全 文 ：西北农业学报　２０１２，２１（４）：１７２－１７５
Ａｃｔａ　Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｅ　Ｂｏｒｅａｌｉ－ｏｃｃｉｄｅｎｔａｌｉｓ　Ｓｉｎｉｃａ
瑞香狼毒根际疣孢青霉菌ＹＬ－５２次生代谢产物的研究
＊
张　琦１，孙艺方２，常振国２，周　乐１
（１．西北农林科技大学 理学院，陕西杨凌　７１２１００；２．西北农林科技大学 生命科学学院，陕西杨凌　７１２１００）
摘　要：旨在了解瑞香狼毒根际疣孢青霉菌ＹＬ－５２（Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓｕｍ ＹＬ－５２）次生代谢产物的组成
和结构。利用溶剂萃取、反复硅胶柱层析分离和Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱层析纯化等方法从发酵液中分离出化合
物，并采用ＩＲ、ＥＳＩ－ＭＳ、１　Ｈ　ＮＭＲ、１３　Ｃ　ＮＭＲ和ＤＥＰＴ等方法综合完成结构的分析鉴定。从发酵液乙酸乙酯
部分中分离出５个化合物，化合物２和化合物３分别被鉴定为熊果酸和扁枝衣二酸，并首次证明瑞香狼毒根
际微生物－疣孢青霉菌发酵液中存在熊果酸和扁枝衣二酸。
关键词：瑞香狼毒；疣孢青霉菌ＹＬ－５２；次生代谢产物；微生物
中图分类号：Ｑ９３６　　　　文献标志码：Ａ　　　　　文章编号：１００４－１３８９（２０１２）０４－０１７２－０４
Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ　Ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ｏｆ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓｕｍ
ＹＬ－５２Ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　Ｒｈｉｚｏｓｐｈｅｒｅ　ｏｆ　Ｓｔｅｌｌｅｒａ　ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ
ＺＨＡＮＧ　Ｑｉ　１，ＳＵＮ　Ｙｉｆａｎｇ２，ＣＨＡＮＧ　Ｚｈｅｎｇｕｏ２　ａｎｄ　ＺＨＯＵ　Ｌｅ１
（１．Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｓｃｉｅｎｃｅ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ　Ｓｈａａｎｘｉ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ；
２．Ｎｏｒｔｈｗｅｓｔ　Ａ＆Ｆ　Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ　Ｃｏｌｅｇｅ　ｏｆ　Ｌｉｆｅ　Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｙａｎｇｌｉｎｇ　Ｓｈａａｎｘｉ　７１２１００，Ｃｈｉｎａ）
Ａｂｓｔｒａｃｔ：Ｔｏ　ｓｔｕｄｙ　ｔｈｅ　ｃｏｎｓｔｉｔｕｅｎｔｓ　ａｎｄ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ　ｏｆ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏ－
ｓｕｍ ＹＬ－５２．Ｔｈｅ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗａｓ　ｉｓｏｌａｔｅｄ　ｂｙ　ｅｘｔｒａｃｔｉｏｎ，ｓｉｌｉｃａ　ｇｅｌ　ａｎｄ　Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０ｃｏｌｕｍｎ　ｃｈｒｏ－
ｍａｔｏｇｒａｐｈｙ．Ｔｈｅｉｒ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｗｅｒｅ　ｅｌｕｃｉｄａｔｅｄ　ｂｙ　ＩＲ，ＥＳＩ－ＭＳ，１　Ｈ　ＮＭＲ，１３Ｃ　ＮＭＲ　ａｎｄ　ＤＥＰＴ．Ｆｉｖｅ
ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｗｅｒｅ　ｏｂｔａｉｎｅｄ　ｆｒｏｍ　ｔｈｅ　ｅｔｈｙｌ　ａｃｅｔａｔｅ，ｏｆ　ｗｈｉｃｈ　２ａｎｄ　３ｗｅｒｅ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ａｓ　Ｕｒｓｏｌｉｃ　ａｃｉｄ　ａｎｄ
Ｅｖｅｒｎｉｃ　ａｃｉｄ．Ｔｈｅ　ｔｗｏ　ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ　ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｕｒｓｏｌｉｃ　ａｃｉｄ（２）ａｎｄ　ｅｖｅｒｎｉｃ　ａｃｉｄ（３）ｗｅｒｅ　ｂｏｔｈ　ｆｉｒｓｔｌｙ
ｆｏｕｎｄ　ｉｎ　ｔｈｅ　ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ　ｌｉｑｕｉｄ　ｏｆ　Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓｕｍ．
Ｋｅｙ　ｗｏｒｄｓ：Ｓｔｅｌｌｅｒａ　ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ；Ｐｅｎｉｃｉｌｌｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓｕｍ ＹＬ－５２；Ｓｅｃｏｎｄａｒｙ　ｍｅｔａｂｏｌｉｔｅ；Ｍｉｃｒｏｏｒ－
ｇａｎｉｓｍｓ
　　根际微生物是指聚居在植物根表面１ｍｍ以
内的土壤并以根际分泌物为主要营养源的微生物
类群，植物与其根际微生物之间具有共生关系。
植物根际分泌物的种类和组成影响根际微生物的
数量和种群结构［１］，而根际微生物的代谢物质反
过来影响植物的生长。近几十年来的研究表明，
微生物已成为人们发现小分子生物活性物质和新
天然化合物的重要生物源。微生物次生代谢产物
的研究也因此成为天然产物化学研究的重要领
域。到目前为止，这一领域的研究主要集中在植
物内生菌和海洋微生物的次生代谢产物方面，关
于植物根际微生物及其次生代谢产物的研究还非
常少。
瑞香狼毒（Ｓｔｅｌｌｅｒａ　ｃｈａｍａｅｊａｓｍｅ　Ｌ．）是瑞香
科狼毒属植物，别名狼毒、断肠草等，其根是传统
中药。关于瑞香狼毒根的化学成分及其生物活性
研究已有很多报道［２－７］，但关于其根际微生物及其
次生代谢产物的研究尚属空白。瑞香狼毒的根有
大毒，其根际土壤具有异株克生作用［８］。据此推
断，瑞香狼毒根际可能存在特殊的微生态环境和
＊ 收稿日期：２０１１－０５－０３　　修回日期：２０１１－０６－０５
基金项目：国家自然科学基金（３０５７１４０２，３１０００８６５）。
第一作者：张　琦，女，在读硕士，研究方向为天然产物活性物质与构效关系。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈａｎｇｑｉ－ｓｍｉｌｅ０９１４＠１６３．ｃｏｍ
通讯作者：周　乐，男，教授，博导，主要从事天然产物化学和有机合成的教学与研究。Ｅ－ｍａｉｌ：ｚｈｏｕｌｅｃｈｅｍ＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
特殊的生物活性代谢物质。基于这种考虑，杨利
珍等［９］对瑞香狼毒根际的微生物进行分离鉴定，
并从中发现１株对其他细菌和真菌均有较高抑制
活性的真菌，即疣孢青霉菌 ＹＬ－５２。本试验旨在
了解疣孢青霉菌ＹＬ－５２的次生代谢产物，为进一
步研究其抗菌活性成分鉴定基础。
１　材料与方法
１．１　材 料
发酵菌株从生长于陕西太白山的瑞香狼毒根
际分离得到，经西北农林科技大学生命科学学院
秦宝福副教授鉴定为疣孢青霉菌 ＹＬ－５２（Ｐｅｎｉ－
ｃｉｌｌｉｕｍ　ｖｅｒｒｕｃｕｌｏｓｕｍ ＹＬ－５２）。
１．２　仪 器
ＷＦＨ－２０３三用紫外分析仪，ＬＳ－Ｂ　５０Ｌ型立
式压力蒸汽灭菌器，ＤＨ６０００Ａ型电热恒温培养
箱，ＣＨＡ－Ｓ型恒温振荡培养箱，ＸＴ－４双目显微熔
点测定仪，ＢＲＵＫＥＲ　ＡＶＡＮＣＥ－ＩＩＩ－５００型超导核
磁共振仪，ＬＣＭＳ－２０１０质谱仪，Ｔｈｅｒｍｏ　Ｆｉｓｈｅｒ傅
立叶红外光谱仪 （ＫＢｒ压片）。
１．３　试 剂
乙酸乙酯、正丁醇等化学试剂均为分析纯，柱
层析硅胶和薄层层析硅胶（青岛海洋化工厂生
产），Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０（Ｗａｌｔｍａｎ公司），大孔吸附
树脂Ｄ１０１（天津农药股份有限公司），琼脂、葡萄
糖（均为国产试剂）。
１．４　方 法
１．４．１　培养基的制作　固体和液体ＰＤＡ培养
基参照文献［１０］的方法配制。
１．４．２　菌种的活化　将固体斜面保藏的ＹＬ－５２
菌株转接至固体ＰＤＡ培养基上，每个平板接种
３处，呈正三角形分布。置２８℃恒温培养箱活化
培养２ｄ。
１．４．３　菌悬液的制备　将活化好的菌种打成菌
饼 （ｄ＝０．７ｃｍ）接入经高温湿热灭菌的ＰＤＡ液
体培养基。每２５０ｍＬ的三角瓶装１００ｍＬ液体
ＰＤＡ，每瓶接菌饼２个，然后置恒温振荡培养箱，
２８℃、１５０ｒ／ｍｉｎ培养２ｄ。
１．４．４　ＹＬ－５２液体发酵培养　在超净工作台上
用灭菌的带刻度的试管取菌悬液３～５ｍＬ，转至
湿热灭菌的ＰＤＡ液体培养基，置恒温振荡培养
箱，培养条件同“１．４．３”，发酵８ｄ，共得发酵液
８０Ｌ。
１．４．５　发酵液的提取分离　将发酵液减压滤去
菌丝体，依次采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇对滤
液分别进行萃取。每种溶剂连续萃取３次，每次
萃取溶剂的用量为滤液体积的１／３。分别对３种
溶剂萃取液和萃取后的滤液减压浓缩至干，得石
油醚萃取物（１２．５ｇ）、乙酸乙酯萃取物（１８．０ｇ）、
正丁醇萃取物（２５．２ｇ）和水溶物（３０．４ｇ）。
对乙酸乙酯萃取物 （１８．０ｇ）进行硅胶柱层
析（ｄ＝８５ｍｍ、ｈ＝６００ｍｍ，１００～２００目硅胶
８５０ｇ），用氯仿－甲醇混合液［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲醇）
＝５０∶１、２５∶１、１０∶１、５∶１，各梯度约５～６Ｌ］
按极性递增的顺序进行洗脱。分步收集各梯度洗
脱液并分别减压蒸除溶剂，依次得Ａ１、Ａ２、Ａ３和
Ａ４洗脱物。
硅胶薄层显示，Ａ１和Ａ２在λ＝３６５ｎｍ下均
有明显的蓝色斑点，故将二者合并，记为 Ｂ
（３．０ｇ）。对 Ｂ 进 行 二 次 硅 胶 柱 层 析 （ｄ＝
３５ｍｍ、ｈ＝４００ｍｍ，２００～３００目硅胶６５ｇ），用
石油醚－丙酮混合液［Ｖ（石油醚）∶Ｖ（丙酮）＝
２５∶１、１０∶１、５∶１，各梯度约２．５Ｌ］按极性递
增的顺序进行洗脱。分步收集各梯度洗脱液并分
别减压蒸除溶剂，依次得Ｂ１、Ｂ２和Ｂ３洗脱物。
以石油醚－丙酮［Ｖ（石油醚）∶Ｖ（丙酮）＝５∶１］为
展开剂，得化合物１（３０ｍｇ）。对Ｂ２中在λ＝３６５
ｎｍ呈蓝色斑点的化合物进行再次硅胶柱层析分
离，对Ｂ１中在λ＝３６５ｎｍ呈蓝色斑点化合物进
行硅胶制备薄层层析分离，以石油醚－乙酸乙酯混
合液［Ｖ（石油醚）∶Ｖ（乙酸乙酯）＝１０∶１、８∶１、
５∶１、２∶１、１∶１，各梯度约０．５Ｌ］按极性递增的
顺序进行洗脱，合并含有目标化合物的流份并减
压蒸除溶剂，得化合物２（４０ｍｇ）。Ａ３进行硅胶
柱层析，用石油醚－乙酸乙酯［Ｖ（石油醚）∶Ｖ（乙
酸乙酯）＝２０∶１、１０∶１、５∶１、２∶１、１∶１，各梯
度约２Ｌ］进行梯度洗脱，分步收集各流份。其
中，石油醚－乙酸乙酯［Ｖ（石油醚）∶Ｖ（乙酸乙酯）
＝１∶１］流份中富含在λ＝２５４ｎｍ下呈暗红色斑
点的物质，将其合并后蒸除溶剂。残留物再反复
进行硅胶柱层析，氯仿－甲醇［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲醇）
＝５０∶１～１０∶１，各梯度约１．５Ｌ］洗脱。最后，
再用Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱层析对目标化合物进行
纯化，氯仿－甲醇［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲醇）＝１∶１，约
０．５Ｌ］洗脱，得到化合物３（１２ｍｇ）。采用类似
方法，对 Ａ４进行反复硅胶柱层析分离，氯仿－甲
醇［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲醇）＝２５∶１～１∶１，各梯度
约１．５Ｌ］梯度洗脱，得富含目标化合物的部分
·３７１·４期　　　　　　　　张　琦等：瑞香狼毒根际疣孢青霉菌ＹＬ－５２次生代谢产物的研究
Ａ４－５。对Ａ４－５采用硅胶制备薄层层析，以氯仿－
甲醇［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲醇）＝５∶１］进行分离，分
别得富含化合物４的 Ａ４－５－１和富含化合物５的
Ａ４－５－２两个部分。最后，用Ｓｅｐｈａｄｅｘ　ＬＨ－２０柱
层析分别对 Ａ４－５－１和 Ａ４－５－２进行纯化（甲醇洗
脱），得到纯化合物４（６ｍｇ）和５（１７ｍｇ）。
２　结果与分析
２．１　化合物２和３的理化性质与结构鉴定
化合物２为白色粉末，熔点２６５～２６７℃，使
φ＝５％的硫酸－乙醇显紫红色。Ｎｅｇａｔｉｖｅ　ＥＳＩ－ＭＳ
（ｍ／ｚ）显示负离子峰４５５．５２［Ｍ－Ｈ］－，表明相对
分子质量为４５６。ＩＲ（ＫＢｒ，ｃｍ－１，表明分子中有
羟基（ν３　４２３），甲基（ν２　９２７、２　８７１、１　３７８、
１　３８８），羰基（ν１　６９７）。１３　Ｃ　ＮＭＲ谱显示，分子含
有３０个碳，其中有１个羰基碳（δＣ１７９．７）、２个双
键碳（δＣ１３９．０，１２５．４）、１个连氧的ｓｐ３ 杂化碳
（δＣ７７．９）和２６个不连杂原子的ｓｐ３ 杂化碳。
ＤＥＰＴ谱显示，分子含有７个ＣＨ３、９个ＣＨ２、７个
ＣＨ 和７个季碳原子。综合 ＭＳ、１３　Ｃ　ＮＭＲ 和
ＤＥＰＴ的分析结果，判断化合物２可能为五环三
萜类化合物（图１）；１　Ｈ　ＮＭＲ显示分子中存在１
个烯烃质子［δ５．４８，（１Ｈ，ｔ）］和１个连氧的饱和
碳质子［５．４８（１Ｈ，ｔ，３．０）］。以上分析表明，化
合物２可能是齐敦果烷或乌苏烷型五环三萜。进
一步与文献数据比对，显示化合物２与熊果酸
（Ｕｒｓｏｌｉｃ　ａｃｉｄ）［１１－１２］核磁数据完全一致，因此化合
物２被鉴定为熊果酸。
化合物３为白色粉末，熔点１４０～１４２℃，在
λ＝２５４ｎｍ下为暗红色斑点。Ｎｅｇａｔｉｖｅ　ＥＳＩ－ＭＳ
（ｍ／ｚ）显示准分子离子峰为３３０．９６［Ｍ－Ｈ］－，表
明相对分子质量为３３２。１３Ｃ　ＮＭＲ（１２５ＭＨｚ，ａｃ－
ｅｔｏｎｅ－ｄ６）显示在δ为９５～１７０ｐｐｍ时存在１４个
ｓｐ２ 杂 化 碳，其 中 ２ 个 为 羰 基 碳 （δ１６９．４，
１７２．８），其余１２个碳表明化合物３中含有２个苯
环。基于２个苯环的碳信号呈现成对分布的特
征，表明分子具有较高的对称性。羰基碳的化学
位移值表明其为酸或酯类。此外，１３　Ｃ　ＮＭＲ谱显
示分子中存在１个甲氧基（δ５５．０）和２个甲基（δ
２３．４，２３．１），ＤＥＰＴ谱进一步显示分子中还存在
４个连质子的芳环碳，即＝ＣＨ。１　Ｈ　ＮＭＲ （５００
ＭＨｚ，ａｃｅｔｏｎｅ－ｄ６）显示４个芳环质子均为单峰
［δ６．７８（１Ｈ，ｓ），６．７４（１Ｈ，ｓ），６．４６（１Ｈ，ｓ），
６．４０（１Ｈ，ｓ）］，表明芳环质子互处于间位或对
位。δＨ２．６５（３Ｈ，ｓ）和δＨ２．６３（３Ｈ，ｓ）表明２
个甲基可能连接于芳环上。根据δＣ１５０～１６６
ｐｐｍ存在４个ｓｐ２ 杂化碳信号，表明芳环上连有
４个羟基或烃氧基。综合以上分析，化合物３可
能是２个４取代的芳香酸形成的酯（图 １）。
ＭＳ、１　Ｈ　ＮＭＲ和１３　Ｃ　ＮＭＲ认定化合物３分子式
为Ｃ１７Ｈ１６Ｏ７。进一步与类似化合物的波谱数据进
行比对，证明化合物３与扁枝衣二酸 （Ｅｖｅｒｎｉｃ
ａｃｉｄ）［１３］的核磁数据完全一致。因此，化合物３
被鉴定为扁枝衣二酸。
　　化合物２为白色粉末，熔点 ２６５～２６７ ℃
（ＣＨＣｌ３／ＭｅＯＨ）。ＩＲ（ＫＢｒ）νｍａｘ：３　４２３，２　９２７，
２　８７１，１　６９７，１　４５８，１　３７８，１　３８８，１　０２８，９９７
ｃｍ－１。Ｎｅｇａｔｉｖｅ　ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：４５５．５２［Ｍ－
Ｈ］－１。１　Ｈ　ＮＭＲ （５００ ＭＨｚ，Ｐｙ－ｄ５）δ：１．０５
（３Ｈ，ｓ，Ｃ－２３），１．０２（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３－２４），１．２２
（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３－２５），０．８９（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３－２６），１．２４
（３Ｈ，ｓ，ＣＨ３－２７），０．９５（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ，
Ｃ　Ｈ３－２９），０．９９（３Ｈ，ｄ，Ｊ＝６．３Ｈｚ　６．５，ＣＨ３－
３０），３．４５（１Ｈ，ｄｄ，１０．０，６．０，Ｈ－３），５．４８
（１Ｈ，ｔ，３．０，Ｈ－１２）。１３Ｃ　ＮＭＲ（１２５Ｈｚ，Ｐｙ－ｄ５）
δ：１７９．７（Ｃ－２８），１３９．０（Ｃ－１３），１２５．４（Ｃ－１２），
７７．９（Ｃ－３），５５．６ （Ｃ－５），５３．３（Ｃ－１８），４７．８
（Ｃ－１７），４７．８（Ｃ－９），４２．３（Ｃ－１４），３９．８（Ｃ－８），３９．３
（Ｃ－１９），３９．２（Ｃ－２０），３９．２（Ｃ－１），３８．９（Ｃ－４），３７．２
（Ｃ－２２），３７．１（Ｃ－１０），３３．４（Ｃ－７），３０．９（Ｃ－２１），２８．６
图１　化合物２和３的结构
Ｆｉｇ．１　Ｔｈｅ　ｓｔｒｕｃｔｕｒｅｓ　ｏｆ　ｃｏｍｐｏｕｎｄ　２ａｎｄ　３
·４７１· 西　北　农　业　学　报　　　　　　　　　　　　　　　　　　２１卷
（Ｃ－１５），２８．５（Ｃ－２３），２７．９（Ｃ－２），２４．７（Ｃ－１６），
２３．７（Ｃ－２７），２３．４（Ｃ－１１），２１．２（Ｃ－２９），１８．６（Ｃ－６），
１７．３（Ｃ－２６），１７．２（Ｃ－３０），１６．４（Ｃ－２４），１５．５（Ｃ－２５）。
化合物３为白色粉末，熔点１４０～１４２℃（丙
酮）。Ｎｅｇａｔｉｖｅ　ＥＳＩ－ＭＳ　ｍ／ｚ：３３０．９６ ［Ｍ－
Ｈ］－。１　Ｈ　ＮＭＲ（５００ＭＨｚ，ａｃｅｔｏｎｅ－ｄ６）δ：６．７８
（１Ｈ，ｓ，Ｈ－３′），６．７４（１Ｈ，ｓ，Ｈ－５′），６．４６（１Ｈ，
ｓ，Ｈ－３），６．４０（１Ｈ，ｓ，Ｈ－５），３．８７（３Ｈ，ｓ，
Ｈ－９），２．６５（３Ｈ，ｓ，Ｈ－８′），２．６３（３Ｈ，ｓ，Ｈ－８），
１．２９（３Ｈ，ｓ，ＯＨ）。１３　Ｃ　ＮＭＲ （１２５ＭＨｚ，ａｃｅ－
ｔｏｎｅ－ｄ６）δ：δ２３．１（Ｃ－８），２３．４（Ｃ－８′），５５．１（Ｃ－９），
９８．８（Ｃ－３），１０４．８（Ｃ－３′），１０８．４（Ｃ－５），１１１．２
（Ｃ－１），１１１．２（Ｃ－１′），１１６．２（Ｃ－５′），１４３．４（Ｃ－６′），
１４３．７（Ｃ－６），１５３．９（Ｃ－４′），１６４．２（Ｃ－２′），１６４．９（Ｃ－
２），１６５．６（Ｃ－４），１６９．４（Ｃ－７），１７２．８（Ｃ－７′）。
２．２　化合物１、４、５的理化性质
化合物１易溶于氯仿、丙酮和乙酸乙酯，为淡
膏状物并伴有颗粒，在可见光下显蓝色荧光，使φ
＝５％的硫酸－乙醇显草绿色。Ｒｆ＝０．４１［Ｖ（石油
醚）∶Ｖ（乙酸乙酯）＝１０∶１］，Ｒｆ＝０．３１［Ｖ（石油
醚）∶Ｖ（丙酮）＝２０∶１］。在两种展开体系中均
呈单一斑点。
化合物４易溶于甲醇和丙酮，为黄色油状物
质，在λ＝３６５ｎｍ下呈棕色。Ｒｆ＝０．５６［Ｖ（氯仿）
∶Ｖ（甲醇）＝２∶１］，Ｒｆ＝０．３７［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲
醇）∶Ｖ（水）＝３∶１∶０．１］。在两种展开体系中
均呈单一斑点。
化合物５易溶于甲醇和二甲基亚砜（ＤＭ－
ＳＯ），为白色固体，在λ＝２５４ｎｍ下呈黑色斑点。
Ｒｆ＝０．５３［Ｖ（氯仿）∶Ｖ（甲醇）∶Ｖ（水）＝１∶１∶
０．１］，Ｒｆ＝０．６７［Ｖ（正丁醇）∶Ｖ（醋酸）∶Ｖ（水）
＝４∶１∶１］。在２种展开体系中均呈单一斑点。
３　讨 论
熊果酸是天然三萜类化合物，主要存在于木
犀科植物女贞、蔷薇科植物枇杷和杜鹃花科植物
熊果的叶中，在其他植物和青霉菌提取物［１４］中也
有发现。扁枝衣二酸属于地衣酸类，常见于地衣
绿槽枝衣［１５］和短柄五加［１６］等生物体。熊果酸具
有抗炎、抗菌、抗病毒［１７－１９］、降血脂［２０］、抗促癌［２１］
等多种生物活性，扁枝衣二酸对多种革兰氏阳性
细菌具抗菌活性，特别对结核杆菌有高度的抑制
活性，在国外医疗中已被作为地衣抗菌素“ＥＶｏ－
ｓｉｎ　Ｉ”的活性成分之一而得到应用。基于前人对
熊果酸和扁枝衣二酸抗菌活性的报道，可以肯定
二者在瑞香狼毒根际疣孢青霉菌 ＹＬ－５２发酵液
的抗菌活性方面具有重要作用。关于化合物１、
化合物４、化合物５，由于其谱图复杂，目前尚无法
确定其准确结构。
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·５７１·４期　　　　　　　　张　琦等：瑞香狼毒根际疣孢青霉菌ＹＬ－５２次生代谢产物的研究