全 文 ：·药品检验· 中国医药导报 2015 年 5 月第 12 卷第 15 期
CHINA MEDICAL HERALD Vol. 12 No. 15 May 2015
中药茺蔚子又名益母草子，为唇形科植物益母草
Leonurus japonicus Houtt.的干燥成熟果实。 药材多秋
季果实成熟时采割地上部分，晒干，打下果实，除去杂
质。该中药首载于《神农本草经》，味辛、苦，性微寒。归
心包、肝经，具有活血调经、清肝明目的功能。 生茺蔚
子长于清肝明目，用于目赤肿痛或目生翳膜[1-2]。
茺蔚子中含有益母草宁碱、水苏碱及脂肪油，油中
主要成分为油酸及亚麻酸，另含维生素 A样物质，其中
盐酸水苏碱是含量较高、活性较强的单体生物碱 [3-5]，
2010 年版《中国药典》对茺蔚子中盐酸水苏碱含量进
行规定来评价药材质量[6]，本文对其提取方法、色谱条
件进行优化，采用蒸发光散射检测器进行测定。 本试
验以吉林省 10 个不同产地的中药茺蔚子为研究对
象， 采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定其
盐酸水苏碱的含量，建立了可靠稳定、重复性好的含
量测定方法，为更方便、简单、有效地控制中药茺蔚子
的质量提供了科学依据，为适应国际市场，我国的中
药企业应制订相应的规范化质量标准。
1 仪器与试药
LC-10ATvP 型高效液相色谱仪（日本岛津），蒸发
光散射检测器（上海分析仪器有限公司），空气压缩泵
（天津市分析仪器厂），超声波提取器（上海分析仪器
有限公司），85-2A 数显测速恒温磁力搅拌器（金坛市
荣华仪器制造有限公司），80-2 型电动离心机 （江苏
金坛讪金国胜实验仪器），百万分之一电子天平，十万
分之一电子天平，超纯水系统，水为超纯水，磷酸、乙
腈为色谱纯，乙醇。
10批茺蔚子药材采自吉林省各产地药材[7-9]，均经
长春中医药大学姜大成教授鉴定为真品，盐酸水苏碱
对照品（批号：110710-201310）规格为 20 mg，购买于
高效液相色谱- 蒸发光散射检测器法
测定中药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量
张彦飞 李智萌 蔡广知 刘凤臣 贡济宇 高文义
长春中医药大学，吉林长春 130117
[摘要] 目的 建立中药茺蔚子中盐酸水苏碱的高效液相色谱-蒸发光散射检测器测定方法。 方法 Asahipak NH2P
50 4E 色谱柱（4.6 mm × 250 mm），流动相为乙腈-0.2%磷酸溶液（84∶16），体积流量 1 mL/min，柱温 30℃。 结果
盐酸水苏碱在 0.487～4.383 μg 范围内线性关系良好，r = 0.9999，平均回收率为 97.96%，RSD 为 0.92%。 结论 该
法灵敏度高，专属性强，可作为中药茺蔚子中盐酸水苏碱的定量测定方法。
[关键词] 茺蔚子；盐酸水苏碱；高效液相色谱-蒸发光散射检测器法
[中图分类号] R284.1 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2015）05（c）-0124-04
Content determination of the hydrochloric acid stachydrine in Mother-
wort Fruit by HPLC-ELSD
ZHANG Yanfei LI Zhimeng CAI Guangzhi LIU Fengchen GONG Jiyu GAO Wenyi
Changchun University of TCM, Jilin Province, Changchun 130117, China
[Abstract] Objective To establish HPLC-ELSD determination method of the hydrochloric acid stachydrine in Mother-
wort Fruit. Methods The separation by HPLC-ELSD was performed on Asahipak NH2P 50 4E column (4.6 mm × 250 mm)
with acetonitrile-0.2% phosphoric acid solution (84 ∶16) as mobile phase, 1 mL/min of flow rate and 30℃ of column
temperature. Results Hydrochloric acid stachydrine at 0.487-4.383 μg had good linear relationship, r = 0.9999, the av-
erage recovery was 97.96%, RSD was 0.92%. Conclusion The method is sensitive, specific, it can be used as quantita-
tive determination method of the hydrochloric acid stachydrine in Motherwort Fruit.
[Key words] Motherwort Fruit; Hydrochloric acid stachydrine; HPLC-ELSD
[基金项目 ] 吉林省教育厅 “十二五” 科学技术研究项目
（2013108）。
[作者简介] 张彦飞（1987-），女，长春中医药大学 2013 级药
物分析专业在读硕士研究生。
[通讯作者] 贡济宇（1960-），女，硕士，教授，长春中医药大
学药学院副院长，从事药物分析研究；高文义（1977-），男，
硕士，教授，长春中医药大学学工部部长，从事中药的鉴定
及质量分析研究。
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中国医药导报 2015 年 5月第 12卷第 15期 ·药品检验·
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中国药品生物制品检定所。
2 方法与结果
2.1 盐酸水苏碱对照品溶液的制备
取盐酸水苏碱对照品，精密称 4.87 mg，完全转入
10 mL 棕色容量瓶中， 先加一定量 70%乙醇溶解，待
溶解完全后，定容至刻度，充分摇匀，即得（每毫升含
盐酸水苏碱对照品 0.487 mg）。
2.2 试验供试品溶液的制备
取研磨后的茺蔚子粉末过四号筛，取过筛后的药
材粉末约 0.25 g，精密称定后记录其准确重量，完全
转入干燥后的 50 mL 具塞锥形瓶中， 精密加入 70%
乙醇 25 mL，加塞，精密称定重量，记录，置入超声提
取器中处理（频率 40 kHz，功率 250 W）30 min，待完
全放冷后，再精密称定其重量，使用 70%乙醇补足与
第一次称量相比减少的重量，充分摇匀，置入漏斗中
滤过，弃除滤液，精密取一定量续滤液，70%乙醇定容
后即为供试品溶液[10-14]。
2.3 试验色谱条件
以氨基键合聚合物为填充剂（色谱柱型号：Asahipak
NH2P-50 4E 4.6 mm × 250 mm）；以乙腈-0.2%磷酸溶
液（84∶16）为流动相，体积流量 1 mL/min，柱温 30℃；
蒸发光散射检测器，该色谱条件下茺蔚子中盐酸水苏
碱峰的分离度＞1.5，拖尾因子在 0.95～1.05。 见图 1。
时间（min）
时间（min）
A：对照品色谱图；B：供试品色谱图
图 1 盐酸水苏碱的高效液相-蒸发光散射检测器色谱图
2.4 方法学考察
2.4.1 线性关系 分别精密吸取“2.1”项下盐酸水苏碱
对照品溶液 1、3、5、7、9 μL 进入相应液相色谱仪，分
别记录相应峰面积值，横坐标为进样量（μg）取对数后
的值，纵坐标为峰面积积分值取对数后的值[15-18]，制作
标准曲线见图 2。 相应的回归方程为 Y = 1.5503X +
2.1495，r = 0.9999， 盐酸水苏碱线性范围为 0.487～
4.383 μg，进样量的对数与峰面积的对数之间有良好
的线性关系。
图 2 盐酸水苏碱的标准曲线
2.4.2 精密度试验 分别精密吸取已处理的供试品溶
液及盐酸水苏碱对照品溶液各 5 mL注入液相色谱仪，
分别连续进样 6次，按照上述色谱条件进行测定其峰
面积，计算其相应的峰面积积分值可知，对照品溶液
和供试品溶液 RSD 值分别为 1.59%、2.99%， 表明该
试验的使用仪器、方法的精密度良好。
2.4.3 重复性试验 精密称取已过筛的吉林通化茺蔚
子药材粉末，按照“2.2”项下供试品溶液制备的方法
进行处理，平行制备 6份，依法独立测定，按上述色谱
条件测定峰面积，计算茺蔚子药材中盐酸水苏碱的含
量，考察试验方法的重复性，测定其盐酸水苏碱含量
的结果 RSD 为 1.67%，平均含量为 34.33 mg/g，表明
该试验方法具备良好的重复性，结果见表 1。
表 1 重复性试验（n=6）
2.4.4 稳定性试验 每隔一定时间， 分别精密吸取已
处理吉林通化的茺蔚子药材供试品溶液和对照品溶
液各 5 μL 注入液相色谱仪，按照上述色谱条件测定
其峰面积值。 考察其稳定性结果显示：在 24 h 内，测
定对照品溶液和供试品溶液峰面积结果的 RSD 分
别为 1.84%、2.26%， 表明盐酸水苏碱具有良好稳定
性，保证了其在 24 h 内测定结果准确可靠。
峰
面
积
对
数
进样量对数（μg）
m
AU
m
AU
1
2
3
4
5
6
34.90
33.92
33.51
34.11
34.93
34.58
34.33 1.67
序号 含量（mg/g） 平均含量（mg/g） RSD（%）
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·药品检验· 中国医药导报 2015 年 5 月第 12 卷第 15 期
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2.4.5 加样回收率试验 精密称取吉林通化茺蔚子药
材样品，按照供试品制备项下方法处理，选择以吉林
省不同产地中的吉林通化茺蔚子药材进行试验，平行
制备 6 份，且已测定其盐酸水苏碱的含量，向 6 份供
试品中分别适量精密加入对照品 [18-19]，按照上述色谱
条件进行测定，计算吉林通化茺蔚子药材中的盐酸水
苏碱加样回收率，经测定，计算其盐酸水苏碱平均加
样回收率为 97.96%，RSD 值为 0.92%，结果显示试验
方法具有良好的准确度。 结果见表 2。
表 2 加样回收率试验结果（n=6）
2.5 不同产地茺蔚子的含量测定
取吉林省不同产地的茺蔚子药材，依照“2.2”项
下供试品的制备方法制备不同产地的供试品溶液，每
批平行 2份，供试品溶液进样 5 mL，将“2.1”项下对照
品溶液精密吸取 1、5 mL进样， 分别记录相关的峰面
积，采用外标两点法对数方程[20-22]，计算吉林省不同产
地样品中盐酸水苏碱含量，试验结果见表 3。
表 3 吉林省不同产地茺蔚子中盐酸水苏碱的含量测定结果（mg/g）
3 讨论
本试验考察了茺蔚子前处理方法中相关提取有
机溶剂——乙醇的不同浓度及其不同倍数的用量，并
参考药典和相关文献选择超声和连续回流提取两种
方法进行前处理；测定其盐酸水苏碱相关的色谱条件
包括色谱柱的柱温、 流动相比例和不同色谱柱型号
等，分别对其试验参数进行考察优化。 最终确定最佳
前处理条件为采用 70%乙醇超声提取 30 min 作为茺
蔚子药材中盐酸水苏碱的提取条件。以氨基键合聚合
物为填充剂（色谱柱型号：Asahipak NH2P-50 4E，4.6 mm
× 250 mm）；乙腈-0.2%磷酸溶液（84∶16）为流动相作
为检测的色谱条件。
采用高效液相色谱-蒸发光散射检测器法测定中
药茺蔚子中盐酸水苏碱的含量 [6]，对所产茺蔚子药材
的吉林省不同地区测定其中盐酸水苏碱的含量，结果
显示，吉林省不同地区的茺蔚子药材，盐酸水苏碱的
含量存在较大差异，含量为 29.32～38.99 mg/g，可能受
其地理位置和环境的影响较大，大多数地区所产药材
能够达到《中国药典》要求。
中药茺蔚子曾记载具有清肝明目、活血调经等功
效，在我国属于常用的传统中草药之一。 目前在临床
中的应用，主要为治疗产后子宫出血、复位不全、月经
不调、月经过多、子宫脱垂及肾炎水肿等妇科疾病；除
此之外，研究表明，其还可很好用于治疗面部肌肉痉
挛、原发性高血压、偏头痛、眩晕（高血压所致）、慢性
鼻副窦炎、突发性耳聋及眼科等疾病的辅助治疗。 但
是茺蔚子及其炮制品至今还没有一个完善的质量标
准体系。现在国内以茺蔚子及其炮制品为中药原料药
的生产、经营企业，正在向完善茺蔚子的质量标准体
系相关方面努力和工作。 总的来说，中药原料药质量
规范跟不上市场需求和产业规模的发展，以茺蔚子为
原料的生产商和经销商之间、企业与企业之间、国家
与国家之间的相关产品等尚存很多缺乏共识的技术
标准和产品质量标准， 给生产经营带来极大的障碍，
同时也给产业发展提出了挑战。中药现代化的“瓶颈”
为中药质量标准水平的提高，因此中药茺蔚子炮制工
艺及其质量标准的规范化，将是其产业走向国际化的
重要保证。 中药材规范化质量标准的发展和产生，是
培育新兴产业和中药现代化的需要，是中药走向国际
市场的需要，为适应国际市场，我国的中药企业应制
订相关规范化的质量标准。
本文使用的提取方法明显简化了盐酸水苏碱的
提取过程，其与原标准（《中国药典》2010 版）比较，样
品的前处理操作明显简化，分别采用两种前处理方法
处理，并对其盐酸水苏碱进行含量测定，试验结果表
明，两者的结果相对一致。 本文的超声前处理方法与
回流相比，大大缩短了有效成分的提取时间，并且减
少了有机试剂的用量， 试验操作起来更简单方便，能
更快完成试验。
试验中采用乙腈∶0.2%磷酸溶液=84∶16为流动相，
以氨基键合聚合物为填充剂（色谱柱型号：AsahipakNH2P-
1
2
3
4
5
6
0.1374
0.1332
0.1327
0.1463
0.1330
0.1440
4.879
4.730
4.712
5.195
4.723
5.113
5.41
5.55
5.61
5.98
5.26
5.69
10.124
10.186
10.246
11.134
9.813
10.677
96.9
98.3
98.6
99.3
96.8
97.8
97.96 0.92
序号
称样量
（g）
盐酸水苏碱
含量（mg）
加入量
（mg）
测得量
（mg）
回收率
（%）
平均
回收率（%）
RSD
（%）
吉林通化
吉林桦甸
吉林伊通
吉林敦化
吉林蛟河
吉林集安
吉林磐石
吉林双阳
吉林辽源
吉林四平
31.32
28.99
28.61
32.01
36.11
39.52
39.53
33.85
35.31
34.76
30.87
31.52
30.02
31.58
36.79
38.46
38.20
32.65
35.70
34.33
31.09
30.25
29.32
31.80
36.45
38.99
38.86
33.25
35.51
34.54
吉林省不同产地
盐酸水苏碱
含量 1
盐酸水苏碱
含量 2
盐酸水苏碱
平均含量
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50 4E 4.6 mm × 250 mm），与原标准相比，其基线噪
声低，重现性好，且理论塔板数和分离度均符合要求，
能够满足定量要求，故选择氨基键合聚合物为填充剂
测定茺蔚子及其炮制品中盐酸水苏碱的含量。
综上所述， 本文建立的高效液相色谱-蒸发光散
射检测器法可作为茺蔚子药材质量评价的快速检测
方法，与 2010年版《中国药典》相比，优势在于简化了
样品的前处理过程， 试验的检测方法基线噪声低，重
现性好，灵敏度高，专属性强，能够满足定量要求，为
茺蔚子药材质量控制提供了参考依据。
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（收稿日期：2015-01-07 本文编辑：李亚聪）
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