全 文 ：第 18卷第 4期
1998年　 12月　　　　　　
云南师范大学学报
Journal of Yunnan Normal University
　　　　　　Vol . 18No . 4
Dec .　 1998
皱木耳多糖对小鼠免疫机能影响的研究
梁子卿　　熊子仙
(云南师范大学生命科学系 ,昆明 650092)
摘　要　本文采用口服和腹腔注射两种给药途径研究了皱木耳多糖对小鼠免疫机能影响的作用。
结果显示 ,皱木耳多糖能明显促进巨噬细胞的吞噬功能、促进小鼠溶血素的生成、增加脾脏和胸腺
的重量 ,具有提高机体免疫机能的作用。此研究为皱木耳多糖的开发利用提供了必要的免疫学依
据。
关键词　皱木耳多糖　巨噬细胞　溶血素　脾脏　胸腺
　　木耳、银耳自古以来就被认为经济价值挺高的食用和药用真菌。近年来有资料表明 ,从木
耳或银耳中提取的多糖物质具有抗衰老 [1 ]、抗血栓 [ 2]、促进血清蛋白合成 [3 ]、降血脂 [4 ]的作用。
此外还能明显提高机体的免疫机能 ,增强机体的抗病能力 ,如提高小鼠巨噬细胞的吞噬功
能 [5 ]、促进人体淋巴细胞核酸生物合成 [6 ]、促进溶血素 [7 ]、白细胞介素- Ⅱ [8 ]的生成等。
皱木耳 ( Auricularia del icata )属于担子菌纲木耳目 ,是一种价格低廉的食用真菌 ,在我省
产量极其丰富 ,如何加快其开发利用对我省经济发展十分有意义。皱木耳多糖是否与其它木耳
或银耳多糖具有相同或相似的功效目前还不清楚。本文研究了皱木耳多糖对小鼠白细胞总数
及其分类、脾脏和胸腺重量、巨噬细胞吞噬功能以及兔红细胞致敏后溶血素生成的影响 ,试图
通过此研究来分析皱木耳多糖对机体的免疫机能方面的作用 ,以利于对皱木耳进行开发利用。
1　材料及试剂
1. 1昆明小白鼠:购自云南生物医学研究所 ,均为雄性 ,体重 30. 2± 3. 2克。
1. 2皱木耳多糖:由本系植物教研室从皱木耳 ( Auricularia delicata )子实体中提取。
1. 3鸡红细胞、兔红细胞、豚鼠血清:由实验动物取血制得。
1. 4血液稀释液 ( T EAE缓冲液 ,用于溶血素测定时血清及兔红细胞的稀释 ):按 [9 ]配制。
1. 5 Giemsa染液:按常规方法配制。
2　实验方法
2. 1　给药途径与剂量: 皱木耳多糖采用两种途径——口服灌喂法 (以下简称口服 )和腹腔注
1998- 07- 26收稿
射法 (以下简称腹注 )分别以不同剂量给药。口服组: 以小鼠每公斤体重 165mg的剂量灌喂皱
木耳多糖溶液 ,对照灌喂等体积的饮用水 ,连续给药 7天 ;腹注组: 以小鼠每公斤体重 150mg的
剂量腹腔注射灭菌皱木耳多糖 (生理盐水 )溶液 ,对照腹腔注射等体积的无菌生理盐水 ,连续给
药 7天。
2. 2　脾脏和胸腺称重:解剖小鼠 ,摘取小鼠脾脏和胸腺 ,去除结缔组织和脂肪 ,立即称量其湿
重。
2. 3　巨噬细胞吞噬功能的测定: 实验前 48小时给每只小鼠腹腔注射 1%可溶性淀粉 0. 5m l,实
验前半小时再注射 2%鸡红细胞悬液 0. 2ml: 实验时将小鼠处死 ,腹腔注射生理盐水 0. 5m l,轻
揉腹部半分钟 ,打开腹腔 ,取腹腔液涂片 ,甲醇固定 , Giemsa染色 ,在光镜下对巨噬细胞计数 ,
统计吞噬百分数和吞噬指数。
2. 4　兔红细胞致敏及小鼠溶血素的测定: 实验前五天给每只小鼠腹腔注射 5%兔红细胞
0. 2ml致敏。实验时摘除小鼠眼球 ,取尽眼静脉血 ,分离各鼠血清 ,将各鼠血清按 1 200稀释。于
冰浴中 ,取稀释血清 1ml ,放入对应离心管 ,每管分别加入 1 10稀释的豚鼠血清 1m l、 1 5稀释的
兔红细胞 0. 5m l。同时设置空白对照管 ( 1 10豚鼠稀释血清 1m l+ 1 200小鼠稀释血清 1ml+ 0.
5ml血液稀释液 )和 50%溶血对照管 ( 1 5稀释的兔红细胞 0. 25m l+ 蒸馏水 2. 25ml)。加样完毕 ,
将各离心管一起放入 37℃温箱温育 30分钟 ,取出后立即放入冰浴终止反应 , 2000rpm离心 5分
钟 ,取上清液在 721分光光度计 540nm处比色 ,测定各管 OD值。根据该值与 50%溶血对照管
OD值 ,计算样品的半数溶血值 HC50 ( HC50= 血清稀释倍数×测定管 OD值 /50%溶血对照管
OD值 )。
2. 5　实验结果的统计与分析: 所有实验结果采用 SPSS统计软件进行统计处理 ,各组的两两
比较 ,采用两样本均数差异显著性检验 ( SPSS的 t- test)进行检验。
3　实验结果
实验表明 ,皱木耳多糖对于小鼠与免疫机能有关的各项指标均有着或强或弱的影响 (表
1)。
表 1　皱木耳多糖对小鼠各项免疫机能有关指标的影响
组　别 动物数量
( n)
脾脏重 ( g )
( x-± S. E. )
胸腺重 ( g )
( x-± S. E. )
吞噬百分数 (% )
( x-± S. E. )
吞噬指数
( x-± S. E. )
半数溶血值 ( HC50 )
( x-± S. E. )
口服对照组 12 0. 12± 0. 01 0. 05± 0. 01 34. 40± 0. 91 0. 73± 0. 01 44. 80± 1. 27
口服实验组 12 0. 12± 0. 01 0. 07± 0. 01* 38. 80± 1. 36* 0. 80± 0. 02† 60. 30± 0. 02※
腹注对照组 12 0. 11± 0. 01 0. 05± 0. 00 33. 42± 0. 74 0. 75± 0. 00 45. 92± 1. 04
腹注实验组 12 0. 22± 0. 02※ 0 0. 07± 0. 00† 41. 58± 0. 29※ 0. 81± 0. 01※ 82. 12± 3. 29※0
　　　注: 与相应对照组比较有显著性差异: * : P< 0. 05　† : P < 0. 01　※: P < 0. 001
　　　　　 0:与口服实验组比较有显著性差异 ( P< 0. 001)
口服皱木耳多糖仅对胸腺具有显著的增重效应 ,而腹腔注射皱木耳多糖则可以极显著地
影响小鼠这两个器官的重量 ,表现为使这两个器官明显增重。通过对巨噬细胞吞噬百分数和吞
噬指数的检测 ,发现皱木耳多糖能够显著增强小鼠腹腔巨噬细胞对鸡红细胞的吞噬能力 ,采用
腹腔注射皱木耳多糖的给药方法增强效果则更为显著。预先口服或腹腔注射皱木耳多糖 ,对于
用鳃红细胞致敏的小鼠来说 ,有助于明显提高其溶血素生成的效率。与对照组相比较 ,口服或
·89·第 4期　　　　　　　　　梁子卿等:　皱木耳多糖对小鼠免疫机能影响的研究
腹腔注射皱木耳多糖均使得溶血素生成的检测指标半数溶血值 ( HC5 0 )增大 ,其效应极为显著。
此外 ,对两个实验组——口服实验组和腹腔注射实验组进行比较 ,发现在两个对照组各项
指标差异不显著的情况下 , HC50 ( P < 0. 001)、脾脏重量 ( P< 0. 001)这两项检测指标出现极为
显著的差异 ,腹腔注射给药比口服给药的影响效果更为明显。
4　讨论和分析
通过以上实验结果可以看出 ,皱木耳多糖无论是口服还是腹腔注射均能够促进小鼠腹腔
巨噬细胞以鸡红细胞的吞噬能力以及血清中溶血素的生成。这与夏尔宁等应用黑木耳、银耳和
银耳孢子多糖和吴春敏等应用毛木耳多糖所作的实验结果一致 [5 ] [10 ]。表明皱木耳多糖对于小
鼠机体的细胞免疫和体液免疫均有促进作用。
胸腺和脾脏分别属于中枢免疫器官和外周免疫器官 ,胸腺是 T淋巴细胞成熟的场所 ,脾
脏是淋巴细胞聚集的部位。这两个器官的增重往往意味着机体淋巴细胞的增殖 ,淋巴细胞的增
殖直接体现了免疫应答的强弱。马莉等人曾报道银耳多糖能够促进脾细胞分泌白细胞介素 -
Ⅱ ( T淋巴细胞生长因子 ) [ 8] ,而白细胞介素 -Ⅱ可以促进淋巴细胞的 DN A合成和淋巴细胞
的增殖 ;夏尔宁等人也证实黑木耳多糖、银耳多糖、银耳孢子多糖对人淋巴细胞核酸生物合成
具有明显的影响 [6 ]。同时也曾有过木耳多糖和银耳多糖能够使小鼠脾重增加的报道 [5 ] [10 ]。我们
虽然没有对皱木耳多糖进行白细胞介素 -Ⅱ以及淋巴细胞的 DNA合成方面的研究 ,但对小
鼠脾脏和胸腺的重量检测显示出的增重结果与他们的报道有一定的联系。这也说明皱木耳多
糖对于小鼠的免疫机能有着明显的促进作用。
本实验还显示了口服与腹腔注射皱木耳多糖 ,即不同给药途径的差别 ,腹腔注射的效果明
显高于口服 ,作者认为皱木耳多糖通过口服在一定程度上可能经过了消化系统的降解 ,即所谓
的“第一关卡效应” ,但实验结果也显示此效应并不足以妨碍皱木耳多糖通过口服来加以开发
利用。
综上所述 ,皱木耳多糖同其他木耳多糖或银耳多糖一样 ,能够激活巨噬细胞 ,提高其吞噬
功能 ,能够促进小鼠溶血素的生成 ,能够增加重要免疫器官的重量 ,具有显著提高机体免疫机
能的作用 ,而皱木耳在云南省资源丰富 ,价格低廉 ,因此极有开发利用的价值。
参　考　文　献
1　周慧萍等 . 黑木耳多糖和银耳多糖的抗衰老作用 .中国药科大学学报 , 1989, 20( 5): 303～ 306
2　申建和等 . 木耳多糖、银耳多糖和银耳孢子多糖对实验性血栓形成的影响 .中国药科大学学报 ,
1990, 20( 1): 39～ 42
3　夏尔宁等 . 黑木耳、银耳、银耳孢子多糖对血清蛋白生物合成的影响 . 南京药学院学报 , 1985,
16( 3): 49～ 50
4　申建和等 . 木耳多糖、银耳多糖和银耳孢子多糖的降血脂作用 . 中国药科大学学报 , 1990, 20
( 6): 344～ 347
5　夏尔宁等 . 黑木耳、银耳、银耳孢子多糖生物活性比较 . 南京药学院学报 , 1984, 15( 3): 50～ 53
6　夏尔宁等 . 黑木耳多糖、银耳多糖和银耳孢子多糖对人淋巴细胞核酸生物合成的影响 . 中国药
科大学学报 , 1987, 18( 2): 141～ 143
7　林志彬等 . 银耳多糖对小鼠免疫功能和肝匀浆细胞色素 P- 450含量的影响 . 中国药理学报 ,
·90· 云南师范大学学报 (自然科学版 )　　　　　　　　　　　　第 18卷
1985, 6( 3): 201～ 204
8　马　莉等 . 银耳多糖对小鼠脾细胞产生白细胞介素 2(Ⅰ L- Ⅱ )的影响 . 药学学报 , 1992, 27
( 1): 1～ 4
9　孙　荫等主编 . 实用临床检验手册 . 上海:上海科技教育出版社 , 1990. 218
10　吴春敏等 . 中国药科大学学报 , 1991, 22( 2): 97～ 100
The Effects of Auricularia delicala Polysaccharides on
Immunological Function in Mice
Liang Ziqing　　Xiong Zixian
( Depa rtment o f Life Sciences, Yunnan No rma l Univ er sity , Kunming 650092)
ABSTRACT　 The ef fects of Auricularia delicala polysaccharides on mice s immuno logica l
function w ere measured w ith giv en the po lysaccharides orally or intera- peri toneally. The
resul ts indica ted i t faci li tated the phagocytosis of the peri toneal macrophages of mice, in-
creased the production o f hemo lysines in mice immunized w ith rabbit RBC and the w eight of
the mice s spleen and thymus remarkably. The conclusions show n that the po lysaccharides
could improve the immunological function of mice.
KEY WORDS　 Auricularia del icala　 poly saccha rides　 macrophages　 hemo lysines spleen
thymus
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