全 文 ：高温季节控温诱导池养鳗鲡性腺发育的研究*
王广军1* *
谢
骏1
余德光1
朱宏友1, 2
( 1 中国水产科学研究院珠江水产研究所鱼类选育与养殖重点开放实验室, 广州 510380; 2 上海水产大学生命
科学与技术学院,上海 20090)
摘要
在高温季节( 6~ 9 月) , 采用人工控温的方法, 通过注射外源激素 hCG和 CPE,对日本鳗鲡进行了
催熟试验. 结果表明,在人工控制温度( 18 ! 2 ∀ )条件下,雌性和雄性日本鳗鲡均可达到性成熟, 诱导成熟
率分别为 73
33%和 67
77% , 而常温条件下( 25~ 32 ∀ )的诱导成熟率分别为 0 和 33
33% . 同时对控温
条件下诱导成熟的部分雌性鳗鲡进行了催产,其排卵率为 70% , 受精率为 32% , 均接近或达到了低温季节
相应的指标(平均分别为 62
1%和 34
2% ) . 对胚胎发育过程也进行了观察, 受精卵能正常发育, 在 22 和
24 ∀ 下, 分别经过 39 h 15 min 和 34 h 9 min 孵化出膜.试验证明, 在高温季节采用人工控温的方法诱导
日本鳗鲡性成熟是可能的.
关键词
日本鳗鲡
高温季节
人工控温
催熟
文章编号
1001- 9332( 2005) 11- 2204- 04
中图分类号
Q178
1
文献标识码
A
Induction of pondcultivated Anguilla j aponica gonadial development by controlling temperature in high tem
perature season. WANG Guangjun1 , XIE Jun1 , YU Deguang 1, ZHU Hongyou1, 2 ( 1K ey Laboratory of T r op ical
and Subtr op ical Fish Breeding and Cultiv ation , Pearl River Fishery Research Institute, Chinese A cademy of
Fishery Sciences , G uangzhou 510380, China; 2College of L if e Science and Technology , Shanghai Fisher ies Uni
versity , Shanghai 200090, China) . Chin. J . A pp l. Ecol. , 2005, 16( 11) : 2204~ 2207.
In this study, t he pondcultivated A nguilla j ap onica was induced to mature by ar tificially controlling temperature
at 18 ! 2 ∀ in high temperature season ( fr om June to September) , w ith injection o f hCG and CPE. The results
showed that both the male and the female eel could be induced to mature, and the art ificial maturation induction
rate was 73
33% and 67
77% , while under noncontrolling temperature 25~ 32 ∀ , the maturation induction
rate was 0 and 33
33% , respectively. In an ovulation induction test, the matured female eels w er e induced, w ith a
spaw ning inducement rate of 70% , and a fertilization rate of 32% , which approached or reached the levels in low
temperature season ( with an average of 62
1% and 34
2% , respectively) , and the zygote developed normally . At
the temperatur e 22 and 24 ∀ , the zygote hatched to fry in about 39 h 15 min and 34 h 9 min. The experiment
pro ved that it w as possible to induce the eel to mature by controlling temperature in high temperature season,
which provided some theoretical foundations for the techniques of artificially breeding eel in w hole y ear.
Key words
Anguilla j ap onica, High temperature season, Artificially controlling temperature, Maturation induction.
* 国家# 十五∃科学技术攻关计划资助项目( 2001BA505B0516) .
* * 通讯联系人.
2005- 02- 01收稿, 2005- 05- 02接受.
1
引

言
鳗鲡( A nguilla j ap onica )是世界性优质养殖鱼
类,但养殖用的苗种完全依靠天然捕捞.近年来鳗鲡
苗种的短缺已严重影响了鳗鲡养殖业的发展, 开展
鳗鲡人工繁殖技术研究势在必行.自从 20纪 60 年
代以来,国内外学者对鳗鲡人工繁殖技术进行了大
量 的 研 究, 也 取 得 了 一 定 的 进
展[ 5, 8, 12, 16, 21, 23, 26, 29, 32] . 国外以日本的成就最大:
1999年报道使仔鳗存活 253 d[ 9, 21] ; 2003年报道已
成功实现鳗鲡人工繁殖, 在实验室内将人工繁殖的
仔鳗培育至全长 20 cm 的成鱼,但只有几十尾[ 23] .
国内 1973年以厦门水产学院为主开始对日本
鳗鲡人工繁殖进行了研究,并取得仔鳗存活 19 d的
阶段性成果[ 26, 34] . 此后, 中国水产科学研究院珠江
水产研究所、中国水产科学研究院长江水产研究所、
福建省水产研究所以及天津市水产生物技术中心等
又进行了这方面的研究, 都能孵化出几十到几百万
尾仔鳗,但均未能成功变态为柳叶鳗[ 23, 29] .
目前, 我国南方在开展鳗鲡人工繁殖技术研究
时,大都集中于每年的 11月底至次年的 3、4月份的
低温季节进行人工催熟、催产[ 1~ 4, 11, 12, 26, 28] , 既不
利于项目研究工作的开展, 也不利于资源的保护.以
往由于所用亲鱼为野生的降海鳗鲡[ 26, 34] ,只能在每
年的 11月天气变冷时, 在珠江口捕获, 时间相对受
到限制. 而以池塘养殖鳗鲡作为亲鳗取代降海鳗鲡
的成功[ 1~ 4, 22] ,为开展周年繁殖试验提供了有利条
应 用 生 态 学 报
2005 年 11 月
第 16 卷
第 11 期






























CHINESE JOURNAL OF APPLIED ECOLOGY, Nov . 2005, 16( 11)%2204~ 2207
件.关于高温季节鳗鲡催熟的研究尚未见报道,为此
研究了高温季节采用人工控温、人工激素诱导情况
下日本鳗鲡性腺的发育成熟情况,旨在探讨周年进
行鳗鲡人工繁殖的可能性, 为今后的同类研究提供
科学依据.
2
材料与方法
2
1
供试材料
试验用雌鳗于 2003 年 5 月 25 日购自广东省佛山市顺
德区某养鳗场, 共 150 尾, 平均体重 852
8 g , 范围 500 ~
1 100 g ;雄鳗为蓄养于本所深圳试验基地的雄性鳗鲡, 共
130 尾, 平均体重 258
5 g ,范围 225~ 312 g. 选择体质健壮、
无病害的个体用于试验. 雌鳗运到基地后, 先进行 1 周的盐
度适应,即从淡水逐渐过度到海水后再开始试验.
2
2
试验方法
2
2
1 温度与激素处理
1)人工控温.试验期间采用人工降
温法控制水温为 18 ! 2 ∀ . 控温条件下试验鱼分为 4 组: C1
为雌性试验组, C2为雌性对照组, C3 为雄性试验组, C4 为雄
性对照组. 雌性试验组每周注射 hCG+ CPE 1 次, 雄性每 10
d 注射 hCG 1次 ,注射方法参照王义强等[ 26]的方法进行. 对
照组注射 Ringer氏液. 2)自然水温 (常温) . 试验期间水温为
25~ 32 ∀ . 自然水温条件下试验鱼也分为 4组: N1 为雌性试
验组, N 2为雌性对照组, N3 为雄性试验组, N4 为雄性对照
组.激素处理方式同上. 每组设 3 个重复,每个重复 10 尾鱼.
试验结束后,每组随机解剖 6 尾鳗鲡(每个重复解剖 2
尾) ,取性腺称量,计算其成熟系数. 切取雌性性腺的前、中、
后段各一小块组织固定于 Bouin 氏液中, 系列酒精脱水, 二
甲苯透明,石蜡包埋, 切片厚度为 7~ 8
m, H
E 染色, Olym
pus显微镜下观察, 测量和摄影.性腺成熟系数( GSI) = 性腺
重/去内脏后的体重& 100% .
2
2
2 鳗鲡成熟标准
轻压亲鱼腹部,以有无乳白色精液流
出为判断雄性成熟与否的标准.采集精液前先用淡水清洗鳗
鲡,再用干毛巾擦去生殖孔周围及体表的水分,挤压法采集
精液.雌鳗则采用挖卵管挖取卵子 50 粒,在显微镜下观察发
育情况,以 70%以上的卵核偏位为确定鳗鲡成熟的标志.
2
2
3 催产试验
对控温条件下性腺发育较好的 10尾雌性
亲鱼进行诱导排卵试验. 具体步骤如下 :催熟针注射 2 d 后,
检测鳗鲡性腺成熟情况, 对适宜催产的再注射 1 次 hCG+
CPE(同催熟剂量) , 24 h 后开始注射催产激素.雄鳗选择轻
压腹部有乳白色精液流出的注射 hCG , 剂量同催熟剂量. 2
次注射部位都是背部肌肉.
原肠中期后采集受精卵, 在解剖镜下计算受精卵数, 以
受精卵数占采集卵数的百分比为受精率 .
2
2
4 胎发育观察
在显微镜下进行观察和记录. 发育时间
按 50%以上鱼卵达该期的时间确定.
2
2
5 数据处理
试验所得数据均表示为平均数 ! 标准差
( Mean ! SE) , 2 个平均值之间的差异用 t 检验, 2 个以上平
均值之间的差异用 Duncan∋ s检验.
3
结果与分析
3
1
雌性鳗鲡的成熟状况
雌性鳗鲡催熟情况见表 1. 在激素处理之前雌性
鳗鲡的性腺成熟系数 GSI较低( n = 5) , 仅为 0
89%
~ 1
02%.处理 50 d后, C1 组开始有成熟个体出现,
70 d后成熟个体开始增多, 大部分鱼在这一时期成
熟.处理 90 d后, C1 组的 GSI达 43% ,与其他各处理
间存在显著差异.此时 N1 组的 GSI 仅为 14%左右,
而对照组的 GSI 基本没有变化,仍低于 3%. N1 组的
个体死亡率为 43%,显著高于其他组.
组织切片表明, N1 组试验鱼的卵巢仅由第(和
第)时相的卵母细胞组成,此时的卵母细胞内全部被
卵黄颗粒充满,卵黄颗粒大小不一,胞核位于中央,核
膜明显,但放射带变薄,滤泡细胞层有2层(图 1) .
图 1
常温条件下( 25~ 32 ∀ ) 90 d后卵巢发育情况
Fig. 1 A section of the ovary after 90 days under natural tem perature( 25
~ 32 ∀ ) .
表 1
雌性鳗鲡卵巢成熟系数和死亡率的变化
Table 1 Changes of GSI and mortality of female Japanese eels
项目
Intem
控温Cont rolled temperature( 8 ! 2 ∀ )
C1 C2
常温 Natural temperature( 25~ 32 ∀ )
C 3 C4
试验前 GSI GSI before experiment 0
89 ! 0
56a 1
02 ! 0
84a 0
74 ! 0
21a 0
65 ! 0
36a
90 d GSI GS I of 90 days af ter experiment 43
8 ! 16
8a 1
7 ! 2
3c 14
3 ! 8
9b 2
8 ! 0
9c
成熟率 Maturat ion rate( % ) 73
33 ! 5
78 0 0 0
90 d死亡率 Mortality af ter 90 days(% ) 20
00 ! 10
00b 13
33 ! 5
78c 43
3 ! 5
78a 23
33 ! 5
78b
同一行平均数值右上角相同字母表示差异不显著( P > 0
05) ,不同字母表示差异显著( P < 0
05) Values in the same row w ith same let ters are no
signif icant ly diff erence( P > 0
05) ; values in the same row w ith different are signif icant ly dif feren ce( P < 0
05) .下同 The same below .
220511 期











王广军等: 高温季节控温诱导池养鳗鲡性腺发育的研究











表 2
雄性鳗鲡成熟状况
Table 2 Percent of matured male Japanese eels during induction
项目
Item
控温 Controlled temperature( 8 ! 2 ∀ )
N 1 N2
常温 Natural temperature( 25~ 32 ∀ )
N3 N4
注射后 30 d成熟率Mat ured rate of 30 days af ter hormone treatment( % ) 30
00 ! 10
00a 0 16
67! 5
78b 0
注射后 50 d成熟率Mat ured rate of 50 days af ter hormone treatment( % ) 66
67! 5
78a 0 33
33! 5
78b 0


C1 组的卵巢处于∗期, 由第∗时相卵母细胞组
成,卵母细胞细胞膜消失, 核仁溶解,卵细胞与滤泡
层分离,并落入卵巢腔.卵巢饱满, 卵大而透明,具有
较大的流动性, 轻压腹部有卵粒流出(图 2) .
图 2
控温条件下( 18 ! 2 ∀ ) 90 d后卵巢发育情况
Fig. 2 A section of the ovary af ter 90 days under cont rolled temperature
( 18 ! 2 ∀ ) .
3
2
雄性鳗鲡的成熟状况
雄性鳗鲡成熟状况见表 2. 30 d检查时, C3组和
N3 组均开始有成熟个体出现,其中 C3 组已有 30%
的成熟个体, N3 组有 20% 的成熟个体; 处理 50 d
后, C3组已有 70%的成熟个体, N3 组有 40% 的成
熟个体,而对照组( N2 和 N4)均未见有成熟个体.
激素处理 50 d后, C3组仅有 10%的个体死亡,
N3 组则有 30%的个体死亡.各对照组都有死亡个
体出现,死亡率为 10% ~ 20% .总体来看,常温和控
温条件下注射激素后雄性鳗鲡均能达到性成熟, 但
控温条件下的成熟率显著高于常温条件下的成熟
率,并能保持较高的存活率.
3
3
诱导催产结果
注射催产剂后, 催产的 10尾鳗鲡中有 7 尾排
卵,排卵率为 70% ,受精率为 32
1%.与国外报道的
催产率为 68
6%、受精率为 20% [ 16, 17] ,国内报道的
催产率为 40~ 50%、受精率为 50% [ 29] , 以及本课题
组低温季节的催产率( 72
6% )和受精率( 33
33% )
相比,均已接近或超过上述指标.
3
4
胚胎发育过程
为了探讨不同温度对胚胎发育的影响, 以及人
工控温下催熟亲鱼所产的卵能否正常发育, 在控制
水温 22
0 ! 1
0和 24
0 ! 1
0 ∀ 的条件下,对发育
过程中的几个重要时期进行了观察与记录.结果表
明,从受精卵到仔鱼孵化出膜都能正常发育,所需时
间分别为 39 h 15 min 和 34 h 9 m in.
4
讨

论
鱼类属于变温动物,其种群结构、生长和繁殖等
活动均受温度的制约. 温度的变化,可以改变鱼体的
代谢强度, 加快或抑制性腺的发育和成熟过
程[ 6, 7, 10, 12, 15, 19, 20, 24, 27] . Orton[ 18]认为, 影响生殖最
重要的外界因子是温度. 温度对某些鱼类的性腺发
育具有重要的作用. 有些鱼类早期卵母细胞生长需
要低温刺激,这也决定了某些鱼类在自然界 1年只
能繁殖 1次, 即在一定季节性腺才可以发育成熟并
最后排卵. 张晓东等[ 33]研究表明, 低温对大银鱼
( Pr otosalanx hyalocranius)的性腺成熟具有重要作
用.林加涵等[ 13]在研究不同水温对文昌鱼( Br an
chiotoma belcher i )性腺发育影响时指出, 低温只是
通过直接和间接的传入途径影响文昌鱼神经中枢释
放促性腺激素样物质, 从而启动性腺发育、分化和成
熟.鳗鲡的性腺发育原理可能类似于文昌鱼,低温刺
激可能是鳗鲡降海洄游的信号. 秋季寒潮的早晚决
定了鳗鲡降海生殖洄游的时间. 寒潮早, 鳗鲡降海
早;寒潮晚, 鳗鲡降海晚.周洵[ 35]通过人工控温的方
法成功改变了中华鳖( Trionyx sinensis )冬眠的习
性,使中华鳖周年都可进行人工繁殖. 在本次试验
中,鳗鲡控温条件下的催熟率显著高于常温条件下
的催熟率,证明人工降温可以起到和自然降温同样
的作用, 加上外源激素的刺激就可以诱导鳗鲡最终
成熟,为周年开展鳗鲡人工繁殖奠定了基础.
本试验从催熟时间的长短、催熟率、排卵率、孵
化率以及仔鱼发育过程等几个方面与低温季节的相
应结果进行了比较. 结果表明, 在高温季节,通过人
工控制温度的方法,人工注射外源激素,雌鳗第 7针
开始成熟(催熟后第 50 d) ,高峰期出现在第 11~ 13
针(催熟后第 77 ~ 90 d ) , 与 Ohta 等[ 16, 17]、柳凌
等[ 14]、汪小东等[ 25]以及本试验室低温季节研究的
结果基本一致. 诱导成熟率在 70% 以上, 并能顺利
排卵和受精孵化(排卵率和受精率分别为 70%和
2206



















应
用
生
态
学
报

















16 卷
32
1%) , 也接近或达到了已报道的结果[ 8, 16, 17, 29] .
本试验受精卵可以正常孵化, 孵化过程 34~ 40 h, 也
与已报道的低温季节的结果相差无几[ 22, 28] .由此可
见,在高温季节通过人工控温可诱导鳗鲡性腺正常
发育, 并可顺利产卵、受精, 受精卵也可正常发育,
证明全年进行鳗鲡人工繁殖是可能的. 至于孵出的
仔鱼是否能正常发育,尚需要进一步研究.
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作者简介
王广军, 男, 1973 年生, 硕士, 助理研究员. 主要
从事水产动物繁育与健康养殖技术研究, 发表论文 20 余篇.
Email: g jwang@ prfri. ac. cn
220711 期











王广军等: 高温季节控温诱导池养鳗鲡性腺发育的研究