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华泽兰清热解毒作用研究



全 文 :有不同程度毒性,可引起骨髓抑制、免疫功能减退等不
良反应[14]。研究结果显示,箬叶多糖联合 CTX 使用,
可以降低 CTX产生免疫抑制作用,恢复机体的免疫功
能,降低化学治疗带来的不良反应,有增效减毒作用。
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DOI 10. 3870 /yydb. 2013. 05. 010
华泽兰清热解毒作用研究
蒋毅萍,徐江平,黄芳
(南方医科大学药学院药理系,广州 510515)
摘 要 目的 研究华泽兰清热解毒作用。方法 通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀、糖皮质激素诱导小鼠免疫功能低
下、干酵母致大鼠发热等实验,研究华泽兰的清热解毒作用。结果 华泽兰可抑制二甲苯所致小鼠耳廓肿胀,并随剂量
的增加作用增强;华泽兰能提高糖皮质激素诱导的免疫功能低下小鼠的免疫功能,且华泽兰 1 g·kg-1 药效作用显著;华
泽兰 1. 5 g·kg-1 能对抗干酵母所致大鼠发热。结论 华泽兰具有清热解毒作用。
关键词 华泽兰;抗炎;清热解毒
中图分类号 R286;R965 文献标识码 A 文章编号 1004-0781(2013)05-0589-04
Heat-clearing And Detoxifying Effects of Eupatorium chinense L.
JIANG Yi-ping,XU Jiang-ping,HUANG Fang (Department of Pharmacology,School of Pharmaceutical
Sciences,Southern Medical University,Guangzhou 510515,China)
ABSTRACT Objective To preliminary study the antipyretic and detoxifying effect of Eupatorium chinense L. Methods
The antipyretic and detoxifying effects of Eupatorium chinense L. were demonstrated through experiments on auricle swelling
induced by xylene in mice,immune insufficientcy induced by glucocorticoid in mice and fever induced by dry yeast in rats .
Results Eupatorium chinense L. inhibited ear swelling and the effect enhanced with the dose;Eupatorium Chinese L. improved
the immune function in immunosuppressed mice and reduced the fever in rats,especially for which at the dose of 1 g·kg-1;
Eupatorium Chinese L. 1. 5 g· kg-1 relieved fever induced by dried yeast. Conclusion Eupatorium chinense L. presents
antipyretic and detoxifying function.
KEY WORDS Eupatorium chinense L.;Anti-inflammatory;Heat clearing and detoxication
华泽兰别名广东土牛膝[1]、大泽兰、六月雪,为菊
科泽兰属,是多年生草本植物,民间多用于白喉[2]、扁
桃体炎、咽喉炎、感冒发热、麻疹、痈疖肿毒等的治疗。
华泽兰作为菊科泽兰属植物,在中国植物图谱数据库
收录为有毒植物,其毒性为全草有毒。近年来,有研究
报道华泽兰具有抗菌、抗炎、抗氧化、抗肿瘤等活
·985·医药导报 2013 年 5 月第 32 卷第 5 期
性[3],但其有毒成分可导致肝损伤[4]。笔者在本实验
考察华泽兰的清热解毒作用,以期为华泽兰的应用提
供理论依据。
1 材料与方法
1. 1 动物 昆明种小鼠,清洁级,体质量 18 ~ 22 g,雌
雄各半,合格证号:SCXK(粤)2011-0015。SD 雄性大
鼠,清洁级,体质量 180 ~ 220 g,合格证号:SCXK(粤)
2011-0023。小鼠和大鼠均由南方医科大学实验动物
中心提供。
自购进实验室当天起,每天定量供给混合饲料和充
足饮水,在安静、通风、清洁环境下分笼饲养,环境温度
22 ~25 ℃,相对湿度 50% ~60%,饲养 3 d,待动物适应
环境后选择状态良好,行动、活动无异常者进行实验。
1. 2 仪器 UV8500 型紫外分光光度计(上海天美科
学仪器有限公司) ,玻璃毛细管(北京亦庄红星医疗器
械有限公司) ,电子天平(上海恒平科学仪器有限公
司) ,微量注射器,7 mm 打孔器,小鼠电子天平(上海
恒平科学仪器有限公司)。水银玻璃体温计。
1. 3 试药 阿司匹林(美化生物公司,批号:
20111128) ,华泽兰[采自浙江金华地区,准确称取华
泽兰茎叶 344 g,中草药粉碎机磨成粉后入不锈钢锅,
煎煮前用纯化水浸泡 1 h,第一次加入 6 倍量水
(约 2 000 mL) ,煮沸后转为小火煮 30 min,收集水煎
液,纱布过滤药液(或用筛网过滤)。再加入 4 倍量水
(约 1 000 mL) ,浸泡 30 min,大火煮沸后转为小火
煮 30 min。收集水煎液,用纱布过滤药液。合并两次
水煎液,旋转蒸发器将药液浓缩成 282 mL,即每毫升
药液相当于华泽兰生药 4 g。4 ℃贮存,临用前以纯化
水稀释至所需浓度],二甲苯(广东光华化学厂有限公
司,批号:20060908) ,氢化可的松(天津金耀氨基酸有
限公司,批号:20111021) ,印度墨汁(北京中西化玻仪
器有限公司,批号:080822) ,干酵母(广东梅山-马利酵
母有限公司,批号:0890。精确称取干酵母,灭菌 0.
9%氯化钠溶液配制成 20%活性干酵母溶液,使用当
天配制) ,液体石蜡。
1. 4 对二甲苯致小鼠耳廓炎症的影响[5] 昆明种小
鼠 50 只,清洁级,体质量 18 ~ 22 g,随机分为 5 组,每
组 10 只,雌雄各半:模型组和华泽兰 100,200,300,
收稿日期 2012-08-14 修回日期 2012-09-22
作者简介 蒋毅萍(1972-) ,女,湖南永州人,高级实验师,
在读 硕 士,主 要 从 事 药 物 炎 性 研 究。电 话:020 -
61648235,E-mail:jiangyp77@ 163. com。
通讯作者 徐江平(1967-) ,男,湖北武汉人,博士生导师,
主要从事神经药理学研究。
400 mg·kg-1 组。模型组灌胃给予 0. 9%氯化钠溶
液,其他各组灌胃给予相应药物。0. 1 mL·(10 g)-1,
连续灌胃 7 d,每天 1 次。于末次给药 1 h 后将二甲
苯 0. 06 mL涂于小鼠右侧耳廓,左侧作为对照。0. 5 h
后处死小鼠,沿耳廓基线剪下双耳,用直径 7 mm 打孔
器打下左右耳同一部位圆片,分析天平称质量,以耳廓
肿胀率及肿胀抑制率表示药物的抗炎作用。
1. 5 对免疫低下小鼠非特异性免疫功能的影响 昆
明种雄性小鼠 50 只,随机分为正常组、模型组、华泽兰
3,2,1 g·kg-1 组。
正常组和模型组小鼠均灌胃给予 0. 9%氯化钠溶
液,华 泽 兰 各 剂 量 组 灌 胃 给 予 华 泽 兰。
均 0. 1 mL·(10 g)-1,连续 7 d。除正常组外,其他组
灌胃 时 皮 下 注 射 氢 化 可 的 松,50 mg · kg-1
[0. 1 mL·(10 g)-1],每天 1 次,连续 6 d。末次给药
后 0. 5 h 小鼠尾静脉注射 20% 印度墨汁,5 μL·
g-1,1 min(t1)和 5 min(t5)后分别自眼眶静脉取血 20
μL,加入 1 g·L-1 碳酸钠(Na2CO3)溶液 2 mL 中摇
匀,分光光度计在 680 nm 波长处测定 t1 和 t5 吸光度
值(A1,A5) ,计算廓清指数(K)。处死小鼠后称肝脏、
脾脏质量,计算吞噬指数(α)。K =(logA1 -logA5)/(t5
-t1)= log(A1 /A5)/4,α =体质量 /肝脾质量×K
1 /3[6]。
1. 6 对大鼠的解热作用 雄性 SD 大鼠 35 只,实验
前 3 d置于实验环境模拟实验操作(包括捉拿、固定、
安放温度计)以使其适应实验条件,每天测体温 3 次,
第 4 天开始正式实验。
正式实验:固定大鼠,将涂有液体石蜡的水银体温
计缓慢插入大鼠直肠 4 cm,记录 3 min 后体
温。30 min内测体温 3 次,以平均值为基础体温,弃去
温差 > 0. 3 ℃ 大鼠。大鼠背部皮下注射 20% 干酵
母,10 mL·kg-1。每 0. 5 h记录体温 1次,第 5小时淘汰
体温升高不足 0. 6 ℃大鼠(5只)。将剩余大鼠平均分为
5组,每组 6只:正常组、模型组、0. 3 g·kg-1 阿司匹林组、
1. 5 g·kg-1 华泽兰组、0. 5 g·kg-1 华泽兰组。除正常组
和模型组灌胃给予 0. 9%氯化钠溶液外,其他各组均灌胃
相应药物,10 mL·kg-1。每 0. 5 h 测体温 1 次,并记录
给药后 1,2,3,4 h 体温,计算给药后各时间点体温与
最高发热(给药后 5 h)体温差值[7-8]。
1. 7 统计学方法 实验数据采用 SPSS13. 0 统计软件
处理,以均数±标准差(x±s)表示,one-way ANOVA 检
验,组间多项数据比较采用单因素方差分析,P<0. 05
为差异有统计学意义。
2 结果
2. 1 对小鼠耳廓炎症的影响 见表 1。实验结果表
·095· Herald of Medicine Vol. 32 No. 5 May 2013
明,不同剂量华泽兰均能降低二甲苯所致小鼠耳廓肿胀
度。与模型组比较,华泽兰各剂量组耳廓肿胀度均差异
有统计学意义,且华泽兰抗炎作用随剂量增大而增强。
2. 2 对免疫低下小鼠非特异性免疫功能的影响 见表
2。小鼠经尾静脉注射印度墨汁后免疫功能下降,对异
物的排毒、吞噬作用减弱。模型组小鼠免疫力降低,与
正常组比较,t1、t5A 值均偏大,差异有统计学意义(P
<0. 01)。华泽兰不同剂量组小鼠 t1、t5A 值均接近正常
组,提示不同剂量华泽兰均可增强小鼠免疫力,显著提高
碳粒 κ和 α,与模型组比较,差异有统计学意义。华泽兰
1. 0 g·kg-1 提高免疫力低下小鼠免疫力作用最强。
2. 3 华泽兰对大鼠的解热作用 见表 3。与正常组
比较,模型组给药后体温升高,差异有统计学意义。正
常组体温随时间变化差异无统计学意义。与模型组比
较,0. 3 g· kg-1 阿司匹林组体温下降显著,华泽
兰 1. 5 g·kg-1 组体温亦显著下降,差异有统计学意义。
表 1 5 组小鼠耳廓炎症实验结果
Tab. 1 The results of the 5 groups of mice in auricle swelling test mg,x±s
组别
小鼠 /

耳片质量
左耳 右耳
肿胀度
肿胀抑制率 /
%
华泽兰
400 mg·kg-1 组 10 3. 79±0. 44 7. 03±1. 18* 1 3. 24±1. 08* 1 56. 16
300 mg·kg-1 组 10 3. 96±0. 38 8. 93±1. 08* 1 4. 96±0. 92* 1 32. 05
200 mg·kg-1 组 10 4. 20±0. 34 9. 69±1. 12* 2 5. 49±1. 21* 1 24. 79
100 mg·kg-1 组 10 4. 06±0. 45 10. 26±1. 13 6. 20±0. 91* 2 15. 06
模型组 10 3. 96±0. 40 11. 26±0. 69 7. 30±0. 73
与模型组比较,* 1P<0. 01,* 2P<0. 05
Compared with model group,* 1P<0. 01,* 2P<0. 05
表 2 5 组小鼠不同时间免疫功能测定结果
Tab. 2 A values of the 5 groups of mice in immune function test at different time points x±s
组别 小鼠 /只
A值
t1 t5
K α
华泽兰
3. 0 g·kg-1 组 10 0. 36±0. 035* 1 0. 27±0. 034* 1 0. 035±0. 009 6. 6±1. 2* 2
2. 0 g·kg-1 组 10 0. 28±0. 049* 1 0. 21±0. 043* 1 0. 035±0. 007 6. 6±1. 0* 2
1. 0 g·kg-1 组 10 0. 28±0. 037* 1 0. 20±0. 019* 1 0. 042±0. 009* 2 7. 2±0. 6* 2
模型组 10 0. 45±0. 049* 3 0. 34±0. 052* 3 0. 028±0. 005* 3 5. 0±0. 9* 3
正常组 10 0. 23±0. 028 0. 15±0. 028 0. 054±0. 009 7. 8±0. 9
与模型组比较,* 1P<0. 05,* 2P<0. 01;与正常组比较,* 3P<0. 01
Compared with model group,* 1P<0. 05,* 2P<0. 01;compared with normal group,* 3P<0. 01
表 3 5 组大鼠不同时间体温测定结果
Tab. 3 The body temperature of the 5 groups of mice at different time points ℃,x±s
组别 基础体温
造模 5 h后
体温
给药后体温变化
1 h 2 h 3 h 4 h
华泽兰
1. 5 g·kg-1 组 38. 2±0. 1 39. 8±0. 2 -0. 03±0. 2* 1 -0. 40±0. 3* 1 -0. 60±0. 4* 1 -0. 72±0. 4* 1
0. 5 g·kg-1 组 38. 3±0. 2 39. 7±0. 5 -0. 02±0. 5* 1 -0. 10±0. 5* 1 0. 03±0. 7* 1 0. 00±0. 8* 1
0. 3 g·kg-1 阿司匹林组 38. 2±0. 3 39. 0±0. 5 -0. 43±0. 4* 1 -0. 80±0. 8* 1 -0. 83±1. 1* 1 -0. 80±0. 5* 1
模型组 38. 2±0. 2 39. 8±0. 4 1. 10±0. 6* 2 1. 07±0. 5* 2 0. 85±0. 4* 2 0. 87±0. 6* 2
正常组 38. 4±0. 2 38. 2±0. 1 0. 17±0. 2 0. 15±0. 1 0. 17±0. 2 0. 18±0. 1
与模型组比较,* 1P<0. 01;与正常组比较,* 2P<0. 01
Compared with model group,* 1P<0. 01;compared with normal group,* 2P<0. 01
·195·医药导报 2013 年 5 月第 32 卷第 5 期
干酵母发热模型能持续发热 9 h,9 h 后体温缓慢
下降,但降温幅度小;阿司匹林 0. 3 g·kg-1 解热效果
明显,华泽兰 1. 5 g·kg-1 从给药后第 2 小时发挥解热
作用,作用持久。华泽兰 0. 5 g·kg-1 解热作用减弱,
维持时间短暂。见图 1。
图 1 4 组大鼠给药后体温变化情况
Fig. 1 The antipyretic effect of Eupatorium chinense L.
on yeast-induced febrile in rats
3 讨论
炎症早期,血管受到刺激,血管内皮间隙扩大,血
管壁通透性增强,白细胞和蛋白质等渗出到组织间隙,
造成组织肿胀[7]。实验结果表明,华泽兰各剂量组均
能降低二甲苯所致小鼠耳廓肿胀度,400 mg·kg-1 华
泽兰作用最强。
糖皮质激素诱导的免疫低下小鼠非特异性免疫功
能低下,实验结果证明,不同剂量华泽兰均可增强小鼠
免疫力,显著提高碳粒 κ和 α。其中 1 g·kg-1 华泽兰
提高小鼠免疫力作用最强。
笔者以干酵母建立发热模型,主要原因是酵母所
致的发热是因注射部位的局部溃烂而引发的剧烈炎症
反应,能较好地模拟病理状态下发热。另外,动物全身
表现与临床伴有明显的内脏或皮肤炎症的里热证类
似,更适合考察清热药的解热作用[8-9]。与模型组比
较,0. 3 g·kg-1 阿司匹林和 1. 5 g·kg-1 华泽兰解热
药效明显,阿司匹林组体温最后接近正常体温。
1. 5 g·kg-1 华泽兰从给药后第 2 小时发挥较强的
解热作用,并且作用持久。而 0. 5 g·kg-1 华泽兰解热
作用弱,时间短。华泽兰解热作用的最佳剂量有待进
一步研究。
本研究从抗炎、增强免疫、解热等方面证明了华泽
兰属于药性寒凉的清热药,为华泽兰的应用提供了新
的理论依据。
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·295· Herald of Medicine Vol. 32 No. 5 May 2013