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2013,42(4):334-336.
Subtropical Plant Science
重瓣臭茉莉根总黄酮提取工艺的优化
吴冬凡,房志坚
（广东药学院，广东 中山 528458）

摘 要：以总黄酮的提取率为考察目标，通过单因素及正交试验，对重瓣臭茉莉根中总黄酮的提取工艺进行优
化。结果表明，最佳提取工艺条件为：以 25 倍量 80%乙醇，在 80 ℃下回流提取 90 min。重瓣臭茉莉根中总黄
酮的平均质量分数为 2.68%。此优化工艺简单可行且稳定高效，可作为重瓣臭茉莉根中总黄酮的优选提取工艺。
关键词：重瓣臭茉莉；根；总黄酮；正交试验
Doi: 10.3969/j.issn.1009-7791.2013.04.012
中图分类号：R284.1 文献标识码：A 文章编号：1009-7791(2013)04-0334-03

Extraction Process of Total Flavones in the roots of Clerodendrum chinense
WU Dong-fan, FANG Zhi-jian
(Guangdong Medicine College, Zhongshan 528458, Guangdong China)

Abstract： Using single factor test and orthogonal test, the optimal processes of extracting total
flavonoids from Clerodendrum Chinense (Lour) Merr were established by the absorption of total
flavonoids. The optimum conditions for extracting the total flavonoids assisted were as follow:
extraction temperature 80 ℃, extraction time 90 min, 80% ethanol and ratio of solid to liquid 1∶25.
The mass fraction of total flavonoids extracted was up to 2.68%. It was suggested that the optimum
extraction process was simple, stable, efficient and feasible.
Key words：Clerodendrum chinense; root; total flavonoids; orthogonal test

臭茉莉来源为马鞭草科大青属植物重瓣臭茉莉Clerodendrum philippinum及臭茉莉C. philippinum
var. simplex的干燥叶、茎和根。重瓣臭茉莉又名冬地梅、山茉莉，主要分布于福建、台湾、广东、广
西、云南等地[1]；臭茉莉又名过墙风、白龙船花，主要分布于广西、贵州、云南等地[2]。性味平、苦，
有祛风利湿、化痰止咳、活血消肿等功效。根可用于医治风湿性关节炎、脚气水肿、白带、支气管炎。
叶外用可治湿疹、皮肤瘙痒[3]。臭茉莉是广东传统凉茶——沙溪凉茶的主要成分之一[4]。全草含黄酮苷、
酚类、皂苷、鞣质[5-7]。黄酮类化合物，是一大类天然产物，广泛存在于植物界，是许多中草药的
有效成分。总黄酮具有抗炎症、抗过敏、抑制细菌和病毒繁殖、抑制寄生虫生长、防治肝病、防
治心脑血管疾病、抗肿瘤、抗化学毒物等作用[8-10]。本实验对重瓣臭茉莉根的总黄酮提取工艺进行
探讨，以优化重瓣臭茉莉根总黄酮的提取工艺。
1 材料与仪器
供试重瓣臭茉莉 Clerodendrum philippinum 采自广东省中山市五桂山，取其根部，去除杂质，切成
小块，阴干，打成粉末备用。芦丁（中国药品生物制品检定所，100080—200707）。UV1102 紫外分光
光度计（上海天美科学仪器有限公司），AUY-120 万分之一电子天平（广州仪通兴化仪器仪表有限公司），
B-220 恒温水浴锅（上海亚荣生化仪器厂），400 克摇摆式高速中药粉碎机（温岭市林机械有限公司，
DFY-400）。
收稿日期：2013-07-05
作者简介：吴冬凡(1981-)，女，广东潮州人，硕士研究生，从事中药资源研究。E-mail: wudongfan2008@163.com
注：房志坚为通讯作者。E-mail: jian139@tom..com
第 4 期 吴冬凡,等：重瓣臭茉莉根总黄酮提取工艺的优化 ﹒335﹒
2 实验方法
2.1 对照品溶液制备
精密称取经 105 ℃干燥至恒重的芦丁对照品 4 mg，添加适量 80%乙醇溶解，置于 10 mL 容量瓶中，
80%乙醇定容至刻度，摇匀，得到 0.4 mg/mL 标准溶液，作为对照品溶液。
2.2 供试品溶液制备
取重瓣臭茉莉根粉末 2 g，置圆底烧瓶中，加入 80%乙醇 50 mL，70 ℃提取液过滤，定容于 100 mL
容量瓶中，再精密量取 5 mL，置于 50 mL 容量瓶，加 5%亚硝酸钠溶液 1 mL，6 min 后，加 10%硝酸
铝溶液 1 mL，6 min 后，加 4%氢氧化钠溶液 10 mL，加水定容至刻度，摇匀，放置 15 min。
2.3 最大波长扫描
取对照品储备液 0.6 mL，置于 10 mL 容量瓶中，加 5%亚硝酸钠溶液 0.3 mL，6 min 后，加 10%
硝酸铝溶液 0.3 mL，6 min 后，加 1 mol/L 氢氧化钠溶液 4 mL，加水定容至刻度，摇匀，放置 15 min，
于 400～600 nm 进行波长扫描，最大波长为 513 nm，因此选择 513 nm 作为测定波长。
2.4 标准曲线制作
精密量取对照品溶液 0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2、1.4、1.6 mL，置于 10 mL量瓶中，加 5%
亚硝酸钠溶液 0.3 mL，6 min后，加 10%硝酸铝溶液 0.3 mL，6 min后，加 1 mol/L氢氧化钠溶液 4 mL，
加水定容至刻度，摇匀，放置 15 min。过滤，于最大波长处测定吸光度。
2.5 总黄酮含量测定
按照 2.4 项下的方法测定样品溶液吸光度，以标准曲线法计算臭茉莉根总黄酮的质量分数。
2.6 单因素试验
在所用溶剂一定的条件下，溶剂的浓度、提取时间、提取温度及料液比都会对提取效率产生影响。
本试验选用乙醇溶液为提取溶剂，确定影响乙醇提取效率的主要因素为：乙醇浓度为 60%、65%、70%、
75%、80%、85%六个水平；提取时间为 30、60、90、120、150 五个水平；提取温度为 50、60、70、
80、90 ℃五个水平及料液比为 1∶10、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35 五个水平。
2.6.1 乙醇浓度对提取率的影响 取重瓣臭茉莉根粉末 2 g，以 1∶30 料液比，在 80 ℃下，分别加入上
述 6 个浓度乙醇提取 90 min，后过滤，定溶于 100 mL 容量瓶。按照 2.5 项下方法测定总黄酮质量分数。
2.6.2 提取时间对提取率的影响 取重瓣臭茉莉根粉末 2 g，以 1∶30 料液比，加入 80%乙醇，在 80 ℃
条件下，分别提取 30 min、60 min、90 min、120 min、150 min、180 min，过滤，定溶于 100 mL 容量
瓶中。按照 2.5 项下方法测定并计算总黄酮质量分数。
2.6.3 提取温度对提取率的影响 取重瓣臭茉莉根粉末 2 g，以 1∶30 料液比，加入 80%乙醇，分别在
上述 5 个温度水平提取 90 min，过滤，定溶于 100 mL 容量瓶。按照 2.5 项下方法计算总黄酮质量分数。
2.6.4 料液比对提取率的影响 取重瓣臭茉莉根粉末 2 g，加入 80%乙醇，在 80 ℃下，分别以上述 5 个
料液比水平提取 90 min，过滤，定溶于 100 mL 的容量瓶中。按照 2.5 项下方法计算总黄酮的质量分数。
2.7 正交试验
根据单因素试验结果，选择乙醇浓度（A）、提取时间（B）、提取温度（C）、料液比（D）作为考
察因素，以测得的样品中总黄酮含量
为考察指标，选用L9（34）正交表实
验，选出因素水平（表 1）。
表 1 正交试验因素水平
水平 乙醇浓度 A(%) 提取时间 B(min) 提取温度 C(℃) 料液比 D
1 75 60 60 1:25
2 80 90 70 1:30
3 85 120 80 1:35 3 结果与分析
3.1 标准曲线
以芦丁对照品溶液浓度（X）对吸光度（Y）进行线性回归，得出回归方程：Y = 10.348X + 0.0077
（R2 = 0.9991）。结果表明，芦丁在 4～64 μg/mL浓度范围内与吸光度呈良好的线性关系。
3.2 乙醇浓度对提取率的影响
以 60%、65%、70%、75%、80%、85%乙醇作溶剂，重瓣臭茉莉根总黄酮提取率分别为 1.50%、
第 42 卷 ﹒336﹒
1.52%、1.60%、2.61%、2.20%、1.65%。当乙醇浓度低于 75%时，随着乙醇浓度的增加，总黄酮的得
率逐渐增加，在 60%～70%之间所增加的幅度不大，当乙醇体积分数为 75%时，重瓣臭茉莉根总黄酮
得率达到最大值；当乙醇体积分数继续上升，总黄酮的得率呈下降趋势，这是由于黄酮是一大类物质，
包含水溶性的和醇溶性的，所以乙醇浓度在一定范围内重瓣臭茉莉根总黄酮得率随提取液浓度升高而
升高，超过了该范围，则随乙醇浓度的提高而提取得率下降。
3.3 提取时间对提取率的影响
提取时间为 30、60、90、120、150、180 min 的重瓣臭茉莉根总黄酮提取率分别为 1.62%、2.48%、
2.56%、2.60%、2.65%。提取时间少于 60 min 时，重瓣臭茉莉根总黄酮得率随着回流的时间不断增加
而有较大幅度增加。当提取时间超过 60 min 后，提取率增加缓慢，在 90 min 时基本达到平衡。
3.4 提取温度对提取率的影响
在 50、60、70、80、90 ℃温度条件下，重瓣臭茉莉根总黄酮提取率分别为 1.45%、1.67%、2.23%、
2.69%、2.21%。在一定温度范围内，重瓣臭茉莉根总黄酮提取率大致随温度的增加呈逐步增加的趋势。
温度在 80 ℃时重瓣臭茉莉根总黄酮提取得率最大，当温度继续上升时，总黄酮提取率反而下降。
3.4 料液比对提取率的影响
以 1∶10、1∶20、1∶25、1∶30、1∶35 的料液比进行提取，重瓣臭茉莉根总黄酮提取率分别为
2.02%、2.24%、2.57%、2.60%、2.62%。随料液比的降低，重瓣臭茉莉根总黄酮提取率逐步增加。料
液比在 1∶35 时重瓣臭茉莉根总黄酮提取得率最大，当料液比继续降低时，重瓣臭茉莉根总黄酮提取
率趋于平缓。说明重瓣臭茉莉根总黄酮提取得率在一定范围内随着料液比降低而提高，超过了该范围，
料液比的降低并不能增加重瓣臭茉莉根总黄酮的提取得率。
3.5 正交试验
由表 2 可知，以总黄酮得率作为考察指标，极差R表明，各因素影响程度大小依次为C>D>A>B，
其中提取温度为影响重瓣臭茉莉根中总黄酮提取的主要因素。方差分析表明，提取温度对重瓣臭茉莉
根中总黄酮提取有显著影响（P>0.05）。其他对试验结果影响较小的素，可按实际需要选择适当的水平。
因此，直观分析得最佳回流提取工艺A2B2C3D1，即用 25 倍量 80%乙醇溶液在 80 ℃下提取 90 min。用
最佳工艺条件重复试验 3 次，黄酮平均含量为 2.68%，RD为 2.80%，提取比较完全，说明此工艺可行。
表 2 正交试验
因素 试验号 乙醇浓度 A(%) 提取时间 B(min) 提取温度 C (℃) 料液比 D 总黄酮含量(%)
1 1 1 1 1 1.76
2 1 2 2 2
3 1 3 3 3
2.14
2.38
4 2 1 2 3
5 2 2 3 1
2.08
2.68
6 2 3 1 2
7 3 1 3 2
2.12
2.50
8 3 2 1 3 1.85
9 3 3 2 1 2.15
K1 2.093 2.173 1.910 2.137
K2 2.233 2.163 2.123 2.313
K3 2.227 2.217 2.520 2.103

R 0.140 0.054 0.610 0.210
4 结论
本研究通过单因素及正交试验，得出 4 个因素对重瓣臭茉莉根中总黄酮得率的影响从大到小依次
是：提取温度>料液比>乙醇浓度>提取时间。提取温度对重瓣臭茉莉根中总黄酮提取有显著影响。这是
由于过高的温度会使部分黄酮类化合物分解，所以重瓣臭茉莉根总黄酮提取得率随着提取温度在一定
范围内升高而提高，超过了该范围，随着温度的提高会使重瓣臭茉莉根总黄酮提取得率下降。
（下转第 341 页）
﹒341﹒第 4 期 陈丽璇,等：底物种类和浓度对污泥重金属生物淋滤效果的影响
严重，选择 S2 处理（10 g/L）是经济高效的。
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（上接第 336 页）
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