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影响细柱五加扦插生根因素的研究



全 文 :2016年4月
第32卷第2期
皖西学院学报
Journal of West Anhui University
Apr.,2016
Vol.32 No.


影响细柱五加扦插生根因素的研究
何晓丽1,刘修树1,王德群2
(1.合肥职业技术学院生物系,安徽 合肥238000;2.安徽中医药大学药学院,安徽 合肥230031)
摘 要:为了研究扦插基质、插穗长度、成熟度和外源激素对细柱五加(Eleuthercoccus gracilistylus W.W.Smith)扦插生根
的影响,采用正交试验设计不同基质、不同浓度外源激素对不同长度和成熟度的细柱五加插穗生根效果。结果表明,单因素随机
区组试验认为沙土混合的基质适合细柱五加扦插,L9(34)正交试验方差分析显示最优组合为A3B2C3D2,插穗成熟度和外源激素
浓度对细柱五加扦插生根率、生根数量均有显著性差异(p<0.05)。结论:细柱五加扦插较适宜条件是选择30cm长的一年生带
小段老枝的插穗于浓度为200ug/mlNAA中浸泡5h后扦插于河沙∶农家土(1∶1)混合物基质中,扦插效果佳。
关键词:扦插;细柱五加;外源激素;生根影响
中图分类号:R28    文献标识码:A    文章编号:1009-9735(2016)02-0093-04
 * 收稿日期:2016-01-05
基金项目:安徽省教育厅自然科学重点项目(KJ2015A403);安
徽省质量工程项目(2014SXZX047)。
作者简介:何晓丽,女,安徽芜湖人,讲师,硕士,研究方向:中药
资源与鉴定。
通信作者:王德群,男,安徽滁州人,教授,研究方向:药用植物
与中药资源。
  细柱五加(Eleuthercoccus gracilistylus W.W.
Smith)为五加科五加属植物,根据2015年版《中华人
民共和国药典》[1](P44)规定:“中药五加皮来源于五加
科植物细柱五加 Eleuthercoccus gracilistylus W.
W.Smith的干燥根皮。”五加皮首载于《神农本草
经》[2](P41),被列为上品,有祛风湿、强筋骨、补肝肾的
功效。细柱五加自然资源主要集中分布在江苏、安
徽、湖北、江西、湖南等长江中下游省区,多生于灌木
丛林下、林缘、山坡路旁和村落附近[3](P512-520)。目前
中药五加皮多来源于野生资源,近年来由于人们无节
制的大量采挖,对细柱五加的资源造成破坏,结合我
们多年来野外实地调查认为全国部分地区五加皮资
源破坏严重,而目前研究大多是针对刺五加进行繁殖
研究[4],对于中药五加皮唯一法定来源细柱五加未见
人工繁育报道,更未见系统的扦插繁殖体系构建研
究,为解决五加皮资源匮乏问题,有必要利用多种栽
培方式繁殖细柱五加,以期找到合适的人工栽培
方法。
细柱五加为灌木,野外调查显示野生状态下主要
以无性繁殖为主,实生苗非常少见。故人工繁育采用
了无性繁殖方式中较为经济简便的扦插繁殖,影响扦
插成活率的因素很多[5-6],本试验参考有关文献资
料[7-8],通过扦插基质、插穗长度、成熟度以及外源激
素浓度和处理时间等不同试验,考察影响细柱五加扦
插生根的外部和内部因素,分析形成结果的依据,为
细柱五加的人工繁育提供一定的理论基础。
1 试验材料和方法
1.1 试验材料
试验使用的细柱五加插穗,取自安徽安庆枞阳县
细柱五加野生居群,分别采集一年生、一年生带小段
老枝,二年生健壮无病虫害带有饱满休眠芽枝条一段
作为插穗,长度设置为10cm、20cm、30cm,保留上
面1~2枚叶,其他叶去除,留下的叶也适当剪去一部
分。扦插基质选用蛭石∶农家土(1∶1)混合物、珍珠
岩∶农家土(1∶1)混合物、河沙∶农家土(1∶1)混合
物、农家土四种。外源激素NAA(萘乙酸)(购自北京
中林佳诚科技有限公司)设3个梯度浓度,分别为50
ug/ml,100 ug/ml、200 ug/ml,另 配 置 500 ug/
mlNAA供预试验使用。
1.2 试验方法
1.2.1 预试验确定外源激素处理方法
外源激素作为促进生根处理的主体,可以补充插
穗含量不足且又是生根所必需的物质,以提高插穗的
生根能力[9]。目前市售的比较稳定易溶于水的为
NAA(萘乙酸),方法有高浓度瞬间浸沾法和低浓度
浸泡法,经过预试验分别使用200ug/ml浸泡5h和
500ug/ml速蘸5s处理五加插穗后扦插证实:低浓
度浸泡方法效果稳定,尤其对绿枝扦插更是如此,此
外,不同植物对外源激素的浓度要求也是不同的,故
在正交试验中设计了相关因素的比较。
1.2.2 单因素随机区组试验筛选扦插基质
分别在上述4种基质上进行扦插,按行、株距10
cm×8cm将插条以40°斜插入基质中1~2节,约为
插穗长度的三分之一,每个处理30支,重复3次,并
以农家土扦插作对照。培养期间可以定期每隔1~2
周采样观察插条生长情况并记录,培养结束后测定生
根率、生根数量、根长等项目并统计分析。
1.2.3 多因素水平-重复试验
根据预试验结果、试验操作可行性以及单因素试
验,确定了影响细柱五加生根的4个主要因素:A(插
穗长度)、B(插穗成熟度)、C(外源激素的浓度)、D(外
源激素浸泡时间),每个因素取3个水平,选用 L9
(34)进行9组试验,按照正交试验要求将不同方法处
理的插条分别扎成一捆,每捆20枝,处理3捆,每组
试验60个样本,分别将基部浸入不同浓度药液内,时
间分别设定为2h、5h、8h,用清水作对照,插穗处理
和扦插方法同前,重复3次,第3次重复可多插10
支,观测记录方法同前。
以上试验地点为安徽中医药大学药圃内,该区域
位于江淮之间,属亚热带湿润季风气候,土壤类型为
黄棕壤,年平均气温15.7℃,年降雨量900~1 100
mm,日照2 100h。
利用正交试验方差分析(ANOVA)评估扦插基
质、插穗和外源激素对上述指标的影响差异,组间进
行t检验,p<0.05具有显著性差异,上述试验数据
分析采用SPSS(V19.0)进行。
2 试验结果和分析
2.1 扦插基质对生根的影响
不同基质中扦插3周后有插穗产生不定根,4周
后观测发现(见表1):生根率、生根数量和长度均以
珍珠岩和农家土混合、沙和农家土混合为高,生根率
分别达到87.3%和86.0%,两者相差不大,与普通农
家土易积水,通气不良缺点相比,采用泥炭土、珍珠
岩、沙等基质可以保证扦插地通气又保湿,泥炭土与
农家土混合作基质效果不如沙土混合或珍珠岩与土
混合,生根率仅达到31.0%,原因可能是泥炭土保湿
性强,试验中可见泥炭土与土混合扦插的枝条下部易
烂根而不长根系,相较于珍珠岩和农家土混合作基质
而言,沙土混合的基质既简单又经济,且效果相差无
几,适宜生产中使用。
表1 不同基质扦插生根情况
指标 泥炭土∶农家土(1∶1) 珍珠岩∶农家土(1∶1) 沙∶农家土(1∶1) 农家土(CK)
生根率 31.0% 87.3% 86.0% 52.5%
生根数量(条/株) 2.5  7.3  7.0  4.1
生根长度(cm/株) 0.4  2.9  2.7  1.0
2.2 插穗对生根的影响
同样4周后观测(见表4)B因素(插穗的成熟
度)对试验结果有极显著性影响(p<0.01),一年生
枝条生根能力强,但易腐烂出现枯萎,影响了生根率,
老枝的生根能力较弱,产生的不定根数量少,所以扦
插时基部带一段老枝的一年生插穗效果佳。而A因
素(插穗长度)无明显影响(p>0.05),综合方差分析
最优组合显示A3即插穗长度30cm扦插效果佳,可
能是插穗长度过短(10cm或20cm),营养容易供应
不良。这与景向欣[2]研究刺五加扦插条件是一致的,
随着插穗长度越长,芽数量越多,生根率越高。
2.3 外源激素对生根的影响
C因素(外源激素的浓度)对试验结果有显著性
影响(p<0.05),有关外源激素对植物根系发育、种
子萌发、植株生长等方面影响的研究日趋增多,普遍
认为外源激素可以很好的促进植物生长[10-11],前期
预试验显示外源激素处理后与未处理插穗扦插相比,
前者生根优势明显高于后者,本次试验筛选最佳浓度
为200ug/ml,浓度过低则达不到预期的生根效果。
D因素(浸泡时间)显著性并不明显(p>0.05),浸泡
时间越长,插穗生根率和生根数量增幅较小。
由表2极差R 值大小显示,不同因素对细柱五
加扦插生根率和生根数量影响程度为B>C>A>D,
由表4可见因素B具有极显著影响,C因素具有显著
性影响,A和D因素的影响无显著性意义,由表3和
表4可知,4个因素的最优组合为A3B2C3D2,即用30
cm长的一年生带小段老枝的插穗于浓度为200ug/
mlNAA中浸泡5h,能起到很好的扦插效果。
49 皖西学院学报 第32卷
表2 因素水平表
水平 插穗长度(cm)(A) 插穗半径(cm)(B) 外源激素(ug/ml)(C) 浸泡时间(h)(D)
1  10 b1  50  2
2  20 b2  100  5
3  30 b3  200  8
  注:b1指母株上二年生枝条(粗度d为8~12mm),b2指一年生枝条,基部带有0.5cm左右的老枝
(粗度d为4~8mm),b3指一年生枝条(粗度d为2~5mm)。
表3 L9(34)正交结果分析
处理号
列号
1  2  3  4
生根率
(%)
生根数量
(条/株)
综合评分
(分)
1  1  1  1  1  11.0  2.1  8.76
2  1  2  2  2  85.0  8.4  65.85
3  1  3  3  3  55.1  6.3  42.9
4  2  1  2  3  25.5  3.0  19.88
5  2  2  3  1  87.8  8.4  67.95
6  2  3  1  2  25.7  3.7  20.2
7  3  1  3  2  58.0  6.8  45.35
8  3  2  1  3  80.2  8.0  62.15
9  3  3  2  1  19.3  2.6  44.15
Ⅰ 50.367  31.500  39.967  39.367
Ⅱ 46.333  84.333  43.267  56.233
Ⅲ 52.500  33.367  66.967  53.600
R  6.167  52.833  28.000  16.866
Ⅰ 5.600  3.967  4.600  6.300
Ⅱ 5.033  8.267  4.667  6.300
Ⅲ 5.800  4.200  7.167  5.767
R  0.767  4.300  2.567  1.933
Ⅰ 39.175  24.667  30.375  40.292
Ⅱ 36.008  65.317  43.292  43.800
Ⅲ 50.550  35.750  52.067  41.642
R  14.521  40.650  21.692  3.508
  注:权重系数<生根率/生根数量>=0.75/0.25
表4 方差分析
方差来源 偏差平方和 自由度 方差 F值 显著性
长度 350.878  2  18.675 19.00
枝龄 2649.451  2  141.011 19.00 **
浓度 714.369  2  38.021 19.00 *
时间 18.789  2  1.000  19.00
误差 18.79  2
  注:**表示显著性水平<0.01;*表示显著性水平<
0.05。
2.4 重复性试验
按照上述的最佳扦插条件平行操作,重复处理3
批插穗,通过生根率、生根数量进行综合评分,结果3
次试验生根率平均值为86.7%,生根数量为8.8(条/
株),综合评分为67.23,高于其他正交试验值,证实
该方法稳定可行,可作为最佳扦插条件。
3 结论与讨论
经多次试验证实,细柱五加扦插较适宜条件是:
在秋季母株生长近结束时(9月~11月),选择30cm
长的一年生带小段老枝的插穗于浓度为200ug/
mlNAA中浸泡5h后扦插于河沙∶农家土(1∶1)混
合物基质中,约4周左右可生根,扦插效果佳。
通过试验研究认为细柱五加扦插对湿度的要求
严格,含水量是影响其成活率的关键因子,前人研究
的部分植物也有此共性[12],这与细柱五加野生状态
下喜长在土壤肥沃,排水良好的林下、林缘或山坡上
的生物学特性也是吻合的,故基质中不可含水过量,
59第2期 何晓丽,等:影响细柱五加扦插生根因素的研究
扦插过程中除当天灌水和插穗后1~2周要注意灌水
外,后期可隔几天灌水一次,不可过勤,因为试验中发
现未成活枝多因含水量过高导致地下部分枝条皮层
脱落而烂枝,另外,也不宜在易蓄水的试验地或沟边
试验地进行扦插繁殖。
细柱五加野生资源不断枯竭,作为中药五加皮法
定的唯一来源种质,其人工繁育工作迫在眉睫,可在
自然分布区利用繁育的插穗进行人工栽培,增加药材
资源量,并结合科学的采收和加工,实现五加皮资源
的可持续利用。
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Study on the Influencing Factors of Rooting
for Eleuthercoccus Gracilistylus
HE Xiaoli 1,LIU Xiushu1,WANG Dequn2
(1.Hefei Vocational and Technical College,Hefei 230038,China;
2.Department of Pharmacy,Anhui University of Chinese Medicine,Hefei 230031,China)
Abstract:Objective:The research aimed to study the effect of rooting agent,the length of cuttings,maturity and cutting media on
cutting rooting of Eleuthercoccus gracilistylus.Method:Using orthogonal experiment design different substrates,study of the
commonly used different concentrations of cutting media of different length and maturity of Eleuthercoccus gracilistylus.Results:
The comprehensive observation that different cuttings rooting rate matrix for river sand:farm soil mixture(1∶1)>perlite:farm
soil mixture(1∶1)> vermiculite:farm soil mixture(1∶1).Result:Single factor randomized block experiment think sand
mixing matrix is suitable for Eleuthercoccus gracilistylus.L9(34)orthogonal test analysis of variance shows that the optimal
combination for A3B2C3D2,the maturity of cuttings and exogenous hormone concentration on Eleuthercoccusgracilistylus.
Rooting rate and rooting number had significant difference(p<0.05).Conclusion:The more suitable rooting conditions of
Eleuthercoccus gracilistylus.is 30cm long annual with smal section old branches cuttings in the concentration of 200ug/ml NAA
soak 5hafter cutting the river sand:farm soil mixture(1∶1)matrix,the cutting effect better.
Key words:cutting;Eleuthercoccus gracilistylus;cutting media;rooting effect
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