全 文 ：菌 物 学 报 25（3）：398~407, 2006
Mycosystema
基于 ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种
的鉴定及评价
郑和斌 1, 2, 3 马志刚 1 吕作舟 1* 余知和 2*
(1华中农业大学应用真菌研究所，武汉 430070；2长江大学生命科学学院，荆州 434025；3湖南省农业厅植保植检站，
长沙 410005)
摘 要：利用 PCR产物克隆测序测定了 20个我国主要栽培的侧耳品种的 ITS序列，另外从 GenBank获得
侧耳属 15个种 25条 ITS序列及亚侧耳属 2个种的 ITS序列。以 Hohenbuehelia grisea和 H. tremula为外
群，运用 PAUP软件中的简约分析法（parsimony analysis）构建的系统发育树表明：侧耳属 Pleurotus是
单起源的，20个主要栽培的侧耳品种分别聚在三个组，即 Ostreatus-eryngii-populinus复合组、Pulmonarius
组、Citrinopileatus-cornucopiae 组。Ostreatus-eryngii-populinus 组含刺芹侧耳 Pleurotus eryngii、白灵侧耳
P. nebrodensis、香侧耳 Pleurotus sp.、阿魏侧耳 P. eryngii var. ferulae、平 963-1Pleurotus sp.及糙皮侧耳 P.
ostreatus、日本秀珍 Pleurotus sp.、平 802Pleurotus sp.、姬菇 Pleurotus sp.、灰白侧耳 P. spodoleucus、缘
刺侧耳 Pleurotus sp.、凤尾菇 P. sajor-caju；Pulmonarius组含肺形侧耳 P. pulmonarius、小白平菇 Pleurotus
sp.、平 8804Pleurotus sp.、平侧 5Pleurotus sp.、美味侧耳 P. sapidus；Citrinopileatus-cornucopiae组含黄白
侧耳 P. cornucopiae、金顶侧耳 P. citrinopileatus、鸡汁菌 Pleurotus sp.。系统树还显示黄白侧耳与金顶侧
耳、白灵侧耳与刺芹侧耳亲缘关系密切，而凤尾菇与肺形侧耳分属于不同的组，属于两个不同的种。基于
ITS序列分析，本文还针对目前我国栽培的主要侧耳品种在名称使用上的混淆和混乱进行了初步的评价和
讨论。
关键词：亚侧耳属，核糖体 RNA，亲缘关系，简约分析法，系统发育树
中图分类号：Q939.5 文献标识码：A 文章编号：1672-6472（2006）03-0398-0407
Identification and evaluation of main cultivated species of Pleurotus
in China based on ITS sequence analysis
ZHENG He-Bin1, 2, 3 MA Zhi-Gang1 LV Zuo-Zhou1 * YU Zhi-He2 *
(1The Institute of Applied Mycology, Huazhong Agricultural University, Wuhan 430070; 2Department of Biological Science,
Yangtze University, Jingzhou 434025; 3Plant Protection and Quarantine Station of Hunan Province, Changsha 410005)
ABSTRACT: Phylogenetic relationships of main cultivated Pleurotus species in China were evaluated and
elucidated. ITS sequences were produced from 20 strains of Pleurotus by clone sequencing of PCR products.
Additional 27 sequences of ITS were obtained from GenBank which included 15 species of Pleurotus and 2
species of Hohenbuehelia. Phylogenetic analyses indicated that Pleurotus was monophyletic with Hohenbuehelia
grisea and H. tremula as the outgroups and seven lineages were recognized. Twenty strains of Pleurotus in China

基金项目：湖北省科技公共项目（2001AA101C32）部分资助
∗通讯作者 email: lvzz@mail.hzau.edu.cn; zhiheyu@hotmail.com.
收原稿日期：2005-08-01，收修改稿日期：2006-04-29
DOI:10.13346/j.mycosystema.2006.03.012
3期 郑和斌等：基于 ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种的鉴定及评价 399

were placed into three groups. P. eryngii, P. nebrodensis, P. eryngii var. ferulae, P. spodoleucus, P. sajor-caju,
P. ostreatus and Pleurotus spp. PHZAU8, 10, 12-13, 15, and 17 represent Ostreatus-eryngii-populinus
complex group and P. pulmonarius, P. sapidus, and Pleurotus spp. PHZAU9, 11, 14 constitute another one
with bootstrap value of 84% and 89%, respectively. Citrinopileatus-cornucopiae group included P. cornucopiae,
P. citrinopileatus and Pleurotus sp. PHZAU16. The result also showed that there was close relationships
between P. eryngii and P. nebrodensis as well as between P. cornucopiae and P. citrinopileatus. P. sajor-caju
was distant to P. pulmonarius.
KEYWORDS: Hohenbuehelia, rRNA, phylogenetic relationships, parsimony analysis, phylogegnetic tree

侧耳属 Pleurotus（Fr.）P. Kumm.真菌狭义上俗称平菇，为一类适应性强、分布广泛并
且具有食、药用价值的木腐真菌（Thorn et al., 2000）。侧耳是世界上主要栽培食用真菌之
一，其产量在世界食用菌总产量中占第二位，是我国主要的出国创汇菇类之一（张树庭和
黄亚东，2004）。侧耳属隶属于担子菌门（Basidiomycota）、蘑菇目（Agaricales）、侧耳科
（Pleurotaceae），目前全世界约有 20种（Kirk et al., 2001）。侧耳属为食用菌中栽培种最多
的一个属，随着食用菌栽培产业的发展，具有商业价值的品种不断涌现，但是由于食用菌
标准化生产尚不够规范，栽培品种的名称混乱严重，特别是形态相近品种之间，同物异名、
同名异物混淆现象时有发生，这种混淆和混乱不仅给生产环节带来诸多不便，也对食用菌
的科学研究如侧耳的遗传育种与学术交流造成障碍。近年来，分子生物学方法越来越多地
被应用于真菌系统学研究和分类鉴定，其中 5.8S rDNA 及其两侧的转录间隔区（Internal
Transcribed Spacer，ITS），由于进化速率较快、稳定性好和测序方便等特点而适用于种级
水平的分类研究，已成为研究真菌系统发育及分子进化的有效工具和重要标记（Bruns et al.,
1991； Brower et al., 1996；王洪凯等，2001；侯丽斌等，2002；徐学锋等，2005）。关于
侧耳属的分类、种的概念、生物地理学及分子系统学国内外有大量的研究报道（Singer，
1986；Pegler & Yao，1995；Vilgalys et al.，1996；Zervakis & Balis，1996；李雪玲和姚一
健，2004）。然而，该属包括的一些种的概念尚有争论，地理界限不严格（Zervakis et al.，
2004）。其中，Vilgalys & Sun (1994) 利用两个不同的 rDNA序列（28S和 ITS）系统分析
侧耳属 28个不同来源的供试个体至少可分为 8个不融合群（intersterility group），提出该
属的种形成的 Ancient 和 recent 地理模型。前者是较早进化的种，广泛分布于南北半球，
而后者进化较迟，大都局限分布于北半球。马富英和罗信昌（2002）对我国侧耳属 18个形
态种 52 个菌株的核糖体 DNA 转录间区进行 PCR 特异性扩增，基于七种限制性内切酶酶
切多态性构建的聚类图表明，在 93%相似水平，可将 52个侧耳菌株分为七组。尽管如此，
但利用 ITS序列对我国主要栽培的侧耳品种进行系统分析尚未见报道，因此本文通过测定
ITS序列来对我国栽培的主要侧耳品种进行鉴定并给予一定的评价。
1 材料和方法
1.1 供试菌株及其培养
供试材料及来源见表 1，由华中农业大学菌种实验中心提供（PHZAU1～20）。将供试
菌株转接在 PDA 平板上活化培养十天，用打孔器挑取菌落边缘直径 5 mm 菌丝块接种至
100 mL的 CYM液体培养基中，室温下静置培养 2至 3周，收集菌丝体并用无菌生理盐水
400 菌 物 学 报 25卷

冲洗数次，用灭菌滤纸吸干置-20°C冰箱保存备用。
1.2 基因组 DNA提取
取 0.1 g菌丝体置于-70°C超低温冰箱冷冻，研碎后菌丝放入 1.5 mL Ependorff管中，
加入 700 µL 2% (w/v) CTAB（Cetyltrimethylammonium bromide）缓冲液于 65°C水浴 30 min
至 2h，按 Zolan ＆Pukkila（1986）抽提基因组 DNA，然后用 0.8 % Agarose凝胶检测 DNA
样品的质量和浓度。
1.3 PCR 扩增
参照 White et al.（1990）的方法，选用引物 ITS1(TCCGTAGGTGAACCTGCGG)和 ITS4
(TCCTCCGCTTATTGATAGGC)，扩增 5.8S rDNA及其两侧的 ITS1和 ITS2基因片段。扩增
反应在 GeneAmp PCR System 9700（美国 PE公司）上进行。反应体积为 50 µl, 其成分
为：10 mMol/L Tris-HCl (pH 8.3)，50 mMol/L KCl，0.1% (w/v) Triton X-100，1.5 mMol/L
MgCl2, 引物 1 µM，0.2 mMol/L dNTPs, 1.5 U Taq DNA聚合酶（Promega公司），模板 DNA
50 ng，以超纯水代替 DNA设为对照。扩增程序为 94°C预变性 5 min，然后 94°C变性 1 min，
54°C退火 1 min，72°C延伸 1.5 min，35个循环，最后一个循环 72°C延伸 10分钟。扩增
产物经 1.5%琼脂糖凝胶电泳检测后，用 3S Spin Agarose Gel Purification Kit（上海申能博彩
公司）进行回收。
表 1 供试材料及来源
Table 1 Materials used in this study
种 名
Species
地理来源
Origin
菌株原始编号
Strain Number
序列登录号
GenBank No.
Hohenbuehelia grisea Korea 韩国 CCRC 36224 AY265835
Hohenbuehelia tremula USA 美国 PBM 2301 DQ182504
Pleurotus abieticola Russia 俄罗斯 TENN 58284 AF345656
Pleurotus abieticola Russia 俄罗斯 TENN 52359 AY450348
Pleurotus australis New Zealand 新西兰 PDD 59215 AY315761
Pleurotus australis Australia 澳大利亚 NZPR-215 AY450342
Pleurotus citrinopileatus 金顶侧耳 Germany 德国 PHZAU1 DQ077889*
Pleurotus citrinopileatus 金顶侧耳 Korea 韩国 ASI 2011 AY265852
Pleurotus citrinopileatus 金顶侧耳 Japan 日本 TFM-M-E793 AB115043
Pleurotus cornucopiae 黄白侧耳 ATCC 42045 AB115037
Pleurotus cornucopiae 黄白侧耳 China 中国 PHZAU19 DQ342325*
Pleurotus cystidiosus 囊盖侧耳 ATCC 28599 AB115036
Pleurotus cystidiosus 囊盖侧耳 Japan 日本 IFO 30607 AY315778
Pleurotus djamor 红侧耳 Japan 日本 TFM-M-C905 AB115047
Pleurotus djamor 红侧耳 CBS 100134 AY265821
Pleurotus dryinus 栎侧耳 Korea 韩国 ATCC 36502 AY368656
Pleurotus dryinus 栎侧耳 Denmark 丹麦 7947 AY450343
Pleurotus eryngii 刺芹侧耳 Japan 日本 ATCC 36047 AY368657
Pleurotus eryngii 刺芹侧耳 China 中国 PHZAU20 DQ342326*
Pleurotus eryngii 刺芹侧耳 Hubei, China 湖北 PHZAU18 DQ077883*
3期 郑和斌等：基于 ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种的鉴定及评价 401

续表 1
种 名
Species
地理来源
Origin
菌株原始编号
Strain Number
序列登录号
GenBank No.
Pleurotus eryngii 刺芹侧耳 Austria 奥地利 Wu 13414 AY450347
Pleurotus eryngii var. ferulae 阿魏侧耳 Fujian, China 福建 PHZAU2 DQ077888*
Pleurotus nebrodensis 白灵侧耳 Beijing, China 北京 PHZAU3 DQ077887*
Pleurotus nebrodensis 白灵侧耳 No.4 Bailing AY720935
Pleurotus ostreatus 糙皮侧耳 Germany 德国 PHZAU4 DQ077884*
Pleurotus ostreatus 糙皮侧耳 Austria 奥地利 TENN 53662 AY450345
Pleurotus populinus 杨侧耳 Korea 韩国 ATCC 90083 AY368667
Pleurotus populinus 杨侧耳 USA 美国 TENN 56749 AY450346
Pleurotus pulmonarius 肺形侧耳 Japan 日本 TMI 30385 AY368669
Pleurotus pulmonarius 肺形侧耳 Sweden 瑞典 TENN 50539 AY450349
Pleurotus sajor-caju 凤尾菇 Hubei, China 湖北 PHZAU5 DQ077890*
Pleurotus sapidus 美味侧耳 Beijing, China 北京 PHZAU6 DQ077885*
Pleurotus sapidus 美味侧耳 ASI 2057 AY265846
Pleurotus sp. 日本秀珍 Hubei, China 北京 PHZAU8 DQ077881*
Pleurotus sp. 平8804 Hunan, China 湖南 PHZAU9 DQ077877*
Pleurotus sp. 平963-1 Fujian, China 福建 PHZAU10 DQ077876*
Pleurotus sp. 平侧5 Sichuan, China 四川 PHZAU11 DQ077878*
Pleurotus sp. 缘刺侧耳 Beijing, China 北京 PHZAU12 DQ077879*
Pleurotus sp. 姬菇 Hubei, China 湖北 PHZAU13 DQ077874*
Pleurotus sp. 小白平菇 Shaanxi, China 陕西 PHZAU14 DQ077873*
Pleurotus sp. 平802 Hubei, China 湖北 P HZAU15 DQ077875*
Pleurotus sp. 鸡汁菌 Jiangsu, China 江苏 PHZAU16 DQ077880*
Pleurotus sp. 香侧耳 Hubei, China 湖北 PHZAU17 DQ077882*
Pleurotus spodoleucus 灰白侧耳 Jilin, China 吉林 PHZAU7 DQ077886*
Pleurotus spodoleucus 灰白侧耳 ASI 2012 AY265848
Pleurotus tuberregium 具核侧耳 Papua New Guinea DSH-92-155 AY450344
Pleurotus tuberregium 具核侧耳 Nigeria 尼日利亚 Pt3 AF109982
注：表中供试材料为 Pleurotus sp. 的中文名称为各地现在采用的商品名或俗名，未作变动。*为本研究测定序列的菌株，
由华中农业大学菌种中心提供，菌株保藏号为 PHZAU1～20

1.4 ITS片段的克隆和序列测序
将 PCR纯化产物与 PMD-18T Vector（Takara公司）连接后转化至大肠杆菌 JM109感
受态细胞中，用含 X-Gal、IPTG、Amp LB平板筛选，挑白色菌落培养，提取质粒做 PCR
检测（Sambrook et al., 2001）。对成功克隆后的菌株样品送于上海基康生物技术有限公司，
测序在 ABI 3700 自动测序仪上进行，做正反双向测序，利用 BioEdit 软件
（http://www.mbio.ncsu.edu/BioEdit/page2.htmL）拼接得完整序列。
1.5 ITS序列分析和系统树构建
序列数据的 Alignment 使用 ClustalW 软件（Chenna et al., 2003）。利用 Se-Al 软件
402 菌 物 学 报 25卷

（Rambaut, 1996）在Machintosh下对个别碱基进行人为的调整，对长短不一的序列两端进
行切除，使不同的序列数据的长度基本一致，并且除去模糊的 Alignment 序列区域。系统
树的构建采用 PAUP 4.0b10（Swofford，2003）软件中的简约分析法（parsimony analysis）。
在简约法分析过程中，对每个特征给予相同的权重和无序处理，将 Alignment 序列中出现
的空缺处理为信息丢失（missing）。系统树构建时， Swapping 规则采用 tree
bisection-reconnection（TBR）方式。先采用启发式搜索（heuristic search），得到最简约树
（most parsimoneous tree），再对得到的最简约树进行自举法分析（bootstrap analysis），1000
次重复，自举法分析的最大的树数目（maxtree set）设定为 5000，合意树（consensus tree）
的产生按照 50%的多数原则（50% majority-rule）。整个 ITS序列数据组由 47个 ITS序列组
成，包括我国主要栽培的 20 个侧耳品种的 ITS 序列，及从 GenBank 获得侧耳属 15 个种
25条 ITS序列和亚侧耳属 2个种的 ITS序列，其中亚侧耳属的种 Hohenbuehelia grisea和
H. tremula作为外群。
2 结果与分析
2.1 ITS序列与 Alignment
本研究测定的我国主要栽培的侧耳品种 20 个菌株的 ITS 序列（含 ITS1，5.8S rDNA
和 ITS2）均已提交 GenBank，登记注册号 DQ077873-077890，DQ342325-342326见表 1。
供试的 47个 ITS序列长度范围为 503－1582 bp，其中 Hohenbuehelia tremula（DQ182504）
为 503 bp，具核侧耳 Pleurotus tuberregium (AY450344）为 1582 bp。从序列长度变异来看，
ITS-1区序列长度变化范围为 225-266 bp，稍大于 ITS-2区的 228-262 bp。5.8S序列较保守，
为 157 bp或 158 bp。值得注意的是，所有供试的侧耳不管是 ITS-1区或者 ITS-2区（G＋C）
%都比较低，只有 43%左右，（G＋C）%含量低说明其碱基置换具有很大的随机性（张文
驹等，1998）。
经 Clustal W排序后序列数据共有 1704个特征位点，为使不同的序列数据的长度基本
一致，切除序列 5’ 端 52 个碱基和序列 3’ 端 928 个碱基位点，尚有 724 个特征位点。与
此同时，模糊的 Alignment序列区域 104 个位点被排除用于系统分析，最后用于系统分析
的序列矩阵为 47个分类单元，620个特征位点。
2.2 侧耳属主要栽培品种的系统学分析
ITS序列的系统分析结果表明，在供分析的 620个特征位点中，其中 372 个位点为不
变的（constant），变异特征位点为 51 个，197 个特征位点（约 31%）具有简约信息
（parsimony-informative）。启发式搜索分析得到 20棵最简约树，其中一棵树如图 1所示，
树长（tree length）297步，一致性指数（consistency index，CI）为 0.7239，保留指数（retention
index，RI）为 0.8615，复定一致性指数（rescaled consistency index，RC）为 0.6236。
以 Hohenbuehelia grisea和 H. tremula为外群，供试的 45个侧耳分类单元是单起源的，
形成红侧耳 Pleurotus djamor，金顶侧耳 P. citrinopileatus和黄白侧耳 P. cornucopiae，
P. australis和囊盖侧耳 P. cystidiosus，栎侧耳 P. dryinus和具核侧耳 P. tuberregium，肺
形侧耳 P. pulmonarius和美味侧耳 P. sapidus，P. abieticola，杨侧耳 P. populinus、糙皮
侧耳 P. ostreatus、凤尾菇 P. sajor-caju、白灵侧耳 P. nebrodensis及灰白侧耳 P. spodoleucus
7个分支，与 Vilgalys et al.（1996）及 Zervakis et al.（2004）的结果一致。
由图 1 和 2 可以看出，我国主要栽培的侧耳品种分别聚在 3 个组，即
3期 郑和斌等：基于 ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种的鉴定及评价 403

Ostreatus-eryngii-populinus复合组、Pulmonarius组、Citrinopileatus-cornucopiae组，支持强
度分别为84%，89%和100%。其中Ostreatus-eryngii-populinus组和Citrinopileatus-cornucopiae
组的刺芹侧耳 P. eryngii (又名杏鲍菇)、白灵侧耳 P. nebrodensis(又名白灵菇)、香侧耳 (P. sp.)、
阿魏侧耳 P. eryngii var. ferulae、平 963-1（P. sp.）组成 Eryngii组；糙皮侧耳 P. ostreatus、
日本秀珍（P. sp.）、平 802（P. sp.）、姬菇（P. sp.）、灰白侧耳 P. spodoleucus、缘刺侧
耳（P. sp.）、凤尾菇 P. sajorcaju构成 Ostreatus组；Pulmonarius组含小白平菇（P. sp.）、
平 8804（P. sp.）、平侧 5（P. sp.）、美味侧耳 P. sapidus；Citrinopileatus-cornucopiae组含
黄白侧耳 P. cornucopiae、金顶侧耳 P. citrinopileatus、鸡汁菌（P. sp.），并且可以推测菌
株 PHZAU16为金顶侧耳。
ITS 系统发育树还表明，刺芹侧耳与白灵侧耳、黄白侧耳与金顶侧耳关系极为密切，
分别得到 Bootstrap值为 91%和 100%的支持强度。而凤尾菇与肺形侧耳则聚在不同的分支
上，表明它们之间的关系较远。
3 讨论
本文采用 ITS序列分析方法，构建了较为完整的侧耳系统发育树。根据系统发育树得
到的结果，我国主要栽培的 20个侧耳品种分别聚在系统树中 3个不同的组或分支，基本上
解决 P. sp.这些菌株的系统位置，为食用菌的生产和研究提供了有价值的信息。
从研究结果来看，以刺芹侧耳为代表的Eryngii组聚在一起的支持强度为 57%（见图 2），
并与糙皮侧耳、杨侧耳、灰白侧耳等形成 Ostreatus-eryngii-populinus 复合组。其中刺芹侧
耳与白灵侧耳关系密切，Bootstrap支持率为 88%，而阿魏侧耳处于该组最外端，与该组其
它侧耳关系相对较远。本文研究结果似乎支持白灵侧耳为系统概念的种（Zervakis et al.，
2001），与 De Gioia et al.（2005）关于刺芹侧耳复合种（P. eryngii species-complex）的概念
相一致，但卯晓岚（2005）根据形态及生理特性认为白灵侧耳与阿魏侧耳为两个不同种的
观点。值得注意的是，白灵侧耳的序列均来自中国，在 GenBank中没有相应的其他可利用
序列，根据已有的资料尚不能确定来自中国的菌株 PHZAU2、PHZAU3及 No.4 Bailing是
否能够真正代表 Pleurotus nebrodensis。另外，菌株 PHZAU20的名称是否正确以及 P. eryngii、
P. eryngii var. ferulae和P. nebrodensis三者之间的关系有待获得可靠来源的菌株作进一步探
讨。
肺形侧耳 P. pulmonarius与凤尾菇 P. sajorcaju是否为同一个种一直是真菌分类学者争
执热点之一。Gonzalez & Labarère（2000）对线粒体小亚基 rDNA可变区域 V4、V6、V9
进行研究认为肺形侧耳与凤尾菇是同一个种的两个不同的名称，马富英和罗信昌（2002）
根据 28S rDNA限制性片段多态性也认为两者为同一个种的两个不同的名称，但是 Pegler &
Yao（1995）根据菌丝的特征比较认为两者应为不同的种，本研究结果显示两者处于不同
的分枝上，亲缘关系较远，可以认为凤尾菇与肺形侧耳为两个不同种。与此同时，肺形侧
耳与美味侧耳 P. sapidus为同一分支的支持强度为 89%，表明两者之间的的亲缘关系密切，
但是，系统关系如何尚难确定。
关于金顶侧耳 P. citrinopileatus 和黄白侧耳 P. cornucopiae 的亲缘关系，形态学研究
（Singer, 1986）和性交配型测定（Ohira, 1990；Vilgalys et al.，1996；Zervakis & Balis，1996）
支持二者为不同的分类单元。本研究结果显示两者聚在同一分枝上的 Bootstrap 支持率为
100%，表明这两者具有非常近的亲缘关系，这一结论与前人根据序列分析结果相一致
404 菌 物 学 报 25卷

（Vilgalys & Sun，1994；李雪玲和姚一健，2004）。

图 1 基于 ITS序列分析构建的 20棵最简约树之一（树长 297步，一致性指数 0.7239，保留指数 0.8615，
复定一致性指数 0.6236）
Fig. 1 One of 20 equally parsimonious trees obtained from heuristic research based on ITS sequences (tree length 297 steps, CI
= 0.7239, RI = 0.8615, RC = 0.6236)
3期 郑和斌等：基于 ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种的鉴定及评价 405


图 2 基于 ITS序列经自举法分析形成的合意树（分支处数字代表支持强度）
Fig. 2 Bootstrap 50% majority-rule consensus tree based on parsimony analysis of ITS sequences (Bootstrap values greater
50% are indicated above branches)
致 谢：承蒙华中农业大学菌种实验中心王卓仁主任和华中科技大学马福英博士提供
菌株，多伦多大学植物系 Jean-Marc Moncalvo 博士和 Terri McLenon女士在 PAUP软件分
406 菌 物 学 报 25卷

析技术方面提供的热情帮助，谨此致谢。

[REFERENCES]
Brower, AVZ, R DeSalle, Vogler AP, 1996. Gene trees, species trees, and systematics: a cladistic perspective. Ann Rev Ecol Syst, 27: 423~450
Bruns TD, White TJ, Taylor JW, 1991. Fungal molecular systematics. Ann Rev Ecol Syst, 22: 525~564
Chenna R, Sugawara H, Koike T, Lopez R, Gibson TJ, Higgins DG, Thompson JD, 2003. Multiple sequence alignment with the clustal
series of programs. Nucl Acids Res, 31: 3497~3500
De Gioia T, Sisto D, Rana GL, Figliuolo G, 2005. Genetic structure of the Pleurotus eryngii species-complex. Mycol Res 109: 71~80
Gonzalez P, Labarère J, 2000. Phylogenetic relationships of Pleurotus species according to the sequence and secondary structure of the
mitochondrial small-subunit rRNA V4, V6 and V9 domains. Microbiology, 146: 209~221
Hou LB, He W, Liu XY, Yang ZZ, 2002. Sequence analysis of ITS region in relationships of Chinese isolates of Cronartium. Journal of
Beijing Forestry University, 24: 175~182 (In Chinese)
Kirk PM, Cannon PF, David CJ, Stalpers JA, 2001. Ainsworth & Bisby’s Dictionary of the Fungi. 9th ed. CAB International:
Wallingford. 1~655
Li XL, Yao YJ, 2004. Assembing phylogenetic tree of Pleurotus based on 28S rDNA sequencing. Mycosystema, 23: 345~350 (In
Chinese)
Ma FY, Luo XC, 2002. PCR-based restriction analysis of internal transcribed spacers of nuclear ribosomal DNA in the genus Pleurotus.
Mycosystema, 21: 356~362 (In Chinese)
Mao XL, 2005. Promoting a new development for precious mushroom (Pleurotus nebrodensis). Guangshui, Hubei: Proceedings of
China (GuangShui) symposium on standardization production for edible mushroom and products fair for rare mushroom (Pleurotus
nebrodensis). 1~122
Ohira I, 1990. A revision of the taxonomic status of Pleurotus citrinopileatus. Rept Tottori Mycol Inst, 28: 143~150
Pegler DN, Yao YJ, 1995. The distinction between Lentinus sajor-caju and Pleurotus ostreatus and their taxonomy. Acta Botanica
Yunnanica, 17: 305~311
Rambaut A, 1996. Se-Al: Sequence alignment editor. Computer program distributed by the author, available at
http://evolve.zoo.ox.ac.uk/
Sambrook J, Russell DW, Sambrook J, 2001. Molecular Cloning: A Laboratry Manual. 3rd edition. New York: Cold Spring Harbor Lab
Press. 1~999
Singer R, 1986. The Agaricales in Modern Taxonomy. 4th ed. Koeltz Scientific Books: Koenigstein, Germany. 1~981
Swofford DL, 2003. PAUP*: Phylogenetic analysis using parsimony (* and other methods), version 4.0b10. Sunderland, Massachusetts,
Sinauer Associates
Thorn RG, Moncalvo JM, Reddy CA, Vilgalys R, 2000. Phylogenetic analyses and the distribution of nematophagy support a
monophyletic Pleurotaceae within the polyphyletic pleurotoid-lentinoid fungi. Mycologia, 92: 241~252
Vilgalys R, Moncalvo JM, Liou SR, Volovsek M, 1996. Recent advances in molecular systematics of the genus Pleurotus. In: Royse
DJ ed. Proceedings of the 2nd International Conference on the Mushroom Biology and Mushroom Products. Penn. State University,
University Park, Pennsylvania. 277~283
Vilgalys R, Sun BL, 1994. Ancient and recent pattern of geographic speciation in the oyster mushroom Pleurotus revealed by
phylogenetic analysis of ribosomal DNA sequences. Proc Natl Acad Sci USA, 91: 4599~4603
Wang HK, Zhang TY, Zhang M, 2001. Application of sequences of 5.8SrDNA, ITS-1 and ITS-2 on identification and classification of
Alternaria at species level. Mycosystema, 21: 168~173 (In Chinese)
White TJ, Bruns T, Lee S, Taylor J, 1990. Amplification and direct sequencing of fungal ribosomal RNA genes for phylogenetics. In:
3期 郑和斌等：基于 ITS序列分析对我国主要栽培的侧耳品种的鉴定及评价 407

Innis MA, Gelfand DH, Sninsky JJ, White TJ (eds.) PCR protocols: a guide to methods and applications. Academic Press, New
York. 315-322
Xu XF, Lin FX, Cheng SM, Li AZ, Lin FC, 2005. Genetic diversity of natural germplasm of Lentinula edodes in China inferred from
rDNA sequences. Mycosystema, 24: 29~35 (In Chinese)
Zervakis GI, Balis C, 1996. A pluralistic approach in the study of Pleurotus species with emphasis on compatibility and physiology of
the European morphotaxa. Mycol Res, 100: 717~731
Zervakis GI, Moncalvo JM, Vilgalys R, 2004. Molecular phylogeny, biogeography and speciation of the mushroom species Pleurotus
cystidiosus and allied taxa. Microbiology, 150: 715~726
Zervakis GI, Venturella G, Papadopoulou K, 2001. Genetic polymorphism and taxonomic infrastructure of the Pleurotus eryngii
species-complex as determined by RAPD analysis, isozyme profiles and ecomorphological characters. Microbiology, 147: 3183~3194
Zhang WJ, Qu LJ, Gao W, Gu HY, Chen JK, Chen ZL, 1998. ITSl and ITS2 sequences of four possible donors of bread wheat genome
and their phylogenetic relationships. Acta Botanica Sinica, 40: 994~1000 (In Chinese)
Zolan ME, Pukkila PJ, 1986. Inheritance of DNA methylation in Coprinus cinereus. Mol Cell Biol, 6: 195~200
[附中文参考文献]
侯丽冰, 贺伟, 刘小勇, 杨佐忠, 2002. 我国几种松干锈菌亲缘关系的 ITS序列分析. 北京林业大学学报, 24: 175~182
李雪玲, 姚一健, 2004. 基于 28S rDNA序列构建侧耳属系统发育树. 菌物学报, 23: 345~350
马富英, 罗信昌, 2002. 侧耳属核 rDNA转录间区扩增产物的限制性酶切分析. 菌物系统, 21: 356~362
卯晓岚, 2005. 促进我国食用菌珍品白灵菇的新发展. 湖北广水：中国（广水）食用菌标准化生产研讨暨珍稀菇品种.（白灵菇）
交易会论文集. 1~122
王洪凯, 张天宇, 张猛, 2001. 应用 5.8SrDNA及 ITS序列分析链格孢种级分类. 菌物系统, 20: 168~173
徐学锋, 林范学, 程水明, 李安政, 林芳灿, 2005. 中国香菇自然种质 rDNA 遗传多样性分析. 菌物学报, 24: 29~35
张树庭, 黄亚东. 2004. 发展中国食用菌产业造福人类贡献. 国际农产品贸易, 88: 18~27
张文驹, 翟礼嘉, 高巍, 顾红雅, 陈家宽, 陈章良, 1998.普通小麦基因组最可能的 4个供体的 ITSl和 ITS2序列及其亲缘关系. 植
物学报, 40: 994~1000