全 文 ：北方园艺２０１２（０３）：１６１～１６３ ·食用菌·
第一作者简介：白世俊（１９７０－），男，青海西宁人，本科，副教授，现
主要从事生态经济与环境保护等研究工作。
责任作者：包锦渊（１９５８－），男，甘肃定西州人，本科，教授，现主要
从事植物化学方面的研究工作。
收稿日期：２０１１－１２－０２
黄绿蜜环菌有效成分的定性分析
白 世 俊，包 锦 渊
（青海民族大学 化学与生命科学学院，青海 西宁８１０００７）
摘 要：采用水提取法、醇提取法和石油醚提取法对黄绿蜜环菌的化学成分进行了提取。结
果表明：黄绿蜜环菌中含有较丰富的蛋白质、氨基酸、糖类、生物碱和少量有机酸、黄酮、强心苷、甾
体三萜类、苷类、皂苷，而挥发油、香豆素萜类、鞣质、酚类极少。通过定性分析黄绿蜜环菌的有效成
分，为充分利用其营养价值、药用价值和经济价值提供了重要的参考依据。
关键词：黄绿蜜环菌；有效成分；定性分析
中图分类号：Ｓ ６４６．１＋１ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１２）０３－０１６１－０３
黄 绿 蜜 环 菌 （Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ （Ａｌｂ．ｅｔ
Ｓｃｈｗ．：Ｆｒ．）Ｓａｃｃ．）属担子菌亚门（Ｂａｓｉｄｉｏｍｙｃｏｔｉｎａ）层菌
纲（Ｈｙｍｅｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）口蘑目（Ｔｒｉｃｈｏｌｏｍａｔａｌｅｓ）口蘑科
（Ｔｃｈｏｌｏｍａｔａｃｅａｅ）蜜环菌属（Ａｒｍｉｌａｒｉａ）名贵野生药食
兼用真菌［１］，俗称黄蘑菇、金蘑菇、黄环菌、草原白蘑菇
等。子实体中等大，菌盖厚，肉质，扁半球形至平展，硫
黄色，干后近白色，具纤毛状鳞片，边缘内卷。菌肉白
色，菌褶近似菌盖色，菌柄柱形，内实，菌环以下具黄色
鳞片，基部往往膨大。黄绿蜜环菌是世界稀有珍品，营
养丰富、味道鲜美，食用有抑制肿瘤生长，防癌之功效。
同时由于该菌铁、磷含量高，有利于抗衰老，具有护肤、延
年益寿、美容等作用。黄绿蜜环菌还含有丰富的蛋白质、
矿物质、氨基酸和多种维生素，是理想的补血疗养食品和
能量代谢、增强肌肤抵抗力的防病保健食品。特别是“硒”
的含量很高，是癌症的克星。目前尚无人工栽培，一般生
长在海拔３ ０００～５ ０００ｍ的高原草地，产量很少，采集十
分困难，绝大部分在山上自生自灭。我国黄绿蜜环菌的主
要盛产区是青海祁连县、四川石渠县、甘肃民乐县、西藏昌
都、云南中甸等地区［２］。年产总量大约５００多ｔ，尤其是青
海的祁连县和四川的石渠县产量很大、质量最优。现通过
定性分析黄绿蜜环菌的有效成分，为充分利用其营养价
值、药用价值和经济价值提供了重要的参考。
１ 材料与方法
１．１ 试验材料
供试黄绿蜜环菌（Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ）为野生黄
绿蜜环菌，采于青海祁连县，并经青海民族大学李军乔
博士鉴定。黄绿蜜环菌子实体阴干粉碎后，过８０目筛
备用。试验仪器有Ｒ－２０５旋转蒸发仪（上海申顺生物科
技有限公司、ＳＨＢ?ⅢＳ循环水式真空泵（郑州长城科工贸
有限公司）、回流装置、ＨＨ－４数显恒温水浴锅（国华电器
有限公司）、ＦＡ１６０４Ｎ电子天平（上海精密科学仪器有限
公司）。
１．２ 试验方法
１．２．１ 定性分析方法 采用水提取法、醇提取法和石油
醚提取法对黄绿蜜环菌的化学成分进行了提取，并做了
较全面的鉴定试验。
１．２．２ 检验试剂的配置 双缩尿试剂：甲液：４０％
ＮａＯＨ，乙液：１％ＣｕＳＯ４，应用前等量混合。茚三酮试
剂：０．１ｇ茚三酮加入到５０ｍＬ蒸馏水中。Ｍｏｌｉｓｈ反应
试剂：０．５ｇａ－奈酚加入到５０ｍＬ乙醇中。Ｆｅｌｉｎｇ反应试
剂：甲液：硫酸铜结晶０．６２３ｇ溶于１０ｍＬ蒸馏水中，乙
液：酒石酸钾钠结晶３．４６２ｇ，ＮａＯＨ １ｇ溶于１０ｍＬ蒸
馏水中，应用前等量混合。三氯化铁试剂：０．５ｇ三氯化
铁溶于５０ｍＬ乙醇中。明胶实验试剂：１ｇ明胶，
１０ｇ ＮａＣｌ溶于１００ｍＬ蒸馏水中。溴酚蓝试剂：０．５ｇ溴
酚蓝溶于５０ｍＬ蒸馏水中。三氯化铝试剂：０．５ｇ三氯
化铝溶于５０ｍＬ乙醇中。三氯化铁－冰醋酸试剂：甲液：
１０％三氯化铁水溶液（５ｍＬ）与１００ｍＬ冰醋酸混合，乙
液：浓硫酸，应用时先加甲液，后缓缓加入乙液。硅钨酸
试剂：１ｇ硅钨酸溶于２０ｍＬ蒸馏水中，加少量盐酸，调
至ｐＨ＝２。开环－闭环试剂：甲液：１％ＮａＯＨ，乙液：２％
ＨＣｌ，应用前等量混合［３］。Ｋｅｄｄｅ试剂：甲液：２％３，５－二
硝基苯甲酸甲醇液，乙液：１ｍｏｌ／Ｌ ＫＯＨ甲醇溶液。盐
酸镁粉试剂：先加少量镁粉，之后在加入浓盐酸。醋肝－
浓硫酸试剂：先加醋肝溶解，再加入醋肝 －浓硫酸（按
２０∶１的比例配置）。苦味酸试剂：０．５ｇ苦味酸溶于
５０ｍＬ蒸馏水中［４］。碘化铋钾试剂：０．１ｇ碘化铋钾溶于
１００ｍＬ乙醇中。
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·食用菌· 北方园艺２０１２（０３）：１６１～１６３
２ 结果与分析
２．１ 水浸取成分分析
取黄绿蜜环菌粗粉５ｇ加蒸馏水６０ｍＬ，在５０～
６０℃的水浴上加热１ｈ，过滤，滤液按表１所列项目进行
试验。
表１ 水浸液中的成分检查
检查项目 试剂名称 正反应指标 试验现象 结论
糖
有机酸
酚类
鞣质
氨基酸
蛋白质
苷类或多糖
皂苷
生物碱
＊Ｍｏｌｉｓｈ反应试剂
＊Ｆｅｌｉｎｇ反应试剂
ΔＰＨ试纸反应
Δ溴酚蓝试剂
Δ三氯化铁试剂
＊明胶实验试剂
Δ茚三酮试剂
＊双缩尿试剂
＊加６ｍｏｌ／Ｌ ＨＣｌ
酸化，加热煮沸数
分钟，冷后观察
＊泡沫实验
＊碘化铋钾试剂
＊硅钨酸试剂
两液界面处有
紫红色环
棕红色沉淀
呈酸性
氨熏后有黄色斑点
呈绿、蓝或暗紫色
出现白色沉淀或浑浊
呈蓝、紫色
呈紫、红色
有絮状沉淀
在试管中剧烈振荡，
１０ｍｉｎ后观察，
有气泡有红色沉淀
淡黄色或白色沉淀
两液界面处有紫色环
经过滤，滤纸上有砖
红色沉淀
ｐＨ＝６．２～６．４
氨熏后有浅黄色斑点
金黄色
无现象
呈蓝色
呈紫红色沉淀
有絮状沉淀
有气泡
有桔红色沉淀
变浑浊
＋
＋
＋
＋
－
－
＋
＋
＋
＋
＋
＋
注：＊表示在试管中反应，Δ表示在滤纸或点滴板上反应。下同。
２．２ 乙醇提取液成分分析
取黄绿蜜环菌粗粉５ｇ，加６０ｍＬ的９５％乙醇，在水
浴上加热回流１ｈ，过滤，滤液留２ｍＬ做Ⅰ项试验（表２）；
其余浓缩成浸膏，浸膏分为二部分，一部分加少量２％
ＨＣｌ过滤，分出酸液，做Ⅱ项试验（表３），附于滤纸上的残
渣再加少量乙醇溶解，做Ⅲ项试验（表４）；另一部分浸膏
以少量的乙酸乙酯溶解，溶液置分液漏斗中加适量５％
ＮａＯＨ振荡，使酚性物质及有机酸等转入下层ＮａＯＨ水
溶液中，剩下的乙酸乙酯为中性部分，用蒸馏水洗至中
性即可备用，取乙酸乙酯液２～３ｍＬ，以１～２ｍＬ乙醇
溶解做Ⅳ项试验（表５）。
表２ Ⅰ项试验
检查项目 试剂名称 正反应指标 试验现象 结论
酚类
鞣质
有机酸
Δ三氯化铁试剂
Δ三氯化铁试剂
Δ溴酚蓝试剂
呈绿、蓝或暗紫色
呈绿、蓝或暗紫色
氨熏后有黄色斑点
暗紫色
暗紫色
氨熏后有浅黄色斑点
＋
＋
＋
表３ Ⅱ项试验
检查项目 试剂名称 正反应指标 试验现象 结论
生物碱 ＊碘化铋钾试剂
＊硅钨酸试剂
＊苦味酸试剂
有红色沉淀
淡黄色或白色沉淀
黄色结晶
有沉淀
白色絮状沉淀
有黄色结晶
＋
＋
＋
２．３ 石油醚提取液成分分析
取黄绿蜜环菌粗粉１ｇ，加入１０ｍＬ石油醚，放置
２～３ｈ，过滤，滤液置于表面皿上挥发，残留物按表６所
示项目进行试验。
表４ Ⅲ项试验
检查项目 试剂名称 正反应指标 试验现象 结论
黄酮
蒽醌
Δ三氯化铁试剂
＊盐酸－镁粉试剂
Δ１０％ＫＯＨ
Δ氨熏
＊１％硼酸
阳性
呈橙红至紫红色或紫至蓝色
呈红色
蓝色背景黄色斑点
呈浅黄色
阳性
绿色
无
蓝色斑点
白色
＋
＋
－
－
－
表５ Ⅳ项试验
检查项目 试剂名称 正反应指标 试验现象 结论
香豆素萜类
强心苷
＊开环－闭环试剂
ΔＫｅｄｄｅ试剂
＊苦味酸试剂
变浑浊
红色沉淀
黄色结晶
变浑浊
红棕色晶状沉淀
有黄色结晶
＋
＋
＋
表６ 石油醚提取液中成分检查
检查项目 试剂名称 正反应指标 试验现象 结论
甾体三萜类
挥发油
＊醋肝－浓硫酸试剂
滤纸试验
颜色由黄－红－紫－
青－污绿
滤纸上有油斑
颜色由黄－红－紫－
青－污绿
有油斑
＋
＋
２．４ 氰苷的检查
取黄绿蜜环菌粗粉０．２ｇ，置于试管中，加入３～
５ｍＬ ５％硫酸溶液，摇匀混合，在试管口置１条浸过苦
味酸钠盐的滤纸条，然后紧塞试管口（滤纸不要接触溶
液），试管于沸水浴上加热十几分钟，如纸条显红色表示
有氰苷。结果表明，悬空处呈红色，表示有氰苷。
３ 结论与讨论
经过系统的化学预试试验，初步判断黄绿蜜环菌中
可能含有甾体三萜类、强心苷、生物碱、有机酸、蛋白质、
氨基酸、皂苷类、糖类、氰苷、挥发油等成分。但确证工
作尚需进行下一步的光谱、色谱、质谱方面的鉴定。
黄绿蜜环菌有很高的营养价值和经济价值，系统的
鉴定其所含的有效成分，有利于以后的开发利用。对黄
绿蜜环菌进行简单的成分确认，以便之后选择适当的分
析方法进行定量分析。
在水提取中，该方法只用了１ｈ的水浴加热，成分的
提取不是很完全，使得有的实验现象不明显，可以改成
先进行２４ｈ的冷水提取，再对滤渣进行水浴提取，这样
可以得到更多的有效成分，以便实验现象清晰。在醇提
取中，该方法分成多个步骤进行定性分析，使得所要鉴
定的成分突出，便于收集和鉴定。氰苷的检查是该试验
较特殊的，它在一定条件下易被分解成醛（酮）和氢氰
酸，其中氢氰酸的毒性较大，所以含有氰苷的食物最好
不要生吃。
参考文献
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社，２００６．
［２］ 周劲松，盛海彦，焦迎春，等．青海野生黄绿环菌生态环境及不同生
态区菌珠间比较［Ｊ］．食用菌，２００７（２）：
［３］ 吴立军，王锋鹏，易扬华，等．天然药物化学［Ｍ］．北京：人民卫生出版
社，２００７．
２６１
北方园艺２０１２（０３）：１６３～１６５ ·中草药·
第一作者简介：汪福源（１９７８－），男，博士，讲师，现主要从事中药生
物技术研究工作。
收稿日期：２０１１－１１－２３
噻重氮苯基脲对贯叶金丝桃胚性愈伤诱导和分化的影响
汪 福 源１，唐 宁２，宋 东 杰２
（１．中国药科大学 高等职业技术学院，江苏 南京，２１１１９８；２．南京晓庄学院 生物化工与环境工程学院，江苏 南京，２１１１７１）
摘 要：系统研究了不同浓度噻重氮苯基脲（ＴＤＺ）对贯叶金丝桃胚性愈伤的诱导和植株再
生的影响。结果表明：诱导胚性愈伤的最适外植体为叶柄，诱导率可达１００％。在诱导胚性愈伤
和分化的最适培养基ＭＳ＋０．０５ｍｇ／Ｌ ＴＤＺ＋０．２ｍｇ／Ｌ ＮＡＡ上，不定芽分化率为５５％。第１代
培养基上，愈伤增殖迅速，绿色的胚性细胞团数目从原来的单个生长提高为平均５．６个。经２、３
代培养，愈伤停止生长，胚性细胞团数量逐渐减少。
关键词：贯叶金丝桃；噻重氮苯基脲（ＴＤＺ）；愈伤组织；不定芽
中图分类号：Ｓ ５６７．２３＋９ 文献标识码：Ａ 文章编号：１００１－０００９（２０１２）０３－０１６３－０３
贯叶金丝桃（Ｈｙｐｅｒｉｃｕｍ ｐｅｒｆｏｒａｔｕｍＬ．）属藤黄科
多年生草本植物，有疏肝解郁、清热利湿、消肿通乳等功
效［１］。１９８４年，Ｓｕｚｕｋｉ等［２］首次发现贯叶金丝桃具有抗
抑郁作用，疗效显著、副作用小。随着研究的深入，贯叶
金丝桃的抗抑郁、抗病毒、抗肿瘤等作用越来越受到人
们的关注［３］。其提取物是近年来欧美最畅销的植物药
之一，美国《草药典》（Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｈｅｒｂａｌ Ｐｈａｒｍａｃｏｐｏｅｉａ）和
德国 《ＤＡＣ》也收载此植物药。现有文献对贯叶金丝桃
的研究主要集中在提取工艺、含量测定和药理活性方
面，在离体培养再生植株方面报道较少。
噻重氮苯基脲（Ｎ－ｐｈｅｎｙｌ－Ｎ’－１，２，３－ｔｈｉｄｉａｚｏｌ－５－
ｙｌｕｒｅａ，Ｔｈｉｄｉａｚｕｒｏｎ，ＴＤＺ）是一种新型高效的生物调节
剂，具有细胞分裂素和生长素的双重作用［４］，魏岳荣等［５］
研究发现，０．２μｍｏｌ／Ｌ ＴＤＺ可有效地改善香蕉体细胞
［４］ 梁敬钰，冯锋，叶文才，等．天然药物化学与指导［Ｍ］．北京：中国医药
科技出版社，２００３．
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［１１］Ｋｒｏｌｉｋｏｗｓｋａ Ｍ，Ｋａｍｅｃｋｉ Ｊ．Ｐｈｙｔｏｃｈｅｍｉｃａｌ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ｉｆｌｕｒｅｓｅｅｎｃｅ
ｏｆ ｍｏｕｎｔａｉｎ ａｓｈ（ｒｏｗａｎ ｔｒｅｅ），Ｓｏｒｂｕｓ ａｕｃｕｐａｒｉａ［Ｊ］．ＲｏｃｚＣｈｅｍ，１９７３，４７（７／
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［１２］新疆维吾尔自治区卫生厅．新疆中草药［Ｍ］．乌鲁木齐：新疆人民出
版社，１９７５．
Ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ Ａｃｔｉｖｅ Ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｏｆ Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ
ＢＡＩ Ｓｈｉ－ｊｕｎ，ＢＡＯ Ｊｉｎ－ｙｕａｎ
（Ｃｏｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｌｉｆｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｑｉｎｇｈａｉ Ｎａｔｉｏｎａｌｉｔｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ｘｉｎｉｎｇ，Ｑｉｎｇｈａｉ ８１０００７）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｗａｔｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ａｌｃｏｈｏｌ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｐｅｔｒｏｌｅｕｍ ｅｔｈｅｒ ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ ｗｅｒｅ ｕｓｅｄ ｉｎ ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｎ ｃｈｅｍｉｃａｌ
ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｏｆ Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ．Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ ｗａｓ ｒｉｃｈ ｉｎ ｐｒｏｔｅｉｎ，ａｍｉｎｏ ａｃｉｄｓ，
ｓｕｇａｒｓ，ａｌｋａｌｏｉｄｓ ａｎｄ ｍｅａｎｗｈｉｌｅ ａ ｓｍａｌ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｏｒｇａｎｉｃ ａｃｉｄｓ，ｆｌａｖｏｎｅ，ｃａｒｄｉａｃ ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ，ｓｔｅｒｏｉｄｓ，ｔｒｉｔｅｒｐｅｎｅｓ，
ｇｌｙｃｏｓｉｄｅｓ ａｎｄ ｓａｐｏｎｉｎｓ，ｙｅｔ ｊｕｓｔ ｖｅｒｙ ｓｍａｌ ａｍｏｕｎｔ ｏｆ ｎａｐｈｔｈａ，ｃｏｕｍａｒｉｎ ｔｅｒｐｅｎｅｓ，ｔａｎｎｉｎｓ ａｎｄ ｐｈｅｎｏｌｓ．Ｔｈｅ ａｃｔｉｖｅ
ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ ｏｆ Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ ｗｅｒｅ ａｎａｌｙｚｅｄ ａｎｄ ｓｅｒｖｅｄ ａｓ ｒｅｆｅｒｅｎｃｅ ｏｆ ｆｕｌ ｕｔｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ ｉｔｓ ｎｕｔｒｉｔｉｏｎａｌ，ｍｅｄｉｃａｌ
ａｎｄ ｅｃｏｎｏｍｉｃ ｖａｌｕｅ．
Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ：Ａｒｍｉｌａｒｉａ ｌｕｔｅｏ－ｖｉｒｅｎｓ；ａｃｔｉｖｅ ｉｎｇｒｅｄｉｅｎｔｓ；ｑｕａｌｉｔａｔｉｖｅ ａｎａｌｙｓｉｓ
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