全 文 ：收稿日期:2001-04-19初稿;2001-11-19修改稿
基金项目:广东省教育厅自然科学重点科研项目
　食用菌学报　2002.9(1):18～ 21
　Acta Edulis Fungi
文章编号:1005-9873(2002)01-18-04
羊 肚 菌 菌 丝 生 物 学 特 性 研 究
张　松　夏艳红　姚珍平
(华南师范大学生物系 ,广州　510631)
摘　要　从培养基 、碳源 、氮源 、酸碱度等方面探讨了羊肚菌菌丝的生物学特性。试验结果表
明 ,羊肚菌菌丝适宜在黄豆芽-玉米粉-黄豆粉培养基上生长;菌丝生长的最适 pH 为 6 ～ 7;在以可
溶性淀粉为碳源 、蛋白胨为氮源的培养基中生长较好;采用棉籽壳-木屑-北芪渣培养基 , 菌丝生长
最快。
关键词　羊肚菌;菌丝体;生物学特性
中图分类号:S646.7;S601　　　文献标识码:A
羊肚菌(Morchel la conica)是一种营养丰富的珍稀食用菌 ,深受人们的喜爱。目前 ,国内
外已展开了羊肚菌形态 、生态 、营养成分等方面的研究〔1 ～ 3〕 ,但对其生物学特性的研究较少 。
为了开发利用羊肚菌 ,我们对其菌丝的生物学特性进行了研究 ,现报道如下 。
1　材料与方法
1.1　供试菌株
羊 5.70引自广东省微生物研究所 。
1.2　培养基
1.2.1　平板菌种培养基配方
马铃薯 200g ,葡萄糖 20g , 蛋白胨 1g , (NH4)2SO4 2g , MgSO4·7H2O 1g , KH2PO4 1g ,水
1000mL , pH6.5。
1.2.2　液体培养基配方
黄豆芽-玉米粉-黄豆粉培养基(M1):黄豆芽 25%,玉米粉 3%,黄豆粉 2%,葡萄糖 2%,
MgSO4·7H2O 0.1%, KH2PO4 0.1%。
胡萝卜-黄豆粉-米糠培养基(M2):胡萝卜 25%,黄豆粉 2%,米糠 2%,葡萄糖 2%,MgSO4
·7H2O 0.1%,KH2PO4 0.1%。
米糠-酵母膏-蛋白胨培养基(M3):米糠 7%,酵母膏0.2%,蛋白胨0.2%,葡萄糖2%,Mg-
SO4·7H2O 0.1%, KH2PO4 0.1%。
马铃薯-蛋白胨培养基(M4):马铃薯 25%,蛋白胨 0.2%, 葡萄糖 2%, MgSO4·7H2O
0.1%,KH2PO4 0.1%。
1.2.3　基础培养基配方
葡萄糖 50g ,蛋白胨 2g ,KH2PO4 1g ,MgSO4·7H2O 0.5g ,Na2HPO4 0.1g , CaCl2 0.01g , VB1
0.01g ,营养液 10mL ,水 1000mL , pH6.5。
营养液配方:KCl 1g ,NaCl 1g ,FeSO4 0.5g ,MgSO4·7H2O 0.1g ,ZnSO4 0.1g ,AlK(SO4)2 0.
01g ,CuSO4 0.01g ,Na2MoO4·2H2O 0.01g ,H3BO3 0.01g ,水 1000mL。
1.3　原种培养基
棉籽壳-木屑-北芪渣培养基(G1):棉籽壳 37%,木屑 25%,北芪渣 10%,米糠 10%,腐殖
土 10%,草木灰 5%,石膏 1%,Ca(H 2PO4)2 1%, KH2PO4 1%。
枯枝叶-棉籽壳培养基(G2):枯枝叶50%,棉籽壳 20%,木屑 10%,米糠 10%,腐殖土 7%,
石膏 1%,Ca(H2PO4)2 1%,KH2PO4 1%。
棉籽壳-米糠-腐殖土培养基(G3):棉籽壳 70%, 米糠 20%, 腐殖土 7%, 石膏 1%,
Ca(H2PO4)2 1%, KH2PO4 1%。
棉籽壳-木屑-米糠培养基(G4):棉籽壳 50%,木屑 30%,米糠 10%,腐殖土 7%,石膏 1%,
Ca(H2PO4)2 1%,KH2PO41%。
1.4　试验方法
1.4.1　不同液体培养基 、pH 、碳源和氮源试验
按液体培养基配方 ,制备 4种培养基 ,进行不同液体培养基振荡培养试验;将基础培养基
用HCl或 NaOH 调节 pH 至3 、4 、5 、6 、7 、8 、9 ,进行不同 pH试验;按基础培养基配方以 0.2%蛋
白胨为氮源 ,分别采用 6种不同的碳源 ,以不加任何碳源为对照 ,进行不同碳源试验;按基础培
养基配方以 5%葡萄糖为碳源 ,采用 9种不同的氮源 ,以不加任何氮源为对照进行不同氮源试
验。试验采用 500mL 、250mL 、150mL 的三角瓶分别装入 200mL 、50mL 、30mL 培养液 。
先将菌株转接于平板菌种培养基的培养皿内 ,制成平板菌种 ,用同一打孔器(直径 3mm)
在平板菌种的同一半径上打孔 ,将 4个菌栓接入培养基 ,振荡培养或在 26℃培养箱内静置培
养 13d后滤出菌丝体 ,在 750℃烘干至恒重 ,测定菌丝干重 。
1.4.2　不同原种培养基试验
按原种培养基配方采用常规方法配制 4种培养基 ,装瓶 ,灭菌 ,接种母种 ,于 26℃培养箱
内培养 ,每隔 3d测定菌丝的生长长度 ,计算平均生长速度。上述试验均采用完全随机设计 ,重
复 3次。
2　结果与讨论
2.1　菌丝在不同液体培养基中的生长效应
将羊 5.70接种在 4种液体培养基中振荡培养 ,结果见表 1。
表 1　不同液体培养基对菌丝干重的影响(g/ 200mL)1)
Table 1　Effect of different liquid media on the dry weight of the mycel ia(g/ 200mL)
培养基　Media M 1 M 2 M 3 M 4
菌丝干重　Dry weight of the mycelia 1.436 aA2) 1.170 bA 1.154 bB 1.147 bB
1)　菌丝干重为 3次重复的平均值 ,下同　The dry weight of the mycelia is the average of three replications , similarly hereinafter
2)　小写和大写英文字母分别表示 P=0.05和 P=0.01水平上的差异显著性 , 下同　Small and capi tal let ters indicate the
signifi cant dif ferences at P=0.05 and P=0.01 levels respectively , similarly hereinaf ter
从表 1可知 ,羊5.70菌丝可在 4种培养基中生长 ,在黄豆芽-玉米粉-黄豆粉培养基中生长
最好 , 其菌丝干重达 1.436g/200mL , 与其它 3 种培养基中菌丝干重的差异达显著水平
(P=0.05)。因为黄豆芽-玉米粉-黄豆粉培养基含有较多的碳源 、氮源 、矿质元素和维生素等
191 期　　　　　　　　　　　　　　张　松等:羊肚菌菌丝生物学特性研究
物质 ,C/N适合 ,可为菌丝生长发育提供丰富的营养 ,有利于菌体物质的合成 ,促进了菌丝的
生长〔1〕。
2.2　不同 pH对菌丝生长的影响
将羊 5.70接种于不同 pH的培养基上 ,结果见表 2。
表 2　不同 pH对菌丝干重的影响(g/ 50mL)
Table 2　Effect of different pH on the dry weight of the mycelia(g/ 50mL)
pH 3 4 5 6 7 8 9
菌丝干重　Dry weight of the mycelia 0.6131 0.7011 0.8190 1.1615 1.0915 0.9752 0.8048
从表 2可知 ,羊肚菌菌丝可在 pH3 ～ 9的范围内生长 ,pH 为 3或 4时 ,菌丝生长较差 ,随
着 pH 的升高 , 菌丝生长量逐渐增高;pH 为 6 时 , 菌丝生长量最高 , 菌丝干重为
1.1615g/50mL ;然而 ,当培养基 pH 为 7时 ,菌丝生长势又变弱 ,这时 ,随着 pH 升高 ,菌丝生长
量逐渐降低。因此 ,羊肚菌菌丝生长的适宜 pH 为 5 ～ 8 ,最适 pH为 6 ～ 7。
2.3　不同碳源对菌丝生长的影响
将羊 5.70分别接种到不同碳源的培养基中培养 ,结果见表 3。
表 3　不同碳源对菌丝干重的影响　(g/ 30mL)
Table 3　Effect of di fferent carbon sources on the dry weight of the mycelia(g/ 30mL)
碳　源
Carbon sources
菌丝干重
Dry w eight of the mycelia
碳　源
Carbon sources
菌丝干重
Dry w eight of the mycelia
可溶性淀粉 Soluble starch 1.2963 aA 白 糖 White sugar 0.6422 bcB
葡 萄 糖 Glucose 0.6934 bB 蔗 糖 Sucrose 0.5735 cB
乳 糖 Lactose 0.6580 bcB 甘露 醇 Mannitol 0.2811 dC
对 照 Cont rol 0.0956 eD
从表 3可见 ,羊肚菌菌丝在 6种不同碳源的培养基中都可以生长 ,说明羊肚菌菌丝可利用
多种碳源 。菌丝在以可溶性淀粉为碳源的培养基中生长最好 , 其菌丝平均干重可达
1.2963g/30mL ,与其它碳源培养基菌丝干重的差异达极显著水平(P =0.01);葡萄糖 、乳糖是
较好的碳源;在甘露醇为碳源的培养基中菌丝干重最低 ,与其它碳源培养基菌丝干重的差异十
分明显。这与前人对食用菌碳源的研究结果较为相似〔1 ,5〕。
2.4　不同氮源对菌丝生长的影响
将羊 5.70分别接种到不同氮源的培养基中培养 ,结果见表 4。
表 4　不同氮源对菌丝干重的影响(g/ 30mL)
Table 4　Effect of different nitrogen sources on the dry weight of the mycel ia(g/ 30mL)
氮　源
Nit rogen sources
菌丝干重
Dry w eight of the mycelia
氮　源
Nit rogen sou rces
菌丝干重
Dry w eight of the mycelia
蛋白 胨　Peptone 0.7412 aA (NH4)2SO 4 0.3423 cdeCD
牛肉 膏　Beef ex tract 0.6444 abAB NH4Cl 0.2903 cdeD谷氨酰胺　Glutamine 0.5896 abABC NH4NO3 0.2516 deD天冬酰胺　Asparagine 0.4731 bcBCD 尿 素　Urea 0.211 deD
NH4H2PO 4 0.3998 cdBCD 对 照　Control 0.1931 eD
从表 4可见 ,羊肚菌菌丝在 9种不同氮源培养基中都能生长 ,说明羊肚菌可利用多种氮
源。菌丝在以蛋白胨为氮源的培养基中生长最好 ,其菌丝干重可达 0.7412g/30mL ;牛肉膏 、
谷氨酰胺是较好的氮源;NH4H2PO4 、(NH 4)2SO4 、NH4Cl 、NH4NO3 是较差的氮源;尿素是最差
的氮源 ,这可能是因为尿素在高温下分解 ,释放氨及氰氢酸 ,不利于菌丝的生长 。这与前人对
食用菌氮源的研究结果有相似的地方〔1 , 4〕 。
2.5　不同原种培养基对菌丝生长的影响
20 食　用　菌　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　9 卷
将羊 5.70培养在 4种不同的原种培养基中 ,结果见表 5。
表 5　不同培养基对菌丝生长速度的影响
Table 5　Effect of different media on the mycelial growth rate
培　养　基　Media G 1 G 2 G 3 G 4
菌丝生长速度　Mycelial grow th rate(mm/ d) 1.64 aA 1.26 bB 1.19 bB 0.71 cC
菌丝生长势1)　Mycelial grow th vigour +++ ++ +++ +
1)　+、++、+++分别表示菌丝生长较弱 ,较强 ,很强　　+, ++, +++ indicate that the mycelial growth is relatively
w eak , relatively vigorous and most vigorous resp.
从表 5可见 ,羊5.70可在这4种培养基中生长 ,菌丝在棉籽壳-木屑-北芪渣培养基中生长
最快 ,生长势最强 ,其菌丝平均生长速度达 1.64mm/d;而在棉籽壳-木屑-米糠培养基中菌丝生
长最慢 ,生长势较弱。棉籽壳-木屑-北芪渣培养基含有丰富的营养物质 ,碳氮含量较高 , C/N
较为合适 ,透气性良好 ,且北芪渣 、腐殖土可能含有一些对菌丝生长有刺激作用的物质 ,因此 ,
有利于菌丝的生长〔1〕。
3　结论
3.1　羊肚菌菌丝在 pH6 ～ 7的培养基中生长最好 ,在以可溶性淀粉作碳源 、以蛋白胨作氮源
的培养基中菌丝生长较好 。
3.2　在羊肚菌菌种生产中 ,液体菌种可选用黄豆芽-玉米粉-黄豆粉培养基 ,原种选用棉籽壳-
木屑-北芪渣培养基培养 ,可缩短制种周期。
参　考　文　献
1　张松.食用菌学.广州:华南理工大学出版社 , 2000.37 ～ 215.
2　林彬 , 刘凤梅 ,刘宜敏.粗柄羊肚菌蛋白质及氨基酸分析.食用菌学报 , 1996 , 3(4):21 ～ 24.
3　张松.高羊肚菌菌丝球液体培养的研究.中国野生植物资源 , 1996 ,(1):25～ 26.
4　Johan JPB.Nitrogen assimilating enzymes in the white button mushroom Agaricus bisporus .Microbiology ,
1994 , 140(5):1161 ～ 1168.
5　尤国倍 , 张健.不同营养物质对羊肚菌菌丝生长的影响.中国食用菌 , 1995 , 14(1):15 ～ 17.
Studies on the Biological Characteristics of
Morchella conica Mycelia
Zhang Song　　Xia Yanhong 　　Yao Zhenping
(Department of Bio logy , South China Normal University , Guangzhou　510631)
Abstract　The biological characteristics of Morchella conica mycelia w ere reported in this paper.The experi-
ment results indica ted that the dry weight of the mycelia was high in soybean bud-corn pow der-soybean powder
medium , that the optimal pH , the appropriate carbon source and suitable nitrogen source for the mycelial g row th of
M.conica were 6.0～ 7.0 , soluble starch and peptone resp., and that the mycelia g rew fastest in the medium of
cotton seed hull-sawdust-residue of Astragalus membranaceus(Fishch.)Bunge.
Key words　 Morchella conica ;Mycelium;Biological characteristic
211 期　　　　　　　　　　　　　　张　松等:羊肚菌菌丝生物学特性研究