全 文 ：的发挥。
虎杖中虎杖苷 、大黄素的同步积累 ,则应土壤中全氮和有机
质含量的同向增高。若只要求增加大黄素的含量 ,则应注重肥力
的均衡性 , 除有效磷之外 ,所有养分均应同步提高;若只需虎杖苷
的积累 , 有机质 、全氮应同向增加。
因此 , 在虎杖规范化种植过程中 ,首先要选择土质肥沃 、有机
质含量高的土壤 , 并加以改良;其次在虎杖的正常生长发育过程
中 , 应及时补充土壤供肥之不足 , 尤其是补充速效性的 N, P, K肥
料三要素 , 增施有机肥 ,改善土壤质地 ,确保虎杖商品的质量。
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收稿日期:2008-07-24;　修订日期:2008-10-10
作者简介:吴友苹(1982-),女(汉族),浙江杭州人 ,现为在读硕士研究生 ,
学士学位 ,主要从事中药临床前安全性评价工作.
＊通讯作者简介:宣尧仙(1954-), 女(汉族),浙江杭州人 , 现任浙江省医
学科学院国家新药安全评价研究重点实验研究员 ,学士学位 ,主要从事药
理毒理学研究工作.
鱼腥草注射液 I型过敏反应试验
吴友苹 ,徐潘生 ,卢觅佳 ,宣尧仙＊
(浙江省医学科学院国家新药安全评价研究重点实验室 ,浙江 杭州　310013)
摘要:目的 观察鱼腥草注射液经静脉注射给药后是否出现全身主动过敏反应和被动皮肤过敏反应。方法 豚鼠分别腹
腔注射鱼腥草注射液 5 ml/kg, 0.9%NaCl注射液 5 ml/kg及牛血清白蛋白生理盐水注射液 5 ml(60 mg)/kg, 隔日 1次 ,
连续 3次进行致敏。末次致敏后 12d各组静脉单次注射 2倍剂量的以上相应受试物进行激发 ,观察 30 min内是否出现
过敏反应;SD大鼠皮内注射相应抗血清 0.1 ml被动致敏 48 h后 ,分别静脉注射鱼腥草注射液 10ml/kg, 0.9% NaCl注射
液 10ml/kg和牛血清白蛋白生理盐水溶液 10 ml(100 mg)/kg, 及 1%伊文思蓝溶液 1 ml进行激发 , 30 min后处死动物 , 观
察注射点皮肤蓝斑直径。结果 鱼腥草注射液致敏期间豚鼠未出现任何异常反应 ,给予激发剂量后亦未出现明显异常反
应 , 未引起豚鼠死亡;鱼腥草注射液组和 0.9%NaCl注射液组大鼠背部皮肤内层均未出现蓝斑。结论 在该试验剂量条件
下 , 鱼腥草注射液豚鼠全身过敏反应 、大鼠被动皮肤过敏均为阴性。
关键词:鱼腥草注射液;　全身主动过敏;　被动皮肤过敏
中图分类号:R285.5　　文献标识码:B　　文章编号:1008-0805(2009)06-1522-02
　　近年来中药注射剂不良反应引起了人们的广泛关注。鱼腥
草类注射剂是临床常用抗菌药物 ,具有不产生耐药性 、价格低廉
等优点 ,在国内已经使用三十余年。然而 , 国家药品不良反应监
测中心监测的数据显示从 2003 ～ 2006-04-13,共收到的鱼腥草
注射液严重不良反应病例报告从 52例猛增到 222例 , 为保障临
床用药安全 , 国家食品药品监督管理局(SFDA)不得不对鱼腥草
注射液作出 “暂停 ”使用的决定。为确保其注射液的安全性 , 本
课题组对鱼腥草注射液进行了针对 I型过敏反应的再评价工作。
本研究按照国家食品药品监督管理局有关安全性试验指导原则
进行了全身主动过敏和皮肤被动过敏试验 , 并在方法上有所改
进 , 为临床用药提供依据。
1　材料
1.1　药物 鱼腥草注射液(060432,浙江正大青春宝药业有限公
司),牛血清白蛋白(Genview), 0.9%NaCl注射液(070903, 浙江
平湖莎普爱思制药有限公司), 弗氏完全佐剂(Sigma), 弗氏不完
全佐剂(Sigma), 伊文思蓝(71016588, 国药集团化学试剂有限公
司 , 新鲜配制成 1%浓度备用)。
1.2　动物 健康 Hartley豚鼠 , 全白色毛 , 18只 , 体重为 250 ～
350g,雌雄各半 , 由江苏省无锡市惠山江南实验动物场供应 ,动物
质量合格证:SCXK(苏)2004 -0003。健康 SD大鼠 , 清洁级 , 30
只 , 体重为 150 ～ 200g, 雌雄各半 , 由浙江省实验动物中心供应 ,
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时珍国医国药 2009年第 20卷第 6期 LISHIZHENMEDICINEANDMATERIAMEDICARESEARCH2009VOL.20NO.6
动物质量合格证:SCXK(浙)2003-0001。
2　方法 [ 1 ～ 3]
2.1　全身主动过敏试验 动物饲养于全封闭清洁级动物房内 ,温
度 20 ～ 25℃,相对湿度 40% ～ 70%,光照 12h暗 、12h明 ,中央空
调集中通风 10 ～ 20次 /h。喂饲全价营养颗粒饲料 , 饮水为城市
自来水用净水器过滤后装入消毒过的饮水盆内让其自由饮用。
取健康无伤白色 Hartley豚鼠 18只 , 随机分成 3组 , 即鱼腥草注
射液组 , 牛血白蛋白生理盐生理盐不溶液阳性对照组和 0.9NaCl
注射液阴性对照组 , 每组 6只 , 雌雄兼用。按组别鼠分别腹腔注
射鱼腥草注射液 5 ml/kg, 0.9%NaCl注射液 5 ml/kg及牛血清白
蛋白生理盐水注射液 5 ml(60 mg)/kg, 隔日 1次 ,共 3次进行致
敏。末次致敏后第 12天由静脉快速注射 2倍剂量的以上相应受
试物进行激发 , 观察 30 min内是否出现过敏反应。致敏期间 ,每
天观察动物的症状 , 并于初次致敏及激发当日测定每个动物的体
重。静脉注射激发后即刻至 30min,按表 1观察记录动物有无相
应症状 , 并记录症状出现及消失时间。如有过敏反应 ,另取 2只
未致敏豚鼠 , 单次自静脉注射激发剂量的相应受试物 ,观察有无
引起类似过敏反应症状 ,以供参考。
表 1　动物的相应症状
编号 症状 编号 症状 编号 症状
0 正常 7 呼吸急促 14 步态不稳
1 不安宁 8 排尿 15 跳跃
2 竖毛 9 排粪 16 喘息
3 发抖 10 流泪 17 痉挛
4 搔鼻 11 呼吸困难 18 旋转
5 喷嚏 12 哮鸣音 19 潮式呼吸
6 咳嗽 13 紫癜 20 死亡
2.2　被动皮肤过敏试验
2.2.1　制备相应抗体 大鼠随机分成 3组:鱼腥草注射液组 、牛
血清白蛋白生理盐水溶液阳性对照组和 0.9%NaCl注射液阴性
对照组 , 每组 4只 ,雌雄各半。鱼腥草注射液 、0.9%NaCl注射液
和牛血清白蛋白生理盐水溶液按致敏剂量 10ml/kg分别与弗氏
佐剂以 1∶1的比例均匀混合成乳液 , 首次致敏采用弗氏完全佐
剂 , 以后采用弗氏不完全佐剂。每鼠分别隔日皮下多点注射 1
次 , 共 3次。末次致敏后第 12天 , 腹主动脉采血 , 分离血清 ,
-20℃保存 , 备用。
2.2.2　大鼠同种被动皮肤过敏反应 大鼠随机分成 3组 , 每组 6
只 , 雌雄各半 , 背中线两侧距脊柱约 1.5 cm处用电动剃毛刀剃
毛 , 面积 4cm×4cm,皮内注射抗血清 0.1ml/只。被动致敏 48 h
后 , 各组分别静脉注射与致敏剂量相同的激发抗原及 1%伊文思
蓝生理盐水溶液 1 ml/只进行激发。激发 30 min后处死各组动
物 , 剪取背部皮肤 ,测量皮内层的斑点大小 , 直径大于 5 mm者判
定为阳性(不规则斑点的直径为长径与短径之和的一半)。
3　结果
3.1　全身主动过敏试验 在致敏期间各试验组豚鼠均未出现任
何异常反应 , 其活动 、摄食 、饮水均正常;对豚鼠的体重增长也无
明显影响 , 各豚鼠体重均随试验时间的延长而增长 , 并首次致敏 、
末次致敏和激发时的平均体重与相应时间对照组豚鼠相似(P>
0.05,数据未列出)。给予激发剂量后 , 鱼腥草注射液组 、0.9%
NaCl注射液对照组各鼠均未出现明显异常反应 , 也未引起豚鼠
死亡 , 未出现 1 ～ 20级反应症状 , 判定过敏反应为阴性。 而阳性
对照组豚鼠出现搔鼻 、咳嗽 、呼吸急促 、流泪 、痉挛 、抽搐等明显的
过敏反应症状 , 反应出现率为 100%,但未出现动物死亡 , 过敏反
应症状在激发后 30min内基本消失 , 过敏反应为阳性。
3.2　被动皮肤过敏试验 鱼腥草注射液组 、0.9%NaCl注射液组
大鼠皮内层均未见蓝色反应斑点 ,而阳性对照组大鼠背部皮肤内
层均出现明显蓝斑(直径 9.1±1.2mm),蓝斑直径均大于 5mm,
判定为阳性反应。见图 1。 结果表明鱼腥草注射液(060432)无
同种被动皮肤过敏作用。
图 1　鱼腥草注射液组
图 2　 0.9%NaCl注射液组　　　图　 3牛血清白蛋白组
4　讨论
本试验采用的方法简便 、准确 、可靠 ,根据 I型过敏反应原理
进行了全身主动过敏和皮肤被动过敏试验 ,结果鱼腥草注射液组
未出现阳性反应。该试验中皮肤被动过敏试验难度较大 ,很有可
能连阳性组都不出现阳性反应(没有蓝斑), 在不断的条件摸索
中作者发现 ,大鼠较豚鼠血清易产生 IgE;还发现皮肤被动过敏
反应中抗血清浓度大小 、佐剂使用与否 、使用量多少等都会直接
影响阳性率及蓝斑直径大小 , 而牛血清白蛋以 10 μl/kg与弗氏
佐剂以 1∶1配合使用时 ,阳性组可 100%出现阳性结果 , 在不使
用佐剂或剂量不够时阳性率为 16% ～ 83%间不等。也有报道采
用氢氧化铝或白百破三联疫苗作为免疫佐剂使用 [ 4, 5] 。 鱼腥草
注射液临床出现不良反应以 I型过敏反应为主 ,且多为静脉注射
剂。目前 SFDA通过全面的安全性再评价研究已经恢复三九 、青
春宝等 8家企业的鱼腥草注射液(2ml)肌内注射使用 ,而鱼腥草
静脉注射剂一直未能 “解禁”。本试验结果显示豚鼠全身过敏反
应 、大鼠皮肤被动过敏反应均为阴性。为确保鱼腥草注射剂安全
性 , 还需在以后的工作中寻求更加合适的试验方法 、检测指标对
其进行全面评价研究 ,使得静脉制剂早日恢复生产 ,保障临床用
药的需求。
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