全 文 :·86 · 天 津 师 范 大 学 学 报 (自然科学版) 2012年10月
文章编号:1671-1114(2012)04-0086-07
珍珠柴提取物对甜菜夜蛾的生物活性研究
张晓丽,刘 强
(天津师范大学a.生命科学学院,b.天津市细胞遗传与分子调控重点实验室,天津300387)
摘 要:以珍珠柴的6种溶剂提取物对甜菜夜蛾进行生物活性的测定.结果显示,珍珠柴提取物对甜菜夜蛾有显
著的拒食活性和产卵忌避活性.丙酮提取物、乙醇提取物及甲醇提取物在质量浓度200.00g/L时,48h的选择性
拒食率均高达100.00%;乙酸乙酯提取物在质量浓度200.00g/L时,24h的选择性产卵忌避率最高,达到
96.53%,丙酮提取物和乙醇提取物的选择性产卵忌避率也较高,能够达到95.89%和93.58%;6种溶剂提取物
的触杀作用和杀卵作用都不明显,几乎没有胃毒活性.
关键词:珍珠柴;植物源杀虫剂;甜菜夜蛾;生物活性
中图分类号:S435.663 文献标志码:A
Studies on bioactivity of extracts fromSalsola passerinato Laphygma exigua
ZHANG Xiao-li,LIU Qiang
(a.Colege of Life Science,b.Tianjin Key Laboratory of Cyto-Genetical and Molecular Regulation,
Tianjin Normal University,Tianjin 300387,China)
Abstract:Different concentrations of 6kinds of crude extracts fromSalsola passerina Bunge were selected for bioas-
say of action on Laphygma exigua.The results showed that,the extracts fromS.passerina showed evident an-
tifeedant effect and inhibiting oviposition effect on L.exigua.When the concentration of the acetone extract,etha-
nol extract,methanol extract was 200.00g/L,the antifeedant rate on L.exiguain choice tests was 100%in 48
hours.When the concentration of the ether acetate extract was 200.00g/L,the oviposition deterrent rate in choice
tests in 24hours was the highest,reached 96.53%.Oviposition deterrent rates of the acetone extract and ethanol
extract in choice tests were higher,reached 95.89%and 93.58%,respectively.Al the 6kinds of extracts had no
evident activity on contact toxic action or ovicidal action of L.exigua,had no stomach poison activity.
Key words:Salsola passerina Bunge;botanical insecticide;Laphygma exigua;bioactivity
收稿日期:2011-05-03
基金项目:国家自然科学基金项目资助项目(30570344);天津市自然科学基金资助项目(09JCYBJC14500)
第一作者:张晓丽(1985-),女,硕士研究生.
通信作者:刘 强(1953-),男,教授,主要从事生态学与保护生态学方面的研究.
珍珠柴(Salsola passerina Bunge)隶属于藜科
猪毛菜属,主要分布于亚洲中部的荒漠区,在我国
境内分布于内蒙古、宁夏、甘肃及新疆等地区,国
外主要生长于蒙古和俄罗斯[1-2].以往有关珍珠柴
的研究主要包括形态学[3-4]、生理生态学[5]、细胞
代谢[6]、种子萌发特征[7]、种群和群落生态学[8]等
方面.任芳等[9]曾测定过珍珠柴对小菜蛾、家蝇、
植物线虫和植物病原菌的生物活性.
甜菜夜蛾是一种世界性分布、间歇性大发生的
以危害蔬菜为主的杂食性害虫,本文采用珍珠柴的
6种溶剂提取物对甜菜夜蛾进行拒食、产卵忌避、
触杀、杀卵及胃毒生物活性的测定,为进一步利用
珍珠柴资源、开发安全可靠的植物源农药提供
依据.
1 材料和方法
1.1 实验材料
甜菜夜蛾(Laphygma exigua)为南开大学生
测站提供的实验室饲养5a的敏感型种群,在实验
室采用赵国营等[10]改进的甜菜夜蛾人工饲料配方
进行扩繁继代,饲养后用于实验.珍珠柴采自内蒙
古乌海市,自然条件下阴干,粉碎成植物粉末,于
第32卷 第4期
2012年10月
天 津 师 范 大 学 学 报 (自然科学版)
Journal of Tianjin Normal University Natural Science Edition)
Vol.32No.4
Oct.2012
第32卷 第4期 张晓丽,等:珍珠柴提取物对甜菜夜蛾的生物活性研究 ·87 ·
阴暗、干燥处存放备用.提取溶剂甲醇、乙醇、乙
酸乙酯、二氯甲烷和丙酮等均为分析纯(天津基准
化学试剂有限公司).旋转蒸发仪 RE-52AA
40725产自上海亚荣生化仪器厂.
1.2 珍珠柴提取物制备
分别采用水煮法[11]和有机溶剂冷浸法[11]制备
珍珠柴提取物.实验时用相应溶剂配制成5个质量
浓度(200.00、150.00、100.00、50.00、25.00g/
L)的药液.
水煮法:称取珍珠柴茎叶混合粉末300g,加
600mL水,置于砂锅中煎煮1h,用纱布滤去浮
渣,将滤液集中后继续在砂锅中加热,直至成粘稠
膏状.趁热将煮膏倒入干净的罐头瓶中,迅速封好
瓶盖,冷却后置于4℃冰箱内保存.
有机溶剂冷浸法:称取珍珠柴茎叶混合粉末
100g,置于棕色瓶中,分别加入5种有机溶剂(无
水甲醇、无水乙醇、丙酮、乙酸乙酯、二氯甲烷)各
500mL.将棕色瓶置于室温、避光处,隔一定时间
摇晃棕色瓶.浸泡20d后,将提取液抽真空过滤并
用旋转蒸发仪将有机溶剂蒸发,得到膏状物或油状
物.用钢勺抠出圆底瓶中的提取物,放在玻璃小瓶
中保存于4℃冰箱内备用.
1.3 生物活性测定
1.3.1 产卵忌避作用测定
选择性产卵忌避实验:将无农药残留的甘蓝叶
片剪成10cm×10cm 的正方形.每种提取物设
5个处理浓度,每个浓度分为处理组和对照组,以
相应溶剂处理的甘蓝叶片为对照.每组取2块叶
片,分别在供试药液和相应溶剂中浸渍10s后取
出,待其溶剂挥发后,对照组与处理组以十字交叉
法粘贴在容积为2.5L的饲养缸内壁上.非选择性
产卵忌避实验是在一个饲养缸内以十字交叉法粘贴
4片经相同药液处理的甘蓝叶片,以相应溶剂处理
的4片甘蓝叶片为对照,放入另一个饲养缸内.
每一个饲养缸内接入当天羽化的甜菜夜蛾成虫
10对.每个处理设3个重复,每隔24h检查各叶
片上的落卵量,观察2d,按式(1)和(2)分别计算
选择性实验和非选择性实验的产卵忌避率.
选择性产卵忌避率(%)=
对照组落卵量-处理组落卵量
对照组落卵量+处理组落卵量×100%
(1)
非选择性产卵忌避率(%)=
对照组落卵量-处理组落卵量
对照组落卵量 ×100% (2)
1.3.2 杀卵作用测定
浸卵法:将各溶剂提取物配制成5种浓度,把
在产卵纸上产下12h的卵各30粒分别放入不同药
液中浸渍10s取出,置于吸水纸上,待药液溶剂挥
发后放入直径为12cm的培养皿中,以清水(或相
应的有机溶剂)处理作对照,每个培养皿内铺湿润
的滤纸保湿.到卵孵化期时,加入新鲜的人工饲料
供孵化的幼虫取食.每个处理浓度重复3次.每隔
24h记录卵孵化数,观察2d,并按式(3)计算校正
孵化率.
校正孵化率(%)=
对照组孵化率-处理组孵化率
1-对照组孵化率 ×100%
(3)
1.3.3 触杀作用测定
微量点滴法:将各种溶剂提取物用相应的有机
溶剂配成系列浓度,选取甜菜夜蛾3龄幼虫,用微
量移液器在每个供试虫体上滴加50μL药液.待药
液溶剂挥发后,将虫体放入铺有滤纸的直径为
12cm的培养皿中继续用人工饲料饲养.对照组虫
体上滴加等量溶剂.每组处理设3个重复,每个重
复用30头幼虫.饲养24h和48h后检查结果,记
录死亡虫体数,分别计算死亡率及校正死亡率.
1.3.4 胃毒作用测定
夹毒叶碟法:将无农药残留的甘蓝叶用打孔器
做成直径1.6cm的圆形叶蝶,将处理组叶碟在被
测药液中浸渍10s后取出,待溶剂挥发后,夹在两
片直径相同的未经处理的叶蝶之间做成夹毒叶碟.
用夹毒叶碟饲喂饥饿4h后的甜菜夜蛾3龄幼虫,以
相应溶剂作为对照,每个处理30头幼虫,重复3次.
然后置于培养箱内继续饲养,分别在24h和48h后
统计死亡率.
1.3.5 拒食作用测定
选择性实验:不同浓度的每种提取物设处理组
和对照组(以相应的溶剂为对照),每组浸泡叶蝶
(同1.3.4制作)10枚,浸泡10s后取出,待溶剂挥
发后备用.在直径12cm、底部铺有滤纸的培养皿
中交错排列放入处理叶碟和对照叶碟各10枚.非
选择性实验是在同上培养皿中放入处理组叶碟10
枚,在另外相同培养皿中放入对照组叶蝶10枚.然
后接入已饥饿4h的甜菜夜蛾幼虫30头,每个处理
重复3次.置于人工气候箱内饲养.24h和48h后
用坐标纸测量取食叶面积,按式(4)和(5)分别计算
选择性拒食率和非选择性拒食率.
·88 · 天 津 师 范 大 学 学 报 (自然科学版) 2012年10月
选择性拒食率(%)=
对照组取食叶面积-处理组取食叶面积
对照组取食叶面积+处理组取食叶面积×100%
(4)
非选择性拒食率(%)=
对照组取食叶面积-处理组取食叶面积
对照组取食叶面积 ×100%
(5)
1.4 数据处理
用Excel软件统计数据并作图,利用SPSS软
件进行差异性显著分析.
2 结果与分析
2.1 产卵忌避作用
珍珠柴不同溶剂的提取物对甜菜夜蛾的产卵忌
避作用如表1所示.
表1 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾的产卵忌避作用
Tab.1 Effect of 6kinds of crude extracts on oviposition deterrent rates of L.exigua
提取物
药液质量浓度/
(g/L)
产卵忌避率/%
选择性试验 非选择性试验
24h 48h 24h 48h
水 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
80.72±1.78a
71.72±1.21b
67.67±4.74c
51.18±1.09d
44.50±0.50e
47.64±0.51a
40.30±0.64b
35.02±1.52bc
30.43±0.66c
21.79±1.56d
77.79±1.42a
71.95±0.56b
64.27±0.49c
58.15±0.15cd
54.72±0.93d
55.72±0.87a
51.81±0.69ab
49.34±0.58b
43.75±0.86c
38.89±0.65d
甲醇 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
87.46±3.37a
81.69±0.95b
73.72±0.69c
65.60±0.72d
60.32±0.67e
60.40±0.63a
52.02±1.59b
46.96±0.45bc
40.79±0.86c
29.21±1.26d
82.78±0.67a
71.63±1.04b
61.94±1.92bc
58.46±0.47c
45.58±0.65d
63.06±0.11a
56.79±0.86b
49.01±0.78c
42.84±0.80d
32.95±0.56e
乙醇 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
93.58±1.06a
87.44±0.92b
84.40±1.39bc
80.95±0.18c
72.14±1.08d
78.89±0.96a
67.75±0.46b
60.63±0.93c
49.51±1.13d
43.53±1.20e
91.84±1.82a
84.58±0.60b
75.73±0.83c
69.67±1.41cd
63.90±0.12d
75.77±0.45a
57.36±1.21b
51.54±1.28c
41.41±1.17d
34.18±0.33e
丙酮 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
95.89±1.12a
90.50±0.71b
85.45±0.56bc
80.75±1.36c
61.28±1.05d
77.61±1.41a
60.73±0.52b
50.91±0.90c
40.92±0.41d
31.25±0.81e
91.36±1.09a
83.69±0.49b
73.06±0.08c
68.76±0.91cd
63.29±0.82d
74.99±0.08a
67.88±0.84b
53.50±0.98c
46.81±0.52d
33.66±1.10e
乙酸乙酯 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
96.53±1.34a
91.19±0.89b
86.76±0.37c
74.70±0.68d
60.34±0.69e
45.15±0.99a
38.51±1.65b
33.06±1.33bc
26.33±0.86c
21.27±2.25d
88.14±0.98a
80.43±0.55b
74.74±0.53c
68.17±0.39d
61.96±0.93e
64.46±0.93a
48.56±1.09b
40.91±1.08c
34.44±0.60cd
28.27±1.02d
二氯甲烷 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
78.40±1.28a
62.78±0.62b
55.25±0.96c
39.90±0.73d
28.89±1.32e
41.32±1.11a
29.33±0.78b
23.47±1.73bc
19.55±0.77c
9.95±0.91d
55.16±1.19a
49.01±0.67b
41.63±0.61c
35.65±0.46cd
30.06±0.94d
51.62±0.58a
29.33±0.78b
39.60±0.73c
27.43±0.85d
16.03±0.65e
注:表中相同字母表示同种提取物不同浓度处理得到的产卵忌避率差异不具统计学意义,字母不同表示差异有统计学意义(P<0.05).
第32卷 第4期 张晓丽,等:珍珠柴提取物对甜菜夜蛾的生物活性研究 ·89 ·
从表1可以看出,乙酸乙酯提取物在浓度质量为
200.00g/L时,24h的选择性产卵忌避率最高达
96.53%;其次,丙酮提取物和乙醇提取物的选择性
产卵忌避率较好,达到95.89%和93.58%;其余4
种提取物在质量浓度200.00g/L时,24h的选择
性产卵忌避率也均在75%以上.6种溶剂提取物在
处理48h后选择性产卵忌避作用都有所下降,乙
醇和丙酮提取物在质量浓度200.00g/L时,选择
性产卵忌避率较好,分别达78.89%和77.61%.二
氯甲烷提取物总体的选择性产卵忌避活性是最差
的,作用48h后供试的5种浓度药液均没有明显的
产卵忌避活性作用.
不同浓度的6种溶剂提取物对甜菜夜蛾均有很
好的选择性产卵忌避作用,其产卵忌避活性大小与
溶液浓度呈正相关,并且随着处理时间的延长,产
卵忌避效果明显降低.
6种溶剂提取物在非选择性产卵忌避实验中,
在质量浓度为200.00g/L时,对甜菜夜蛾的产卵忌
避效果最好的是乙醇提取物和丙酮提取物,处理
24h后的产卵忌避率分别为91.84%和91.36%,
48h后产卵忌避率分别为75.77%和74.99%.其
余4种提取物也均表现出不同程度的非选择性产卵
忌避活性,二氯甲烷提取物的产卵忌避活性是最差
的,在质量浓度为200.00g/L时产卵忌避率仅为
55.16%.6种溶剂提取物的非选择性产卵忌避活
性随着处理时间的延长和浓度的降低呈现减弱趋
势.药液作用48h后,水提取物、甲醇提取物、乙
酸乙酯提取物和二氯甲烷提取物在质量浓度低于
100.00g/L时非选择性产卵忌避率均低于50%,
忌避活性不明显.
2.2 杀卵作用
珍珠柴不同浓度的6种溶剂提取物对甜菜夜蛾
卵孵化率的效果分别如图1和图2所示.处理24h
后,甲醇和乙醇提取物在质量浓度200.00g/L时
杀卵作用较好,孵化率均仅为6.67%.水提取物杀
卵作用较差,孵化率为18.89%.乙酸乙酯和二氯
甲烷提取物在药液质量浓度低于50.00g/L时杀卵
效果不明显.使用各提取物处理48h后杀卵作用
明显下降,在质量浓度200.00g/L时,丙酮提取物
和乙醇提取物杀卵作用较好,孵化率分别为
14.45%和16.67%.处理48h后药液因有的物质
挥发导致浓度降低,当低于100.00g/L时除丙酮
提取物和乙醇提取物外,其余4种提取物的杀卵作
用不明显.总体来看,6种溶剂提取物对甜菜夜蛾
的卵的毒杀作用有明显差异,随着处理时间的延长
和药液浓度的降低,杀卵作用明显下降.
图2 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾卵48h孵化
率的影响
Fig.2 Effects of 6kinds of crude extracts fromS.Pas-
serinaon eggs hatch rate of L.exiguaafter treat-
ment of 48h
图1 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾卵24h孵化率
的影响
Fig.1 Effects of 6kinds of crude extracts fromS.Pas-
serinaon eggs hatch rate of L.exigua 24hafter
treatment
2.3 触杀作用
用6种溶剂提取物对甜菜夜蛾幼虫在24h和
48h后的触杀作用结果见图3和图4.甲醇提取物
和水提取物在质量浓度200.00g/L时触杀活性相
对较好,处理24h后触杀率分别为36.67%和
33.33%,处理48h后触杀活性也明显提高分别达
到54.44%和52.22%.其余4种提取物总体的触
杀活性较差,作用48h后质量浓度低于200.00g/
L时触杀效果均不显著,乙醇提取物的触杀活性最
·90 · 天 津 师 范 大 学 学 报 (自然科学版) 2012年10月
差,致死率仅为16.67%.
图3 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫24h
的触杀作用
Fig.3 Contact toxic activity against 3rd-instar larvae of
L.exiguaafter treatment of 24h
图4 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫48h
的触杀作用
Fig.4 Contact toxic activity against 3rd-instar larvae of
L.exiguaafter treatment of 48h
2.4 胃毒作用
6种溶剂提取物对甜菜夜蛾幼虫几乎没有胃毒
作用,即使是作用效果最明显的丙酮提取物在质量
浓度200.00g/L时,48h的校正死亡率也只有
17.78%.其余5种提取物在5个浓度处理后幼虫
均能正常化蛹、羽化.
2.5 拒食作用
2.5.1 选择性拒食
6种溶剂提取物对甜菜夜蛾幼虫的选择性拒食
活性具有显著差异,结果见表2.
由表2可知,随着药液浓度的降低,拒食率明
显下降.丙酮、甲醇和乙醇提取物的选择性拒食活
性总体效果很好,在浓度200.00g/L时,24h和
48h的选择性拒食率均达到100.00%,其中,丙酮
提取物的拒食活性最好,在质量浓度为150.00g/L
时,24h和48h的选择性拒食率均达到100.00%.
水提取物的选择性拒食活性则随着作用时间的延
长,拒食率均不同程度的上升,乙酸乙酯提取物和
二氯甲烷提取物选择性拒食活性在质量浓度
200.00g/L时效果较好,作用24h的拒食率分别
为89.41%和78.42%,但随着作用时间的延长拒
食活性均有所下降.
表2 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫的
选择性拒食率
Tab.2 Antifeedant effects of 6kinds of crude extracts
on 3rd-instar larvae of L.exiguain choice tests
提取物
药液质量浓
度/(g·L-1)
选择性拒食率/%
24h 48h
水 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
87.31±0.82a
80.25±0.41b
75.99±0.52c
61.74±0.94d
54.36±1.29e
90.67±0.40a
84.22±0.57b
78.90±1.41c
67.67±1.16d
60.44±1.28e
甲醇 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
100.00±0.00a
99.05±0.17a
92.92±0.14b
80.95±0.25c
75.21±0.90d
100.00±0.00a
92.16±1.33b
83.15±2.25c
70.54±0.94d
63.93±1.83e
乙醇 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
100.00±0.00a
98.33±0.64ab
96.34±0.34b
84.92±0.57c
79.36±0.62d
100.00±0.00a
91.34±1.02b
86.24±1.12c
72.57±1.61d
62.62±1.33e
丙酮 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
100.00±0.00a
100.00±0.00a
98.10±0.17ab
89.59±0.68c
83.80±0.71d
100.00±0.00a
100.00±0.00a
92.64±0.69b
83.80±1.48c
79.20±1.57d乙酸乙
酯
200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
89.41±0.81a
78.02±0.60b
70.95±1.39c
61.36±0.93d
54.35±1.76e
79.27±1.17a
64.29±1.36b
52.11±1.46c
40.43±1.27d
31.42±1.35e二氯甲
烷
200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
78.42±1.15a
70.15±0.84b
62.17±1.55c
53.65±0.98d
37.45±1.03e
59.42±0.88a
41.34±0.86b
35.67±0.67c
24.60±1.28d
18.53±0.57e
注:表中数据为平均值±标准误差,同种提取物的同列数据附相同
小写字母者表示经DMRT检验在0.05水平上差异无统计学意义,
反之表示差异有统计学意义.
通过表3对6种提取物选择性拒食作用回归方
程及拒食中浓度(AFC50)分析,在相同处理时间,
丙酮提取物的AFC50值最低,表明其拒食作用最
第32卷 第4期 张晓丽,等:珍珠柴提取物对甜菜夜蛾的生物活性研究 ·91 ·
强,其次是乙醇提取物和二氯甲烷提取物(见表3).
表3 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫的选择性拒食作用回归方程及AFC50
Tab.3 Regression equations and AFC50of antifeedant effects of 6kinds of crude extracts on 3rd-Instar
larvae of L.exiguain choice tests
提取物 处理时间/h 回归方程y=a+bx 相关系数r AFC50/(g·L-1)
水 24
48
y=0.466 1+0.002 1x
y=0.532 8+0.001 9x
0.985
0.993
20.47
18.32
甲醇 24
48
y=0.693 2+0.001 7x
y=0.538 3+0.002 3x
0.966
0.996
12.32
16.80
乙醇 24
48
y=0.753 8+0.001 4x
y=0.545 0+0.002 3x
0.948
0.990
5.68
15.94
丙酮 24
48
y=0.814 6+0.001 1x
y=0.737 9+0.001 5x
0.930
0.969
4.67
7.11
乙酸乙酯 24
48
y=0.447 8+0.002 2x
y=0.176 4+0.003 0x
0.997
0.996
20.14
116.72
二氯甲烷 24
48
y=0.308 4+0.002 5x
y=0.063 6+0.002 5x
0.987
0.979
75.41
181.32
2.5.2 非选择性拒食
6种溶剂提取物对甜菜夜蛾幼虫的非选择性拒
食效果如表4.丙酮提取物的非选择性拒食率在供
试的6种溶剂提取物中是最显著的,在最高质量浓
度200.00g/L时,24h和48h的非选择性拒食率
分别为90.61%和86.10%.乙醇、甲醇和乙酸乙酯
提取物的非选择性拒食率位居其次,在质量浓度
200.00g/L 时,24h 的 拒 食 率 较 好,分 别 为
86.11%、84.32%和83.48%.随着药液作用时间
的延长拒食活性均明显的下降.二氯甲烷提取物总
体的拒食活性较差,在质量浓度200.00g/L时,
48h的非选择性拒食率仅为51.84%.
表4 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫的非选择性拒食率
Tab.4 Antifeedant effects of 6kinds of crude extracts on 3rd-instar larvae of L.exiguain non-choice tests
提取物
药液质量浓
度/(g·L-1)
非选择性拒食率/%
24h 48h
提取物
药液质量浓
度/(g·L-1)
非选择性拒食率/%
24h 48h
水 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
60.09±0.99a
52.30±0.55b
41.96±1.40c
30.79±0.80d
21.73±0.89e
65.16±0.94a
59.37±0.62b
42.88±1.05c
36.85±0.93d
25.84±0.97e
甲醇 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
84.32±1.19a
74.29±0.40b
66.81±1.04c
57.33±1.06d
40.60±0.56e
77.28±1.34a
66.55±0.98b
56.85±0.46c
44.27±1.72d
26.90±1.13e
乙醇 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
86.11±0.91a
76.78±1.13b
71.15±1.15c
62.36±1.38d
45.34±1.18e
81.08±0.79a
73.68±0.81b
60.70±1.20c
54.29±2.03d
36.14±0.83e
丙酮 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
90.61±0.82a
84.16±0.74b
79.38±1.31c
69.40±0.60d
54.44±0.93e
86.10±1.10a
76.35±0.51b
69.64±1.13bc
60.31±0.43c
43.26±2.17d
乙酸乙酯 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
84.48±0.82a
74.38±1.32b
71.32±0.67c
63.44±0.84d
47.32±0.73e
79.79±0.72a
71.18±1.23b
59.13±0.61c
49.75±0.68d
30.25±1.16e
二氯甲烷 200.00
150.00
100.00
50.00
25.00
59.52±0.78a
49.90±0.86b
33.16±1.54c
20.09±1.02d
10.42±0.96e
51.84±1.29a
40.43±1.22b
29.47±0.83c
22.49±1.68d
12.80±0.61e
注:表中数据为平均值±标准误差,同种提取物的同列数据附相同小写字母者表示相互之间的差异不具有统计学意义;不同时,表示具有统计学意义.
同选择性拒食作用一样,通过表5对6种提取
物非选择性拒食作用回归方程及AFC50分析,处理
时间相同时,丙酮提取物的拒食中浓度(AFC50)值
最低,表明其拒食作用最强;其次是乙酸乙酯提取
物和乙醇提取物;二氯甲烷提取物和水提取物的拒
食作用最差.
·92 · 天 津 师 范 大 学 学 报 (自然科学版) 2012年10月
表5 珍珠柴6种溶剂提取物对甜菜夜蛾3龄幼虫的非选择性拒食作用回归方程及AFC50
Tab.5 Regression equations and AFC50of antifeedant effects of 6kinds of crude extracts on 3rd-instar
larvae of L.exiguain non-choice tests
提取物 处理时间/h 回归方程y=a+bx 相关系数r AFC50/(g·L-1)
水 24
48
y=0.119 1+0.002 5x
y=0.156 7+0.002 5x
0.998
0.989
150.67
141.02
甲醇 24
48
y=0.333 5+0.002 6x
y=0.174 6+0.003 1x
0.988
0.993
66.52
102.76
乙醇 24
48
y=0.395 6+0.002 4x
y=0.284 0+0.002 7x
0.980
0.986
52.19
69.87
丙酮 24
48
y=0.494 7+0.002 2x
y=0.366 2+0.002 5x
0.974
0.985
28.63
59.71
乙酸乙酯 24
48
y=0.426 1+0.002 1x
y=0.218 7+0.003 0x
0.971
0.988
50.08
81.52
二氯甲烷 24
48
y=-0.037 9+0.003 2x
y=0.026 0+0.002 4x
0.996
0.997
160.05
196.32
3 讨论与结论
任芳研究了珍珠柴7种溶剂提取物对小菜蛾
的生物活性测定,其结果为珍珠柴对小菜蛾有明显
的拒食活性和产卵忌避活性,触杀作用不显著,没
有胃毒作用[9].从产卵忌避作用的比较来看,在质
量浓度200.00g/L时,乙醇和丙酮提取物处理
24h后,对小菜蛾选择性产卵忌避率均达100%,
对甜菜夜蛾的选择性产卵忌避率分别为93.58%和
95.89%;在质量浓度100.00g/L时,乙醇提取物
对小菜蛾的选择性产卵忌避率为93.15%,对甜菜
夜蛾的选择性产卵忌避率为84.49%.这说明各提
取物在相同浓度和作用时间时对甜菜夜蛾的产卵忌
避作用略小于小菜蛾.拒食作用中,在质量浓度
200.00g/L时,水、甲醇、乙醇和丙酮提取物对小
菜蛾48h选择性拒食率均达100.00%,而水提取
物对甜菜夜蛾选择性拒食率为90.67%,其余3种
溶剂提取物均达100.00%.从触杀作用来看,对甜
菜夜蛾致死率均小于小菜蛾.而对小菜蛾幼虫没有
胃毒作用,对甜菜夜蛾的胃毒实验只有丙酮提取物
在质量浓度200.00g/L时,48h后的校正死亡率
才为17.78%,其余5种提取物的5个浓度处理后
幼虫均能正常化蛹、羽化.关于杀卵作用的研究,
任芳对小菜蛾做了质量浓度为10.00g/L时的杀卵
实验,结果为各提取物对孵化率几乎没有影响;本
实验对甜菜夜蛾做了各提取物5个浓度下的杀卵作
用,结果为在质量浓度200.00g/L时处理24h,甲
醇和乙醇提取物的杀卵作用较好,孵化率均为
6.67%,随着处理时间的延长和药液浓度的降低,杀
卵作用也明显降低.
综上所述,珍珠柴提取物对甜菜夜蛾有显著拒
食活性和产卵忌避活性,触杀作用和杀卵作用不明
显,几乎没有胃毒活性.在触杀和胃毒作用中对甜
菜夜蛾和小菜蛾所表现出的结果差异,可能是由于
甜菜夜蛾的体型显著大于小菜蛾,因此耐药性也略
强于小菜蛾.但是在拒食和产卵忌避作用方面对二
者均表现出明显的活性,由此认为珍珠柴提取物中
含有对鳞翅目昆虫具有拒食活性和产卵忌避活性的
物质,这种物质的化学成分很值得做进一步的分离
提纯和结构鉴定,用它作为拒食剂和产卵忌避剂应
该具有一定的开发利用价值.
参考文献:
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(责任编校 纪翠荣)