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小叶丁香抗炎作用的实验研究



全 文 :第 34 卷第 6 期 通 化 师 范 学 院 学 报(自然科学) Vol. 34 №6
2013 年 12 月 JOURNAL OF TONGHUA NORMAL UNIVERSITY Dec. 201
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3
小叶丁香抗炎作用的实验研究
*
何晓燕,史金杰,宫汝淳,苗婷婷
(通化师范学院 生命科学学院,吉林 通化 134002)
摘 要:建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀、甲醛致小鼠足肿胀及冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管渗出模型,以地塞米松为阳性药对
照组,观察小叶丁香茎枝水煎液高、中、低剂量组(10g /Kg、5g /Kg、2. 5g /Kg)的抗炎作用及其与剂量的关系.结果表明,与生理盐
水组比较,各剂量组对小鼠耳廓肿胀、足肿胀及腹腔毛细血管通透性均有抑制作用,且随剂量增加抑制作用增强.其中,高剂量
组差异极显著(P < 0. 01). 因此,小叶丁香茎枝水煎液具有一定的抗炎作用.
关键词:小叶丁香茎枝;抗炎;小鼠
中图分类号:R284. 1 文献标志码:A 文章编号:1008 - 7974(2013)
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06 - 0055 - 03
小叶丁香 (Syringa pubescens Turcz)又名巧
玲花、雀舌花、毛丁香,为木樨科(Okaceae)、丁香
属 (Syringa Linn)的植物,该植物为落叶灌木,
有数米高,属于温性树种 . 中国是丁香属植物的
自然分布中心,主要分布在中国西南、西北、华
北、东北等地区 . 小叶丁香分布于河南、河北、陕
西、山西、甘肃等地,生长在海拔 800 ~ 2400m 山
地、沟内或崖石上,在长白山区也有广泛分布 . 其
各部位均可入药,民间用其花、果实泡茶饮用,有
消炎、镇咳、治疗肝炎和肝硬化之疗效,但至今未
被药典收录 . 据报道,小叶丁香叶的水煎剂对常
见化脓性感染的金黄色葡萄球菌和白色葡萄球
菌,对引起继发感染的变形杆菌和绿脓杆菌,对
各种(型)痢疾杆菌、伤寒杆菌和副伤寒杆菌,对
引起食物中毒的鼠伤寒杆菌、沙门氏菌等均有明
显的抗菌作用 . 关于小叶丁香的研究主要集中在
抗病毒和抑菌作用方面,但未见其抗炎作用的实
验研究报道 . 本实验采用二甲苯致小鼠耳廓肿
胀、甲醛致小鼠足肿胀及冰醋酸致小鼠腹腔毛细
血管通透性增强的方法来观察小叶丁香茎枝水
煎液对致病小鼠的抗炎作用,以期为进一步研究
小叶丁香的药理作用、进一步开发利用小叶丁香
提供一定的实验依据 .
1 实验材料
1. 1 实验动物
健康昆明种小鼠,雌性,体重为(20 ± 2)g,长春
高新医学实验动物中心提供,合格证号:scxk -(吉)
2008 - 0001.
1. 2 实验药品与试剂
小叶丁香茎枝,采于通化县江南山上,由通化
师范学院生命科学学院周繇教授鉴定;地塞米松磷
酸钠注射液,批号 1301201,天津博迪化工股份有限
公司;二甲苯,批号 20060106,沈阳市新西试剂厂提
供;氯化钠,批号 20120716,天津博迪化工股份有限
公司;冰醋酸,批号 20120303,天津市科密欧化学试
剂有限公司;甲醛,批号 20110809,沈阳市新西试剂
厂提供.
1. 3 实验仪器
高速万能粉碎机,型号 FW100,北京中兴伟业
仪器有限公司生产;精密电子天平,型号 JA2003
SHP07003,上海恒平科学仪器有限公司;可调控温
电热套,型号 ZDHW,北京中兴伟业仪器有限公司;
台式高速离心机,型号 TGL - 16G,湖南星科学仪器
有限公司;电子天平,型号 MB10KPW,上海精密科
·55·
* 收稿日期:2013 - 06 - 10
作者简介:何晓燕(1972 -) ,女,吉林通化人,硕士,通化师范学院生命科学学院教授、院长.
学仪器有限公司;H723 -可见分光光度计,上海第
三分析仪器厂生产;电热鼓风烘干箱,型号 DGF30,
南京实验仪器厂生产.
2 实验方法
2. 1 小叶丁香茎枝水煎液的制备
取小叶丁香的茎枝在烘干箱 60℃条件下进行
烘干.称量烘干的小叶丁香茎枝 100g并用粉碎机粉
碎成粉末状,把 100g 小叶丁香粉末加入 10 倍蒸馏
水浸泡约 3h,然后放在可控温的电热套中煮沸
60min后,倒出煎出液 1,向剩余药渣中加入与第一
次等量的蒸馏水,继续加热 60min,倒出煎出液 2 将
两次煎出液合并在一起,用消毒纱布过滤,去掉药
渣,再进行熬制,使煎出液熬成膏状为止. 向小叶丁
香膏中加入 100mL 蒸馏水(即每 1mL 含生药 1g) ,
存冰箱中冷藏备用.
2. 2 实验分组
取小鼠 50 只,随机分为 5 组,每组 10 只. 即生
理盐水组、地塞米松组及小叶丁香茎枝水煎液低、
中、高剂量组.
2. 3 给药剂量
依据《中药药理研究方法学》计算,地塞米松组
(3. 6 × 10 -3g /Kg)和小叶丁香茎枝水煎液低、中、高
剂 量 组 (2. 5g /Kg、5g /Kg、10g /Kg)分 别 按
0. 1mL /10g的剂量灌胃给药,生理盐水组给予等体
积的生理盐水,每日 1 次,连续给药 7d.
2. 4 二甲苯致小鼠耳廓肿胀实验
实验分组、给药剂量和给药方法同“2. 2”、
“2. 3”.末次给药 1h 后,右侧耳廓正反面均匀涂抹
二甲苯 0. 1mL,左耳涂抹等量生理盐水为阴性对照,
1h后将小鼠颈椎脱臼处死,沿耳廓对称剪下小鼠左
右两耳,精密电子天平称量,计算肿胀度(mg)及肿
胀抑制率(%).肿胀度(mg)=右耳片重(mg)-左
耳片重(mg).肿胀抑制率(%)=(对照组平均肿胀
度 -给药组平均肿胀度)/(对照组平均肿胀度)×
100% .
2. 5 甲醛致小鼠足肿胀实验
实验分组、给药剂量和给药方法同“2. 2”、
“2. 3”.末次给药 1h 后,在右足跖处注射 50%甲醛
30ml,致炎 1h 后将小鼠颈椎脱臼处死,从踝关节处
对称剪下小鼠左右足,精密电子天平称量,计算肿胀
度(mg)及肿胀抑制率(%). 肿胀度(mg)=右足重
(mg)-左足重(mg).肿胀抑制率(%)=(对照组平
均肿胀度 -给药组平均肿胀度)/(对照组平均肿胀
度)× 100% .
2. 6 冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管渗出实验
实验分组、给药剂量和给药方法同“2. 2”、
“2. 3”.末次给药后 1. 5h,尾静脉注射 0. 5%伊文思
蓝生理盐水溶液 0. 1mL /10g,10min 后腹腔注射
0. 7%冰醋酸 0. 1mL /10g,20min 后脱颈椎处死小
鼠,每只腹腔注射生理盐水 5mL 轻揉腹部 3min,从
腹腔中收集腹腔洗出液 3mL(冲洗液被血液污染,
则弃去不用) ,1500r /min 离心 15min,取上清液用
H723 -可见分光光度计,于 λ = 590nm 处测吸光度
值.
2. 7 数据统计分析
采用 SPSS数据处理软件,各组数据结果以 珋x ±
s表示,组间比较用 t检验.
3 结果与分析
3. 1 对小鼠一般特征的影响
各实验组小鼠状态无明显差别,均生活正常,
无死亡,低剂量组小鼠在前期精神稍有些萎靡,给
药高、中剂量组稍显活泼. 饮食量与饮水量较稳定,
各组体重增长速度无明显差异.
3. 2 小叶丁香茎枝水煎液对二甲苯致小鼠耳廓肿
胀的影响
实验结果表明:与生理盐水组比较,小叶丁香茎
枝水煎液低、中、高剂量组均可以抑制二甲苯所致小
鼠耳廓肿胀,较地塞米松组弱;其中,小叶丁香茎枝
水煎液低剂量组无显著性差异(P > 0. 05) ,小叶丁
香茎枝水煎液中剂量组差异显著(P < 0. 05) ,小叶
丁香茎枝水煎液高剂量组差异极显著(P < 0. 01).
结果见表 1.
表 1 小叶丁香茎枝水煎液对二甲苯致小鼠耳廓肿胀的影响
(n = 10,珋x ± s)
组别
给药剂量
/(g·Kg -1)
肿胀度
/(mg)
肿胀抑制率
/(%)
生理盐水组 - 23. 09 ± 1. 16 -
小叶丁香高剂量组 10 9. 43 ± 0. 51** 59. 51
小叶丁香中剂量组 5 5. 29 ± 0. 43* 34. 35
小叶丁香低剂量组 2. 5 20. 43 ± 0. 54 12. 28
地塞米松组 3. 6 × 10 -3 5. 14 ± 0. 46** 77. 93
注:与生理盐水组比较 * P < 0. 05,**P < 0. 01.
3. 3 小叶丁香茎枝水煎液对甲醛致小鼠足肿胀的
影响
实验结果表明:与生理盐水组比较,小叶丁香茎
枝水煎液低、中、高剂量组均可以抑制甲醛所致小鼠
足肿胀,较地塞米松组弱;其中,小叶丁香茎枝水煎
液中、高剂量组差异极显著 (P < 0. 01) ,小叶丁香
茎枝水煎液低剂量组与生理盐水组比较无显著性差
·65·
异(P > 0. 05). 结果见表 2.
表 2 小叶丁香茎枝水煎液对甲醛致小鼠足肿胀的影响
(n = 10,珋x ± s)
组别
给药剂量
/(g·Kg -1)
肿胀度
/(mg)
肿胀抑制率
/(%)
生理盐水组 - 91. 43 ± 0. 15 -
小叶丁香高剂量组 10 29. 00 ± 1. 24** 68. 28
小叶丁香中剂量组 5 54. 71 ± 1. 29** 40. 16
小叶丁香低剂量组 2. 5 83. 14 ± 1. 13 9. 10
地塞米松组 3. 6 × 10 -3 24. 00 ± 1. 30** 73. 75
注:与生理盐水组比较 * P < 0. 05,**P < 0. 01.
3. 4 小叶丁香茎枝水煎液对冰醋酸致小鼠腹腔毛
细血管渗出的影响
实验结果表明:与生理盐水组比较,小叶丁香茎
枝水煎液低、中、高剂量组均可以抑制冰醋酸所致小
鼠腹腔毛细血管渗出,较地塞米松组弱;其中,小叶
丁香 茎 枝 水 煎 液 高、中 剂 量 组 差 异 极 显 著
(P < 0. 01) ,小叶丁香茎枝水煎液低剂量组无显
著性差异(P > 0. 05). 结果见表 3.
表 3 小叶丁香茎枝水煎液对冰醋酸所致小鼠腹腔毛细血管
通透性的影响(n = 10,珋x ± s)
组别
给药剂量
/(g·Kg - 1 )
光吸收值
生理盐水组 - 0. 281 ± 0. 091
小叶丁香高剂量组 10 0. 069 ± 0. 041**
小叶丁香中剂量组 5 0. 128 ± 0. 051**
小叶丁香低剂量组 2. 5 0. 217 ± 0. 062
地塞米松组 3. 6 × 10 -3 0. 082 ± 0. 078**
注:与生理盐水组比较 * P < 0. 05,**P < 0. 01.
4 讨论
炎症是机体活组织对各种损伤因子所发生的以
防御为主的反应,是临床常见的病理过程之一,因此
抗炎药物研究具有重要的临床意义. 组织引起炎症
的原因有多种,但其基本病理变化都包括变质、渗出
和增生三项.一般来说,炎症早期主要表现是毛细血
管扩张、通透性增强、渗出和水肿.
毛细血管是最细的,也是数量最多的一类血管.
在我们全身组织内,广泛分布着毛细血管网,以确保
每个细胞都有充分的血液供应. 皮肤毛细血管通透
性实验是抗炎药物筛选的常用方法之一. 本实验用
二甲苯、甲醛、冰醋酸作为致炎因子,观察了小叶丁
香茎枝水煎液对炎症早期实验性渗出、肿胀的影响.
研究结果表明,小叶丁香茎枝水煎液对二甲苯引起
的小鼠耳廓肿胀、甲醛引起的小鼠足跖肿胀和冰醋
酸所致小鼠腹腔毛细血管通透性增强均有显著的抑
制作用,并有一定的剂量依赖性.
综上所述,小叶丁香茎枝水煎液具有一定的抗
炎作用.其作用机理与减少毛细血管通透性、减少渗
出有关,尚待进行进一步研究.
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(责任编辑:陈衍峰)
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