全 文 ：同浓度的半枝莲含药大鼠血清分别处理人肺巨细胞癌细胞株 PG细胞 , 采用流式细胞仪法观察其对 PG细胞 bcl-2基因表达的影响。
结果:经半枝莲含药血清作用的 PG细胞 bcl-2基因表达明显降低。结论:半枝莲抗肿瘤作用机制可能与 bcl-2基因表达减少有关。
　　关键词　半枝莲;肺癌细胞 PG;bcl-2
　　半枝莲(ScutelariabarbataD.Don)作为一种常用的抗肿瘤
中药对肝癌 、肺癌 、胃癌 、直肠癌 、鼻咽癌等均有一定的疗效。在
多种肿瘤组织中 , 由于 bcl-2基因异常的高表达 , 可使肿瘤细胞
群逃避和减少凋亡 , 造成增殖细胞群的细胞数量增多。本文试
图从 bcl-2基因表达的角度来探讨半枝莲的抗肿瘤作用机制。
1 　材料
1.1　试验药物　半枝莲购自济南市建联中药店 ,并由山东中医
药大学中药鉴定室鉴定。称取半枝莲 200g, 加适量水浸泡 1 ～
2h, 水煎煮提取两次 ,合并提取液 , 浓缩成一定浓度(剂量为 50g
生药 /kg),即得半枝莲水提取物。顺铂(DDP), 齐鲁制药有限
公司。
1.2 　动物与细胞株　 Wistar大鼠 , 雄性 , 体重 200-240g, 由山
东中医药大学实验动物中心提供。人肺巨细胞癌细胞株 PG细
胞 , 由山东省医学科学院基础所提供。
1.3 　仪器与试剂　流式细胞仪(FACScan型 , 美国 BD公司),
倒置相差显微镜(美国 AO);藻红蛋白(PE)荧光素标记的鼠抗
人 bcl-2单抗 IgG1及用于免疫阴性对照 IgG1-PE(美国 Pharmin-
gen公司), RPMI1640培养基(Gibco公司),小牛血清(杭州四季
青生物材料研究所);胰蛋白酶(GIBCO分装 , 伯安生命技术有
限公司)。
2　方法与结果
2.1　含药血清的制备 　大鼠 20只 , 随机分二组。 含药血清组
每日分别半枝莲 4ml/次 , 2次 /日灌胃;正常血清组每日给予等
量生理盐水灌胃。连续给药 3天 , 末次给药后 1h, 乙醚麻醉 ,腹
主动脉无菌采血 , 置无菌离心管离心 1500rpm10min, 无菌分离
血清 , 经 56℃、30分钟灭活 ,用 0.22μm微孔滤膜过滤除菌 , 分
装入小瓶 , 置-20℃冰箱保存备用。
2.2　流式细胞仪检测　取对数生长期的 PG细胞 , 经 0.25%胰
酶消化 ,计数 , 以 2×105 /ml的量接种于培养瓶中 , 37℃ 5% CO
2
含 10%小牛血清的 1640培养基中培养 24小时 , 至细胞生长旺
盛贴壁后 , 去掉原培养液 , 分别加入不同浓度的含药血清及
DDP,于培养箱中继续培养 24小时 , 0.25%胰酶消化 , 离心 , 用
PBS液洗涤 2次 ,制成细胞悬液 , 取 200μl, 加 bcl-2单抗工作液
20μl, 另 1支加阴性对照单抗 IgG1-PE, 避光反应 20min, 上机检
测 , 结果见表 1。
表 1　半枝莲含药血清对PG细胞 bcl-2基因表达的影响( x±s)
组别 n bcl-2表达率(%)　　
10%正常血清 5 46.28±2.79
5%含药血清 5 35.41±1.83＊＊
10%含药血清 5 22.90±2.15＊＊
15%含药血清 5 17.61±2.24＊＊
DDP 5 3.82±1.87＊＊
10%含药血清 +DDP 5 2.51±1.03＊＊
　　与正常血清组比较＊P<0.05, ＊＊P<0.01
3　讨论
　　bcl-2是滤泡型 B细胞淋巴瘤 /白血病 2(B-celllymphoma/
leukemia-2, bcl-2)的缩写 ,人 bcl-2基因是从与滤泡性淋巴瘤相
关的 t(14:18)染色体易位的断裂点克隆到的。 在此易位中 ,
bcl-2从其正常位点(18q21)易位到与位于 14q32的免疫球蛋白
重链(IgH)座位并列的位置 ,这导致在淋巴瘤细胞中该基因的
转录启动以及 26kbbcl-2蛋白的过度表达。 bcl-2基因是一种细
胞凋亡抑制基因 , bcl-2基因蛋白定位于核膜皱折处 、内质网膜
及线粒体膜上。 bcl-2蛋白不阻止药物进入细胞 , 也不抑制药物
引起的 DNA损伤 , 但 bcl-2蛋白具有保持细胞不死亡的抗凋亡
作用 [ 1-4] 。在多种肿瘤组织中 ,由于它异常的高表达 , 可使肿瘤
细胞群逃避和减少凋亡 ,造成增殖细胞群的细胞数量增多 ,这与
肿瘤的恶性生物学行为和预后不良有密切关系。
本实验采用流式细胞仪分析半枝莲含药血清对 PG细胞
bcl-2基因表达的影响 , 结果表明 , 不同浓度半枝莲含药血清作
用于肿瘤细胞后 ,可明显抑制的 bcl-2的高表达 , 且存在明显的
量效关系。而且半枝莲含药血清与 DDP合用与单用 DDP组比
较无显著性差异 , 提示半枝莲抑制肿瘤细胞内凋亡抑制基因
bcl-2的表达 , 可能是其抗肿瘤作用的主要机制之一 , 影响其基
因表达的因素还有待进一步研究。
参考文献
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2　臧运华 ,李震 ,李洁 ,等.益气养阴方对 K562细胞 bcl-2及 p53基因
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mia, 2001;15∶869～ 874
大泡通乙醇提取物镇痛抗炎作用研究
殷勇冠 ,易艳东 1 ,郑有顺
(南方医科大学中医药学院 ,广州　510515;1武汉第一医院 ,武汉　430022)
　　摘　要　目的:探讨大泡通乙醇提取物的镇痛 、抗炎作用。方法:用小鼠热板法观察其镇痛作用;以小鼠耳肿法及大鼠足肿
47中药药理与临床 2007;23(1)DOI :10.13412/j.cnki.zyy l.2007.01.026
胀法观察其抗炎作用 。结果:大泡通乙醇提取物能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿胀 , 提高热板法小鼠痛
阈值。结论:大泡通乙醇提取物具有明显镇痛 、抗炎作用。
　　关键词　大泡通;抗炎;镇痛
　　大泡通(ImpatienspritzelliHook.f.var.hupehensisHook)
为五加科植物惠序鹅掌柴 ,其根或根皮入药 , 能祛风活络 , 治骨
折 , 挫伤 ,风湿关节痛 , 腰肌劳损 [ 1] 。本文对其镇痛抗炎作用进
行了研究。
1 　材料
1.1 　试验药物与试剂 　大泡通乙醇提取物由本实验室常规
方法提取 , 配成高 、中 、低不同浓度备用。阿司匹林用 1%CMC
配成相应浓度的悬浮液。角叉菜胶:Sigma公司。
1.2　动物 　昆明小鼠 , ♀♂各半 , 体重(20 ±2)g;SD大鼠 ,
♂, 体重(200±20)g, 购自同济医学院动物实验中心。
2 　方法与结果
2.1 　大泡通对角叉菜胶致大鼠足肿胀的影响　大鼠 40只随
机分成 5组 , 灌胃给药后 1h,于每只大鼠右后脚足跖皮下注射
1 %角叉菜 50μl致炎 , 玻璃容积法测量致炎前及致炎后 1 、2、
3、4和 5h足容积 ,计算肿胀度和各组的肿胀抑制率。结果各药
物组于致炎后 0.5h至 6h与对照组比较均有显著性差异 , 提示
药物对角叉菜胶所致大鼠足肿胀有明显抑制作用 ,结果见表 1。
　　表 1　大泡通乙醇提取物抑制大鼠足跖肿胀试验(% x±s)
组别 剂量(g/kg) 0.5h 1h 2h 4h 6h
阴性对照 20.6±5.3　　 31.5±8.7　　39.8 ±9.23　　48.0±8.4　　45.2±9.3　　
阿司匹林 0.1 16.5±6.8＊＊ 18.9±7.1＊＊ 26.8±8.1＊＊ 31.1±8.9＊＊28.5±8.9＊＊
大泡通 0.5 18.9±8.1＊　 20.1±5.1＊　 27.3±7.9＊＊ 32.2±7.6＊＊33.1±8.6＊＊
大泡通 1 17.8±7.5＊　 19.9±7.8＊　 25.4±7.9＊＊ 30.1±5.4＊＊28.9±7.1＊＊
大泡通 2 14.5±5.9＊　 17.8±6.3＊＊ 24.9±9.0＊＊ 25.9±8.8＊＊30.1±6.6＊＊
　　与对照组比较 ＊ P<0.05, ＊＊ P<0.01
2.2 　对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀的影响 　小鼠 50只随机
分为 5组 , 灌胃给药 3d每天两次 , 第 3天给药 30min后涂二甲
苯于小鼠左耳致炎 , 30min后脱臼处死 , 用打孔器铳取双耳 , 称
重 ,左右耳的重量差作为肿胀度 , 结果对照组为(3.31 ±0.54)
mg,阿司匹林 200mg/kg为(1.45 ±1.25)mg,大泡通高 、中 、低
剂量组分别为(1.99±1.69)mg、(1.78±1.54)mg和(1.55±
0.35)mg,表明大泡通对二甲苯所致小鼠耳肿胀有明显抑制作
用。
2.3　小鼠热板法试验　 ♀小鼠 50只 , 体重 20±2g, 55.0±
0.5℃热板 ,以舔后足反应为指标 , 预选痛阈在 5 ～ 15s内小鼠 40
只 ,随机分成 4组 ,灌胃给药 , 测定给药后 1、2h的痛阈 , 60s内不
发生舔足反应者按 60s计算。结果大泡通 1g/kg使小鼠痛阈提
高 3.5s(28 %)和 5.5s(44 %), 阿司匹林 200 mg/kg组提高
5.4s(44%)和 4.6s(37 %), 两者基本相当。
3　讨论
　　大泡通在民间主要用于风湿病的治疗 ,所以本实验对大泡
通乙醇提取物抗炎镇痛作用进行了研究 , 结果大泡通乙醇提取
物能显著抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀及角叉菜胶致大鼠足肿
胀 ,提高热板法小鼠痛阈值 , 表明 大泡通乙醇提取物具有明显
镇痛 、抗炎作用。
AStudyonanti-inflammatoryandanalgesicefectofDapaotongalcoholextractive
YingYongguan, YiYangdong, ZhengYoushun
(SouthUniversityofMedicalSciences, Guangzhou　510515)
　　Objective:Tostudytheanti-inflammatoryandanalgesicefectsofDapaotongsalcohol-extractive(DAE).Menthods:Thehot-platetest
, earedemainducedbydimethylbenzeneandswellingofratpawinducedbycarrageeninwereusedtostudytheanalgesandanti-inflammatory
effects.Result:DAEcouldinhibitthemouseearedemainducedbydimethylbenzene, inhibittheratfootswellinginducedbycarrageenin,
andincreasethemicepainthresholdinducedbyhotplate.Conclusion:DAEhasanti-inflammatoryandanalgesicefects.
　　Keywords　 Dapaotong(大泡通);analgesicefect;anti-inflammationefect
乌骨鸡正己烷提取物补血作用研究＊
田颖刚 ,谢明勇＊＊ ,吴红静 ,王维亚 ,唐永富
(南昌大学食品科学教育部重点实验室 , 　南昌　 330047)
　　摘　要　目的:探讨乌骨鸡正己烷提取物的补血作用。方法:口服预防给药后 , 用放血法制作小鼠失血性血虚证模型 , 乙酰
48 中药药理与临床 2007;23(1)
＊ 江西省农业科技攻关重点项目(2005)　　　　＊＊通讯作者