全 文 ：园艺学 现代农业科技 2013年第 20期
长柄扁桃 （Amygdalus pedunculata Pall.）具有很高的营
养价值、药用价值及优良的防风固沙性能，长柄扁桃的果仁
在工业方面的应用开发潜力更大 [1]。但是由于自然和人为的
破坏，长柄扁桃的分布面积日趋减少，已被列为二级濒危植
物。长柄扁桃花粉可育性偏低，产种量少，繁殖系数小，移栽
不易成活，繁殖速度慢，人工实生繁殖不能满足对这种濒危
植物的保护需求。生产上亟需发展长柄扁桃组培快繁技术，
以保护长柄扁桃这一珍贵的野生果树资源 [2]。传统组培要求
严格的环境条件，成本较高，而开放式组织培养可简化培养
程序、降低成本 [3]。开放式组织培养是通过在培养基中添加
抑菌剂，使植物组织培养脱离严格无菌的操作环境，不需高
压灭菌和超净工作台，在自然、开放的有菌环境中进行植物
的组织培养。开放式组织培养由于降低了环境要求，减少了
操作环节，在设备、场地、能源等方面都显著降低了成本。研
究长柄扁桃开放组织培养技术，以便实现低成本的长柄扁
桃组培苗规模化和产业化生产。
1 材料与方法
1.1 试验材料
选用长柄扁桃种子的胚为外植体。
1.2 试验方法
1.2.1 培养基的制备。开放式组培的培养基加入蔗糖 30 g/L、
琼脂 8 g/L，pH 值调到 5.8 左右后煮沸，琼脂未凝
固前加入抑菌剂，不经高温高压灭菌，充分搅拌培
养基，定量分装入洁净的三角瓶中。
1.2.2 抑菌剂的筛选 。选取山梨酸钾 、利福平 、
50%多菌灵可湿性粉剂 、75%代森锰锌可湿性粉
剂、青霉素、链霉素、氨苄西林钠、羧苄青霉素、硫
酸庆大霉素 9 种抑菌剂，配制抑菌剂浓度分别为
0、25、50、100、150、200 mg/L 的 MS 培养基。9 种杀
菌剂每个浓度梯度各 12 瓶培养基。在空气中暴露
1 h，封口，放在培养室中培养，每组重复 3 次。每 3
d 观察其生菌状况，记录培养基的污染情况。
1.2.3 外植体消毒。将长柄扁桃种子的外壳去掉，
再用小镊子将种胚取出。按以下流程进行预处理：蒸馏水中
浸泡 24 h→蒸馏水漂洗 3 次→75%酒精漂洗 30 s→0.1%升
汞溶液消毒 9~13 min→无菌水清洗 4~5 次，将胚接种到含
有不同浓度杀菌剂的培养基上。暗处培养 1 周，然后在光下
培养，培养温度为 25~32 ℃，光照强度为 2 000 lx，光照时间
为每天 12~16 h。
1.2.4 采用正交试验设计探索适合抑菌剂的浓度和胚萌发
的培养基。采用 L16（44）正交表设计长柄扁桃开放组培胚萌
发的试验方案，参试因子为培养基（MS、1/2MS、G、QL）、代森
锰锌（5、10、15、20 mg/L）、多菌灵（15、25、35、45 mg/L），进行统
计分析，筛选出长柄扁桃开放组培最适合的胚萌发培养基。
2 结果与分析
2.1 不同抑菌剂对培养基污染率的影响
由图 1 可知，每种抑菌剂随着浓度的增大，培养基污染
率逐渐减小。山梨酸钾、青霉素、链霉素、氨苄西林钠、羧苄
青霉素、硫酸庆大霉素浓度达 200 mg/L 时污染较多，抑菌效
果差。利福平浓度达 200 mg/L 时污染率达 20%，抑菌效果一
般。50%多菌灵可湿性粉剂、75%代森锰锌可湿性粉剂的浓
度分别达到 50、25 mg/L 时，污染率即降为 10%以下，可以看
出 50%多菌灵可湿性粉剂和 75%代森锰锌可湿性粉剂抑菌
效果最好，这一结果与李文英 [4]的研究相一致。因此，50%多
菌灵可湿性粉剂和 75%代森锰锌可湿性粉剂可作为长柄扁
桃开放组织培养的抑菌剂。
2.2 不同培养基、抑菌剂浓度对胚萌发的影响
由表 1 可知，影响长柄扁桃胚萌发污染率的各因子的
主次顺序是 75%代森锰锌可湿性粉剂、50%多菌灵可湿性
粉剂、培养基，污染率主要受抑菌剂的影响，随着抑菌剂浓度
的增大污染率降低。最优的抑菌剂组合为 75%代森锰锌可
湿性粉剂 20 mg/L+50%多菌灵可湿性粉剂 45 mg/L。由萌发
（下转第 69 页）
长柄扁桃开放式组培试验研究
孙占育 1 曹 彬 1 李红芳 1 郭春会 2
（1渭南职业技术学院，陕西渭南 715501； 2西北农林科技大学园艺学院）
摘要 对长柄扁桃的开放式组培技术进行研究，结果表明：通过 9 种抑菌剂不同浓度抑菌效果的比较，发现 50%多菌灵可湿性粉剂和
75%代森锰锌可湿性粉剂 2 种抑菌剂效果较好。采用正交试验设计 L16（44）研究出适合长柄扁桃开放组培胚培养的抑菌剂浓度组合和适宜
的培养基，即 75%代森锰锌可湿性粉剂 20 mg/L+50%多菌灵可湿性粉剂 45 mg/L 和 1/2MS。
关键词 长柄扁桃；开放式组培；抑菌剂；胚萌发
中图分类号 S662.1 文献标识码 A 文章编号 1007-5739（2013）20-0066-01
基金项目 渭南市基础研究计划项目（2011JH-11）；渭南职业技术学院
院级科研项目（WZYY201111）。
作者简介 孙占育（1971-），男，陕西蒲城人，副教授，硕士，从事农业
生物技术与植物生理的教学与科研工作。
收稿日期 2013-09-16
100
10
20
30
40
50
60
70
80
90
0
培
养
基
污
染
率
∥
%
0 25 50 100 150 200
抑菌剂浓度∥mg/L
山梨酸钾
羧苄青霉素
氨苄西林钠
链霉素
青霉素
75%代森锰锌可湿性粉剂
50%多菌灵可湿性粉剂
利福平
硫酸庆大霉素
图 1 不同种类及浓度的杀菌剂对培养基的污染率比较
66
率的 R 值和 k 值大小可知，影响长柄扁桃胚萌发的各因子
的主次顺序是培养基、50%多菌灵可湿性粉剂、75%代森锰
锌可湿性粉剂，表明长柄扁桃胚萌发率主要受培养基的影
响，以 1/2MS 为最佳胚萌发培养基，较高的抑菌剂浓度胚萌
发率较低。
3 结论与讨论
采用开放式组织培养不需高压灭菌和超净工作台接
种，技术环节简化，降低了组培成本 [5]。而植物开放式组织培
养技术的关键在于找到有效的抑菌剂，在长柄扁桃的开放
组培试验过程中，通过对 9 种抑菌剂不同浓度抑菌效果的
比较，发现 50%多菌灵可湿性粉剂和 75%代森锰锌可湿性
粉剂抑菌效果较好。正交试验结果表明，适合长柄扁桃开放
组培胚萌发的抑菌剂浓度组合为 75%代森锰锌可湿性粉剂
20 mg/L+50%多菌灵可湿性粉剂 45 mg/L，适宜的培养基是
1/2MS。试验采用一定浓度的多菌灵和代森锰锌抑菌剂组合，
有效控制了长柄扁桃的开放组培胚培养的污染，为以后长柄
扁桃开放组培的增殖与生根培养奠定了基础。在试验过程
中，也发现高的抑菌剂浓度对胚的萌发有抑制作用，还需
对抑菌剂的浓度和种类做进一步研究。
4 参考文献
[1] 郭春会，罗梦 .沙地濒危植物长柄扁桃特性研究进展 [J].西北农林科
技大学学报，2005（12）：125-128.
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学报：自然科学版，2004，35（4）：529-533.
[4] 李文英.百合‘普瑞头’组织培养与开放组培初探[D].哈尔滨：东北林
业大学，2012.
[5] 解辉.香蕉开放式组织培养体系研究[D].海口：海南大学，2011.
试验号 培养基
75%代森锰锌
可湿性粉剂
mg/L
50%多菌灵
可湿性粉剂
mg/L
污染率
%
萌发率
%
1 MS 10 35 10 73
2 1/2MS 20 15 7 82
3 G 20 35 5 71
4 QL 10 15 13 75
5 MS 15 15 9 74
6 1/2MS 5 35 11 81
7 G 5 15 16 76
8 QL 15 35 6 72
9 MS 5 45 8 73
10 1/2MS 15 25 9 81
11 G 15 45 5 70
12 QL 5 25 13 74
13 MS 20 25 7 72
14 1/2MS 10 45 8 80
15 G 10 25 11 73
16 QL 20 45 4 69
污染率 8.5 12.0 11.3
8.8 10.5 10.0
9.3 7.3 8.0
9.0 5.8 6.3
0.8 6.2 5.0
萌发率 73.0 76.0 76.8
81.0 75.3 75.0
72.5 74.3 74.3
72.5 73.5 73.0
8.5 2.5 3.8
k1
k2
k3
k4
R
k1
k2
k3
k4
R
注：k1、k2、k3、k4分别为各因素四水平的均值，R 为极差。
表 1 胚萌发的正交试验结果
（上接第 66页）
肥料类型
（稀土∶氮∶磷∶钾）
0.1∶4∶8∶4 140 150
0.1∶4∶10∶6 185 190
0.1∶4∶4∶4 135 100
果实花青素含量∥mg/100 g
老基地 新基地
表 4 不同施肥比例对蓝莓果实花青素含量的影响
适应驯化的土壤、肥料改良试验，但没有进一步对不同蓝
莓品种最适的高产栽培条件进行详细探讨，有待于进一步
试验。
4 参考文献
[1] 徐宏，胡勇，杨普，等 .安徽蓝莓种苗组培扦插繁育技术初探 [J].安徽
农业科学，2008，36（11）：4427-4428.
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徽农业科学，2012，40（8）：4509-4511.
[3] 马艳萍 .蓝莓的生物学特性、栽培技术与营养保健功能[J].中国水土
保持，2006（2）：47-49.
[4] 孙丽，苗宁，金志成，等.山东省蓝莓种植中常用有机肥的应用[J].安
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（上接第 67 页）
品参照茶叶审评标准进行感官审评，并检测样品的水浸出
物、氨基酸含量，结果见表 4。可以看出，网室栽培菊花样品
的感官品质评分为 98 分，高于露地栽培的 94 分，网室栽培
的汤色汤黄绿亮，滋味浓甜，优于露地栽培。网室栽培菊花
的水浸出物 52.92%、氨基酸含量 1.37%，分别比露地栽培的
高 21.8%、21.2%，内含物有所提高，这也是网室栽培菊花感
官品质优于露地栽培的原因。
3 结论与讨论
网室栽培与露地栽培菊花对比试验结果表明，网室栽
培菊花可以避免或最大程度地减少农药污染，病虫害发生几
率较小 ，菊花植株健壮 、花大，内含物及感官品质得到提
高，售价大幅提高，以对比试验的 200 m2地为计算依据，鲜菊
花产量可以提高 16.09%，干菊花成品产量可以提高 21.64%，
产量增加 189 kg/hm2，按照当年收购价 160 元/kg 计算，可增
加收入 30 240 元/hm2，经济效益显著，可以在有条件的地方
进行推广。
4 参考文献
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试验研究[J].农业工程学报，2000（4）：129-131.
[2] 刘大会，郭兰萍，朱端卫，等.施肥和覆盖地膜对福田河菊花产量与品
质的影响[J].中草药，2009（5）：788-792.
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方程拟合[D].南京：南京农业大学，2008.
[5] 盛蒂.不同栽培类型药用菊花性状比较和施肥对菊花产量、品质的影
响[D].南京：南京农业大学，2006.
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栽培方式 感官品质
评分
分
水浸
出物∥%
氨基酸
含量∥%
网室栽培 浅金黄色，汤黄绿亮，碗底有
花粉沉淀，花香浓郁，滋味浓、
甜润、爽口、含香
98 52.92 1.37
露地栽培 象牙白色，花香浓郁，汤浅黄
绿亮，滋味甜润、爽口、含香
94 43.45 1.13
表 4 网室栽培与露地栽培干菊花样品感官品质与
生化分析对比
杨 春等：网室栽培对饮用菊花产量及品质的影响
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