林和龙人 , 大学本科 ,讲师。研究方向:中药学。
　　长白忍冬为忍冬科忍冬属(Lonicera ruprechtiana
Regel)植物 ,灌木 、高达 2米 。幼枝密生短柔毛 ,叶对
生。两花合生叶腋 ,花萼筒联合 ,具腺毛 ,花冠白基部
带淡紫色 ,浆果红色。花期 3 ～ 4月 ,果期 8 ～ 10 月。
由于对于长白忍冬干燥花蕾挥发油成分的分析尚属
首次 ,故本着植物同源同属其化学成份相近的特性 ,
笔者参照长白忍冬的同属植物金银忍冬(金银花)的
采摘及炮制条件 ,对长白忍冬的花蕾进行处理 ,即采
摘尚未开花的长白忍冬花蕾 ,自然条件下阴干 ,并进
行了防虫 、防蛀的处理。根据药典中对金银花挥发油
的提取条件及相关文献资料 ,最终确定长白忍冬干燥
花蕾的挥发油提取条件 ,即利用挥发油提取器 ,采用
常规水蒸汽蒸馏法进行提取 ,在提取前取干燥花蕾
100g ,加入 10倍量的水浸泡 10h ,之后进行水蒸汽蒸
馏 ,温度控制在 75℃～ 100℃之间 ,回流提取 10h[ 1] 。
最终挥发油收率在 0.2%。之后进行气相色谱—质
谱(GC-MS)分析 ,共分离出 26种成份 ,从中鉴定了 25
种成份 ,占挥发油总成份的 96.15%。
1　资料与方法
1.1　仪器与材料　HP6890GC/5973MSD气质联用分
析仪(安捷伦科技有限公司), 附 G1701DA Version
D.00.00.38 ChemStation软件 ,G1033A ,D.01.00NIST98
标准质谱检索库 。挥发油提取器 ,长白忍冬的干燥花
蕾(自行采集)。
1.2　挥发油的提取　将长白忍冬干燥花蕾粉碎后 ,
加入10倍量的水浸泡 10h ,用挥发油提取器按常规水
回流法回流提取 10h ,分离后收油率为 0.2%。挥发
油为黄褐色透明油状物 ,具有浓郁香味 ,用少量乙醚
溶解后备用 。
1.3　色谱条件　色谱柱:HP-5MS ,5%苯甲基聚硅氧
烷弹性石英毛细管柱(30m×0.25mm×0.25μm);进样
口温度:250℃,柱室温度:初始温度 70℃,以 5℃/min
升温速度升至 280℃(保持 5min);载气:高纯氦气 ,柱
前压 64kPa ,流速 1ml/min ,分流比 40:1。
1.4　质谱条件　接口温度:250℃;电离方式:EI;电
子能量:70eV ;离子源温度:230℃, 四极杆温度:
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吉林中医药　2006年 1月　第 26卷第 1期