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菌物学报
jwxt@im.ac.cn 15 November 2015, 34(6): 1068‐1077
Http://journals.im.ac.cn Mycosystema ISSN1672‐6472 CN11‐5180/Q © 2015 IMCAS, all rights reserved.
研究论文 Research paper DOI: 10.13346/j.mycosystema.140185
基金项目：贵州省科技厅“贵州省农业资源高效利用技术创新平台建设”黔科条中补地[2012]4003号
Supported by Science and Technology Department of Guizhou Province “The agricultural resources utilization technology
innovation platform construction in Guizhou” Guizhou Families of Article to [2012] no. 4003.
*Corresponding author. E‐mail: gzliuzuoyi@163.com
Received: 2014‐08‐07, accepted: 2014‐12‐25
猪苓与蜜环菌高亲和性组合的筛选
柳玲玲 1, 2 刘永翔 2, 4 毛堂芬 4 朱国胜 2, 3 刘作易 2*
1贵州省土壤肥料研究所 贵州省农业资源与环境研究所 贵州省农业资源与环境工程技术研究中心 农业部贵州耕地保育
与农业环境科学观测实验站 贵州 贵阳 550006
2贵州省农业生物技术重点实验室 贵州省农业科学院 贵州 贵阳 550006
3贵州省农作物品种资源研究所 贵州 贵阳 550006
4贵州省生物技术研究所 贵州 贵阳 550006
摘 要：猪苓与蜜环菌共生亲和性是猪苓人工栽培成功的关键因素。为获得猪苓与蜜环菌的高亲和性组合，本文采用了 5
株猪苓菌株与 4 株蜜环菌菌株进行筛选。通过将猪苓菌株与蜜环菌菌株共培养，比较不同组合的生长速度、拮抗线形成
情况，以及两种菌丝生长过程中形态学变化等指标，结果发现组合 GU‐06&AM‐08 生长速度最快，为 3.36mm/d。GU‐06
和 GU‐07‐2菌株与每株蜜环菌共培养均可产生拮抗线，共培养 28d后，产生拮抗的猪苓菌丝分枝较多，可以看到菌丝束。
被蜜环菌菌索侵染的猪苓菌核，切面可以明显观察到侵入猪苓菌核中的蜜环菌菌索，侵染到猪苓菌核中的蜜环菌菌索分
枝较多，中空，表皮细胞细长。发生侵染现象的组合有 7组：GU‐04与 AM‐06；GU‐06与 AM‐06，AM‐08，AM‐13；GU‐07‐2
与 AM‐06，AM‐08；GU‐15与 AM‐06，其中以 GU‐06与 AM‐06，AM‐13两组组合侵染最严重，其余组合没有发现侵染现象。
综合以上共生筛选指标获得 GU‐06&AM‐08、GU‐06&AM‐06、GU‐07‐2&AM‐08以及 GU‐06&AM‐13 4组高亲和性的组合。
关键词：猪苓，蜜环菌，共生培养，拮抗作用
Screening Polyporus umbellatus and Armillaria mellea combination with
high symbiotic compatibility
LIU Ling‐Ling1, 2 LIU Yong‐Xiang2, 4 MAO Tang‐Fen4 ZHU Guo‐Sheng2, 3 LIU Zuo‐Yi2*
1Guizhou Institute for Soil and Fertilizer Sciences/Guizhou Institute for Agricultural Resources and Environment/Guizhou Province
Engineering Research Center for Agricultural Resources and Environment/Field Monitoring Experimental Station for Cultivated
Land Preservation and Agro‐environment in Guizhou, Ministry of Agriculture of China, Guiyang, Guizhou 550006, China
2Guizhou Key Laboratory of Agricultural Biotechnology, Guizhou Academy of Agricultural Sciences, Guiyang, Guizhou 550006, China
3Guizhou Institute of Crop Genetic Resources, Guiyang, Guizhou 550006, China
4Guizhou Institute of Biotechnology, Guizhou Academy of Agricultural Sciences, Guiyang, Guizhou 550006, China
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Abstract: Symbiotic compatibility of Polyporus umbellatus and Armillaria mellea is the key factor for the successfully artificial
cultivation of Polyporus umbellatus sclerotia. In order to obtain the combination with high compatibility, five isolates of
Polyporus umbellatus and four isolates of Armillaria mellea were screened. The growth rate, antagonism line, and mycelium
morphology of the combinations were compared separately after co‐cultivation on a plate or in a culture bottle. The result
showed that the fastest growth of mycelia reaching 3.36mm/d was the combination GU‐06&AM‐08. The antagonistic line could
be observed in each co‐cultivation of P. umbellatus isolate GU‐06 or GU‐07‐2 and A. mellea isolates. After co‐culture for 28 days,
more branches and hyphal strands emerged in mycelia of P. umbellatus. Rhizomorph of the A. mellea was found obviously in the
sclerotia of P. umbellatus, with more branches, hollow, and slender epidermal cells. Seven combinations with infectivity were
GU‐04&AM‐06, GU‐06&AM‐06, GU‐06&AM‐08, GU‐06&AM‐13, GU‐07‐2&AM‐06, GU‐07‐2&AM‐08 and GU‐15&AM‐06. The
most serious infection happened in the GU‐06&AM‐06 and GU‐06&AM‐13, and no infection was found in the other
combinations. In conclusion, the four group of highly compatible symbiotic combinations, GU‐06&AM‐08, GU‐06&AM‐06,
GU‐07‐2&AM‐08, and GU‐06& AM‐13, could be regarded as most suitable for artificial production of P. umbellatus sclerotia.
Key words: Polyporus umbellatus, Armillaria mellea, symbiotic mixed culture, antagonism
猪苓Polyporus umbellatus是重要的食药用真
菌（戴玉成和杨祝良 2008；戴玉成等 2010）通
常生长栎树属Quercus根部附近，腐殖土中带有蜜
环菌Armillaria meltlea菌索。蜜环菌寄生在活立木
或腐生在倒木和根部，延生的菌索与猪苓菌核接
触，侵入猪苓菌核，为猪苓的生长提供营养（秦国
夫等 2000，2004；赵俊等 2005；Ohsawa et al.
1992）。猪苓和蜜环菌以及蜜环菌与树木三者的复
杂关系，国内学者称之为“真菌营养型”（徐锦堂
和郭顺星 1992；王秋颖等 2000）。国内学者们
经过多年的研究（郭顺星和徐锦堂 1992a；Guo et
al. 2002），通过对蜜环菌侵入猪苓菌核后不同时期
的材料进行解剖观察，并从蜜环菌侵染菌核后二者
的相互作用及其菌核的营养来源等方面分析，把猪
苓与蜜环菌的关系确定为一种共生关系。研究发
现，当猪苓受到蜜环菌侵染的刺激时，菌丝和菌核
活性氧由此而迸发，猪苓菌丝酶活性也会因此发生
变化，从理论上阐明了猪苓和蜜环菌的共生亲和性
关系（夏洪燕和郭顺星 2003），并实现了猪苓的
半野生栽培。猪苓人工栽培实践证明，栽培猪苓菌
核不加带有生长蜜环菌菌索的菌棒，猪苓就不能生
长繁殖。正是由于这种共生关系的存在，使得猪苓
在人工栽培方面一直没有大的突破，猪苓与蜜环菌
的亲和性的研究缺乏系统的筛选指标，种质资源以
及猪苓共生蜜环菌的选择成为猪苓产业发展的瓶
颈。为此，本试验将筛选出的猪苓和蜜环菌进行了
共培养，观察两者共培养时的生长状况，建立一套
两者共生的高亲和性指标。针对猪苓和蜜环菌的共
生特性，筛选出猪苓与蜜环菌高亲和性组合，从而
促进贵州省猪苓GAP基地的建设，提高我省中药现
代化水平，为贵州省猪苓产业发展提供理论参考。
1 材料与方法
1.1 供试菌株
供试的猪苓5株和蜜环菌4株，分别为本实验室
通过建立的猪苓和蜜环菌菌株筛选体系筛选出的
高产优质菌株（表1）。
1.2 培养基配制
1.2.1 猪苓培养基：母种培养基：改良PDA培养基：
配方为马铃薯200g/L洗净、去皮、切成碎块，用水
煮沸30min后用8层纱布过滤，加入蒸馏水将滤液
补足1L，葡萄糖20g/L，KH2PO4 3g/L，MgSO4∙7H2O
1.5g/L，琼脂15g/L，pH自然。原种培养基：可溶
性淀粉20g/L，豆饼粉40g/L，玉米粉30g/L，硫胺素
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表 1 供试菌株
Table 1 Information of the tested strains
猪苓菌株编号
Polyporus umbellatus strain
来源
Origin
蜜环菌菌株编号
Armillaria mellea strain
来源
Origin
GU‐02 黑龙江凤凰山
Fenghuang Mountain, Heilongjiang
AM‐06 陕西西乡食用菌研究所
Shaanxi Xixiang Institute of Edible
Fungus Research
GU‐04 秦巴山
Qinling and Daba Mountains
AM‐08 陕南山区
Mountainous areas in southern
Shaanxi
GU‐06 吉林长白山
Changbai Mountains, Jilin
AM‐12 河南省农业科学院生物所
Institute of Biology, Henan
Academy of Agricultural Sciences
GU‐07‐2 贵州省农业生物技术重点实验室
Guizhou Key Laboratory of
Agricultural Biotechnology
AM‐13 贵州省农业生物技术重点实验室
Guizhou Key Laboratory of
Agricultural Biotechnology
GU‐15 东北食用菌研究所
Northeast Institute of Edible
Fungus Research
0.5g/L，pH自然。豆饼粉和玉米粉分别用水煮沸
20min后4层纱布过滤，合并滤液，加入蒸馏水将
滤液补足1L。栽培种培养基：阔叶树木屑50%，麦
麸20%，玉米粉20%，豆饼粉10%；加水混匀，含
水量65%（握料法检测湿度，手握紧配好的培养基，
有水滴即可）。
1.2.2 蜜环菌培养基：母种培养基：GPC培养基：
葡萄糖20g/L，蛋白胨6g/L，玉米粉30g/L，琼脂
15g/L，pH自然。玉米粉用水煮沸20min后4层纱布
过滤，加入蒸馏水将滤液补足1L（黄燕芬等 2004）。
原种培养基：酵母膏10g/L，葡萄糖20g/L，玉米粉
30g/L，pH自然。玉米粉用水煮沸20min后4层纱布
过滤，加入蒸馏水将滤液补足1L。栽培种培养基：
阔叶树木屑50%，玉米芯粉碎（40目）25%，麦麸
15%，玉米粉10%，白糖1%，石膏1%，石灰0.5%，
KH2PO4 0.1%，MgSO4∙7H2O 0.05%；加水混匀，含
水量65%。
上述母种和原种培养基都采用 0.1MPa，
121℃，20min灭菌。栽培种培养基采用0.1MPa，
121℃，1h，间隔24h灭菌两次。
1.3 共培养体系的建立
1.3.1 平皿共培养：将猪苓和蜜环菌菌种在PDA培
养基中活化，作为母种。采用9cm直径培养皿，每
皿加20mL 灭菌PDA培养基。每皿分别接入猪苓菌
种和蜜环菌菌种各一块，相距3.5cm；25℃黑暗条
件下恒温培养（程显好和郭顺星 2006；郭顺星
等 2002）。
1.3.2 广口瓶中共培养：将筛选出的猪苓菌株单独
培养时结出的菌核与培养好的蜜环菌菌材，共同移
栽到装有新栽培种培养基的广口瓶中，每个组合设
10个重复，共 20个组合。培养 3个月时观察两者
侵染情况（郭顺星等 2005）。
1.4 猪苓和蜜环菌共培养形态及显微观察
将实验室筛选出的5株优质猪苓菌株和4株优
良蜜环菌菌株两两共培养，共20个组合，每个组合
设置3个重复；猪苓单独培养作为对照，每个菌株
柳玲玲 等 /猪苓与蜜环菌高亲和性组合的筛选
菌物学报
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设2个重复。其中2个共培养的重复在培养基的中央
位置平行猪苓和蜜环菌的生长方向45°斜插一片无
菌盖玻片，分别在共培养14d和28d后观察共培养
情况；并显微镜下观察两者共生的菌丝形态。平皿
共培养24h后划线，分别测量猪苓菌丝生长4d、7d、
14d菌落直径，并计算猪苓和蜜环菌共培养时的平
均生长速度，利用DPS软件对数据进行LSD法多重
比较，差异显著性分析。利用体视镜对共培养3个
月的猪苓菌核进行切面观察，观察蜜环菌菌索侵入
到菌核中的情况。
2 结果与分析
2.1 蜜环菌对猪苓生长速度的影响
跟踪观察猪苓和蜜环菌共培养的生长情况，计算
两者共培养时的平均生长速度，利用 DPS 软件对数
据进行 LSD 法多重比较，差异显著性分析(表 2)。
表 2 与不同蜜环菌共培养时各个猪苓菌株生长速度
Table 2 The growth rate of Polyporus umbellatus co‐cultured with Armillaria mellea
组合
Combination
平均生长速度
The average growth rate (mm/d)
5%显著水平
5% significant level
1%显著水平
1% significant level
GU‐06&AM‐08 3.36 a A
GU‐06&AM‐06 3.28 ab AB
GU‐07‐2&AM‐08 3.28 ab AB
GU‐06&AM‐13 3.27 b ABC
GU‐15&AM‐12 3.18 c BCD
GU‐15&AM‐06 3.17 c CDE
GU‐07‐2&AM‐06 3.16 c CDE
GU‐15&AM‐08 3.16 c CDE
GU‐02&AM‐13 3.14 cd DEF
GU‐02&AM‐08 3.12 cde DEF
GU‐07‐2&AM‐13 3.10 cde DEF
GU‐06&AM‐12 3.06 def EFG
GU‐02&AM‐06 3.04 ef FG
GU‐02&AM‐12 2.98 f GH
GU‐04&AM‐13 2.98 f GH
GU‐15&AM‐13 2.98 f GH
GU‐04&AM‐06 2.88 g HI
GU‐07‐2&AM‐12 2.88 g HI
GU‐04&AM‐08 2.86 g I
GU‐04&AM‐12 2.56 h J
注：凡有一个相同字母表示两者之间差异性不显著，不同的字母表示两者之间差异性显著；小写字母表示 α=0.05显著水
平上的差异显著性，大写字母表示 α=0.01显著水平上的差异显著性.
Note: In the same column the same letters indicate the difference is not marked and the different letters indicate the difference
is marked. The capital letters indicate significant difference for α=0.01, and the lowercase letters indicate significant difference
for α=0.05.
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GU‐06&AM‐08 共培养时生长速度最快，为
3.36mm/d；GU‐06 号菌株单独培养时生长速度为
3.9mm/d；其次为组合 GU‐06&AM‐06 和组合
GU‐07‐2&AM‐08 生长速度为 3.28mm/d，组合
GU‐06&AM‐13生长速度位居第四，为 3.27mm/d。
GU‐06&AM‐13 与组合 GU‐06&AM‐08 在 α=0.05 显
著 水 平 上 表 现 显 著 的 差 异 性 ， 从 组 合
GU‐15&AM‐12 开 始 和 组 合 GU‐06&AM‐08 、
GU‐06&AM‐06、GU‐07‐2&AM‐08、GU‐06&AM‐13
在 α=0.05 显著水平上表现显著的差异性。其中组
合 GU‐15&AM‐12 和组合 GU‐06&AM‐08 表现出极
显著的差异。从生长速度来看，猪苓和蜜环菌共培
养时，蜜环菌的生长对猪苓菌丝的生长有一定的抑
制作用。但是，每个组合表现出的抑制作用不一，
其 中 组 合 GU‐06&AM‐08 、 GU‐06&AM‐06 、
GU‐07‐2&AM‐08、GU‐06&AM‐13 4个组合中蜜环菌
对猪苓菌丝的抑制作用较小。
组合 GU‐15&AM‐06 生长速度为 3.17mm/d 与
组 合 GU‐06&AM‐08 、 GU‐06&AM‐06 、
GU‐07‐2&AM‐08在 α=0.01显著水平上均表现出极
显著的差异性。从生长速度为 3.14mm/d 的组合
GU‐02&AM‐13 开始与生长最快的前 4 个组合在
α=0.01 上开始均表现出极显著的差异性。而生长
速度低于 3.10mm/d 的 11 个组合，说明蜜环菌的
生长明显地抑制了猪苓菌株的生长。
2.2 猪苓和蜜环菌共培养的形态学
猪苓和蜜环菌共培养 14d、28d观察两者菌丝
的生长情况，观察结果如下：猪苓和蜜环菌共培养
初期，两者生长正常。蜜环菌菌索不断分枝，在培
养基中延伸，猪苓菌落呈圆形。在两者共培养 8d
左右，两者的菌丝开始接触（图 1A）；当两者培养
14d时，两者接触处出现了拮抗线，其中 GU‐06和
GU‐07‐2两株菌与每个蜜环菌共培养时都可以观察
到拮抗线（图 1B，C）。蜜环菌菌索侵入到猪苓菌
落中，两者的生长受到相互抑制，侵入到猪苓菌落
中的蜜环菌菌索分枝较多（图 1D），共培养 28d
后，可以观察到猪苓和蜜环菌之间的拮抗线开始隆
起（图 1E），其中组合 GU‐06&AM‐13 开始形成菌
核（图 1F）。猪苓和蜜环菌共培养 28d后，出现菌
丝束的组合有 GU‐06&AM‐06、GU‐06&AM‐08、
G U ‐ 0 6 & AM ‐ 1 3 以及 G U ‐ 0 7 ‐ 2 & AM ‐ 0 6、
图 1 猪苓和蜜环菌共培养形态学特征 A：Gu‐06&AM‐08
共培养 8d后，两者菌丝开始接触；B：Gu‐06&AM‐13共培
养 14d 菌落正面，可见明显的拮抗线（箭头）；C：
Gu‐06&AM‐08共培养 14d后菌落正面，可见明显的拮抗线
和菌丝束（箭头）；D：Gu‐06&AM‐13共培养 14d菌落反面，
蜜环菌菌索与猪苓菌丝接触的地方分枝增加（箭头）；E：
Gu‐06&AM‐13共培养 28d菌落正面，蜜环菌菌索开始褐化，
两者间的拮抗线隆起（箭头）；F：Gu‐06&AM‐13共培养 28d
菌落正面，猪苓菌丝开始形成小的菌核（箭头）. 图中 P
表示猪苓，A′表示蜜环菌.
Fig. 1 Morphological characteristics of Polyporus umbellatus
and Armillaria mellea in co‐culture. A: Hyphal contact
between Gu‐06 & AM‐08 after co‐culture for 8 days; B: An
obvious antagonism line formed (arrow) after Gu‐06&AM‐13
co‐culture for 14 days; C: The hyphal strands and obvious
antagonism line (arrow) of the Gu‐06&AM‐08 after
co‐culture for 14 days; D: Many branches of the A. mellea
rhizomorph in the Gu‐06&AM‐08 after co‐culture for 14 days
(arrow); E: Browning of the A. mellea rhizomorph and
eminence of the antagonism line in Gu‐06&AM‐13 co‐culture
for 28 days (arrow); F: P. umbellatus sclerotia (arrow) at the
obverse side of Gu‐06&AM‐13 co‐culture for 28 days. P.
umbellatus is represented by P, A. mellea is represented by A′.
柳玲玲 等 /猪苓与蜜环菌高亲和性组合的筛选
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GU‐07‐2&AM‐08、GU‐07‐2&AM‐12。有研究表明，
猪苓菌落表面的菌丝束是菌丝分化产生的，菌丝束
的出现是菌核形成前期的一种反应，而猪苓在单
独培养时则很少有菌丝束的分化（邢晓科和郭顺
星 2003b）。
显微观察共培养的猪苓菌丝和蜜环菌菌索，可
以看出与蜜环菌共培养的猪苓菌丝分枝较多。纯培
养的猪苓菌丝，呈线性生长，菌丝分枝相对较少（图
2A，C）。组合 GU‐15&AM‐08共培养时也可以观察
到拮抗线，但是两者共培养时，菌索分枝较少，并
且较细，说明蜜环菌生长受到很大的抑制作用。侵
染到猪苓菌落中的蜜环菌菌索变为中空，表皮细胞
细长且排列紧密，纯培养的蜜环菌菌索表皮细胞呈
圆形（图 2B，D）这与邢晓科和郭顺星（2003a）
的研究结果一致。
图 2 猪苓和蜜环菌共培养细胞学特征 A：与蜜环菌共培
养的猪苓菌丝；B：侵染到猪苓菌核中的蜜环菌菌索；C：
纯培养的猪苓菌丝；D：纯培养的蜜环菌菌索.
Fig. 2 Cytologic features of Polyporus umbellatus and
Armillaria mellea in co‐culture. A: The P. umbellatus hyphae
co‐cultured with A. mellea; B: The A. mellea rhizomorphs
invading into the colony of P. umbellatus; C: The P.
umbellatus hyphae in pure culture; D: The A. mellea
rhizomorphs in the pure culture.
以拮抗线的形成、猪苓菌丝的生长情况以及蜜
环菌菌索生长情况作为指标，量化赋值后对 20个
组合进行综合评价，结果显示（表 3）：组合 GU‐06
和 AM‐06，AM‐08，AM‐13以及 GU‐07‐2和 AM‐06，
AM‐08综合得分最高。这 5个组合的猪苓和蜜环菌
共培养时有明显的拮抗线，在培养 28d 时，拮抗
线隆起并变为棕色，与蜜环菌共培养的猪苓菌丝纠
结呈束状生长，说明两者有较好的共生亲和性。
2.3 猪苓和蜜环菌共生亲和性筛选
将培养好的猪苓菌核（图 3A）和蜜环菌菌材
转接到装有猪苓栽培种培养基的广口瓶中共培养，
培养 90d 后，可以观察到培养瓶中有些组合猪苓
菌核已形成（图 3B），并且蜜环菌菌索已侵入到猪
苓菌核中（图 3C）。
图 3 猪苓菌核与蜜环菌共培养特征 A：单独培养的猪苓
菌种形成的菌核（箭头）；B：未被蜜环菌侵染的猪苓菌核
（箭头）；C：被蜜环菌侵染的猪苓菌核（箭头）；D：侵染
到菌核内的蜜环菌菌索（箭头），标尺=1mm.
Fig. 3 Characteristics of Polyporus umbellatus and Armillaria
mellea co‐culture. A: P. umbellatus sclerotia under pure
culture (arrow); B: P. umbellatus sclerotia uninfected by A.
mellea (arrow); C: P. umbellatus sclerotia infected by A.
mellea (arrow); D: A. mellea rhizomorph infection within P.
umbellatus sclerotia (arrow), bar=1mm.
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体视镜下观察被蜜环菌菌索侵染的猪苓菌核
的切面，可以明显看到侵染到猪苓菌核内的菌索
（图 3D）。有研究表明，蜜环菌侵染猪苓菌核初
期，菌核吸收营养主要由菌核隔离腔壁中的细长薄
壁菌丝伸入邻近的蜜环菌皮层细胞中获得，说明侵
染到猪苓菌核中的蜜环菌菌索开始给猪苓菌核的
生长提供营养。发生侵染现象的组合有 GU‐04 与
AM‐06；GU‐06与 AM‐06，AM‐08，AM‐13；GU‐07‐2
与 AM‐06，AM‐08；GU‐15与 AM‐06 7个组合，其
中以 GU‐06与 AM‐06，AM‐13 2个组合侵染最严重。
其余组合没有发现侵染现象。
综合上述试验结果表明，组合 GU‐06 和
AM‐08、组合 GU‐06&AM‐06、组合 GU‐07‐2&
AM‐08 以及组合 GU‐06&AM‐13 为猪苓和蜜环菌
的最优组合。不管是共培养时两者的形态学特
征，还是猪苓和蜜环菌的生长速度都比较占优
势。因此，这 4个组合为最终筛选的优质高亲和
性组合。
表 3 猪苓和蜜环菌共培养生长情况
Table 3 The growing conditions of Polyporus umbellatus and Armillaria mellea co‐culture
组合
Combination
拮抗线
The brown antagonistic
line
猪苓菌丝生长情况
Mycelial growth of P.
umbellatus
蜜环菌菌索生长情况
Rhizomorph growth of A.
mellea
综合得分
Composite score
GU‐02&AM‐06 0 1 0 1
GU‐02&AM‐08 0 0 0 0
GU‐02&AM‐12 0 0 0 0
GU‐02&AM‐13 0 0 0 0
GU‐04&AM‐06 1 2 1 4
GU‐04&AM‐08 0 0 1 1
GU‐04&AM‐12 0 2 1 3
GU‐04&AM‐13 0 1 1 2
GU‐06&AM‐06 2 2 2 6
GU‐06&AM‐08 2 2 2 6
GU‐06&AM‐12 1 1 2 4
GU‐06&AM‐13 2 2 2 6
GU‐07‐2&AM‐06 2 2 2 6
GU‐07‐2&AM‐08 2 2 2 6
GU‐07‐2&AM‐12 2 2 1 5
GU‐07‐2&AM‐13 1 1 1 3
GU‐15&AM‐06 0 1 0 1
GU‐15&AM‐08 1 0 1 2
GU‐15&AM‐12 0 2 1 3
GU‐15&AM‐13 0 2 0 2
注：拮抗线：2：明显；1：不明显；0：无. 猪苓菌丝生长：2：束状生长并扭结；1：正常生长；0：受抑制. 蜜环菌菌索
生长：2：菌索中空；1：正常生长；0：菌索实心.
Note: The brown antagonistic line: 2: Clear; 1: Obvious; 0: No. Mycelial growth: 2: Wispy and kinky; 1: Normal; 0: Suppressed.
Armillaria rhizomorph growth: 2: Hollow; 1: Normal; 0: Solid.
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菌物学报
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3 讨论
猪苓菌核是菌丝间相互黏连（称菌丝融合）聚
集而形成的一种紧密球形结构。菌核表皮由数层紧
密排列的菌丝组成，细胞壁加厚，整个细胞趋于木
质化，这为猪苓菌核被蜜环菌菌索的侵染设置了一
道屏障。研究发现，蜜环菌通过猪苓菌核表皮侵染
菌核时，菌核表皮下层的菌丝具有特异的拮抗性反
应（郭顺星和徐锦堂 1993a）。蜜环菌菌索侵入后，
猪苓菌核菌丝在蜜环菌侵染的外围形成大小隔离
腔和深色的环带，隔离腔壁以及环带主要由一些厚
壁或木质化菌丝组成，与观察到的菌核的表皮结构
一致（郭顺星和徐锦堂 1993b）。蜜环菌侵染后
的菌核中常可看到大量结晶，并且结晶存在的部位
以蜜环菌索侵染的菌核部位和菌核防御结构的隔
离腔周围较多，随着年龄的增大，厚壁细胞不断增
加，可能是抵抗不良环境或拮抗蜜环菌侵染的表现
（郭顺星和徐锦堂 1992b）。
同样在蜜环菌菌索侵入猪苓菌核中时，猪苓菌
核髓部菌丝也相应的反侵染蜜环菌菌索（邢晓科和
郭顺星 2003a）。在猪苓和蜜环菌的共培养的过程
中我们可以观察猪苓对蜜环菌菌索的影响（王秋颖
和徐锦堂 1993）。受到猪苓菌丝的侵袭后，蜜环
菌菌索皮层细胞同时产生相应的防御机制，在未受
到或受到少量猪苓菌丝侵袭时，蜜环菌菌索皮层细
胞呈圆形，排列规则；而受到猪苓菌丝强烈侵袭时，
蜜环菌菌索皮层细胞的形态及排列方式均发生变
化，此时蜜环菌菌索的皮层细胞变为细长形且呈纵
向紧密排列，这是蜜环菌的防御性反应（邢晓科和
郭顺星 2003a）。猪苓和蜜环菌的这种共生关系的
起始是两者表现出一种相互的拮抗现象，彼此形成
一定的防御机制，当这种防御机制被突破时，两
者真正的共生关系便建立起来了（夏洪燕和郭顺
星 2003）。
猪苓和蜜环菌菌株共培养时，发现当双方菌丝
接触后，在接触区形成致密的拮抗线，蜜环菌菌索
生长方向发生改变，或从培养基底部穿过后在适当
的地方突破培养基表层。共培养28d时观察猪苓菌
丝互相扭结，呈束状生长。菌核形成于猪苓菌丝互
相扭结处，这与Townsend和Willetts报道的S. rolfsii
菌核形成过程中菌丝行为相似（Townsend 1957；
Willetts & Bullock 1992）。另外，有报道表明菌核
形成于当菌丝长至培养皿边缘或者菌丝线性生长
受到抑制时，观察猪苓和蜜环菌共培养的生长情
况，可以看出，当蜜环菌与猪苓相互接触时，蜜环
菌抑制了猪苓菌丝的线性生长，从而促使其形成菌
核（Henis et al. 1965）。比较猪苓纯培养与猪苓蜜
环菌共培养时的菌丝显微结构，纯培养时猪苓菌丝
分枝较少，菌丝较细，双核有隔，锁状联合明显。
而猪苓和蜜环菌共培养时，显微镜下观察，菌丝交
织密集，分枝较多，有锁状联合。同时对侵入到猪
苓菌丝内的蜜环菌菌索进行显微观察，可以看出侵
染后的菌索表皮细胞细长，排列紧密，并且中空；
没有侵染猪苓菌丝的蜜环菌菌索表皮细胞饱满呈
圆形，排列规则，中间有髓。而在培养瓶中共培养
猪苓菌核和蜜环菌菌索3个月后，个别组合可以观
察到菌索侵入到菌核的现象，体视镜下观察，可以
明显看到蜜环菌菌索的侵入点。在研究猪苓和蜜环
菌共生关系时，要时刻明确一点，蜜环菌并不侵染
猪苓的菌丝，两者共培养时是拮抗的。当猪苓菌核
和蜜环菌共培养时，蜜环菌的菌索侵入到了菌核
中，此时两者是共生的。在实际生产中，以菌核作
为种子来进行栽培性生产是有一定的理论性的。如
果利用菌丝体作为种子，此时就要注意蜜环菌的
下种时间，应该等到猪苓菌丝体适应了培养环
境，最好是形成小菌核时再种下蜜环菌（柳玲玲
等 2012）。
另外，对于猪苓的研究主要集中在药理作用和
人工栽培两个方面，而对猪苓和蜜环菌的共生机理
的研究，以及两者这种复杂关系的基因调控方式的
研究甚少。而对于筛选出的猪苓和蜜环菌的组合是
否适合生产使用，还有待于进行野外栽培试验，进
ISSN1672‐6472 CN11‐5180/Q Mycosystema November 15, 2015 Vol. 34 No. 6
http://journals‐myco.im.ac.cn
1076
一步验证筛选结果。以上这些问题的解决将会对猪
苓产业的发展提供很大的技术帮助，也会为猪苓种
植的产业化起到催化剂的作用。
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